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Apostila 2

Disciplina: Pr-Clnica II (DP-201)

Aspectos microbiolgicos da placa dental

rea de Microbiologia e Imunologia

FOP-UNICAMP
Profa. Dra. Renata O. Mattos Graner
Prof. Dr. Reginaldo B. Gonalves
Prof. Dr. Jos Francisco Hfling
Leandro Moraes Furlan

Piracicaba 2005

Placa dental bacteriana aspectos microbiolgicos

1. Conceito de placa dental bacteriana ou biofilme dental.
Definio de biofilme:
Genericamente, biofilmes so definidos como comunidades microbianas ssseis
aderidas a superfcies rgidas. Os microrganismos que compem o biofilme formam uma
comunidade extremamente organizada, sendo envolvidos por uma matriz extracelular,
composta principalmente de polissacardeos produzidos pelos prprios microrganismos, os
quais interagem com componentes do fludo pelo qual so banhados. Os biofilmes so
tipicamente banhados por fludos que carregam microrganismos. O biofilme dentrio
banhado pela saliva.

Os microrganismos que colonizam os dentes formam a chamada placa dental

bacteriana, de enorme interesse odontologia e outras reas de medicina. A placa dental
bacteriana um BIOFILME. Na natureza existem inmeros biofilmes distintos. Por exemplo,
biofilmes microbianos esto implicados na reduo da vazo de tubulaes das redes de gua e
esgoto e na contaminao e disseminao de infeces por microrganismos formadores dos
biofilmes de catteres e tubulaes de equipamentos mdicos e odontolgicos (4,12). A placa
dental possivelmente o biofilme mais estudado, sendo importante no desenvolvimento das
principais patologias bucais: a crie dental e as doenas periodontais (3).
A comunidade microbiana de um biofilme dental maduro envolve interaes
microbianas intra e inter espcies e gneros, as quais so relativamente estveis. A matriz
extracelular do biofilme apresenta canais por onde atravessam fludos contendo nutrientes,
metablitos secretados, enzimas, oxignio, sais e compostos orgnicos.
As bactrias que formam o biofilme apresentam mecanismos de comunicao atravs
de sinais qumicos. Estes sinais estimulam as bactrias a produzir protenas e enzimas
importantes para a adaptao fisiolgica bacteriana s diferentes condies ambientais, s
quais o biofilme est exposto. Assim, os biofilmes se comportam como um tecido organizado,
sendo capazes de se adaptar mais facilmente a diferentes condies de estresse ambiental (3).
2. Fases de formao de biofilmes dentrios.
Embora tenhamos discutido que a composio microbiana varia segundo as diferentes
reas dos dentes, principalmente quando se compara biofilme supragengival e biofilme
subgengival, os mecanismos bsicos de formao de biofilmes so academicamente divididos
em trs fases principais do desenvolvimento:
1) Fase de aderncia inicial: envolve mecanismos inespecficos e especficos de
adeso pelcula adquirida do esmalte e outras superfcies dentrias expostas (Ex.
superfcies radiculares). Os microrganismos com maior capacidade de se aderir aos
dentes nestas fases iniciais so definidos como colonizadores primrios.
2) Fase de acmulo: envolvem mecanismos de interao bacteriana e a produo de
uma matriz extracelular. Muitos microrganismos no se aderem inicialmente aos
dentes, mas so capazes de se aderir (co-adeso) a microrganismos primrios que se
estabelecem na fase inicial. Estes so denominados de colonizadores secundrios.

3) Fase da comunidade clmax: atinge um estgio de equilbrio dinmico, onde os

diversos microrgarnismos que compem o biofilme esto em constante adaptao s
alteraes ambientais. Aps a adeso e acmulo, diversas modificaes ambientais
ocorrem de forma que os diferentes gneros e espcies microbianas vo variar em
proporo at atingir uma fase de equilbrio. Este equilbrio dinmico, pois envolvem
constantes modificaes fisiolgicas, para que a comunidade sobreviva no nicho
colonizado. Variaes na composio e proporo das espcies so menores, a no ser
que grandes variaes ambientais ocorram, como por exemplo, alteraes acentudas da
dieta e/ou da sade geral do hospedeiro. A microbiota clmax apresenta
microrganismos colonizadores primrios e secundrios, e tambm os microrganismos
colonizadores tardios, isto , aqueles que aumentam em proporo como
conseqncia de variaes ambientais decorrentes do acmulo microbiano no biofilme
dentrio.
Os mecanismos envolvidos nestas fases de formao de biofilmes tm sido intensamente
estudados, pois ao compreendermos estes mecanismos, poderemos desenvolver mtodos de
controle de placa bacteriana e estratgias que atuem apenas sobre aqueles microrganismos
patognicos. Os principais mecanismos envolvidos em todas estas fases de formao do
biofilme dentrio sero descritos com mais detalhes nos tpicos a seguir.
2.1 Fase de aderncia inicial.
Esta fase formada basicamente pela interao dos colonizadores primrios com a
pelcula adquirida do esmalte, por meio de interaes inespecficas ou especficas.
Interaes inespecficas ocorrem da seguinte forma: o esmalte dentrio possui uma
fora de atrao predominantemente negativa, devido aos grupos fosfatos que formam a
hidroxiapatita. Sobre esta superfcie, se forma uma camada composta, na sua maioria, por ons
clcio (com carga positiva), denominada camada de hidratao. Sobre esta camada, se
adsorvem diversos componentes salivares e microbianos atravs de ligaes no covalentes
fracas, como as ligaes de van der Waals, interaes hidrofbicas, pontes de hidrognio e
pontes inicas (13). Esta camada, formada predominantemente de glicoprotenas e protenas
ricas em aminocidos prolina denominada de pelcula adquirida do esmalte (PA) (Figura
1A). A adeso dos colonizadores primrios ao dente ocorre atravs de ligaes ao
componentes da PA. Estas ligaes podem ser de dois tipos:
1) ligaes inespecficas: envolvem interaes fracas por carga (por exemplo, interaes
de van der Waals);
2) ligaes especficas: envolvem interaes estveis de encaixe entre protenas da PA
e protenas de superfcie bacteriana, as chamadas adesinas (Figura 1B). Existem vrios
tipos de adesinas nas diversas espcies microbianas. Cada tipo de adesina se liga a um
componente especfico comumente presente na PA. Vide alguns exemplos na Tabela 1.

Adesina

Esmalte dentrio

Esmalte dentrio

Bactria presente
na saliva

Pelcula
adquirida

Figura 1. A) Esquema da organizao da pelcula adquirida do esmalte. A superfcie do esmalte apresenta

carga negativa decorrente dos grupos fosfatos que compem a hidroxiapatita. ons clcio (Ca +) so ento
atrados, formando uma camada de hidratao com carga positiva. Componentes salivares com partes
eletronegativas se adsorvem a esta camada por interaes no covalentes fracas. Estes componentes
formam uma camada denominada de pelcula adquirida do esmalte (PA). B) Protenas de superfcie
bacteriana (adesinas) se ligam especificamente a componentes da pelcula adquirida, permitindo ligaes
mais estveis (encaixe). As ligaes bacterianas inespecficas, que ocorrem inicialmente por ligaes
eletrostticas e/ou ligaes de van der Waals no esto representadas nesta figura. Figura adaptada de B.
Nyvad e O. Fejerskov, in: A. Thylstrup, O. Fejerskov. Tratado de Cariologia. Ed. Cultura Mdica, RJ, 1 a.
edio, 1988.

Os colonizadores primrios da placa dental tm como caracterstica, a presena de

adesinas com maior afinidade a componentes da PA, quando comparados com
colonizadores secundrios. Alm disto, estes microrganismos geralmente so produtores de
proteases que quebram os anticorpos IgA1S. Estas proteases so portanto, denominadas de
IgA1-proteases (vide Apostila 1). As IgA1-proteases so importantes, pois permitem que
estes microrganismos ocupem stios da PA bloqueados por anticorpos. Alm disto, estes
microrganismos so capazes de eliminar os anticorpos que se ligam a suas adesinas de
superfcie. Dentre as principais espcies classificadas como colonizadores primrios dos
dentes esto: Streptococcus sanguinis, Streptococcus gordonii, Streptococcus oralis e
Streptococcus mitis (vide as principais caractersticas destas espcies bacterianas na Apostila
1).

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Tabela 1. Exemplos de adesinas que interagem com componentes da pelcula adquirida,
identificadas em espcies de colonizadores primrios.
Tipo de adesinas
Espcies microbianas que
Receptor
apresentam
Famlia de Antgenos I/II

S. gordonii, S. oralis, S. mutans, S.

sobrinus

Protenas Ligantes de Amilase

Aglutinina da saliva da
partida, protenas ricas em
prolina, colgeno.
S. gordonii, S. mitis, S. salivarius, S. -amilase salivar.
crista

Lectinas de superfcie

S. oralis, S. mitis

Glicoprotenas salivares.

Complexo antignico G9B

S. gordonii

Protena de 73 kDa da
saliva submandibular.

Protena de
famlia LraI

superfcie

da S. parasanguis, S. sanguinis

Diversos componentes da
PA.

Fonte: adaptado de Kolenbrander, P. E. and J. London. 1993. Adhere today, here tomorrow: oral bacterial
adherence. J.Bacteriol. 175:3247-3252. (7)

2.2 Fase de acmulo.

A fase de acmulo a fase onde os microrganismos interagem entre si. Nesta fase,
microrganismos no capazes de interagir com componentes da PA podem se aderir atravs da
interao com as superfcies de microrganismos colonizadores primrios (aderidos PA).
Diversos mecanismos esto envolvidos na fase de acmulo microbiano no biofilme. Estes
mecanismos podem ser divididos em:
(a) Co-adeso e co-agregao: adesinas de novos microrganismos se ligam a receptores da
superfcie celular dos microrganismos que formam as primeiras camadas de biofilme
(colonizadores primrios).
(b) Acmulo microbiano atravs da diviso celular de microrganismos aderidos ao dente.
(c) Acmulo atravs da produo de uma matriz extracelular pegajosa de polissacardeos
extracelulares que gruda diversas bactrias em diviso no biofilme.
(d) Interaes metablicas. Todos os processos de acmulo ocorrem de forma associada e
dinmica, sofrendo influncia de diversas condies ambientais, condies do hospedeiro e
bacterianas. As interaes bacterianas metablicas incluem mecanismos de antagonismo 1 e
mutualismo2 entre as diversas espcies e gneros microbianos.
2.2.1 Mecanismos de co-adeso e co-agregao (a).
Estes mecanismos envolvem a interao especfica entre adesinas da superfcie
bacteriana e receptores presentes nas superfcies de outros microrganismos. Estas interaes
entre clulas promovem agregao de bactrias de mesma espcie. O prefixo co- utilizado
para indicar interao entre bactrias de gneros e/ou espcies distintos. Bactrias isoladas ou
1
2

Antagonismo: relao entre dois organismos distintos no qual um inibe o outro.

Mutualismo: relao entre dois organismos distintos, na qual ambos so beneficiados.

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agregados bacterianos podem se ligar a outras aderidas ao dente. Atravs destes mecanismos
de interao especfica h um progressivo aumento da diversidade microbiana. Primeiro
surgem os colonizadores secundrios e com o aumento sucessivo e ordenado de novas
espcies, aparecem os colonizadores tardios. Alguns dos gneros bacterianos mais
freqentemente identificados como colonizadores secundrios esto Actinomyces spp.,
Veillonela spp. Fusobacterium spp, Haemophilus spp. e Capnocytophaga spp. (vide
caractersticas destes microrganismos na Apostila 1). Os colonizadores tardios so aqueles
que dependem das modificaes desencadeadas pelos colonizadores primrios e secundrios.
Estes normalmente incluem bactrias anaerbicas estritas, como as do gnero Prevotella,
Porphyromonas, Actinobacillus e Treponema (7).
A Figura 2 ilustra um modelo de acmulo bacteriano envolvendo mecanismos de coaderncia e co-agregao proposto por Kolenbrander e London (1993) (7). Note que os
microrganismos da primeira camada bacteriana correspondem aos colonizadores primrios, os
quais apresentam inmeros receptores para os colonizadores secundrios. Assim, a sucesso
microbiana parece no ser aleatria, mas sim determinada pelos tipos de receptores presentes
nas superfcies das bactrias que formam as camadas anteriores e as adesinas das bactrias que
formam as camadas subseqentes. Entretanto, como veremos a seguir, este no o nico
mecanismo que determina a composio da microbiota do biofilme dentrio (vide tpico de
Dinmica das sucesses microbianas).
2.2.2 Acmulo microbiano pela diviso celular (b e c)
Outro mecanismo de acmulo bacteriano no biofilme, consiste no prprio processo de
diviso celular das bactrias aderidas. As novas bactrias geradas pela diviso celular passam
a formar microcolnias que aumentam em tamanho. Durante a formao do biofilme, diversas
microcolnias em crescimento se unem umas s outras. Este acmulo concomitante e
dependente da produo de polissacardeos extracelulares (polmeros de acar como a glicose
ou frutose). Estes polissacardeos formam uma matriz extracelular pegajosa que muito
importante para que as clulas em diviso se acumulem no biofilme. Esta matriz pode tambm
interagir com outras bactrias trazidas pela saliva individualmente ou como agregados e coagregados. A Figura 3 ilustra estes processos.
A matriz de polissacardeos extracelulares (PEC) produzida por enzimas secretadas
pelas prprias bactrias colonizadoras. Estas enzimas catalisam a produo de polmeros de
glicose (dextranos) ou de frutose (frutanos) a partir da sacarose presente na dieta. Como vimos
na Apostila 1 (vide Tabela 3), diversas espcies bacterianas, principalmente Streptococcus,
so capazes de produzir polissacardeos extracelulares a partir da sacarose. Entretanto, estes
polissacardeos variam muito quanto a suas propriedades (por exemplo, solubilidade em gua),
dependendo do tipo das ligaes glicosdicas e do tamanho das cadeias de acar formadas.
Algumas espcies no patognicas produzem PEC mais solveis em gua e mais facilmente
quebrados (por exemplo, S. sanguinis), enquanto outras espcies produzem PEC altamente
ramificados e insolveis em gua (por exemplo, S. mutans). Estes PEC insolveis so mais
estveis e so considerados como essenciais na patogenia da crie dentria, como veremos
mais adiante. Indivduos que ingerem acar com freqncia, tm maior acmulo de placa
dental nos seus dentes. A produo de PEC aumenta a rapidez de acmulo e o volume de placa
formada sobre os dentes. Assim, a composio microbiana (proporo de microrganismos
produtores de PEC), dieta (disponibilidade de sacarose) e hbitos de higiene bucal determinam
a velocidade de formao de placa dental. Assim, aps a completa remoo de placa atravs
da escovao e uso de fio dental, ou atravs da remoo de placa profissional, alguns
indivduos apresentam um rpido re-acmulo de placa, enquanto que em outros indivduos, o
acmulo de placa dental muito lento. Por isto, a velocidade com que a placa dental foi

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utilizada por um pesquisador sueco, Dr. Per Axelsson, como um indicador dos riscos dos
indivduos desenvolverem doenas bucais como a crie, uma vez que esta patologia est
associada a microrganismos altamente formadores de PEC e ao consumo freqente de
sacarose (10).

Adesina

Receptor

Colonizadores
tardios

Protena rica
em prolina

Protena rica
em prolina

Resto celular
bacteriano

-amilase

estaterina

Colonizadores
secundrios

PA

Superfcie dentria
Adaptado de PE Kolenbrander e J London. J Bacteriol 175:3247-3252, 1993

Figura 2. Diagrama de aderncia bacteriana superfcie dentria. Os colonizadores primrios

consistem naqueles com adesinas de maior afinidade a componentes de pelcula adquirida da
esmalte. Aps aderidos, estes microrganismos oferecem novos stios de interao, visto que
colonizadores secundrios apresentam adesinas que se ligam a protenas de superfcie de alguns
colonizadores primrios, podendo co-aderir e co-agregar. Camadas sucessivas so formadas a partir
destes processos de co-aderncia/agregao, ocorrendo um aumento da diversidade microbiana da
placa dental. Observe que a espcie Fusobacterium nucleatum corresponde a uma das espcies
fusiformes que funcionam como uma ponte entre as diferentes camadas de bactrias.

Co-agregado
bacteriano

Agregado
bacteriano

Bactrias em
diviso
(microcolnia)

Superfcie dentria

Bactria colonizadora
primria

Matriz de polissacardeos
extracelulares

Figura 3. Diagrama simplificado do acmulo bacteriano durante a formao da

placa dentria. Bactrias inicialmente aderidas aos dentes passam a se dividir,
formando microcolnias, as quais vo crescer em tamanho e se unem a outras
microcolnias. Algumas das bactrias em diviso produzem tambm uma matriz
de PEC, a qual favorece o acmulo, agregao e co-agregao de outros
microrganismos na placa.

2.2.3 Dinmica das sucesses microbianas (d).

Conforme o biofilme vai se formando, diversas mudanas locais ocorrem. Com o
aumento da quantidade de matriz extracelular, as camadas mais internas (mais prximas do
esmalte) apresentam menor disponibilidade de alguns nutrientes e de oxignio. Estas reas
mais internas passam a ser favorveis aos microorganismos anaerbios, os quais iniciam sua
proliferao. Alm disto, algumas espcies presentes na placa utilizam O 2, para a produo de
H2O2, tambm favorecendo microrganismos anaerbios estritos.
Outras modificaes ocorrem devido a variaes no pH local. Como grande parte dos
colonizadores primrios e secundrios so bactrias sacarolticas fermentativas, h a produo
de cido lctico e conseqente queda do pH local. Embora existam diversos mecanismos de
tolerncia bacteriana a meios cidos, a maior parte dos colonizadores comensais (S. sanguinis,
S. gordonii, S. oralis) no so capazes de resistir a quedas muito drsticas e duradouras do pH.
Em algumas placas dentrias, o pH pode cair rapidamente para valores por volta de 4,0!
Algumas espcies bucais se desenvolvem bem em meios cidos, como Lactobacillus spp.,
Veillonela spp. e estreptococos do grupo mutans, sendo favorecidas nos ambientes altamente
acidognicos. Por outro lado, nas placas subgengivais, o pH torna-se alcalino em decorrncia
da resposta inflamatria, onde h degradao de protenas, liberao de aminas e produo de
amnia. Nestes casos, o pH local varia de 7,2 a 7,4, o que favorece o crescimento de algumas
espcies patognicas como a Porphyromonas gingivalis, cujo pH timo de crescimento est
por volta de 7,5 (8,9).
Com a maior competio por nutrientes, aqueles microrganismos com capacidade de
transportar e metabolizar maior diversidade de acares ou de nutrientes disponveis tendero
a aumentar em proporo na placa dental. A saliva funciona como uma fonte importante de

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nutrientes, pois contm carboidratos, glicoprotenas, protenas e diversos ons importantes para
o metabolismo microbiano. A saliva pode sustentar o crescimento de muitos microrganismos
durante os perodos entre as refeies, quando h ausncia de nutrientes da dieta (exgenos).
Entrentanto, possvel que a maior fonte de nutrientes nos perodos entre as refeies seja
proveniente de reservas de acares presentes na forma de polissacardeos da prpria matriz
extracelular e de polissacardeos intracelulares (glicognio) (2). Os componentes da dieta tm
grande influncia na composio da microbiota bucal. Os carboidratos da dieta,
principalmente a sacarose, e seu efeito na composio da microbiota bucal so os de maior
interesse, pois podem favorecer microrganismos patognicos, como S. mutans, como veremos
em mais detalhes na Apostila 3. Por outro lado, enquanto microrganismos da placa
supragengival utilizam os nutrientes da dieta e saliva, os microrganismos da placa
subgengival, menos expostos a nutrientes exgenos, utilizam principalmente os nutrientes do
fludo crevicular. O fludo crevicular contm diversos nutrientes proticos e glicoprotenas,
alm de fatores de crescimento essenciais para diversos microrganismos anaerbicos, como a
hemina e vitamina K.
Com o aumento do nmero e diversidade microbiana, uma srie de produtos do
metabolismo microbiano se acumula no biofilme. H um aumento da presso osmtica, o que
poder promover perda de gua pelas clulas microbianas. Assim, quando h alta
concentraes de soluto no meio extracelular, os microrganismos somente podem captar gua
do ambiente, atravs do bombeamento de ons inorgnicos para o interior da clula. Assim, a
proporo de ons de sdio (Na+) e potssio (K+) extracelular alterada. Os ons sdio e
potssio so osmorreguladores que participam do transporte ativo de componentes atravs da
membrana celular (13). Para lidar com o estresse osmtico, as bactrias tambm sofrem
alteraes na sua membrana e parede celular, para tornarem-se mais impermeveis.
Outro desafio ambiental consiste no acmulo de radicais livres e variaes no potencial
de oxido-reduo (Eh). Diversas reaes enzimticas envolvem reaes de oxidao-reduo,
nas quais um componente oxidado (perde eltrons) e outro reduzido (recebe eltrons). A
tendncia de transferir eltrons de um composto para o outro definida como o potencial de
oxidao-reduo ou potencial redox (Eh). O Eh de um composto pode ser determinado
experimentalmente, sendo definido como a diferena de voltagem ocorrida quando eltrons de
um componente em soluo com baixa afinidade a eltrons migram para a soluo de outro
componente com alta afinidade a eltrons. A diferena de energia ocorrida pela migrao de
eltrons medida atravs de um voltmetro, sendo o valor de Eh expresso em miliVolts (mV).
Assim, o Eh uma medida da afinidade por eltrons (1). A baixa afinidade a eltrons de um
composto em relao ao outro gera um valor de Eh negativo, enquanto a alta afinidade a
eltrons tende a gerar Ehs positivos. O Eh altamente influenciado pela disponibilidade de O 2,
uma vez que o oxignio o receptor de eltrons mais comum no ambiente. A cavidade bucal
caracterizada por grandes variaes nos valores Eh. Na saliva, Ehs variam de +158 a +542mV,
mas chegam a valores de -300mV no sulco gengival. O Eh tambm varia muito na extenso da
placa dental, principalmente em placas dentais espessas. Nas pores externas, o Eh tende a
ser positivo com a maior exposio ao oxignio, mas nas pores internas tende a ser negativo
(6). Bactrias anaerbicas precisam de ambientes com valores de Eh negativos, enquanto a
bactrias aerbicas precisam de condies oxidantes (valores de Eh positivos) (6). Na placa
supragengival, apesar da maior exposio ao O2, o Eh apresenta valores negativos (por volta
de -141mV), o que est associada presena de grande proporo de anaerbios facultativos
(por exemplo, Streptococcus spp.). Por outro lado, estudos mais recentes tm demonstrado que
at mesmo diversos microrganismos associados doena periodontal e classificados como
anaerbios estritos apresentam certa tolerncia ao oxignio. Isto porque estes microrganismos
apresentam mecanismos para controle do estresse oxidativo. Por estas caractersticas, alguns

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pesquisadores consideram questionvel a classificao de espcies bucais dos gneros
Porphyromonas, Prevotella e Treponemas, como anaerbios estritos (2).
O estresse oxidativo decorrente dos vrios produtos txicos oxidantes derivados do
O2, os quais so altamente reativos. A reatividade do O2 aumenta com a aquisio de eltrons.
Entre os produtos txicos gerados a partir do O 2, temos o radical livre superxido (O2-), o
perxido de hidrognio (H2O2), o radical hidroxila (OH.) formado pela adio de um a trs
eltrons. Os produtos O2- ou H2O2 podem ainda reagir com ons de ferro (Fe 3+) ou cobre (Cu2+),
gerando produtos tambm txicos s bactrias. A sobrevivncia ao estresse oxidativo
dependente da capacidade de metabolizar O2 sem gerar produtos txicos ou de
remover/modificar os agentes txicos produzidos em produtos finais no txicos. Enquanto os
microrganismos aerbicos utilizam inmeros sistemas enzimticos que eliminam os agentes
redutores originados do O2, as bactrias anaerbicas estritas no produzem estas enzimas,
sendo altamente sensveis ao estresse oxidativo. Os anaerbios facultativos tambm
apresentam diversos sistemas para converter produtos txicos, embora no utilizem o O 2 para
obter energia, como os aerbicos. As bactrias bucais se utilizam de pelo menos 6 reaes
enzimticas distintas para metabolizar o oxignio e/ou seus produtos (2). Cada uma destas
reaes envolvem diferentes enzimas, cujas reaes catalisadas esto a seguir:
1) Superxido dismutase : O2- + O2- + 2H+ H2O2 + O2
2) Catalase : 2 H2O2 2H2O + O2
3) Perxido de hidrognio NADH oxidase : NADH + H+ + O2 2NAD+ + H2O2
4) gua-NADH oxidase: 2NADH + 2H+ + 2O2 2NAD+ + 2H2O
5) NADH peroxidase: NADH + H+ + H2O2 NAD+ + H2O
6) Piruvato oxidase: Piruvato + Pi + O2 Acetyl-P + H2O2
Streptococcus spp. (anaerbios facultativos) apresentam NADH oxidases, NADH
peroxidases, superoxido-dismutases, mas no catalases. Enzimas NADH oxidase e superxido
dismutase tambm foram detectadas em espcies de anaerbios estritos, como Treponema
denticola, Porphyromonas spp.e Prevotella spp.
A Figura 4 ilustra as principais modificaes ambientais ocorridas em diferentes reas
de placa dental bacteriana, da mais externa mais interna. Variaes nos mesmos fatores
ambientais tambm existem quando se comparam as microbiotas da placa supragengival e
subgengival (no representado na Figura 4).
O conjunto de mecanismos de adaptao ao estresse ambiental tambm influenciado
pela composio microbiana de placa dental. Diversas interaes entre microrganismos
favorecem o estabelecimento de uma condio de equilbrio. Um biofilme dentrio maduro
formado por uma comunidade complexa em equilbrio dinmico pode ser referido como uma
comunidade clmax. As comunidades clmax podem existir apenas temporariamente, uma vez
que alteraes ambientais podem constantemente interferir neste equilbrio ecolgico.
Portanto, improvvel que as comunidades clmax existam por muito tempo na cavidade
bucal, exceto em reas mais protegidas.

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O2

Eh

pH

Produtos
metablicos

Placa dental

Nutrientes

Superfcie dentria
Figura 4. Diagrama representativo das variaes em diferentes condies ambientais que
influenciam na composio microbiana das diversas camadas da placa dental (das pores externas
s internas). As setas em preto voltadas para baixo indicam reduo nas concentraes de
nutrientes, tenso de oxignio e pH nas regies mais internas da placa dentria. A seta em preto
voltada para cima indica maiores concentraes de produtos metablicos nas reas internas da
placa. Observe que o Eh tende a ser negativo nas regies de menor tenso de oxignio. As barras
pretas indicam variaes nos valores de Eh e concentraes de ons potssio e sdio. Figura
adaptada P.D. Marsh, Microbiologia Oral, 2005 (6).

3. Interaes metablicas entre gneros e/ou espcies da placa dental

A sucesso microbiana no casual, mas sim envolve inmeros processos que
ordenam a colonizao e composio da microbiota bucal. Alm dos mecanismos de interao
mediados por adesinas, PEC e adaptao a condies de estresse ambiental, h tambm o
efeito de interaes metablicas entre microrganismos distintos da comunidade da placa
dental. Estas interaes envolvem diversos mecanismos especficos de antagonismo (uma
espcie/gnero inibe outra espcie ou gnero distinto) e de mutualismo/agonismo (uma
espcie ou gnero favorece a outra espcie ou gnero distinto). Estes processos contribuem
para o estabelecimento de uma comunidade microbiana em equilbrio. Alm disto, dentro de
uma mesma espcie microbiana, cepas distintas competem entre si para se estabelecer dentro
de uma comunidade especfica. Vamos compreender isto melhor. Considere que os alunos do
curso de graduao da FOP-UNICAMP pertencem espcie Homo sapiens. Embora sendo da
mesma espcie, muitos destes alunos podero interagir de forma competitiva, ou para vencer
um torneio esportivo, ou para obter as melhores notas, ou para adquirir o aproveitamento mais
completo e/ou especializado do curso e com isto tornar-se mais competitivo em reas
especficas do mercado de trabalho. Cada indivduo desta espcie apresenta, no entanto,
habilidades distintas que os tornam mais ou menos competitivos, dentro da situao ou
condio especfica. Muitas destas habilidades so determinadas geneticamente. Entre as
bactrias de uma mesma espcie, algo semelhante ocorre. Assim, por exemplo, cada indivduo
da espcie Streptococcus gordonii, embora semelhante em muitas caractersticas
fundamentais, pode diferir bastante em caractersticas especficas. Cada indivduo dentro de
uma mesma espcie bacteriana denominado de cepa. Cepas distintas de uma mesma espcie
variam geneticamente, o que influencia na sua capacidade competitiva.
A seguir, vamos explicar alguns exemplos de interaes metablicas entre
microrganismos da placa dental e mecanismos competitivos dentro ou fora de um mesmo
gnero e/ou espcie microbiana.

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(Exemplo 1) Antagonismo: bactrias produtoras de cido lctico versus microrganismos

aerbios e outros competidores
Como explicado no tpico do gnero Streptococcus, as bactrias produtoras de cido
lctico so anaerbias facultativas, isto , no requerem O2 para obter energia (ATP), embora
no sejam sensveis ao oxignio. Entretanto, as bactrias produtoras de cido lctico captam
O2 em propores similares aos microrganismos aerbicos. Parte deste reduzido ao radical
livre superxido (O2- ), H2O2 ou H2O. O superxido produzido altamente txico e deve ser
convertido em O2 e H2O2, pela enzima superxido-dismutase. O O2 captado no utilizado
para obteno de energia, mas tem uma funo ecolgica importante. Ao utilizar O2 do meio,
estas bactrias criam um ambiente anaerbico, inibindo a proliferao de microrganismos
aerbicos. Alm disto, a prpria H2O2 produzida ou substncias geradas a partir de H 2O2 so
capazes de inibir o metabolismo e crescimento de outros microrganismos competidores.
(Exemplo 2) Mutualismo: bactrias produtoras de cido lctico versus Veillonella spp.
O cido lctico, produto final do metabolismo de Streptococcus e outros gneros de
bactrias produtoras de cido lctico, consiste na fonte de carbono ideal de Veillonella spp.
Espcies de veilonela no so capazes de fermentar acares, mas obtm energia a partir de
cido lctico. Veillonella metaboliza cido lctico produzindo CO2 e H2. Desta forma, h boa
disponibilidade de cido lctico em comunidades onde predominam Streptococcus e
Lactobacillus, o que favorece o crescimento e aumento da proporo de veilonelas. Por outro
lado, muitas espcies de estreptococos comensais da placa dental (por exemplo, S. sanguinis)
no so capazes de tolerar pH muito baixos, que ocorre em decorrncia do acmulo de
metablitos, como o cido lctico. Assim, as veilonelas presentes auxiliam no controle do pH
local impedindo que este atinja limites txicos aos prprios estreptococos produtores de
cidos.
(Exemplo 3) Antagonismo: bacteriocinas
A produo de bacteriocinas um exemplo de competio entre cepas de uma mesma
espcie microbiana. Cepas distintas de diversas espcies bacterianas produzem substncias que
inibem o crescimento de cepas da mesma espcie ou de espcies semelhantes. Estas
substncias so denominadas de bacteriocinas. Diferente dos antibiticos, substncias
inibitrias de amplo espectro de ao produzidas por diversos microrganismos, as
bacteriocinas tm pequeno espectro de ao e atuam normalmente sobre cepas da mesma
espcie ou sobre cepas de espcies semelhantes espcie produtora. Assim, Streptococcus
mutans produzem bacteriocinas que inibem outras espcies de Streptococcus competidoras,
como S. gordonii, S. sanguinis e S. mitis, alm de inibirem cepas distintas, tambm da espcie
S. mutans. Nem todas as cepas de S. mutans produzem bacteriocinas, e cepas distintas podem
produzir tipos distintos de bacteriocinas. Existem bacteriocinas que inibem cepas distintas
dentro de uma mesma espcie, enquanto outras tm maior espectro da ao. Atravs da
produo de um grupo particular de bacteriocinas, uma cepa pode ser mais hbil do que a
outra em se estabelecer em um determinado nicho ecolgico. Existem estudos que sugerem
que cepas de S. mutans que produzem maior nmero de bacteriocinas distintas contra um
maior espectro de cepas de S. mutans e de outras espcies de estreptococos bucais, so mais
facilmente transmitidas de mes para seus filhos (as) (5).

13
(Exemplo 4) Comunicao: atravs de interaes qumicas entre bactrias de mesma
espcie ou entre espcies distintas
Como abordado superficialmente na Apostila 1, as bactrias que colonizam o mesmo
ambiente so capazes de se comunicar atravs de sistemas de sinalizao. Alguns destes
sistemas so denominados de quorum-sensing (do Latim, quorum: nmero mnimo de
indivduos presentes exigidos para que um rgo coletivo funcione), atravs dos quais as
bactrias sentem o aumento de sua densidade populacional. Isto ocorre porque as bactrias
secretam pequenos peptdeos (tambm chamados de ferormnios), para o meio extracelular.
Quando h um aumento na concentrao destes ferormnios em decorrncia do aumento do
nmero de bactrias no local, estes se ligam a receptores das bactrias locais, ativando a
transcrio de genes importantes para uma srie de modificaes fisiolgicas (11,14). Estas
modificaes fisiolgicas tornam as bactrias mais hbeis a se adaptar a condies de estresse
decorrentes da super-populao, como carncia de nutrientes, estresse osmtico, quedas do
pH e variaes de Eh. Existem ferormnios que ativam apenas as cepas da mesma espcie da
cepa produtora (sinalizao intra-espcie), enquanto outros ferormnios ativam bactrias de
espcies distintas (sinalizao inter-espcie) (11,11).
4. Placa dental associada s doenas bucais
A placa dental pode apresentar uma composio microbiana compatvel com a sade,
quando h o bom funcionamento dos mecanismos de defesa do hospedeiro inatos e
adaptativos, um controle fsico-mecnico de placa peridico (atravs de escovao e fio
dental) e uma dieta balanceada (rica em fibras e com baixa concentrao e freqncia de
consumo de sacarose). Nestas situaes, podemos dizer que a placa dental encontra-se em
condio homeostase (equilbrio) com o hospedeiro. Entretanto, fatores que interfiram no
sistema imune, no acmulo de placa dental e ou que promovam uma dieta inadequada (pobre
em fibras, com alta freqncia de consumo de acares fermentveis), podem promover o
desequilbrio microbiano da placa dental e reduo da proporo de microrganismos
comensais. Esta condio de desequilbrio est associadao ao aumento em proporo dos
microrganismos patognicos oportunistas envolvidos na patogenia da crie dental ou em
doenas periodontais. Assim condies que favoream microrganismos capazes de proliferar
em baixos pHs (por exemplo: estreptococcus do grupo mutans e lactobacilos) esto associados
desmineralizao progressiva dos dentes, e conseqente desenvolvimento de leses de crie.
Por outro lado, o acmulo prolongado de placa nas margens gengivais causam inflamao
gengival pela ao mais exacerbada do sistema imune local e favorece o crescimento de
microrganismos anaerbios estritos, incluindo bactrias proteolticas (por exemplo:
Porphyromonas spp., Prevotella spp., Treponema spp.) que promovem destruio dos tecidos
periodontais e ativam mecanismos imunolgicos que agridem o prprio tecido periodontal.
Alm das proteases produzidas por estes microrganismos, os produtos da prpria reao
inflamatria so responsveis pelo dano do periodonto. Durante a inflamao, o pH da placa
subgengival varia de neutro a pHs mais bsicos, por volta de 7,5 (8). Estes pHs alcalinos
favorecem o crescimento de bactrias periodontopatognicas anaerbias, Gram-negativas,
como Prevotella intermedia e Porphyromonas gingivalis. Alm disto, o fludo crevicular
aumenta em volume em decorrncia do processo inflamatrio. Por ser rico em protenas, este
fludo passa ser uma fonte rica em nutrientes para as bactrias proteolticas, favorecendo o
crescimento das espcies periodontopatognicas, os quais aumentam em proporo na placa
dental bacteriana (9). A Figura 5 ilustra a evoluo de uma placa dental associada sade para
uma placa dental patognica. Na prxima apostila, vamos estudar em detalhes os fatores
associados ao estabelecimento de uma placa dental associada crie dentria.

14

Presses
Ecolgicas ambientais

superfcie dentria
Placa dental associada sade
(maiores nveis de microrganismos comensais)

superfcie dentria
Placa dental associada doena
(maiores nveis de microrganismos patognicos)

Figura 5. Relao entre os nveis de patgenos da placa dental associada sade e

doena periodontal. Bactrias em cinza representam as espcies patognicas. As
bactrias comensais so representadas em branco. Observe que os nveis de
microrganismos comensais maior nas placas dentrias compatveis com a sade,
embora microrganismos patognicos possam existir em baixos nveis. Presses
ecolgicas podem favorecer a proliferao de microrganismos patognicos, o que
promove o desenvolvimento de uma placa dental patognica. Figura adaptada de P.D.
Marsh. Microbiology 149: 279-294, 2003 (9).

Agradecimentos
A elaborao desta apostila contou com a colaborao do aluno do Curso de
Graduao em Odontologia da FOP-UNICAMP, Leandro Moraes Furlan (RA 24277).

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Referncias Bibliogrficas
1.

Alberts, B, A. Johnson, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts, and P. Walter. 2002. IV.

Internal Organization of the Cell -> 14. Energy Conversion: Mitochondria and
Chloroplasts -> Electron-Transport Chains and Their Proton Pumps, In Alberts, B, A.
Johnson, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts, and P. Walter (eds.), Garland Publishing, New
York.

2.

Bowden, G. H. and I. R. Hamilton. 1998. Survival of oral bacteria. Crit Rev.Oral

Biol.Med. 9:54-85.

3.

Costerton, J. W., P. S. Stewart, and E. P. Greenberg. 1999. Bacterial biofilms: a

common cause of persistent infections. Science 284:1318-1322.

4.

DuPont, G. A. 1997. Understanding dental plaque; biofilm dynamics. J.Vet.Dent.

14:91-94.

5.

Gronroos, L., M. Saarela, J. Matto, U. Tanner-Salo, A. Vuorela, and S.

Alaluusua. 1998. Mutacin production by Streptococcus mutans may promote
transmission of bacteria from mother to child. Infect.Immun. 66:2595-2600.

6.

Kenney, E. B. and M. M. Ash, Jr. 1969. Oxidation reduction potential of developing

plaque, periodontal pockets and gingival sulci. J.Periodontol. 40:630-633.

7.

Kolenbrander, P. E. and J. London. 1993. Adhere today, here tomorrow: oral

bacterial adherence. J.Bacteriol. 175:3247-3252.

8.

Marcotte, H. and M. C. Lavoie. 1998. Oral microbial ecology and the role of salivary
immunoglobulin A. Microbiol.Mol.Biol.Rev. 62:71-109.

9.

Marsh, P. D. 2003. Are dental diseases examples of ecological catastrophes?

Microbiology 149:279-294.

10.

per Axelsson, A. 1991. A four-point scale for selection of caries risk patients, based on
salivary S. mutans levels and plaque formation rate index., p. 159-171. In N. W.
Johnson (ed.), Risk marker for oral disease. Cambridge University, New York.

11.

Podbielski, A. and B. Kreikemeyer. 2004. Cell density--dependent regulation: basic

principles and effects on the virulence of Gram-positive cocci. Int.J.Infect.Dis. 8:8195.

12.

Shearer, B. G. 1996. Biofilm and the dental office. J.Am.Dent.Assoc. 127:181-189.

13. Thylstrup, A. and O. Fejerskov. 1995.

Cariologia clnica. Editora Santos, So Paulo.
14.

Vendeville, A., K. Winzer, K. Heurlier, C. M. Tang, and K. R. Hardie. 2005.

Making 'sense' of metabolism: autoinducer-2, LuxS and pathogenic bacteria.
Nat.Rev.Microbiol. 3:383-396.

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Glossrio
Heme: subunidade da molcula de hemoglobina que consiste de uma parte orgnica e um
tomo de ferro. A parte orgnica formada por 4 anis, os quais se ligam formando um tetraestrutura. O tomo de ferro fica no centro da estrutura tetra e se liga ao oxignio.
Hemina: forma qumica de heme, na qual o tomo de ferro se torna frrico (reativo com
cloro. Tambm chamado de cloreto de hemina, cloreto de hematina, cloro-hemina, fator X de
Haemophilus.
Mutualismo: Relao entre dois organismos distintos, na qual ambos so beneficiados.