Produção de bioetanol de biomassa residual rica em carboidratos obtida após extração de

lipídios de Chlorella SP KR-1

Resumo

A biomassa residual de Chlorella SP KR-1 obtidos após extração de lipídios foi usada para a
produção de bioetanol através de sacarificação. O hidrato de carbono foi sacarificado usando
simples reação enzimática e métodos químicos usando Pectinex pH 5,5 e 45 oC e 0,3 M de HCl
em 121 oC por 15 min com 76.9% e 98,2% rendimento, respectivamente, sem qualquer
tratamento prévio. A biomassa residual contia 49,7% de carboidratos consistindo de açúcar
fermentável de 82,4% e 17,6% de açúcar não fermentáveis, que é valioso para a fermentação
de bioetanol. Aproximadamente 98,2% do total de hidrato de carbono foi convertido em
monossacarídeo (açúcar fermentável + açucares não-fermentáveis) usando sacarificação de
ácido diluída. O açúcar fermentável foi subsequentemente fermentado para bioetanol através
de hidrólise separada e fermentação com um rendimento de fermentação de 79.3%. Em geral,
0,4 g etanol/g açúcar fermentável e biomassa residual de 0,16 g etanol/g foram produzidos.

1. Introdução

Preocupações com a escassez de combustíveis fósseis e o aumento das emissões de CO 2 têm

aumentado o interesse na produção de biocombustíveis derivados de biomassa (Harun et al.,
2011; Lin e Tanaka, 2006). Biodiesel e bioetanol são consideradas promissoras alternativas para
o diesel à base de petróleo e gasolina, respectivamente (Costa, 2007; Ho et al., 2013). A
produção de biocombustíveis de primeira geração da biomassa, como a cana de açúcar e
milho, revelou as preocupações sobre o uso de alimentos para a produção de energia. O uso de
materiais lignocelulósicos, segunda geração, tais como a palha de arroz e lixo do aparo da
grama, ainda é problemático devido o pré-tratamento necessário para processar a lignina
(Neto et al, 2010; Nigam e Singh, 2011).

Microalgas, recentemente, têm sido consideradas como matéria-prima terceira geração

promissora para a produção de biocombustíveis (Lam e Lee, 2012; Norsker et al., 2011).
Geralmente, as microalgas são utilizadas para produção de biodiesel por causa de seu alto teor
de lípidos, acima de 80% da massa seca (Hu et al., 2008; Libessart et al., 1995). No entanto,
principalmente devido a seu custo de produção elevado, produção de biodiesel a partir de
microalgas não foi implementada em escala industrial (Singh e Gu, 2010; Lardon et al., 2009).
Uma solução para reduzir o custo de produção de biocombustíveis é a biorrefinaria que pode
converter todos os componentes celulares das microalgas em biocombustíveis e vários
produtos químicos valiosos (Wijffels et al, 2010; Wijffels e Barbosa, 2010).

Algumas microalgas, como Chlorella, Dunaliella e Tetraselmis, foram mostrados para acumular
uma grande quantidade de carboidratos (> 40% do peso seco), assim, são considerados como
bons candidatos para matéria-prima do bioetanol (Ho et al., 2012, 2013; John et al., 2011). A
maioria dos carboidratos contidos em microalgas estão na forma de amido e celulose. A
ausência de lignina indica que este material pode ser facilmente convertido em
monossacarídeos utilizáveis (Harun e Danquaha, 2011; Harun et al., 2011). Biomassa de
microalgas residual após a extração de lipídios para a produção de biodiesel também pode ser
usada para a fermentação de bioetanol devido à quantidade significativa de carboidratos
remanescentes. No caso de Dunaliella, o hidrato de carbono em sua maioria está presente
como amido (Lee et al., 2013a). Estes hidratos de carbono têm sido sacarificados com êxito em
glicose, e o caldo resultante de sacarificação foi usado para a fermentação de bioetanol, sem
qualquer tratamento prévio (Lee et al., 2013a). Este tipo de produção sequencial de biodiesel e
bioetanol pode melhorar a relação custo-eficácia geral de microalgas-produção de
biocombustíveis.

Chlorella SP KR-1 acumula lipídios totais em até 40% de sua massa seca (Lee et al., 2013c; At et
al., 2011). Lee et al foram capazes de extrair completamente os lipídios de biomassa de
Chlorella SP. KR-1 usando uma (7:3, v/v) mistura de dimetil carbonato (DMC) e metanol,
seguido por transesterificação em ésteres metílicos (FAMEs), com uma produtividade de
biomassa 293,8 mg/g (Lee et al., 2013b). No presente estudo, a biomassa residual total
lipid-extraído do Chlorella SP KR-1, em que os hidratos de carbono representam maior que
49,7% da sua massa seca, foram usada como matéria-prima para a produção de bioetanol.
Vários ácidos diluídos e enzimáticas foram usados na sacarificação da biomassa residual
investigados sem qualquer tratamento prévio. Saccharomyces cerevisiae foi usado para a
fermentação de bioetanol utilizando o caldo de sacarificação, feito a partir da biomassa
residual de Chlorella SP. KR-1 diretamente sem qualquer tratamento prévio.

2. Métodos

2.1. Cultivo e condições de crescimento de Chlorella SP KR-1

As composições de meio de cultura para Chlorella SP KR-1 foram os seguintes (at et al., 2011):
KNO3, 3 mM; KH2PO4, 5,44 mM; Na2HPO4, 1,83 mM; MgSO47H2O, 0,20 mM; CaCl2, 0.12 mM;
FeNaEDTA, 0,03 mM; ZnSO47H2O, 0.01 mM; MnCl24H2O, 0,07 mM; CuSO4, 0,07 mM;
Al2(SO4)318H2O, 0.01 mM. Chlorella SP KR-1 foi cultivado usando um reator Air lif de Pyrex
(volume de trabalho: 6L) equipado com 12 lâmpadas fluorescentes na parte da frente, bem e
deixou os lados (intensidade de luz: 80 s ìmol/m 2) a 30 oC. Foi fornecido ao reator 10% (v/v) de
CO2 no ar a uma taxa de 0,75 L/min (Lee et al., c de 2013). As células foram colhidas por
centrifugação (4000 rpm, 10 min), lavados com água e em seguida liofilizadas (FD5512, Il Shin
BioBase co., Coreia) durante quatro dias ou mais. As células colhidas foram armazenadas a -20
o
C até o uso no ítem 2.2.

2.2. Extração de lipídios e transesterificação de triglicérides catalisada por lipase de Chlorella

SP. KR-1 para produção de biodiesel

A extração de lipídios totais do liofilizado de Chlorella SP. KR-1 foi realizada utilizando dimetil
carbonato e metanol (7:3, v/v) sob agitação magnética a 60 °C por 12h (Lee et al., 2013b). Após
a extração de lipídios, a mistura de extração foi filtrada para separar a solução lipídica e
lipídios-extraído de biomassa residual. A biomassa residual foi seca à temperatura ambiente
por três dias.

Para a síntese de FAMEs, 20% (w/w) Novozyme 435 foi usadA com base na quantidade de
lipídios extraídos em 10 mL da mistura de reação para 6h 60 OC. As amostras foram tomadas
periodicamente e filtrado usando filtros seringa (porosidade 0.20 lm, hidrofóbica) a fim de
remover a lipase e resídual da reação. Estas amostras foram então analisadas usando
cromatografia gasosa (GC) para determinar o grau de conversão de FAME.

2.3. Determinação da composição bioquímica de todas as células e lipídios-extraído de

biomassa residual de Chlorella SP. KR-1

O conteúdo lipídico seco de Chlorella SP. KR-1 foi determinado utilizando o método de Soxhlet
(AOAC, 2000; método 920.39). O conteúdo de carboidratos foi determinado utilizando
métodos analíticos do laboratório nacional de energias renováveis (NREL) (Sluiter, 2011).

O conteúdo de carboidratos e composição das microalgas também foram determinadas

utilizando métodos estabelecidos pelo NREL (Moxley e Zhang, 2007). Uma pequena
quantidade de biomassa de microalgas liofilizada foi adicionada 0,5 ml de ácido sulfúrico que
72% (w/w) e então incubada durante 30 min a 30 oC. O hidrolisado foi diluído de ácido sulfúrico
de 4% (w/w) e incubado durante 20 min a 121 oC (esterilização). O sobrenadante foi
neutralizado e analisados usando cromatografia líquida de alta pressão (HPLC). Usando o
método direto de transesterificação proposto por Jo et al. (2014), os lipídios estavam
determinados a ser composta de FAMEs. O teor de proteína foi analisado utilizando um
método micro-Kjeldahl (AOAC, 2000; método 976.05). O teor de cinzas foi determinado
comparando o peso da amostra antes e após o aquecimento em uma fornalha a 600 oC por
12h.

2.4. Sacarificação de lipido-extraído de biomassa residual de células de Chlorella SP. KR-1

2.4.1. Sacarificação enzimática

A sacarificação enzimática de Chlorella SP KR-1 foi realizada utilizando várias enzimas

comerciais. Poligalacturonase (Pectinex Ultra SP-L com 9500 poligalacturonase unidades
(PGU) /mL), amiloglucosidase (AMG 300L com 300 amiloglucosidase unidades (AGU) /mL),
celulase (Celluclast 1,5 L com 700 palha unidades (EGU) /mL) e Viscozyme L (com b-glucanase
fúngicas de 100 unidades (FBG) / g) foram comprados da Novozymes (Dinamarca). Para
sacarificação enzimática, 5% (p/v) da biomassa residual ou células toda foram incubados a
diferentes temperaturas (35-55 oC) e pH (3,5-6,5) na presença de Celluclast 1,5 L, AMG 300L,
Viscozyme L ou Pectinex Ultra SP-L. enzimas foram usadas na faixa de 2.4 – 0,08 mL/g com base
na massa seca da biomassa residual. A reação de sacarificação do lote foi realizada em um
frasco de Erlenmeyer de 1L (a 45 oC, pH de 5,5, biomassa residual de 0,8 mL enzima/g) agitando
a 230 rpm. Em seguida, 1 mL da mistura de reação foi amostrado periodicamente, e a
quantidade de açúcares redutores foi determinada utilizando o método do DNS.

2.4.2. Sacarificação ácida diluída

Para sacarificação ácido diluída, 5% (p/v) da biomassa residual ou de células toda foram
esterilizados em autoclave a 121 oC durante 15 min na presença de HCl ou H 2SO4 (0.1, 0.3, 0.5,
0.7, 1 M). Após a hidrólise ácida diluída, as amostras foram à temperatura de refrigeração e
centrifugadas a 7000g por 20 min. O sobrenadante contendo os açúcares redutores lançados
foi coletado como hidrolisado ácido diluído, o teor de açúcar e a composição dos quais foram
determinados utilizando o método do DNS.
2.5. Fermentação do Bioetanol

2.5.1. Separação da hidrólise e o processo de fermentação (SHF)

S. cerevisiae 7931 KCTC (ATCC 20626) foi usada para a fermentação de bioetanol. Para produzir
uma cultura de starte, S. cerevisiae foi cultivada em um tubo falcon de 50ml com 5 mL de meio
de cultura em 30 oC e 180 rpm para 16h. A composição do meio de cultura foi a seguinte:
extrato de levedura, 3 g/L; extrato de malte, 3 g/L; peptona, 5g/L; dextrose, 10 g/L (Lee et al.,
2011). Para SHF processamento do hidrolisado enzimático, 3 mL do pre-culta S. cerevisiae foi
inoculado com 200 mL do hidrolisado enzimático que contém açúcares redutores em um balão
de 500 mL cultura a 30 oC e 180 rpm para processamento de 20h. SHF também foi realizado
utilizando a hidrólise ácida diluída. O hidrolisado ácido foi coletado através de centrifugação
(7000 rpm por 20 min) e o pH do hidrolisado foi então ajustado para 6.0 com uma solução de
NaOH 4 M para chegar a uma faixa de pH adequado para a fermentação de etanol com S.
cerevisiae. O consumo de açúcar fermentável e quantidade de etanol produzido foram
determinados periodicamente.

2.5.2. Sacarificação simultânea e fermentação (SSF)

Como meio de SSF, 5% da biomassa residual foi misturada com uma solução de tampão de
acetato de sódio 50 mM (pH 6,0). S. cerevisiae foi inoculado com 1,5% (v/v) do meio de SSF e a
solução de Pectinex filtro esterilizado (biomassa de 0,8 mL/g). O meio de tampão de acetato de
sódio contendo a biomassa residual, em seguida, foi adicionado a esta mistura.

2.6. Análise

A quantidade de açúcar foi determinada utilizando o método DNS (ácido 3,5-dinitrosalicylic)

com glicose (de 0,1 a 2,0 mg/mL) usado como padrão. Depois de misturar uma amostra de 0,5
mL com 1,5 mL de reagente de DNS, a mistura foi aquecida a 100 oC por 10 min, e 8 mL de água
foi adicionado. A absorbância da mistura foi analisada utilizando um espectrofotômetro no
comprimento de onda de 550 nm. As composições de açúcares e etanol foram identificadas e
quantificadas usando HPLC (Jasco, Japão). A cromatografia foi equipada com uma coluna de
Aminex HPX - 87H (Bio-rad) e um detector de índice de refração. Uma solução de H 2SO4 a uma
vazão de 0,6 mL/min de 5 mM foi usado como o eluente. Uma amostra de 40 lL foi injetado a
60 oC. As FAMEs dentro da amostra foram analisados utilizando um cromatógrafo a gás
(M600D, Young Lin instrumento, Coreia) equipado com uma coluna de CERA InterCap (GL
Sciences, 30m comprimento 0,53 mm de diâmetro) e um detector de ionização de chama (FID).

3. Resultados e Discussão

3.1. Duas etapas do método para produção de biodiesel de Chlorella SP KR-1

FAMEs foram sintetizadas usando um método de duas etapas, consistindo de extração de

lipídios mediada por DMC, seguida por transesterificação catalisada por Novozyme 435 dos
lipídeos extraídos em FAMEs. Uma mistura de DMC e metanol foi usada como o solvente de
extração para os lipídios de microalgas; DMC então foi empregado como substrato para a
síntese de FAMEs de triglicerídeos. As FAMEs foram sintetizados em um rendimento de FAMEs
298 – 250 mg por grama de biomassa de microalgas.
3.2. Análise de composição de toda Chlorella SP. KR-1 as células e biomassa residual após a
extração de lipídios

As composições de todas célula de Chlorella SP. KR-1 e a biomassa residual de lipídios extraídos
são mostradas na tabela 1. Usar apenas o DMC e metanol mistura (7:3, v/v), os lipídios totais
extraídos foi de aproximadamente 38,0% (w/w). Os carboidratos representam 36,1% do peso
seco em células toda de Chlorella SP KR-1. Glicose, galactose, xilose, ramnose e arabinose
representado 82.8%, 5,5%, 0,9%, 5,3% e 5,4% do peso, respectivamente. Assim, a quantidade
de açúcares fermentáveis foi 82.8% dos monossacarídeos totais, sugerindo que a Chlorella SP
KR-1 é adequado para a fermentação de bioetanol. O teor de hidratos de carbono na biomassa
residual lipid-extraído era 49,7%, enquanto a proteína constituída de 28,5% da biomassa
residual extraídas por meio de lipídios, seguida por ash em 9,5%. A célula inteira e a biomassa
residual continham uma quantidade significativa de carboidratos e, portanto, podem ser
usados para a fermentação de bioetanol após sacarificação.

3.3. Sacarificação da biomassa residual de extração-lipídica

Sacarificação enzimática e sacarificação ácida diluída foram usadas para converter os hidratos
de carbono da biomassa residual de extração-lipídica em açúcares para a fermentação de
bioetanol. Várias enzimas foram avaliadas para a capacidade de sacarificação, enquanto a
variação de pH (3,5-6,5) e temperatura. Conforme mostrado na tabela 2, quando o AMG 300L
foi usado para hidrolisar a biomassa residual de Chlorella SP KR-1, 13,7 g/L de açúcares
redutores foram produzidos após 1 h de tempo de reação. Enquanto isso, o rendimento de
sacarificação foi apenas 55,1% (baseado no hidrato de carbono total da biomassa residual),
indicando que a eficiência da AMG 300L para sacarificação não é satisfatória. É provável que a
atividade de amiloglucosidase não era suficiente, uma vez que o principal carboidrato contido
na Chlorella SP. é amido, seguido por galactan, xilana, arabinan e ramnose (Goulart et al, 2013;
Kim et al., 2014). Pectinex exibiu a melhor eficiência de sacarificação sob as condições de
determinado. Para 1h de tempo de reação, um rendimento de açúcar de 70,4% (baseado no
hidrato de carbono total da biomassa residual) foi obtida em pH 5,5 e 45 C. Pectinex tem a
capacidade de quebrar a parede de pilha ininterrupta hidratos de carbono da biomassa
residual. Além disso, para hidrolisar os principais carboidratos (amido), sem enzimas adicionais
eram necessários desde Pectinex de Aspergillus contém um-amilases, cellobiases e xilanases
(Botella et al., 2007; Mamã et al, 2008; Tengerdy e Szakacs, 2003). Porque a biomassa para
proporção de enzima é um fator importante, a concentração de Pectinex para sacarificação
enzimática foi otimizada para a biomassa residual de extração -lipídica de Chlorella SP KR-1. A
concentração de Pectinex era variada na faixa de 2.4 – 0,08 mL/biomassa residual em g. O
rendimento máximo de sacarificação foi cerca de 75% na presença de biomassa residual de 0,8
mL Pectinex/g. Aumento na concentração de Pectinex não melhora o rendimento de
sacarificação. Assim, a concentração de enzima mais adequada foi encontrada para ser
biomassa residual de 0,8 mL/g. A sacarificação catalisada por Pectinex da biomassa residual
lipídios extraídos realizou mais de 3h, e o rendimento de sacarificação final foi de
aproximadamente 76,8% com base em carboidratos totais da biomassa residual. A
concentração de açúcar redutor foi 19,1 g/L

Para sacarificação por ácido diluido, várias concentrações de HCl e H 2SO4 variando de 0,1 a 1 M
foram avaliados e autoclavados a 121 oC por 15 min. Fig. 1 mostra o efeito da concentração do
ácido na eficiência de sacarificação. Para sacarificação da biomassa residual de 5% (p/v), 0,3 M
de HCl produzido uma saturada sacarificação com eficiência de 98,2% com base na quantidade
de carboidratos totais. A solução mais favorável é que com a menor concentração de ácido
possível produzir o maior rendimento possível sacarificação. Obteve-se um rendimento de
sacarificação de quase 100% (baseado em açúcar fermentável) usando 0,3 M HCl, enquanto o
rendimento de sacarificação (baseado no total de carboidratos) era 98,2%. Quanto ao impacto
ambiental e custos operacionais, uma concentração de ácido clorídrico de 0,3 M
(aproximadamente 2,5% (v/v)) é um custo efetivo para sacarificação por ácido diluído.

O caldo de Pectinex-catalisada sacarificação foi analisado usando HPLC para determinar a

composição de monossacarídeos. Glicose foi o principal açúcar fermentável, constituindo
aproximadamente 93,8% de monossacarídeos os totais. Xilose esteve presente em cerca de
5,9%, seguido por arabinose. O caldo de sacarificação de ácido diluido contia glicose como o
principal açúcar fermentável (82% de monossacarídeos no totais). Xilose e galactose estavam
presentes em 0,9% e 5,9% peso por cento, respectivamente, seguido por arabinose (5,7%) e
ramnose (5,9%).

3.4. Sacarificação de todas células de Chlorella SP. KR-1

Para comparação com o rendimento de sacarificação de biomassa residual de extração-lipídica,

as células de Chlorella SP KR-1 foram submetidas a sacarificação usando métodos de ácido
diluídos e enzimáticos (tabela 3). Um rendimento de 22,7% foi obtido através de sacarificação
enzimática, enquanto um rendimento de 93,3% foi obtido usando a sacarificação de ácido
diluída com uma concentração de ácido de 0,3 M HCl. No que se refere a sacarificação
enzimática, obteve-se um rendimento de sacarificação alta usando biomassa residual, ao invés
das células de total, uma vez que a biomassa residual já tinha sido interrompida por DMC e
metanol mistura durante a extração de lipídios. O rompimento da pilha após a extração de
lipídios foi confirmado, comparando a morfologia da célula de célula intacta e tratada com
solvente celular baseado na digitalização de análise microscópica de elétron (dados não
mostrados).

3.5. Fermentação do Bioetanol usando caldo de sacarificação da biomassa residual de

exração-lipídica

Fermentação de bioetanol com açúcares fermentáveis partir da biomassa residual de Chlorella

SP KR-1 foi investigada usando S. cerevisiae no processo de fermentação (SHF) (Fig. 2). A
biomassa residual de Chlorella SP KR-1 tinha um teor de glicose de 82,4%, com base em
hidratos de carbono total de biomassa residual. Após 3h de sacarificação enzimática a 45 oC e
pH 5,5, a concentração de glicose de 17,8 g/L. S. cerevisiae foi então inoculada a 30° C para a
fermentação de etanol. A glicose foi consumida rapidamente (inicial a concentração de glicose:
14,75 g/L), resultando em uma concentração de etanol e rendimento de 5,9 g/L e 79.3%,
respectivamente.
Produção de bioetanol a partir de biomassa residual de Chlorella SP KR-1 também foi realizada
através do processo de fermentação (SSF) e sacarificação simultânea. Em uma concentração
final de glicose de quase zero, a safra de etanol foi 82,3%. O processo SSF parece mais
apropriado para a biomassa residual lipid-extraído do Chlorella SP KR-1 para a fermentação de
bioetanol desde que é uma reação mais simples e tem um menor tempo de reação e um maior
rendimento de etanol, em comparação com o processo SHF.

O hidrolisado a partir do ácido diluído na biomassa residual de Chlorella SP KR-1 também foi
utilizado para a fermentação de bioetanol através de processo de SHF. Sacarificação de ácido
diluída, no entanto, pode levar à formação de subprodutos de fermentação-inibitórios devido a
alta concentração de ácido à relação de biomassa (Girio et al, 2010; Moxley e Zhang, 2007).
Produtos de sacarificação ácido diluído da biomassa lignocelulósica contêm vários inibidores de
fermentação, como o ácido fórmico ou hidroximetilfurfural e levedura de fermentação não
consumiam completamente açúcares do caldo de sacarificação (Wikandari et al, 2010; Biswas
et al., 2013). Em contraste com biomassa lignocelulósica, simples processo SHF alcançado um
rendimento de etanol de 79.3% do caldo diluído ácido sacarificação da biomassa residual
lipid-extraído de Chlorella SP KR-1, indicando que sacarificação de ácido diluída faz não
inibidores de fermentação de forma. Esta é uma vantagem da utilização de hidratos de carbono
baseado em microalgas residuais para a fermentação de etanol, em comparação com biomassa
lignocelulósica.

3.6. Balanços de produção de biodiesel e bioetanol pelas microalgas Chlorella SP KR-1

Um balanço de massa da produção de biodiesel e bioetanol a partir de 1 kg de biomassa de

Chlorella SP. KR-1 foi analisado (Fig. 3). Toda células contêm lipídios totais e carboidratos de
38,0% e 36,1% (w/w), respectivamente. Partir deste exemplo, 0,3 kg de biodiesel e 0,62 kg da
biomassa residual lipídios extraídos foram produzidos. A biomassa residual contido 49,7% de
carboidratos (açúcar fermentável de 82,4% e 17,6% de açúcar não-açúcares fermentáveis).
Aproximadamente 98,2% dos carboidratos totais foram convertidos em monossacarídeos
(açúcar fermentável + açúcares não-fermentáveis) usando sacarificação de ácido diluída. Os
açúcares fermentáveis em seguida foram posteriormente fermentados em bioetanol, com um
rendimento de fermentação de 79.3% usando o processo SHF.

Neste estudo, bioetanol sequencialmente foi produzido usando a biomassa residual de

extração-lipídica de Chlorella SP KR-1 como matéria-prima de fermentação. A biomassa
residual de extração-lipídica foi sacarificada diretamente e fermentada com eficiência elevada,
desde que a parede celular foi interrompida durante a etapa de extração de lipídios no
processo de produção de biodiesel. De outra forma, o caldo de sacarificação gerado pelo
método enzimático foi usado diretamente para fermentação de bioetanol, sem qualquer
tratamento prévio. Os resíduos de biomassa residual gerado a partir de processo de produção
de biodiesel podem ser usado como matéria-prima para a fermentação de bioetanol, o que
contribui para a viabilidade econômica da produção de biocombustíveis de microalgas.
4. Conclusão

Pectinex-catalisada e sacarificação diluíção ácida de biomassa residual de estração-lipídica de

Chlorella SP KR-1 gerado 19,1 e 24,4 g/L de açúcares, redutores, respectivamente. Hidrolisado
ácido diluído partir da biomassa residual de extração-lipídica para produzir de bioetanol foi
convertido pelo SHF com um rendimento de açúcar fermentável de 0,4 g etanol/g. O
rendimento de bioetanol baseado a biomassa residual foi a biomassa de 0,16 g etanol/g. Neste
estudo, demonstramos o uso da biomassa residual de extração-lipídica para viabilidade
econômica melhorada de biomassa de microalgas para a produção de biodiesel e bioetanol.

Agradecimentos

Esta pesquisa foi apoiada pelo Programa de Pesquisa de Ciência Básica na Pesquisa Nacional
Fundação da Coreia (NRF), Ministério da Ciência, TIC e futuro planejamento
(NRF-2013R1A2A2A01068863). Este trabalho também foi apoiado por uma bolsa do Programa
de Biotecnologia Marinha, financiado pelo Ministério de Oceanos e Pesca do Governo Coreano.