ATIVIDADE DE LABORATRIO

CD -ROM APOIO DIDTICO

Amabis e Martho

Efeito da temperatura sobre a ao da amilase salivar Com alguns materiais simples de laboratrio possvel realizar uma atividade interessante, cujos resultados permitem excelentes discusses sobre a atividade das enzimas e os efeitos do calor sobre sua atuao.         Material necessrio 5 tubos de ensaio pequenos 2 bqueres largos (podem ser copos), um com gelo picado e o outro com gua a cerca de 40 o C termmetro soluo de lugol (ou, alternativamente, soluo alclica de iodo antissptico, que pode ser comprada em uma farmcia) soluo de amido (maisena dissolvida em gua) recipiente para recolher saliva (bquer, copo etc.) pipeta ou conta-gotas etiquetas para identificao

Procedimentos Enquanto alguns estudantes recolhem a saliva para a atividade, outros podem ir executando os seguintes passos: a) colocar aproximadamente 1 ml de soluo de amido em cada tubo de ensaio; b) pingar uma gota de lugol em cada tubo; a soluo deve ficar azulada ou arroxeada, em virtude da reao entre o amido e o iodo presente no lugol; c) escrever as seguintes etiquetas para os tubos de ensaio: 1) Saliva a 0 oC. 2) Saliva a 40 oC. 3) gua a 0 oC. 4) gua a 40 oC. 5) Saliva previamente fervida a 40 oC. Etiquetar cada tubo; d) nos tubos 1 e 2, acrescentar entre 1 e 1,5 ml de saliva; colocar o tubo 1 no bquer com gelo e o tubo 2 no bquer com gua a 40 oC; e) nos tubos 3 e 4, adicionar 1 a 1,5 ml de gua; colocar o tubo 3 no bquer com gelo e o tubo 4 no bquer com gua a 40 oC; f) no tubo 5, acrescentar entre 1 e 1,5 ml de saliva previamente fervida em banho-maria, durante pelo menos 10 minutos. O aquecimento dever ser suficiente para desnaturar a enzima ptialina. Colocar o tubo 5 no bquer com gua a 40 oC; g) aguardar pelo menos 20 minutos antes de observar e anotar os resultados; espera-se que os estudantes observem e anotem o seguinte: Tubo 1) inalterado ou pequena mudana de cor, mantendo-se azul ou roxo; Tubo 2) mudana para lils at perder totalmente a cor; Tubo 3) sem modificao; Tubo 4) sem modificao; Tubo 5) sem modificao. Explique aos estudantes qual a funo da soluo de iodo (indicadora da presena de amido). Certifique-se de que eles entendem que o desaparecimento da cor azul significa o desaparecimento, por digesto, do amido presente no tubo. Os objetivos da atividade so: a) demonstrar que a ptialina digere rapidamente o amido, indicado pelo desaparecimento da cor azul no tubo 2; b) demonstrar que a baixa temperatura inibe a atividade enzimtica, observada no tubo 1; c) demonstrar que a fervura da saliva desnatura a enzima ptialina, tornando-a inativa, observada no tubo 5. Terminada a demonstrao, pea aos estudantes que respondam, por escrito, s seguintes questes: a) o que se pode concluir da observao e comparao dos tubos 1 e 2? b) qual a razo de terem sido includos tubos contendo apenas gua, em vez de saliva? c) o que se pode concluir da observao do tubo 5 e da comparao com os tubos 1 e 2?