Aula Imunologia 130719 Manhã

Curso de Pós-Graduação em Hematologia e
Hemoterapia Laboratorial (HHL15)
Disciplina: Imuno-Hematologia
Docente: Rita Terezinha de Oliveira Carneiro

Email: biologa.rita.terezinha@gmail.com
Salvador – Bahia
12 e 13/julho/2019.
Componente: Hematologia
1ª parte
1ª parte
HISTÓRIA DA HEMOTERAPIA
Docente: Rita Terezinha de O. Carneiro
Hematologia – Linha do tempo

Jesus Swammerdam
Figuras pré- “na verdade vos digo (1678)
históricas de (...) não beberdes o Descreve glóbulo
animais sangue não terás vida” vermelho
sangrando (Jo 6:53)
Utilização em Hewsen (1777)

“tratamentos” Harvey (1628) Descreve fatores
empíricos pelas Descreve de coagulação e
civilizações circulação leucócitos
clássicas sanguínea
Virchow
(1938/1939)
460-475 a.C Denis e Lower
Toda célula se
Hipócrites (1667)
origina de outra
uso de sanguias 1ª transfusão
Blundell (1834) Schultze (1965)

Morte por Vierodt (1852)
Identifica presença
hemorragia pode Quantiica glóbulos
de plaquetas no
ser evitada vermelhos
sangue
Lane (1840) Denis (1856) Lister (1867)

Tratamento da Observação de Uso de anti-
hemofilia com coagulação séptico na
transfusão extracorporea tranfusão
Neumann (1868)
McIntryre e Jones Seyler (1862)
Relacionou
(1845) Descreveu a
glóbulos
Descrevem o estrutura da
vermelhos na
mieloma hemoglobina
medula óssea
Ehrlich (1877) ? (1914)

Melhora técnica de Propriedade ? (1972)
observação de anticoagulante do Áferese
células citrato de sódio
Landsteiner
(1901) Anos 90
Caracteriza Wierner (1939)
Projeto Genoma
grupos Descobre fator Rh
Humano
sanguíneos
Hektoen (1907)
Coombs, Mourant
Tranfusão
e Race (1945) uso
melhorada pela ....
de anti-Ig na busca
reação cruzada
por antigenos
D/R
SISTEMA SANGUÍNEO
Rins*
SANGUE
Maior tecido do corpo humano, e o mais funcionalmente
diversificado;
• Plasma constituído por
componentes orgânicos e
inorgânicos + soro;
• Água (90%) + proteínas (9%) +

sais inorgânicos, inorgânicos,
gases (1%);
• Células das séries branca e

vermelha
SANGUE
SANGUE - HEMATOPOIESE
SANGUE - HEMATOPOIESE
Dúvidas...
1ª parte
FUNDAMENTOS BIOQUÍMICOS DA
IMUNOHEMATOLOGIA E AS BASES
MOLECULARES E FUNÇÃO DOS SISTEMAS
DE GRUPOS SANGUÍNEO
IMUNOHEMATOLOGIA – Fundamentos e bases moleculares
Mecanismos:
• Diferenciação celular
(produção);
• Reconhecimento
celular (maturação).

Mecanismos de
reconhecimento e
sinalização celular
Liberação de sinais
químicos (mediadores)
atuam em células-alvo
desencadeando
processos específicos
Rotas anabólicas de
compostos químicos
Controle e regulação em sua

produção e atuação
(homeostasia)


PAMPS: receptores de reconhecimento ao patógeno
DAMPS: receptores de reconhecimento ao dano
Sinais atravessam barreiras físicas que separam

diferentes compartimentos
Ativam células e/ou produzem “segundo mensageiro”

que migram até o local lesionado (quimiotaxia)
IIMUNOHEMATOLOGIA – Fundamentos e bases moleculares




IMUNOHEMATOLOGIA – GRUPOS SANGUÍNEOS

Proteínas presentes na superfície dos eritrócitos e que atuma no
reconhecimento de outras células;
A determinação dos grupos sanguíneos atende aos padrões de

herança genética (co-dominância, dominância e recessividade);
Mecanismo de defesa,
o organismo produz
anticorpos contra o
grupo sanguíneo
“desconhecido” e os
libera no plasma

Efeito Bombaim (Mombaim, Índia)
Frequência observada é 1:250.000 pessoas, exceto em partes da

Índia, onde a frequência observada é elevada 1:7600;
Ausência do antígeno H (hidrato de carbono, fucose) nas hemácias,

justificando sua caracterização como “falso O”;
Endogamia de castas
indianas possibilitou o
surgimento do genótipo hh,
que fenoticamente expressa
enzima transferase fucosil
defeituosa
Portadores do falso O
podem doar para todos os
grupos (compatibilidade
com fator Rh) e só receber
de outro falso O
O antígeno H está presente

em hemácias tipo O, mas
não sofre modificação pelas
enzimas de reconhecimento
celular

Dúvidas...
1ª parte
IMPORTÂNCIA CLÍNICA E TESTES PARA

DETERMINAÇÃO DOS SISTEMAS DE GRUPOS
SANGUÍNEOS
Compatibilidade sanguínea
Capacidade de não reação de um organismo frente as células e
componentes advindos de outros;
Se transfusões sanguíneas fogem

desse escopo, RESPOSTA
IMUNOLÓGICA é desencadeada
(In)Compatibilidade sanguínea – Eritoblastose fetal
Dessensibilização materna com vacina anti-Rh


CASO CLÍNICO: Maria tinha 31 anos quando engravidou pela terceira vez. Seu grupo sanguíneo era
A, Rh-negativo. O marido era A, Rh-positivo. Seu primeiro filho era um menino saudável. Durante a 2ª
gestação, seu Coombs indireto foi positivo para um título de 1:16. O feto foi acompanhado e, após 36
semanas de gestação, o parto foi induzido. Na 3ª gestação, o exame de Coombs indireto foi positivo
para um título de 1:8 na 14ª semana e de 1:16 na 18ª semana de gestação. O líquido amniótico foi
coletado de 2 em 2 semanas e mostrou uma quantidade elevada de bilirrubina (principalmente da
bilirrubina indireta), mostrando que as hemácias fetais haviam sido lisadas. Na 29ª semana de
gestação, uma amostra de sangue foi obtida através da veia umbilical mostrando um hematócrito de
6,2% (normal: 45%). Como o feto estava muito anêmico, foram transfundidos 85 mL de papa de
hemácias O, Rh-negativo pela veia umbilical. O feto foi examinado semanalmente para verificar o
aparecimento de hidropisia fetal, o que não foi observado. Na 34 semana de gestação, o hematócrito
da amostra de sangue retirada da veia umbilical era de 21% e 80 mL de papa de hemácias foram
transfundidos. Na 35ª semana de gestação, verificou-se que o feto estava suficientemente maduro e
o parto foi induzido. Nasceu uma menina saudável e o hematócrito foi de 29%. Não foi necessário
tomar medidas terapêuticas adicionais.
Disponível em: http://www.lip.nupeb.ufop.br/pdf/casoclinicoeritroblastose.pdf, Acesso em 10/07/2019 as 21:48h

PROVAS SURPRESA
1 - Qual antígeno presente nas hemácias fetais provocou a anemia observada no feto? Que outros antígenos
eritrocitários podem levar ao mesmo problema?
2 - Por que é importante fazer o Coombs indireto da gestante no caso acima?
3 - Por que a eritroblastose fetal decorrente de incompatibilidade no sistema ABO pode ocorrer na 1 a
gestação, enquanto no sistema Rh ocorre freqüentemente a partir da 2 a gestação de feto com grupo
sanguíneo incompatível?
4 - Quando uma mulher Rh negativo é compatível no sistema ABO com seu marido Rh positivo, o risco de
alo-imunização por Rh é de 16%. Quando eles são ABO incompatíveis, o risco cai para 7%. Como você
explica essa diferença?
5 - Por que são usadas hemácias O Rh negativo para a transfusão intra-uterina?
6 - Sabendo que a vacina usada para previnir a eritroblastose fetal é constituída de plasma humano com alto
título de IgG anti-D, existe algum problema para o feto dessa vacina ser administrada com 28 semanas de
gestação?
7- Que medidas são tomadas quando o recém-nascido apresenta icterícia grave logo após o nascimento?
8- A que se devem os níveis elevados de bilirrubina total encontrados freqüentemente em recémnascidos?
Tipagem sanguínea
Identifica as proteínas de superfície
das hemácias
Tipagem sanguínea – Prova direta (ou globular - Vincent)

Tipagem sanguínea – Prova reversa (ou sérica – Simoni)

Interpretação do teste de aglutinação de hemácias
FONTE: Imuno-Hematologia Laboratorial, Ministério da Saúde, 2014

Tipagem sanguínea
Tipagem sanguínea
Teste de Coombs ou Teste da anti-globolina (TAG)
Pesquisa de hemácias sensibilizadas e/ou frações do sistema

complemento

Pesquisa de anticorpos anti-hemácias



Hemograma completo
Dúvidas...
1ª parte
DETECÇÃO E INTERPRETAÇÃO DAS

PROTEÍNAS PLASMÁTICAS
Proteínas séricas
Conjunto de distintas proteínas produzidas no fígado e que circulam

no plasma sanguíneo;
Exercem importantes papéis bioquímicos, justificando seu uso na

investigação de doenças;
Grande interesse para análise laboratorial por meio da dosagem

proteica nos líquidos corporais;
Proteínas de fase aguda: cuja concentração é aumentada em 25%

ou mais, durante uma semana após o dano tecidual ter ocorrido
Proteínas séricas
Proteínas séricas
Proteínas séricas – Análise laboratorial
Eletroforese de proteínas séricas (EPS): movimentação das

proteínas plasmáticas em campo elétrico, formando picos que
permitem a identificação e a quantificação das mesmas;
Velocidade de hemosedimentação (VHS): velocidade com que os

eritrócitos se separam do plasma, e passam a se agregar umas às
outras e determinando a sedimentação no intervalo de 60 a 120
minutos;
PCR reativa: radioimunoensaio, imunodifusão radial, enzima-

imunoensaio e por nefelometria;
Espectofotometria: detecta proteínas totais nos líquidos corpóreos

por medição do índice de refração dos sólidos totais antes e depois da
remoção de proteínas;
Teste de Biureto: produto de decomposição da uréia pelo calor;

Reação do biureto na presença de íons cúprico e em solução alcalina
torna solução arroxeada;
Intensidade da coloração é proporcional ao número de ligação
peptídica encontrada;
Medidas de citoquinas: análise de proteínas mediadoras de resposta

inflamatória.

Albumina: constituinte predominante e

que participa de diversos processos de
transporte de biomoléculas conjugadas;
Proteínas séricas – Análise laboratorial - FRAÇÕES
Alfa globulinas 1 e 2: processos

inflamatórios, infecciosos e imune;
Beta globulinas: anemias, icterícia

obstrutiva, hipotireoidismo, Diabetes
mellitus e aterosclerose;
Gamaglobulinas: reações de defesa

imunológicas ou frente à presença de
alérgenos.
Alfa globulinas (frações 1 e 2)

Alfa 1-Antitripsina (AAT) Inibe protease controlando processo
inflamatório nos sítios de inflamação
Alfa 1-Glicoproteína ácida (AAG) Inibe progesterona e interagem com
fármacos
Alfa 1-Fetoproteínas (AFP) Marcador de heptocarcinoma
Haptoglobina (HAP) Transporta hemoglobina livre para
retículo endotelial
Alfa 2-Macroglobulina (AMG)
Inibe protease
Ceruloplasmina (CER)
Transporte de cobre no plasma
Beta globulinas (frações 1 e 2)

Transferrina/Siderofilina (TRF)
Transportadora de ferro
Hemopexina (HX, HPX) Transportadora de radical heme

metabolizado
Subtrato da trompina e participa do
Fibrogênio (TRF)
processo de coagulação sanguínea
Proteína C reativa (PCR) Ativador do sistema complemento
durante processo inflamatórios
Proteínas séricas – Análise laboratorial e correlação clínica

Efisema panlobar/evolução de cirrose

Infecção e inflamação grave/hemólise



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Curso de Pós-Graduação em Hematologia e

Hemoterapia Laboratorial (HHL15)

Docente: Rita Terezinha de Oliveira Carneiro

Hematologia – Linha do tempo

Utilização em Hewsen (1777)

Hematologia – Linha do tempo

Blundell (1834) Schultze (1965)

Lane (1840) Denis (1856) Lister (1867)

Hematologia – Linha do tempo

Ehrlich (1877) ? (1914)

• Água (90%) + proteínas (9%) +

• Células das séries branca e

IMUNOHEMATOLOGIA – Fundamentos e bases moleculares

IMUNOHEMATOLOGIA – Fundamentos e bases moleculares

IMUNOHEMATOLOGIA – Fundamentos e bases moleculares

IMUNOHEMATOLOGIA – Fundamentos e bases moleculares

Controle e regulação em sua

IMUNOHEMATOLOGIA – Fundamentos e bases moleculares

IMUNOHEMATOLOGIA – Fundamentos e bases moleculares

DAMPS: receptores de reconhecimento ao dano

Sinais atravessam barreiras físicas que separam

Ativam células e/ou produzem “segundo mensageiro”

IIMUNOHEMATOLOGIA – Fundamentos e bases moleculares

DAMPS: receptores de reconhecimento ao dano

IMUNOHEMATOLOGIA – Fundamentos e bases moleculares

DAMPS: receptores de reconhecimento ao dano

IMUNOHEMATOLOGIA – GRUPOS SANGUÍNEOS

A determinação dos grupos sanguíneos atende aos padrões de

IMUNOHEMATOLOGIA – GRUPOS SANGUÍNEOS

Frequência observada é 1:250.000 pessoas, exceto em partes da

Ausência do antígeno H (hidrato de carbono, fucose) nas hemácias,

IMUNOHEMATOLOGIA – GRUPOS SANGUÍNEOS

O antígeno H está presente

IMUNOHEMATOLOGIA – GRUPOS SANGUÍNEOS

IMPORTÂNCIA CLÍNICA E TESTES PARA

Se transfusões sanguíneas fogem

(In)Compatibilidade sanguínea – Eritoblastose fetal

Dessensibilização materna com vacina anti-Rh

(In)Compatibilidade sanguínea – Eritoblastose fetal

Disponível em: http://www.lip.nupeb.ufop.br/pdf/casoclinicoeritroblastose.pdf, Acesso em 10/07/2019 as 21:48h

(In)Compatibilidade sanguínea – Eritoblastose fetal

Tipagem sanguínea – Prova direta (ou globular - Vincent)

Tipagem sanguínea – Prova reversa (ou sérica – Simoni)

Interpretação do teste de aglutinação de hemácias

FONTE: Imuno-Hematologia Laboratorial, Ministério da Saúde, 2014

Teste de Coombs ou Teste da anti-globolina (TAG)

Pesquisa de hemácias sensibilizadas e/ou frações do sistema

Teste de Coombs ou Teste da anti-globolina (TAG)

Teste de Coombs ou Teste da anti-globolina (TAG)

Pesquisa de anticorpos anti-hemácias

Teste de Coombs ou Teste da anti-globolina (TAG)

Teste de Coombs ou Teste da anti-globolina (TAG)

DETECÇÃO E INTERPRETAÇÃO DAS

Conjunto de distintas proteínas produzidas no fígado e que circulam

Exercem importantes papéis bioquímicos, justificando seu uso na

Grande interesse para análise laboratorial por meio da dosagem

Proteínas de fase aguda: cuja concentração é aumentada em 25%

Proteínas séricas – Análise laboratorial

Eletroforese de proteínas séricas (EPS): movimentação das

Velocidade de hemosedimentação (VHS): velocidade com que os

PCR reativa: radioimunoensaio, imunodifusão radial, enzima-

Proteínas séricas – Análise laboratorial