Teste de ELISA

(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay)

TESTE DE ELISA

O ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) é um teste sorológico

imunoenzimático cuja metodologia se baseia em reações antígeno-anticorpo
detectáveis através de reações enzimáticas. Existem vários modelos de ELISA, e
eles envolvem testes usando anticorpos como reagentes.
ELISA

ELISA
A Técnica ELISA é muito utilizada em escala mundial, devido a sua praticidade de
uso para várias amostras e sua habilidade de amplificação robusta do sinal com
alta sensibilidade e especificidade para a quantificação de anticorpos e antígenos
em fluidos biológicos de natureza complexa (BORGES, DEMARGOS &
HATANAKA, 2021).
Esta técnica foi descrita pela primeira vez por Yalow e Berson (1959). Foi relatado
pelos autores uma técnica que utilizava a detecção de anticorpos com a ligação
de um sinal radioativo, e devido aos riscos relativos à radioatividade, o método foi
modificado (TIGHE et al., 2015).
Utilização

Essa técnica é utilizada para detecção e diagnóstico de diferentes doenças

infecciosas,doenças autoimunes, alergias, infecções fúngicas, bacterianas, parasitárias e
virais.

Assim, é possível observar se em algum momento aquele organismo entrou em contato

com estes agentes.
Por isso, a ELISA é amplamente utilizada em laboratórios de biotecnologia, farmacêutica e
clínica no geral.
Apesar do avanço da biotecnologia e o avanço e criação de técnicas de detecção, o papel
dessa técnica na biologia molecular permanece significativo, ainda sendo um dos mais
sensíveis dos imunoensaios, oferecendo alto rendimento, combinado com acessibilidade e
facilidade de uso.
UTILIZAÇÃO

Nos últimos 20 anos, houve um refinamento de tecnologias de alto

rendimento para todas as áreas denominadas como Ômicas (genômica,
proteômica, transcriptômica e lipidômica, metabolômica, entre outras).
Com isso, os laboratórios de Biologia Molecular possuem atualmente a
possibilidade de desenvolver (ou até mesmo comprar) biomarcadores, que no
caso do ELISA, são utilizados para diagnosticar patologias ou até mesmo
estudar organismos com muito mais precisão.
TIPOS DE TESTE DE ELISA

Os testes do tipo ELISA são normalmente padronizados em laboratórios de

referência para a detecção de anticorpos com sensibilidade e especificidade para
os anticorpo.
Esse método versátil é capaz de forma quantitativa e qualitativa especificar uma
substância, que normalmente é um antígeno, que é imobilizado quimicamente em
uma microplaca ou diretamente, por um anticorpo de captura.
Existem 4 tipos principais: ELISA direta, ELISA indireta, ELISA sanduíche e ELISA
de bloqueio.
TESTE DIRETO
TESTE SANDUICHE
TESTE DIRETO
Como manter a qualidade?

É importante salientar que a solução tampão deve se manter em um pH estável

conforme as instruções do fabricante, pois assim os antígenos irão permanecer
solúveis e o seu resultado será confiável.
Além disso, a integridade da amostra também é um fator muito importante. Apesar da
técnica Elisa ser capaz de detectar em fluidos complexos (sangue, sobrenadante,
urina e etc.), existem diversos estudos demonstrando que amostra deve ser bem
conservada ou não será possível detectar nada (BORGES, DEMARGOS &
HATANAKA, 2021).
Outro fator importante nesse experimento é a utilização dos controles e padrões de
amostra de forma correta. Normalmente os kits de ELISA já fornecem padrões que
possuem as concentrações conhecidas