FACULDADES INTEGRADAS APARÍCIO

CARVALHO
SOCIEDADE DE PESQUISA, EDUCAÇÃO E CULTURA DR. APARICIO
CARVALHO DE MORAES LTDA

DISCIPLINA: BIOQUÍMICA
TURMA: MEDICINA, 1º ano A, B e C
PROF.ª LEDA FABIÉLEN TEIXEIRA

AULA PRÁTICA 5: Extração e caracterização de lipídeos

LIPÍDIOS:

Introdução:

Lipídeos são ésteres elaborados pelos organismos vivos, que por hidrólise
fornecem ácidos graxos ao lado de outros compostos.

Objetivos:

Compreender as propriedades dos triacilgliceróis e como elas influenciam sua

solubilização
Analisar a composição desses lipídeos através de reações de saponificação e
precipitação.

Materiais:
• Ovo (1 p/ cada grupo); • 1 Tubo de ensaio com
• Filtro de papel; 12 mL de ÉTER
• 1 Placa de Petri; ETÍLICO;
• 1 funil; • 1 Tubo de ensaio com
• 1 Bastão de vidro; 3mL de
• Banho-maria; • Hidróxido de potássio
• Ác. ACÉTICO alcoólico – Tubo B;
concentrado 5 mol/L ; • 1 Tubo de ensaio vazio

Metodologia:

Extração de lipídios:

• Abrir o ovo separando o seu conteúdo em dois béqueres (clara em um,

gema em outro) sem romper a membrana que envolve a gema;
• Retirar 10mL da gema do ovo colocando-a em outro béquer (3); (no caso
da gema, evitar usar pipeta);
• A este recipiente adicionar 8mL de ÉTER ETÍLICO;
• Com o bastão de vidro homogeneizar a solução até a aglutinação do
material;
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• Lavar o béquer 2 (que continha a gema);

• Acomodar o filtro de papel no béquer 2 de modo a permitir a filtragem
do material do béquer 3;
• Passar mais 4mL de ÉTER ETÍLICO pelo filtro;
• Transferir todo o material filtrado para a placa de Petri;
• Colocar a placa, já com o material no banho-maria até a evaporação do
ÉTER ETÍLICO;
• Registrar o ocorrido ao material em cada uma das etapas do processo.

Teste da Solubilidade

Neste teste vamos identificar a presença de lipídios nas amostras. Para isso utilizamos
algumas substâncias como óleo vegetal, éter, água e álcool. Sabendo que os lipídios são
moléculas apolares e conhecendo a lei de dissolução "semelhante dissolve semelhante",
certamente as amostras que contém lipídios formarão soluções de apenas uma fase com
as substâncias apolares; e com as substâncias polares soluções onde observaremos mais
de uma fase.

Reativos: óleo vegetal, álcool etílico (etanol), éter e água.

Procedimento:
Reativos Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3
Água 1 ml
Etanol 1 ml
Éter 1 ml
Óleo vegetal 1 ml 1ml 1ml
- Agitar vigorosamente todos os tubos;
- Deixar em repouso por 1 minuto;
- Observar a solubilidade em cada um dos solventes.

2 – Teste de formação de emulsão

Emulsão é a mistura entre dois líquidos imiscíveis em que um deles (a fase dispersa)
encontra-se na forma de finos glóbulos no seio do outro líquido (a fase contínua),
formando uma mistura estável. Exemplos de emulsões incluem manteiga e margarina,
maionese, café expresso e alguns cosméticos. As emulsões mais conhecidas consistem de
água e óleo.

Reativos: óleo vegetal, solução de Na2CO3 a 2%.

Procedimento:
Reativos Tubo 1 Tubo 2
Óleo vegetal 5 gotas 5 gotas
Água 5 ml -
Na2CO3 - 5 ml
- Agitar e verificar a formação da emulsão;
- Verificar o tempo de duração da emulsão em cada um dos tubos.
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3 - Teste da Saponificação
O teste da saponificação identifica a presença de ácido graxo. Para isso colocamos a
amostra na presença de uma base como solução alcoólica de Hidróxido de Potássio
(KOH) 10%.
O produto final da saponificação é uma molécula anfipática, com uma "cabeça" polar
(COO- K+) e uma cauda apolar formada pelo radical "R". Quando em meio aquoso
moléculas anfipáticas tendem a se agrupar formando estruturas esferóides, as micelas.
Este é o princípio da limpeza de gorduras produzida pelo sabão.

Reativos: Solução alcoólica de KOH a 10% ( 1 volume de KOH a 10% + 1 volume

de etanol 95%), óleo vegetal.
Procedimento:
Reativos Tubo 1
Óleo Vegetal 1 ml
Sol. Alcoólica KOH a 10% 2ml
- Aquecer cautelosamente em banho-maria fervente por 10 minutos e manter em ebulição
até evaporar o líquido;
- Em seguida acrescentar 10ml de água quente e agitar com um bastão de vidro. Manter
em banho-maria fervente por mais 15 minutos.
- Observar a formação de uma solução opalescente de sais de potássio de ácidos graxos
(sabões) e glicerol.

DETERMINAÇÃO DO GRAU DE SATURAÇÃO DOS ÁCIDOS GRAXOS

4 - Teste do Iodo
Este teste identifica a presença de ácido graxo insaturado. Ocorre uma reação de
halogenação, em que o iodo reage com as duplas ligações do ácido graxo insaturado. Se
houver dupla ligação, o iodo será consumido e a coloração característica da solução de
iodo diminuirá de intensidade.

Reativos: Solução de iodo a 1% em clorofórmio (lugol), Clorofórmio, óleo de soja, óleo

de linhaça
Procedimento:
Reativos Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3
Óleo de soja 1 ml - -
Óleo de linhaça - 1 ml -
Clorofórmio 2ml 2 ml 2 ml
Sol. Iodo 1% (lugol) 5 gotas 5 gotas 5 gotas
- Agitar vigorosamente e observar a coloração avermelhada;
- Deixar em repouso na estante;
- Acompanhar a descoloração da solução
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QUESTÕES

1 - Em que consiste o teste da solubilidade dos lipídeos?

2 - Quais os produtos da hidrólise alcalina de um triglicerídeo (reação de
saponificação)?
3 - Após um teste de saponificação, observou-se formação de bolhas. O que se pode
concluir? Explique.
4 - Qual a finalidade do teste de saponificação?
5 - Em que consiste o teste do iodo?
6 - O que caracteriza o teste do iodo como positivo?
7 - Por que o teste do iodo é capaz de identificar ácidos graxos insaturados?
8 - O teste da solubilidade de lipídeos quando realizado com KOH é positivo ou
negativo? Justifique.