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Desnaturao Proteica e Ao Enzimtica

1. Introduo
1.1 Desnaturao Proteica
As protenas so estruturas compostas pela unio de diversas molculas de aminocidos, atravs de
ligaes peptdicas, sendo que possui quatro nveis estruturais primria, secundria, terciria e
quaternria.
Todas as protenas iniciam sua existncia no ribossomo como uma
sequncia linear de resduos de aminocidos. Esse polipeptdeo deve
enovelar-se durante e em seguida sntese, a fim de atingir a sua
conformao nativa. Pequenas alteraes no meio em que se localiza a
protena podem resultar em alteraes estruturais, que poder levar a
uma deficincia no seu funcionamento.
A estrutura proteica adquire sua funo em meio celular especfico.
Condies diferentes daquelas presentes no interior da clula podem resultar em variveis
alteraes na estrutura das protenas. Uma perda da estrutura tridimensional suficiente para causar
perda de funo recebe o nome de desnaturao. O estado desnaturado no necessariamente
corresponde a um desenovelamento completo da estrutura proteica e a uma randomizao de
conformao. Sob a maioria das condies, as protenas desnaturadas se encontram em um conjunto
de estados parcialmente enovelados pouco elucidados.
A maioria das protenas pode ser desnaturada pelo calor, que afeta as interaes fracas em uma
protena (especialmente entre as ligaes de hidrognio) de forma complexa. Quando a temperatura
se eleva lentamente, uma conformao proteica geralmente permanece intacta at que haja uma
perda abrupta de estrutura em uma faixa estrita de temperaturas. Essa alterao repentina indica
que o desenovelamento um processo cooperativo: a perda da estrutura em uma parte da protena
desestabiliza outras partes.
A desnaturao proteica se d no s pelo calor, mas tambm por extremos de pH, por alguns
solventes orgnicos miscveis com a gua (lcool e acetona, por exemplo), por certos solutos como
ureia e cloridrato de guanidnio ou por detergentes. Cada um desses agentes desnaturantes
representa um tratamento relativamente brando no sentido de que nenhuma ligao covalente na
cadeia polipeptdica rompida. Os solventes orgnicos (ureia e detergente) agem principalmente de
modo a promover o rompimento de interaes hidrofbicas que estabilizam as protenas globulares;
os extremos de pH alteram a carga lquida da protena, provocando a repulso eletrosttica e
rompimento de algumas ligaes de hidrognio.
1.2 Ao Enzimtica
O processo de digesto consiste num conjunto de mecanismos pelos quais os componentes dos
alimentos so transformados em substncias assimilveis pelas clulas. Para que isso se faa
possvel, o organismo conta com o auxlio de uma gama de enzimas, molculas polipeptdicas
grandes que facilitam a sntese de outros tipos de molculas biolgicas.
A presena de um alimento na cavidade bucal, bem como sua viso e paladar, leva o sistema nervoso
a estimular as glndulas salivares a secretar a saliva, uma soluo aquosa de consistncia viscosa que
contem a enzima amilase salivar, alm de sais, muco e outras substncias. A amilase salivar
produzida pelas glndulas salivares partidas e atua sobre as grandes molculas dos polissacardeos
amido e glicognio do alimento, quebrando-as em fragmentos menores. A ao dessa enzima
depende de um pH timo, que de aproximadamente 7,0 (neutro), e um temperatura tima, de
37C (entre 35C e 40C, ela ainda atua, abaixo de 35 ela se torna inativa e acima de 40 sofre
desnaturao).

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Embora desempenhe um importante papel na digesto, a amilase salivar a enzima de ao menos
significativa, uma vez que sua exposio ao substrato ocorre de forma muito rpida (tempo de
mastigao, que varia de acordo com os hbitos de cada indivduo), e, ao ser deglutida juntamente
com o bolo alimentar, inativada pelo meio fortemente cido do estmago. Todas as molculas de
polissacardeos que no foram quebradas pela amilase salivar so sintetizadas no intestino, mais
especificamente, no duodeno (uma das trs pores do intestino delgado) por outro tipo de enzima
denominada amilase pancretica. Da a importncia de se mastigar vagarosamente, pois assim, o
contato da amilase salivar com o polissacardeo prolongado e a sua ao e potencializada.
Essa enzima tambm essencial ao combate natural de cries dentrias. Os resduos de alimentos
ricos em carboidratos que permanecem nos dentes aps a mastigao propiciam o crescimento de
bactrias, que produzem cidos capazes de corroer o esmalte dental, causando cries. A amilase
salivar sintetiza os polissacardeos desses resduos, evitando que tais bactrias cresam e se
multipliquem. por isso que indivduos que produzem um maior fluxo de saliva tm menor
tendncia a desenvolver cries dentrias.

2. Materiais / Reagentes

gua destilada;
10 tubos de ensaio e 1 estante para tubos de ensaio;
07 pipetas graduadas com pera;
Beckeres de vidro;
Garra (pina de madeira) para tubos;
Soluo de albumina (10%);
HCl 5M;
NaOH 5M;
Etanol gelado;
Soluo saturada de sulfato de amnio;
Amido 1%;
gua destilada;
Basto de vidro;
Lugol;
Pipeta de Pasteur;
Banho-maria.

3. Procedimento Experimental
3.1 Desnaturao Proteica
A princpio, identificou-se os 5 tubos de ensaio, sendo:
Tubo 1: albumina 10%;
Tubo 2: HCl;
Tubo 3: NaOH;
Tubo 4: etanol gelado;
Tubo 5: sulfato de amnio;
Em seguida, colocou-os na estante para tubos de ensaio;
Com auxlio da pipeta graduada, pipetou-se 2 ml de albumina 10% para colocar nos 5 tubos de
ensaio. Levou-se o tubo de ensaio 1 para o banho-maria por 3 minutos, aps retirou-se com a
pina de madeira e colocou-o na estante do tubo de ensaio;
Em seguida, com auxlio das pipetas graduadas (destinadas para cada soluo) pipetou-se 2 ml de
cada soluo (HCl, NaOH, etanol gelado e sulfato de amnio) colocando-se nos demais tubos de

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ensaio identificados, homogeinizou-se. Aps verificou-se e registrou-se os resultados obtidos
para cada tubo de ensaio.
3.2 Ao Enzimtica
A princpio, identificou-se os 5 tubos de ensaio, sendo:
Tubo 1;
Tubo 2;
Tubo 3;
Tubo 4;
Tubo 5;
Em seguida, colocou-os na estante para tubos de ensaio;
Coletou-se saliva (amilase salivar) no bquer de vidro e com o basto de vidro diluiu-se com gua
destilada;
Colocou-se 20 ml de amido 1% em outro becker de vidro;
Com o auxlio da pipeta graduada, pipetou-se 1 ml de soluo de amilase salivar diluda, colocouse no tubo de ensaio e pipetou-se 1 ml de amido 1%, colocando-se no mesmo tubo de ensaio, em
seguida, com a pipeta de Pasteur colocou-se 2 gotas de lugol e homogeinizou-se. O procedimento
foi realizado nos demais tubos de ensaio.
Aps verificou-se e registrou-se os resultados obtidos para cada tubo de ensaio.
Ao trmino dos procedimentos as solues foram descartadas, os utenslios foram higienizados e
secos.
4. Dados Obtidos
Para o procedimento realizado acima se obteve os seguintes resultados:
Desnaturao Proteica
Tubos
1
2
3
4
5

Solues
Albumina 10%
Albumina + HCl
Albumina + NaOH
Albumina + Etanol gelado
Albumina + sulfato de amnio

Resultados
Houve desnaturao
Houve desnaturao
No houve desnaturao
Houve desnaturao
No houve desnaturao

Ao Enzimtica
Tubos
1
2
3
4
5

Solues
Amilase + Amido + Lugol (1 minuto)
Amilase + Amido + Lugol (2 minutos)
Amilase + Amido + Lugol (3 minutos)
Amilase + Amido + Lugol (4 minutos)
Amilase + Amido + Lugol (5 minutos)

Resultados
Houve ao enzimtica, a digesto
da protena inicia-se na boca
terminando no intestino, processo
foi verificado atravs de uma
degradao de cor.

5. Resultados e Discusso
Nestes procedimentos verificou-se que a desnaturao proteica e ao enzimtica, onde
constatou-se os dados descritos no item anterior.

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6. Concluses
De acordo com os resultados obtidos, conclui-se que a desnaturao proteica se d pelo calor, pelo
pH e solventes orgnicos miscveis com a gua e a ao enzimtica inicia-se na boca terminando no
intestino delgado.
7. Referncias Bibliogrficas
DESNATURACAO PROTEICA Disponvel em: http://www.infoescola.com/bioquimica/desnaturacao/
Acesso em 11 de Maio de 2014
AMILASE SALIVAR Disponvel em: http://www.infoescola.com/bioquimica/ptialina/ Acesso em 11 de
Maio de 2014