UNIVAG – CENTRO UNIVERSITÁRIO

Curso PROTOCOLO
Biomedicina DE AULA PRÁTICA
Disciplina Bromatologia
Título do Experimento Análise de substâncias estranhas no leite e mel e análise de metanol em bebidas
destiladas

Aula Prática N°.

Síntese do experimento: ALIMENTOS ADULTERADOS: São aqueles que tem sido

privado, parcial ou totalmente, de seus elementos úteis ou característicos, porque foram
ou não substituídos por outros inertes ou estranhos. Também a adição de qualquer
natureza, que tenha por objetivo dissimular ou ocultar alterações, deficiências de
qualidade da matéria-prima ou defeitos na elaboração, que venham a constituir
adulteração do alimento. A adulteração pode ser por acréscimo de substâncias
estranhas ao alimento (por exemplo água no leite ou vísceras em conservas de carnes,
amido no doce de leite, melado no mel), por retirada de princípios ativos ou partes do
alimento (retirada da nata do leite ou cafeína do café) ou por ambas as
simultaneamente.
Objetivos da Prática: Verificar elementos adulterantes (conservantes, espessantes e
reconstituíntes da densidade) no leite, como formol, amido e urina e no mel, como glicose. E
metanol em bebidas destiladas.

INSUMOS QUANTIDADE (por grupo)

Leite de 3 marcas diferentes 100 mL
Mel de 3 marcas diferentes 20 mL
Bebida alcoólica (destilados) de 3 marcas diferentes
(cachaça, tem que ser sem corante) de preferência com teor
alcoólico de 5,5% V/V
floroglucina 1% 1 mL
Solução de guaiacol a 1% 2mL
NaOH 10 % 2 mL
Ácido clorídrico 5mL
Ácido nítrico 5mL
Ácido sulfúrico concentrado
Alcool etílico 5mL
Lugol 3 mL
Agua destilada 100mL
solução estoque de metanol 5% (v/v)
solução de permanganato de potássio 3% (m/v) em ácido
fosfórico 15% (m/v)

Área Ciências da Saúde

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PROTOCOLO
solução aquosa de bissulfito de sódio 2% (m/v) DE AULA PRÁTICA
solução aquosa de ácido cromotrópico 5% (m/v)
EQUIPAMENTOS QUANTIDADE
pHmetro/papel indicador de pH 1 unidade
espectrofotômetro com cubeta de vidro, leitura a 575nm 1 unidade
UTENSÍLIOS QUANTIDADE (por grupo)
Béquer 1 unidade
Conta-gotas 4 unidades
Bico de Bunsen 1 unidade
Tripé 1 unidade
Tela de amianto 1 unidade
Tubos de ensaio 5 unidades de 5ml (ou 10 ml)

Área Ciências da Saúde

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Descrição dos procedimentos: PROTOCOLO DE AULA PRÁTICA

Leite
A. Para detecção de conservantes (formol):
colocar no béquer 10 ml de leite;
adicionar 1 ml de solução de floroglucina
adicionar 2 ml de NaOH 10%
misturar bem e observar a coloração: salmão: formol/ esverdeado: ausência de formol.
Para detecção de conservantes (água oxigenada)
colocar no béquer 10 ml de leite
adicionar 2 ml de solução de guaiacol a 1%
misturar bem e observar a coloração. Salmão: água oxigenada.
Para detecção de espessante (amido)
colocar no béquer 10 ml de leite
levar ao fogo até ferver e esperar esfriar
adicionar 2 gotas de solução de iodo (lugol)
misturar bem e observar a coloração: azul= amido
Para detecção de recuperadores de densidade (urina)
colocar no béquer 5 ml de leite
adicionar 5 ml de ácido clorídrico
adicionar 5 ml de álcool etílico
adicionar 5 ml de ácido nítrico
misturar bem e observar a coloração. Rósea-violácea - urina.

Mel
Pesquisa de pH:
colocar 10 ml da amostra num béquer
medir o pH do mel, que deve estar em torno de 3,9 se for mel de abelhas.

Pesquisa de adulteração com glicose comercial:

colocar 10 ml da amostra no béquer
adicionar 10 ml de água destilada
adicionar 1 ml de lugol
observar a cor: se ficar vermelho a violeta, tem adição de glicose comercial

Para detecção de metanol em bebidas destiladas

Oxidação do metanol a formaldeído: Em um tubo de ensaio colocar 250μL da solução de
permanganato de potássio e 125 μL da solução padrão de metanol/amostra.
Colocar em em um banho de gelo por 20 min. Após este período, eliminar o excesso de
permanganato de potássio mediante a adição da solução de bissulfito de sódio (3-4 gotas).
Procedimento analítico
Reação cromogênica (derivatização do formaldeído): No mesmo tubo de ensaio após a adição
Área Ciências da Saúde
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PROTOCOLO
do bissulfito de sódio, adicionar 250 μL da solução deDE
ácidoAULA PRÁTICA
cromotrópico e 1,9 mL de ácido
sulfúrico concentrado.
Colocar em banho-maria (60 °C-75 °C) por 15 min. Resfriar até temperatura ambiente e o
volume da mesma elevar a 10 mL em balão volumétrico usando água deionizada. Preparar uma
prova em branco seguindo todo o procedimento, mas usando água deionizada no lugar da
solução padrão de metanol/amostra.
Ler no espectrofotômetro a 575nm

Descrição das medidas de biossegurança adotadas:

Jaleco de algodão, luvas, touca, sapato fechado, calça

Observações e anexos:
Por favor providenciar a compra de reagentes novos pois essa prática não deu certo nas duas
últimas vezes que foi aplicada devido aos reagentes estarem vencidos e/ou estragados. A falta
dos reagentes novos impossibilitará a realização da aula prática.

Referências Bibliográficas:
CECCHI, H. M. Fundamentos teóricos e práticos em análise de alimentos, 2ª Ed. Rev.,
Campinas, Editora da UNICAMP. 2003.

INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas Analíticas do Instituto Adolfo Lutz: Métodos Químicos
e Físicos para Análise de Alimentos, São Paulo, 2005.

Elaborado em: agosto 2023

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