Relatório Crítico de Encerramento

329252 - Desenvolvimento de testes em ELISA e

Lateral Flow para diagnóstico do COVID-19

SENAI CETIQT

1
 Relatório Crítico de Encerramento

Parcial ( ) Total ( x ) Cancelamento ( ) Prorrogação ( )

Unidade Executora: SENAI CETIQT

Empresa Parceira: Rio Paraná Energia S.A.
Outros Parceiros: Advagen Biotech Ltda; Fundação Oswaldo
Cruz Instituto De Tecnologia Em Imunobiológicos
Laboratório de Engenharia de Cultivos Celulares, UFRJ,
Laboratório de Virologia Molecular, UFRJ
Modalidade de Apoio Financeiro: Edital de Inovação para a Indústria
2020 MISSÃO CONTRA COVID-19

Vigência do Projeto: 30/04/2020 a 30/09/2020

Período de Execução: 30/04/2020 a 30/09/2020
Gestor do Projeto: Aline Romão-Dumaresq/ Marcelo Moura
Tel.: (21) 99623 7769
Email: ADumaresq@cetiqt.senai.br / Mvmoura@cetiqt.senai.br
Gestor da Carteira: Rodrigo de Jesus Souza
Tel.:
Email:

2
1. Descrição do Projeto

1.1 Objetivo Geral

Em um momento em que o isolamento social é promovido no Brasil e em outros
países, o Centro de Tecnologia da Indústria Química e Têxtil - SENAI CETIQT -
vem adotando ações consistentes e medidas preventivas no combate ao novo
coronavírus.
Através do Edital SENAI de Inovação Missão Contra o COVID-19, o Instituto
SENAI de Inovação em Biossintéticos e Fibras (organização integrante do
SENAI CETIQT) fechou parceria estratégica com a CTG Brasil, uma empresa da
China Three Gorges Group, empresa do setor elétrico visando o
desenvolvimento e produção de testes sorológicos para COVID-19. O projeto
ainda contou com as importantes participações da Bio-Manguinhos/Fiocruz, da
Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ) e da Advagen Biotech, empresa
paulista de biotecnologia.
A iniciativa visou o desenvolvimento e implementação de dois tipos de testes de
diagnóstico de base sorológica, que permitem a detecção específica dos
anticorpos (Imunoglobulinas IgG) contra a proteína S viral produzidos pelos
pacientes infectados com o SARS-CoV-2. As alternativas para a detecção do
novo coronavírus são: (i) teste sorológico rápido baseado em
imunocromatografia de fluxo lateral (LF); (ii) teste sorológico baseado em ELISA
(do inglês Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Os testes sorológicos
propostos trarão agilidade na obtenção dos resultados, variando de minutos
(para os testes rápidos) a poucas horas (para testes ELISA).

3
 1.2 Objetivos Específicos / Metas Estabelecidas e
Alcançadas (correlação).
Atividade Metas Estabelecidas
Desenvolver um processo
1 - Produção
escalonável de produção
otimizada da
de proteína S
proteína S em
recombinante em
Biorreatores
biorreatores
2 - Metodologia Purificar a proteína
estabelecida de recombinante produzida
purificação para uso em kits
Desenvolvimento de um
3 - Protótipo teste baseado em ELISA
do teste sorológico para diagnóstico de
baseado em Elisa COVID-19 com a proteína
S produzida
Validação do teste
4 - Validação do
sorológico baseado em
teste sorológico
Elisa com a soroteca das
baseado em Elisa
UFRJ
Produção de Ferramentas
5- Produção de de Biologia Sintética para
fragmentos de expressão da proteína S
proteína S em outros sistemas de
expressão
Desenvolvimento de um
6 - Protótipo do teste baseado em LF para
teste sorológico diagnóstico de COVID-19
rápido desenvolvido com a proteína S
produzida
7 - Validação do
Validação do teste
teste sorológico
sorológico baseado em LF
rápido com a soroteca das UFRJ
8 - Análise dos
Análise dos dados de NGS
dados de NGS
(Sequenciamento de Nova
(Sequenciamento Geração) com diferentes
isolados de SARS-CoV-2
de Nova Geração)
Metas Alcançadas
Meta alcançada com sucesso.
Foi estabelecido um processo,
escalonável de produção da
proteína em meio otimizado e
capaz de gerar 10 a 12mg/L de
proteína em um intervalo de 5
dias
Meta alcançada com sucesso.
Foi desenvolvido um protocolo
de purificação com coluna de
afinidade, capaz de purificar a
proteína S recombinante de
maneira que a mesma possa
ser usada em kits de
diagnóstico.
Meta alcançada com sucesso.
Foi desenvolvido um protótipo
de teste ELISA IgG que
apresentou 93% de
sensibilidade e 98% de
especificidade.
Meta alcançada com sucesso.
Foram testados mais de 2000
amostras com a Soroteca da
UFRJ, obtendo-se 92% de
sensibilidade e 97% de
especificidade
Meta Alcançada com sucesso.
Foram clonadas e
sequenciadas mais de 5 novos
vetores para a expressão da
proteína S.
Meta alcançada com sucesso.
Foi desenvolvido um protótipo
de teste LF IgG que apresentou
91% de sensibilidade e 96% de
especificidade
Meta alcançada com sucesso.
Foram testados 545 amostras
com a Soroteca da UFRJ,
obtendo-se 91% de
sensibilidade e 97% de
especificidade
Atividade cancelada. Não foi
possível o acesso ao banco de
amostras por parte do Comitê
de Ética da UFRJ
4
 com diferentes
isolados de SARS-
CoV-2
9 - Pedido de
registro para a Meta Alcançada com sucesso
Pedido de registro dos kits
parcial. O Kit ELISA foi
ANVISA visando ELISA e LF para a
licenciado para venda em
ANVISA visando
permissão de 30/9/2020 porém o kit LF foi
permissão de distribuição
licenciado por Biomanguinhos
distribuição em em escala comercial
somente em 02/09/2021.
escala comercial

1.3 Escopo da execução do projeto.

Houve mudanças no escopo do projeto, para melhor aproveitar os resultados de

pesquisa. Desta forma, após alinhamentos com os parceiros, optou-se por
priorizar apenas os kits do tipo IgG, pois os mesmos estavam em escala de
desenvolvimento mais avançada. Optou-se também por cancelar a atividade de
sequenciamento dos vírus de SARS CoV-2. Isto foi necessário devido à demora
na chegada de reagentes para sequenciamento e a implicações quanto aos
Comitês de Ética do projeto (vinculados aos parceiros UFRJ e Biomanguinhos)
para a análise de dados de pacientes humanos por parte do SENAI CETIQT.
Desta maneira, visto da impossibilidade de realizar o pacote sem expor a
instituição a riscos legais, decidiu-se pelo cancelamento da entrega descrita.

1.4 Justificativa de todos os itens não executados dentro

dos prazos previstos no cronograma, acompanhada
dos respectivos impactos no desenvolvimento do
projeto.

Houve alteração no prazo de algumas entregas do projeto devido à necessidade

de realizar mais de uma rodada de validação dos protótipos dos kits ELISA e
Lateral Flow. Este atraso se deu devido a diversos afastamentos por causa de
infeção por COVID-19 por parte dos parceiros, sobretudo de Biomanguinhos. A
redução da equipe impactou significativamente na dedicação ao

5
desenvolvimento técnico dos testes e às suas atividades subsequentes de
elaboração documental.
Outro impacto sentido durante a execução do projeto foi na aquisição de
materiais e reagentes para a pesquisa. A dificuldade na importação de insumos
devido a desabastecimento, flutuações cambiais e alta demanda por itens de
pesquisa também impactou no atraso de alguns experimentos, como na
impregnação de membranas com ouro coloidal e na falta de capilares para
montagem dos kits LF.
Estes fatos impactaram no cronograma de execução do projeto, que teve de ser
ajustado ao longo da pesquisa.
A atividade de Registro dos kits na ANVISA, que consistia na submissão de kits
LF e ELISA foi parcialmente concluída. O produto desenvolvido pela Advagen
Biotech Ltda, denominado “COVID-19 IgG pS MAX ELISA” foi licenciado no dia
30/9/2020, tendo sua liberação para uso publicada no Diário Oficial da União no
dia 1° de Outubro de 2020 (vide Anexo). Este kit apresentou valores de
sensibilidade (92%) e especificidade (98%) dentre os melhores do mercado, além
de poder ser produzido com custos acessíveis.
Foi também elaborado um protótipo por Biomanguinhos, do teste de LF IgG, que
obteve sensibilidade de 91% e especificidade de 99%, o que os deixa elegíveis
para credenciamento nas regulações mais rigorosas, como a da OMS. O
desenvolvimento experimental dos testes de Lateral Flow foi concluído em
Agosto de 2020. No entanto, a etapa de compilação de documentos por parte de
Biomanguinhos se mostrou mais demorada que o esperado e não foi possível
aproveitar o Fast Track na tramitação de documentos por parte da ANVISA.
A necessidade de documentos e testes adicionais impactou mais ainda nesta
execução, de maneira que o teste TR SARS-CoV-2 IgG, produzido por
Biomanguinhos, teve seu registro junto à ANVISA protocolado somente em
02/09/2021.
Desta forma, apesar de entraves administrativos na confecção do dossiê por
parte de Biomanguinhos, o projeto realizou com sucesso desenvolvimento dos
produtos propostos, sendo um deles já disponível no mercado.

2. Resultados alcançados
2.1 Resultados para o SENAI/SESI/IEL

6
A produção nacional de insumos se apresenta como fundamental para o país,
pois aumenta a independência de mercados estrangeiros. O desenvolvimento de
uma cadeia produtiva de insumos nacionais também gera impacto social por toda
a área de Biotecnologia. A possibilidade do SENAI e do ISI Biossintéticos e Fibras
de reunir parceiros, competências e experiências foi fundamental para inserir a
Rede em uma posição de destaque no cenário nacional. Foi possível adquirir
uma rede de contatos e participar de diversas iniciativas na área de diagnósticos.
Outro resultado positivo para o SENAI foi o expertise ganho no desenvolvimento
de um projeto desafiador, com uma elevação do TRL da pesquisa de 3 para 9
em 5 meses.
Mais um resultado positivo foi a divulgação positiva do projeto, que foi veiculado
em diversos tipos de mídia, como internet, TV e mídias impressas. Foram
geradas notas técnicas que, juntamente com a infra – estrutura moderna e
abrangente, os resultados e a visibilidade proporcionados pelo projeto, alçaram
o SENAI em uma posição de proeminência no mercado e na área acadêmica.

2.2 Resultados para a Indústria

A produção nacional de insumos se apresenta como fundamental para o país,

pois aumenta a independência de mercados estrangeiros. Em eventuais novas
ondas de contaminação, que estão sendo verificadas ao redor do mundo, é de
vital importância que o Brasil seja capaz de produzir todos os insumos
necessários na cadeia produtiva de testes.

O presente projeto também desenvolveu uma otimização da produção da

proteína, gerando um processo escalonável, passível de ampliação de escala
(em projetos separados, o escalonamento não é parte do escopo do projeto)
mediante demanda e com custos menores. Através do fornecimento nacional de
proteína, outras empresas além das parceiras do projeto já demonstraram
interesse e se encontram testando o insumo desenvolvido pelo grupo.

Esperava-se que o custo para confecção dos kits desenvolvidos ficasse em torno
de 6 dólares/ensaio no caso do teste rápido. Ao final do desenvolvimento, os
custos do teste rápido estão estimados em torno de 25 reais, indicando que esta
meta foi obtida com sucesso, com um kit 20% mais barato que o objetivo. O
teste de ELISA tem seu custo individual de cerca de 20 a 30 reais, o que também

7
 aponta para impactos positivos no barateamento do processo devido à
nacionalização de insumos e da cadeia produtiva.

2.3 Status do desenvolvimento da Inovação proposta no

projeto

O desenvolvimento e a produção dos dois kits diagnósticos sugeridos

representam um impacto tecnológico para a Saúde Pública nacional, além do
impacto socioeconômico supracitado. É fundamental para a soberania
tecnológica brasileira a capacidade de produzir estes insumos internamente.
Tais tecnologias terão grande oportunidade de implementação e contenção da
disseminação do COVID-19 frente a tecnologia convencional empregada.

Durante o projeto, foram geradas expertises e competências, tanto no SENAI

quanto nos parceiros, para desenvolver, produzir e avaliar kits sorológicos de
diagnóstico para SARS CoV-2. Os kits desenvolvidos com tecnologia nacional
apresentam desempenho robusto e confiável quando comparados com as
contrapartes importadas, o que marca a capacidade técnica obtida e gerada no
projeto.

Houve também a experiência de desenvolver um produto de maneira acelerada,

elevando o TRL da pesquisa de etapas muito iniciais até a chegada no mercado.
Esta experiência positiva também agrega aos resultados, onde o modelo de
desenvolvimento poderá ser replicado futuramente.

3. Lições Aprendidas
3.1 - O que faríamos da mesma forma?

Como tratou-se de um projeto de curto prazo, houve um alinhamento prévio entre

os setores da instituição, onde foram indicados profissionais para servir como
pontos focais para as atividades técnicas e principalmente administrativas. Uma
vez que em um curto período de tempo foram executados mais de um milhão de
reais em compra de insumos, houve um desempenho muito eficiente por parte
do setor de Compras e Suprimentos da Instituição. Esta experiência estará
sendo replicada em projetos futuros.

8
Por se tratar de um projeto com muitos parceiros e muitas sedes, houve também
acompanhamento constante, através de reuniões semanais online e da criação
de um grupo de Whatsapp com os técnicos dos parceiros e do Instituto. Desta
maneira, foi possível compartilhar dados e competências, bem como agilizar as
tomadas de decisão e as interações entre os parceiros, o que foi um diferencial
e contribuiu positivamente para o projeto.

3.2 - O que faríamos de maneira diferente?

Tendo em vista o desafio de desenvolver uma tecnologia em um curto período

de tempo, o escopo do projeto poderia ter sido reduzido, tendo dado mais ênfase
nas atividades centrais de desenvolvimento dos kits.

O planejamento poderia ter dado mais espaço para contingências devido à

situações decorrentes da pandemia, como por exemplo alocar uma equipe maior
para cobrir a eventual redução de quadro por COVID-19.

Visto que o maior desafio para a execução do projeto não foi técnico e sim
administrativo, poderia-se também ter tido um alinhamento maior com os
parceiros na etapa anterior ao início do projeto. O não envolvimento dos setores
de apoio dos parceiros no planejamento refletiu no grande impacto na demora
na realização principalmente nas tarefas administrativas, que foram realizadas
em regime de pandemia, com novas práticas, demandas e prazos. Com um
alinhamento prévio, com maior participação dos setores administrativos das
instituições, seria mais provável antecipar gargalos na realização das atividades,
mapear quais eram as atividades mais sensíveis e traçados planos de
contingência.

Estes fatores, curto tempo de realização, dificuldades de importação e

transtornos gerados pela COVID-19, impactaram a realização das atividades nos
parceiros.

3.3 - O que sabemos hoje e que não sabíamos antes

do projeto?

Foi gerada uma grande quantidade de conhecimento ao longo do

desenvolvimento dos kits.

9
Ao final do projeto, a Aliança conseguiu gerar um protocolo de produção de
proteína S recombinante nacional, eficiente e escalonável. Esta proteína foi
utilizada para a produção de kits confiáveis e de preço acessível, que apresenta
uma grande competência gerada, inclusive com a publicação de artigos
científicos por parceiros.

A interação com os parceiros foi um grande aprendizado para a equipe. A

competência em produção e manuseio de células animais do grupo da prof. Leda
Castilho e o conhecimento em virologia do professor e membro da OMS Amilcar
Tanuri, ambos da UFRJ, somaram bastante. O grande conhecimento do
mercado, das Leis vigentes e do processo de montagem de kits dos parceiros
da Advagen e de Biomanguinhos também foi de grande valia. A equipe do SENAI
pôde adquirir um pouco mais destas competências ao realizar os experimentos
em conjunto com os parceiros e isto agrega ao portfólio da instituição.

A aliança também ganhou experiência na produção e avaliação de kits, sendo

possível adicionar o conhecimento gerado à rede SENAI de Diagnóstico.

Ao longo do projeto, foi também aprendido que o impacto administrativo da

pandemia no país foi severo, onde tivemos a influência da subida do dólar no
preço dos insumos. Foi então desenvolvido um processo de compras rápido de
maneira a atender os prazos e minimizar os efeitos de flutuação de cambio, bem
como garantir a entrega correta e em bom estado dos itens.

Ao final do projeto, aprendeu-se bastante sobre requisitos para o licenciamento

de kits de diagnóstico, bem como as exigências e procedimentos para que isto
seja realizado.

10
 4. Recursos Aportados
Recursos Aportados
Contrapartida Previsto Realizado Diferença Justificativa
DN R$ 1.000.000,00 R$ 1.000.000,00 - -
DR - - - -
EP R$ 1.000.000,00 R$ 1.000.000,00 - -
OP - - - -
Total >>>>>> R$ 2.000.000,00 R$ 2.000.000,00

5. Conclusão (para relatório final)

Após a realização das atividades previstas no projeto, pôde-se estabelecer um
protocolo de purificação da proteína S baseado em cromatografia de afinidade.
Este protocolo foi capaz de concentrar a amostra em cerca de 40 a 50 vezes a
proteína S através de Ultrafiltração e atualmente um litro de meio é capaz de
gerar a quantidade de proteína necessária para a confecção de mais de 50 mil
testes.

Foi também possível estabelecer e validar um protótipo do teste de ELISA. Estes

testes apresentaram sensibilidade de 92% e especificidade de 98% após a
segunda rodada de validação. Este kit utiliza uma pequena quantidade de
proteína nacional (200ng) e tem seu custo estimado entre 15 e 25 reais. O
produto foi licenciado na ANVISA pela Advagen Biotech em 30/9/2020 sob o
nome de “COVID-19 IgG pS MAX ELISA” já está disponível para produção no
mercado e o primeiro lote foi doado à Santa Casa de Valinhos pelos parceiros
do projeto, capitaneados pela Rio Paraná Energia S.A.

Foi também elaborado um protótipo de teste de LF IgG, utilizando 200ng de

antígeno. O kit, após validação, teve sensibilidade de 91% e especificidade de
99%, o que os deixa elegíveis para credenciamento nas regulações mais
rigorosas, como a da OMS. Estes números são compatíveis com os testes no
mercado, com a vantagem de terem sido validados em uma grande quantidade
de amostras. O teste TR SARS-CoV-2 IgG teve seu registro junto à Anvisa
protocolado em 02/09/2021.

Estas contribuições apresentam grande impacto para o país, onde foi

demonstrada a capacidade de produção do insumo chave e a soberania nacional

11
 para a produção de testes. O impacto também poderá ser sentido com a
possibilidade da diminuição dos custos de obtenção do insumo chave, a proteína
recombinante de SARS-CoV-2.

6. Anexos

Produtos finalizados

Foto 1. Imagem ilustrativa da veiculação do kit “COVID-19 IgG pS MAX ELISA”,

distribuído pela empresa Advagen Biotech Ltda.

Foto 2. Imagem ilustrativa do protótipo validado do kit “TR SARS-CoV-2 IgG”.

12
 iDivulgação na mídia

• PORTAL CTG
https://www.ctgbr.com.br/ctg-doa-equipamentos-de-saude-para-combate-ao-coronavirus/
• PORTAL SETOR ELETRICO
https://www.osetoreletrico.com.br/ctg-brasil-faz-parceria-com-senai-para-producao-local-de-
testes-rapidos-de-coronavirus/
• PORTAL DO GOVERNO NACIONAL
https://www.gov.br/pt-br/noticias/educacao-e-pesquisa/2020/06/ufrj-faz-acordo-para-
producao-de-testes-de-diagnostico-em-grande-escala
• PORTAL UFRJ
https://conexao.ufrj.br/2020/03/23/coronavirus-ufrj-desenvolve-novo-teste-para-detectar-
covid-19/
• REDE GLOBO - JORNAL NACIONAL
https://globoplay.globo.com/v/8607137/

Rio de Janeiro, 15 de Setembro de 2021

_____________________________ _____________________________
Sergio Luiz Souza Motta Paulo Luiz de Andrade Coutinho
Diretor Executivo – SENAI CETIQT Gerente do ISI Biossintéticos e Fibras
CPF: 347.240.365-91 CPF: 606.574.807-20

_____________________________
Marcelo Victor Holanda Moura
Coordenador de Biotecnologia – ISI
CPF: 057.044.777-12
______________________________
Carlos Carvalho Nascimento
Gerente de Pesquisa e Desenvolvimento
Rio Paraná Energia S.A
CPF: 259.977.588-27

13