UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DA AMAZÔNIA-UFRA

INSTITUTO SOCIOAMBIENTAL E DE RECURSOS HÍDRICOS-ISARH

DISCIPLINA BIOQUÍMICA

ASSUNTO: CARACTERIZAÇÃO DAS PROTEÍNAS E ENZIMAS

1. INTRODUÇÃO:
As proteínas, cujo nome vem do grego protos, que significa “a primeira” ou “a
mais importante”, são as biomoléculas mais abundantes nos seres vivos, estando
presente em todas as partes de uma célula. São polímeros cujas unidades
constituintes são aminoácidos ligados por ligações peptídicas. Possuem estrutura
tridimensional bem definida que está relacionada intimamente com suas propriedades
biológicas e físicas, e que são mantidas por forças estabilizadoras. Denomina-se
desnaturação a modificação na estrutura tridimensional nativa de uma proteína, e se
caracteriza por alterações na estrutura terciária, quaternária e secundária, além da
diminuição da solubilidade e perda da atividade biológica. A solubilidade de uma
proteína em um solvente é o resultado entre o balanço entre as interações que
ocorrem entre as moléculas de proteína (proteína-proteína) e as da proteína e o
solvente (proteína-solvente). A precipitação ocorre quando as interações proteína-
proteína tornam-se mais forte do que as interações proteína-solvente. A solubilidade
proteica é dependente da concentração e natureza dos sais, polaridade do solvente,
pH e temperatura.
As enzimas são proteínas, em sua maioria, que possuem funções catalíticas
nas células acelerando as reações químicas diminuindo sua energia de ativação. As
reações enzimáticas são muito importantes, podendo ser tanto benéficas, quanto
prejudiciais. A enzima catalase é uma enzima que ocorre em plantas, animais e
microrganismos. Nos animais e vegetais, acredita-se que a função dela é proteger os
tecidos contra os efeitos tóxicos do peróxido de hidrogênio (H2O2), que é tóxico para
as células, formado durante o metabolismo celular, principalmente a respiração. Sabe-
se que esta substância é um potente inibidor de muitas enzimas, devendo existir,
portanto um mecanismo enzimático nos tecidos que promova sua destruição. A
catalase utilizam H2O2 como substrato uma vez que aceleram a decomposição dessa
substância em H2O e O2. Outras funções de catalases nas plantas superiores ainda
não estão bem definidas ou determinadas.

2 H2O2 CATALASE 2H2O + O2

O ovo possui uma composição média de 73,67% de água, 12,50% de

proteínas, 12,02% de gorduras e 1,81% de sais minerais. Por conter muita água, ele
espirra na hora de fritar. Na clara há uma mistura de proteínas, sendo a albumina a
principal. A gema é rica em nutrientes e contém várias proteínas diferentes, além de
uma grande quantidade de gordura, o colesterol.
O leite de vaca possui uma composição média de 87,3% de água, 4,6% de
lactose, 3,9% de gordura, 3,3% de proteínas e 0,65% de sais minerais.

2. OBJETIVO GERAL:
Ao final da prática, o aluno deverá ser capaz de:
 Detectar a presença de proteínas no ovo.
 Detectar a presença e observar a atividade de catalase em tubérculos de
batatinha.
 Identificar os agentes que podem desnaturar e alterar a solubilidade da proteína;
 Verificar a desnaturação de uma proteína por solvente orgânico

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Prof . Joanne Souza / Prof. Igor Hamoy – Aula Prática II Bioquímica
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DISCIPLINA BIOQUÍMICA

3. MATERIAL:
 Tubos de ensaio
 Pipetas Pasteur plástica
 Bastão de vidro
 Espátula
 Placas de Petri
 Béqueres
 Solução de ácido acético 10% (CH3COOH)
 Álcool etílico (CH3CH2OH)
 Tubérculo de batatinha.
 Solução de ovolabumina (clara de ovo) 1%
 Leite

4. DESNATURAÇÃO POR AGENTES ÁCIDOS

PROCEDIMENTO:
 No tubo de ensaio nº1 pipete 2 ml de solução de ovoalbumina 1%
 No tubo de ensaio nº2 pipete 2 ml de leite;
 Adicionar 30 gotas da solução de ácido acético 10% em cada tubo.
 Observe e anote os resultados;
 Explique o que ocorreu em cada tubo.

5. DESNATURAÇÃO POR SOLVENTE ORGÂNICO

PROCEDIMENTO:
 Colocar álcool etílico no béquer até metade de seu volume.
 Adicionar um ovo sem a casca e esperar por aproximadamente 20 minutos.
 Anotar suas observações

6. ATIVIDADE DE CATALASE EM TUBÉRCULOS DE BATATINHA

PROCEDIMENTO:
 Corte uma fatia de tubérculo de batatinha e coloque na a placa de Petri nº 1
 Na placa de Petri nº 2 o seu professor já terá colocado uma outra fatia de
tubérculo de batatinha;
 Cubra os dois tubérculos com uma solução diluída (15:1) de peróxido de
hidrogênio.
 Interprete os resultados.
 Faça um desenho esquemático dos seus resultados.

QUESTÕES DA PRÀTICA:
1. O que aconteceu com a batata crua e a fervida por 5 min na presença do peróxido
de hidrogênio?
2. Dê a reação da catalase, indicando o substrato e o produto dessa reação.
3. Explique o que ocorreu com a ovoalbumina na presença do ácido acético e na
presença do álcool.

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Prof . Joanne Souza / Prof. Igor Hamoy – Aula Prática II Bioquímica