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Int. J. Exp. Caminho. (2008), 89, 358-366 doi:

10.1111 / j.1365-2613.2008.00601.x

ARTIGO ORIGINAL

O efeito adverso do esteróide anabólico-androgênico mesterolona na

remodelação cardíaca e no perfil de lipoproteínas é atenuado pelo
treinamento físico aeróbico
Karina Fontana *, , Helena Coutinho Franco Oliveira, Marta Beatriz Leonardo, Carlos Alberto
Mandarim-de-Lacerda§ e Maria Alice da Cruz-Höfling
*Departamento de Farmacologia, Faculdade de Ciências Médicas, Departamento de Histologia e Embriologia, Departamento de Fisiologia e
Biofísica, Instituto de Biologia, Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP), Campinas, SP, Brasil e §Laboratório de Morfometria e
Morfologia Cardiovascular, Centro Biomédico, Instituto de Biologia, Universidade do Estado do Rio de Janeiro, Rio de
Janeiro, RJ, Brasil

INTERNACIONAL Resumo
DIÁRIO DE O abuso de esteróides anabólicos androgênicos (AAS) para melhorar o desempenho físico
EXPERIMENTAL está associado a efeitos adversos graves, às vezes fatais. O objetivo do presente trabalho foi
PATOLOGIA investigar os efeitos do AAS na estrutura cardíaca e no perfil lipoprotéico plasmático isolado e
em combinação com o exercício. Camundongos transgênicos com um fenótipo lipêmico
humano (expressando proteína de transferência de éster de colesterol no fundo de nocaute
do receptor de LDL) foram usados neste estudo. Camundongos sedentários e exercitados
(corrida em esteira, cinco vezes por semana durante 6 semanas) foram tratados com
mesterolone (2eug ⁄ g de peso corporal) ou veículo (controle-C) nas últimas 3 semanas.
Quatro grupos foram comparados: (i) exercício + mesterolona (Ex-M), (ii) exercício + veículo
(Ex-C), (iii) sedentário + mesterolona (Sed-M) e (iv) sedentário + veículo (Sed- C). A pressão
arterial e a massa corporal aumentaram em todos os grupos ao longo do tempo, mas Sed-M
atingiu os maiores valores e Ex-C os menores. O tratamento com mesterolone aumentou os
níveis plasmáticos de colesterol total, triglicerídeos, lipoproteína de baixa densidade (LDL-c) e
Recebido para publicação: 3
de março de 2008 muito LDL-c (VLDL-c). No entanto, o exercício atenuou alguns desses efeitos deletérios,
Aceito para publicação: 15 de aumentando o colesterol da lipoproteína de alta densidade e diminuindo o LDL-c, VLDL-c e os
junho de 2008
triglicerídeos. O treinamento físico induziu efeitos benéficos, como hipertrofia fisiológica dos
Correspondência: cardiomiócitos, aumento da circulação miocárdica e diminuição do interstício cardíaco.
Maria Alice da Cruz-Höfling
Contudo, A mesterolona prejudicou esses ganhos fisiológicos e, além disso, aumentou os
Departamento de Histologia e
Embriologia níveis plasmáticos de troponina T em camundongos sedentários e exercitados. Assim,
Instituto de Biologia enquanto a mesterolona induziu o perfil lipoprotéico pró-aterogênico e hipertrofia cardíaca
Universidade Estadual de Campinas patogênica, o exercício neutralizou esses efeitos e modificou favoravelmente tanto o perfil
(UNICAMP)
lipoprotéico quanto a remodelação cardíaca induzida pela mesterolona.
CEP 13 083-970 Campinas, SP
Brasil
Palavras-chave
Tel .: +55 19 3521 6224 Fax:
+55 19 3521 6247 E-mail: interstício cardíaco, cardiomiócitos, perfil lipídico, mesterolone, modelo transgênico
hofling@unicamp.br murino, hipertrofia ventricular

2008 Os Autores
358 Compilação de jornal 2008 Blackwell Publishing Ltd

Os esteróides anabólicos androgênicos (AASs) são derivados
sintéticos do hormônio masculino testosterona. O uso terapêutico
dos AASs é indicado na disfunção endócrina dos testículos, perda
de massa muscular relacionada à idade e ao HIV (Vermeulen
2001). A partir de ensaios clínicos, parece provável que a
prescrição apropriada de AASs pode ter efeitos anabólicos
positivos na caquexia associada ao HIV, câncer, queimaduras,
insuficiência renal e hepática e anemia associada a leucemia ou
insuficiência renal, que superam a ameaça de efeitos colaterais
(para revisão , veja Basariaet al. 2001).
O uso não terapêutico de AASs é uma prática comum entre
os atletas para melhorar o desempenho físico, dada sua
capacidade putativa de aumentar a massa e força muscular
(Hartgens & Kuipers 2004). Geralmente administrado em doses
suprafisiológicas, o abuso de AASs por atletas saudáveis tem
sido relacionado com a incidência de doença cardiovascular
(DCV), como desenvolvimento de hipertensão, cardiomiopatia,
fibrilação atrial, acidente cerebrovascular, infarto do miocárdio,
distúrbios no sistema hemostático, trombose ventricular e
embolia sistêmica e insuficiência cardíaca aguda (Dickermanet
al. 1996; Sullivanet al. 1998). Além disso, foi demonstrado que a
testosterona pode afetar negativamente a recuperação do
infarto do miocárdio pós-isquêmico, ativando a produção de
citocinas pró-inflamatórias (Wanget al. 2005).
Estudos também mostraram que o uso de AASs induz o
perfil de lipoproteína aterogênica com uma diminuição no
colesterol de lipoproteína de alta densidade (HDL-c) e
apolipoproteína Al e um aumento nos níveis plasmáticos de
colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL-c) (Glazer
1991) . Por outro lado, o treinamento físico tem sido associado
a um risco reduzido de DCV, possivelmente porque leva a uma
melhora do perfil lipoprotéico (LaRosa 1992).
Por outro lado, a evidência experimental e clínica sugere a deficiência
de andrógeno como um fator de risco potencial para DCV (para revisão,
ver Winkler 1996). Portanto, a deficiência de testosterona em
camundongos resultou em níveis plasmáticos aumentados de
lipoproteínas contendo apolipoproteína B [muito LDL (VLDL) e LDL] e
diminuição de HDL-c, mas camundongos transgênicos que expressam a
proteína de transferência de éster de colesterol (CETP) tiveram tais
efeitos significativamente atenuados (Casqueroet al. 2006). Este modelo
de camundongos transgênicos é interessante porque seu perfil de
lipoproteínas é mais próximo ao dos humanos do que o do
camundongo selvagem. Ao contrário dos humanos, os camundongos do
tipo selvagem apresentam níveis muito baixos de LDL e altos níveis de
HDL. Essas diferenças são atribuídas à falta de expressão da CETP, que
aumenta o HDL-c, e ao alto número de receptores de LDL, que reduzem
o LDL-c plasmático nos camundongos selvagens. Assim, ao introduzir a
expressão do gene CETP e reduzir a expressão do gene do receptor de
LDL (LDLr), o lipae-
2008 Os Autores
Compilação de jornal 2008 Blackwell Publishing Ltd, International Journal of Experimental Pathology, 89, 358-366
Esteróides, exercícios e remodelação cardíaca 359
o fenótipo mic desses camundongos transgênicos se assemelha ao
dos humanos (Cazita et al. 2003; Casqueroet al. 2006).
No presente estudo, os efeitos do mesterolone (17-beta-
hidroxi-1-alfa-metil-5-alfa-androstan-3-ona, C20H32O2), um
esteróide sintético com atividades anabólicas e androgênicas,
foram avaliados quanto à sua potência em induzir a remodelação
da estrutura cardíaca e alterar o perfil de lipoproteínas neste
modelo transgênico murino. Além disso, verificamos se o
treinamento físico modula tais efeitos.
materiais e métodos
Protocolos de animais
O protocolo experimental foi aprovado pelo Comitê de
Ética em Experimentação Animal da universidade
(CEEA ⁄ UNICAMP) de acordo com o Guia para o Cuidado e Uso de
Animais de Laboratório publicado pelos Institutos Nacionais de
Saúde dos Estados Unidos (publicação NIH nº 85-23, revisada em
1996). Os camundongos transgênicos utilizados neste estudo
foram cruzados e mantidos no Departamento de Fisiologia e
Biofísica (Instituto de Biologia da UNICAMP) por 10 anos.
Camundongos heterozigotos para o transgene CETP humano e
para o alelo nulo do receptor de LDL (CETP+ ⁄)LDLr) ⁄ +) foram
descritos em outro lugar (Cazita et al. 2003; Casqueroet al.
2006). A atividade CETP plasmática, expressa como% éster
de colesterol transferido de LDL para HDL, neste modelo é
36,6 ± 1,6 (n = 24) enquanto os camundongos do tipo selvagem são
completamente deficientes de CETP circulante. Os camundongos
foram alojados em uma sala com temperatura controlada (22 ± 1
C), umidade de 55-65%, 12 h de luz⁄ ciclo escuro e livre acesso à
água e ração padrão (Nuvilab, Colombo, PR, Brasil).
protocolo experimental
Vinte e quatro camundongos machos adultos com 2 meses de
idade foram divididos em quatro grupos de seis animais: os grupos
controle, sedentários (Sed-C) e exercitados (Ex-C), receberam goma
arábica [2 eug ⁄ g massa corporal (MC) via orogástrica] nas últimas 3
semanas de treinamento ou período sedentário e os grupos
experimentais, sedentário (Sed-M) e exercitado (Ex-M), receberam o
AAS mesterolone (Proviron; Schering, São Paulo, SP, Brasil; 2 eug ⁄ g
BM via orogástrica) durante as últimas 3 semanas de treinamento
ou período sedentário. A goma arábica foi usada como veículo
devido aos seus efeitos não tóxicos e pró-absorção no intestino
delgado (Codipillyet al. 2006). Camundongos exercitados foram
autorizados a se adaptar à corrida em esteira por 1 semana antes
do uso do protocolo experimental. Consistia em exercícios de nível
baixo a moderado de corrida em esteira realizados diariamente por
5 dias (15 m⁄ min por 20 min ⁄ dia). Depois de
360 K. Fontana et al.
adaptação, camundongos exercitados foram submetidos a 6 semanas
de treinamento físico intensivo (corrida em esteira), 5 dias por semana,
conforme programado na Tabela 1 (adaptado de Smolka et al.
2000). A pressão arterial (PA) e a MC foram monitoradas
semanalmente antes de qualquer procedimento experimental.
Todos os animais foram habituados ao aparelho de medida da PA
por 7 dias antes do início do período experimental. A pressão
arterial foi medida semanalmente por meio de pletismografia
computadorizada com algema de cauda (RTBP 1000; Kent Scientific
Co., Litchfield, CT, EUA) em camundongos conscientes.
No final do período experimental, camundongos em jejum
durante a noite foram profundamente anestesiados com uma
mistura 1: 1 de cloreto de cetamina (Dopalen, 100 mg ⁄ kg de
animal) e cloreto de xilazina (Anasedan, 10 mg ⁄ kg; 2eueu ⁄ mg BM,
ip; ambos os anestésicos de Vetbrands, Jacareí, SP, Brasil).
Amostras de sangue foram retiradas do átrio direito do coração
para análises de lipídios plasmáticos. Os corações foram retirados e
os átrios separados dos ventrículos e o ventrículo esquerdo com o
septo interventricular (VE) foi pesado e, a seguir, cortado em duas
metades, posicionado com a face seccionada para baixo e, a seguir,
seccionado perpendicularmente à face ventral de forma aleatória.
Os fragmentos de LV fixados com 4% recém-preparados (w⁄ v)
formaldeído em tampão fosfato 0,1 M, pH 7,2 por 48 h, foram
então rotineiramente processados até incorporação em Histosec
(Merck, Rio de Janeiro, RJ, Brasil). Seções (3eum de espessura)
corados com hematoxilina-eosina e tricrômico de Masson foram
usados para estereologia. A massa do VE⁄ A relação BM foi usada
como um índice de hipertrofia cardíaca.
Análise de lipídio plasmático e troponina T
Os níveis de colesterol total (CT), triglicerídeos (TG) e HDL no
plasma foram determinados por ensaios enzimáticos em kits
disponíveis no mercado (Roche, São Paulo, SP, Brasil) de acordo
com as instruções do protocolo do fabricante. Colesterol de
lipoproteína de densidade muito baixa foi estimado como TG⁄ 5
e LDL-c pela fórmula de Friedewald (Friedewald
et al. 1972). A troponina T (TnT) foi determinada por
imunoensaio enzimático de uma etapa com base no ensaio
ECLIA de terceira geração em um analisador Elecsys 2010
(Roche Diagnostics, Basel, Suíça).
Estereologia
Foi utilizado um sistema de vídeo microscópico composto por um
microscópio Leica DMRBE, videocâmera Kappa (Gleichen,
Alemanha) e monitor Sony Trinitron (Pencoed, Reino Unido). Para a
estereologia, o miocárdio do VE consistindo de cardiomiócitos
(cmy) mais interstício cardíaco (int, este último consistindo de
tecido conjuntivo e vasos intramiocárdicos, ve) foi analisado
Compilação de jornal 2008 Blackwell Publishing Ltd, International Journal of Experimental Pathology, 89, 358-366
sed. Dez seções histológicas aleatórias foram observadas a partir dos
vários fragmentos de LV de cada animal (n = 5 ratos ⁄ grupo) e 10
campos microscópicos aleatórios por animal foram analisados às cegas
com uma objetiva planacromática 40· (Leica, Wetzlar, Alemanha)
movendo a platina do microscópio. A análise estereológica utilizou um
sistema de teste com 36 pontos de teste e uma área conhecida. As
densidades de volume das estruturas eram esti-
acasalado como: Vv [estrutura] = Pp [estrutura] ⁄ PT, Onde Pp é o
número de pontos que atingiram a estrutura e PT é o número
total de pontos de teste (36 no presente estudo) contidos em
a moldura. A área transversal média do cardiomio-
cyte UMA(cmy) foi estimado como: UMA(cmy) = Vv (cmy) ⁄ 2ÆQA (cmy),
Onde Vv é a densidade de volume dos cardiomiócitos e QUMA
é o número de núcleos de cardiomiócitos dentro do quadro cujo
área é conhecida respeitando a 'linha proibida' (Gundersen
1977). A vascularização intramiocárdica do VE foi analisada
pelo Vv (ve) ⁄ Vv (cmy) razão (Mandarim-de-Lacerda 2003).
Análise estatística
Os dados foram testados para desvios da distribuição Gaussiana
usando o teste de Kolmogorov-Smirnov (prisma gráfico
versão 5.0; GraphPad Software, San Diego, CA, EUA) e expresso
como média ± SEM. A comparação estatística entre os grupos
de controle e tratados foi determinada usando uma viaanova (
pares) seguido pelo post hoc teste de Tukey. Além disso, mão
duplaanova foi usado quando apropriado para determinar
como o tratamento com mesterolone ou o treinamento físico
afetaram os resultados e se houve uma interação entre essas
duas condições. UMAP-valor de 0,05 indicou significância
estatística.
Resultados
Pressão sanguínea e massa corporal
A variação semanal na PA e BM durante o período de 6 semanas de
experimentação é mostrada nas Figuras 1 e 2, respectivamente. A
pressão arterial tendeu a aumentar ao longo do
tabela 1 Protocolo de exercício (6 semanas) e esteróide androgênico
anabólico (AAS) ou administração de veículo (3 semanas)
Semanas Velocidade (m ⁄ min) Duração (min)
1 12,42 20
2 14,70 30
3 16,68 45
4-6 * 17.04 60
* AAS ou goma arábica (veículo) administrado por via oral por gavagem em
10,00 sou (Segunda, quarta e sexta-feira) nas últimas 3 semanas.
2008 Os Autores

figura 1 Evolução da pressão arterial caudal (tipo sistólica) nos grupos
controle sedentário (Sed-C) e exercitado (Ex-C) tratados com goma
arábica (veículo), e nos grupos experimentais sedentário (Sed-M) e
exercitado (Ex-M) tratado com mesterolone de CETP+ ⁄)LDLr) ⁄ +
camundongos transgênicos. Quando os grupos foram colocados juntos
(em um retângulo), eles não mostraram diferença estatisticamente
significativa, mas entre os retângulos a diferença foi significativa (P <
0,05). Mão únicaanova seguido pelo teste de Tukey. Os dados são
expressos como média ± SEM.
período de teste, particularmente a partir da terceira semana
nos grupos de mesterolone (valores de PA mais altos em
ambos os grupos Sed-M e Ex-M). Os valores de PA na sexta
semana foram significativamente diferentes dos valores iniciais
no mesmo grupo (P < 0,05). É digno de nota que o treinamento
físico atrasou o ritmo de aumento da PA em ambos os grupos
tratados com mesterolone e tratados com veículo. Apesar da
diferença significativa na PA entre Ex-C e Sed-M (P < 0,05), a
pequena variação não foi relevante do ponto de vista
fisiológico.
A Figura 2 mostra que o ganho de MC foi menor em camundongos
exercitados do que em camundongos sedentários. Sed-M mostrou
melhor aumento de MC semana a semana e o maior ganho de MC no
final da sexta semana. Como no Ex-C, o BM foi mantido praticamente
em um nível constante desde o início do período experimental, uma
ligeira, mas estatisticamente significativa diferença foi encontrada
comparando Sed-Mvs. Ex-C (P < 0,05). No entanto, o efeito
2008 Os Autores
Compilação de jornal 2008 Blackwell Publishing Ltd, International Journal of Experimental Pathology, 89, 358-366
Esteróides, exercícios e remodelação cardíaca 361
Figura 2 Evolução da massa corporal (MC em gramas) durante o período
de 6 semanas no CETP com goma arábica (veículo) e mesterolone
sedentário (Sed-C e Sed-M) ou exercitado (Ex-C e Ex-M) CETP+ ⁄)LDL) ⁄ +
camundongos transgênicos. Sed-M exibiu o maior ganho de peso
enquanto Ex-C exibiu o menor (Sed-M = Sed-C = Ex-M> Ex-C). Os grupos
dentro de retângulos não interseccionados entre si apresentam uma
diferença significativa semana a semana como segue: Ex-C „Sed-M (em
todas as semanas, exceto na terceira); Ex-C „Sed-C (quarto, quinto e
sexto); Ex-C „Ex-M (sexto)
(P < 0,05). Mão únicaanova seguido pelo teste de Tukey. Os dados são
expressos como média ± SEM.
de exercício na manutenção de baixo ganho de MC não foi
suficiente para abolir o ganho promovido por mesterolone e,
portanto, não há diferença significativa entre Sed-M e Ex-M.
Lípidos plasmáticos
Os níveis plasmáticos de TC, TG e distribuição de colesterol nas
frações lipoproteicas (HDL e LDL) são apresentados na Figura 3.
Considerando os níveis plasmáticos de TC no grupo Sed-C como
referência (86,5 ± 1,8), houve um aumento significativo de Sed- M
(P = 0,00004) e Ex-C (P = 0,02). Em comparação com o grupo
Sed-C (92,5 ± 0,7 mg⁄ dl), os níveis plasmáticos de TG no
grupo Sed-M aumentaram 38% (P < 0,0001), no grupo Ex-M
diminuiu 15% (P < 0,0001) e no grupo Ex-C diminuiu 30% (P
= 0,003). Estes achados
362 K. Fontana et al.
Figura 4 Índice de massa ventricular esquerda em CETP exercitado e
sedentário+ ⁄)LDLr) ⁄ + camundongos transgênicos submetidos à
administração orogástrica de mesterolone ou goma arábica (veículo).
Houve diferença significativa entre Sed-Mvs. Ex-M (P < 0,05). Mão única
anova seguido pelo teste de Tukey. Os dados são expressos como média ±
SEM.
indicaram que um efeito benéfico do treinamento físico sobre os
lipídios plasmáticos foi suficiente para neutralizar o efeito adverso
do mesterolone.
Os níveis plasmáticos de HDL-c não foram diferentes entre
Sed-M e Sed-C, mas foram elevados em Ex-C (P = 0,0002) e Ex-
M (P < 0,001), indicando o efeito predominante de
Compilação de jornal 2008 Blackwell Publishing Ltd, International Journal of Experimental Pathology, 89, 358-366
Figura 3 Níveis plasmáticos de lipídios e
lipoproteínas no CETP+ ⁄)LDLr) ⁄ + camundongos
transgênicos em grupos de controle tratados
com goma arábica (veículo), sedentários (Sed-
C) ou exercitados (Ex-C) e grupos pareados
tratados com mesterolona (Sed-M e Ex-M). O
mesmo símbolo sobre a barra indica
diferenças significativas entre os grupos (P <
0,05). Mão únicaanova seguido pelo teste de
Tukey. Os dados são expressos como
média ± SEM.
Figura 5 Densidade de volume do interstício do ventrículo esquerdo (Vv (int))
de CETP exercitado e sedentário+ ⁄)LDLr) ⁄ + camundongos transgênicos
tratado por via oral com mesterolona e goma arábica (veículo). Houve
diferenças significativas entre os grupos como segue: Sed-Cvs.
Ex-C e Sed-M vs. Ex-M (P < 0,05). Mão únicaanova
seguido pelo teste de Tukey. Os dados são expressos como média ± SEM.
o treinamento físico no controle dos níveis de HDL-c em camundongos
administrados com mesterolone.
Os níveis plasmáticos de LDL-c foram aumentados em Sed-M em
comparação com Sed-C (P < 0,01) e em Sed-M em comparação com
Ex-M (P = 0,03), indicando o efeito colateral do mesterolone e o
benefício do exercício.
2008 Os Autores
 Esteróides, exercícios e remodelação cardíaca 363

Os níveis de VLDL-c foram mais baixos no Ex-C

(aproximadamente 40% reduzido) e Ex-M (aproximadamente 30%
reduzido) em comparação com o grupo Sed-C (P < 0,005), e
diminuíram aproximadamente em 40% no Ex-M em comparação
com Sed-M (P < 0,01). O colesterol de lipoproteína de densidade
muito baixa não diferiu entre os grupos exercitados.

Hipertrofia cardíaca

Exercício sozinho (Ex-C) ou mesterolone sozinho (Sed-M) promoveu uma

tendência de aumento do índice de massa do ventrículo esquerdo (VE)
em comparação com Sed-C, mas as diferenças estavam no limite da
significância estatística (P = 0,054). Em contraste, o índice de massa do
VE aumentou 25% no Ex-M em comparação com Sed-M
(P = 0,03). Esses resultados mostram que o exercício associado ao
mesterolone teve um efeito aditivo no índice de massa do VE
(Figura 4).

Estereologia

A densidade de volume do interstício, Vv (int), diminuiu 65%

Figura 6 Área transversal de cardiomiócito do ventrículo esquerdo
no Ex-M e 80% no Ex-C quando comparado com seus
(UMA(cmy)) de CETP exercitado e sedentário+ ⁄)LDLr) ⁄ + camundongos
homólogos sedentários (P < 0,05). Treino de exercíciosper se
transgênicos tratados com mesterolone ou goma arábica (veículo).
diminuiu o Vv (int) em camundongos de controle tratados com veículo,
Houve diferenças significativas entre os grupos como segue: Sed-C
<Ex-C, Ex-C <Ex-M e Ex-M> Sed-M (P < 0,05). Mão única e mão dupla enquanto aumentou nos camundongos sedentários tratados com mestero-

anova seguido pelo teste de Tukey. Os dados são expressos como solitário (Figura 5). Esses achados mostram que o treinamento
média ± SEM. físico é capaz de reduzir o interstício cardíaco (incremento das
fibras de colágeno).

(uma) (b)

Figura 7 Fotomicrografias mostrando o miocárdio

do ventrículo esquerdo em camundongos
transgênicos. (a) Ex-M: camundongos exercitados
tratados com mesterolone; (b) Ex-C: animais
(c) (d)
exercitados tratados com goma arábica (veículo);
(c) Sed-M: animais sedentários tratados com
mesterolone;
(d) Camundongos sedentários Sed-C tratados com
veículo. Observe que qualitativamente os
cardiomiócitos são maiores em tamanho nos
grupos exercitados (a, b) e menores nos grupos
sedentários (d, c). As inserções representam uma
grande ampliação dos cardiomiócitos de Ex-M (a) e
Se-C (d).

2008 Os Autores
Compilação de jornal 2008 Blackwell Publishing Ltd, International Journal of Experimental Pathology, 89, 358-366
364 K. Fontana et al.
Figura 8 Vascularização miocárdica no ventrículo esquerdo por CETP
exercida e sedentária+ ⁄)LDLr) ⁄ + camundongos transgênicos tratados
com mesterolone e goma arábica (veículo). Houve diferença
significativa entre Sed-Cvs. Ex-C (P < 0,05). Mão única e mão dupla
anova seguido pelo teste de Tukey. Os dados são expressos como
média ± SEM.
As Figuras 6 e 7 mostram as medidas e morfologia da área dos
cardiomiócitos. Em comparação com os camundongos Sed-C, os
maiores cardiomiócitos foram observados no grupo Ex-M
(UMA(cmy) onde houve um aumento de área de 65% (P < 0,01),
seguido pelo grupo Ex-C (com aumento de 40%, P < 0,02)
[as diferenças foram significativas entre Sed-C vs. Ex-C; Sed-C
vs. Ex-M; Sed-Mvs. Ex-M e Ex-C vs. Ex-M (P < 0,05) (Figura
6)]. Essas descobertas indicaram que o treinamento físico
per se causa hipertrofia dos cardiomiócitos e o treinamento
físico combinado com a administração de mesterolone
aumenta essa hipertrofia. Isso foi confirmado por duas vias
anova (P = 0,03; Figura 6) e observações histológicas (Figura
7).
A vascularização intramiocárdica (Figura 8) foi significativamente
maior no grupo Ex-C em comparação com o grupo Sed-C (em 40%,
P < 0,05). No entanto, não foram observadas diferenças estatísticas
nos vasos sanguíneos intramiocárdicos dos grupos Ex-M e Sed-M
(Figura 8). Assim, o tratamento com mesterolone embotou o
benefício obtido com o exercício.
Os níveis plasmáticos de TnT foram mais baixos no grupo
Ex-C, sem diferença significativa com o do Sed-C (Figura 9).
O maior valor foi alcançado no Sed-M
Compilação de jornal 2008 Blackwell Publishing Ltd, International Journal of Experimental Pathology, 89, 358-366
Figura 9 Nível plasmático de troponina T (TnT) no CETP+ ⁄)LDLr) ⁄ +
camundongos transgênicos nos grupos controle (Sed-C) e exercitados
(Ex-C) tratados com goma arábica (veículo) e os grupos experimentais
sedentários (Sed-M) e exercitados (Ex-M) tratados com mesterolona. O
mesmo símbolo sobre a barra indica diferenças significativas entre os
grupos (P < 0,05). Mão única
anova seguido pelo teste de Tukey. Os dados são expressos como média ±
SEM.
grupo (0,44 ng ⁄ ml). Em camundongos Ex-M, o valor TnT foi
0,25 ng ⁄ ml, indicando uma redução de 40% na liberação de TnT
dos cardiomiócitos promovida pela corrida em esteira (P < 0,001).
Discussão
Neste estudo, camundongos transgênicos com um fenótipo
lipêmico humano (CETP+ ⁄)LDLr) ⁄ +) foram usados para avaliar os
efeitos do tratamento com mesterolone combinado com ou sem
um protocolo de treinamento físico aeróbio, no sistema
cardiovascular, especificamente na PA, perfil de lipoproteína
plasmática e remodelação cardíaca. O uso de testosterona ou AASs
é um fator de risco bem reconhecido para hipertensão, distúrbios
no perfil lipídico e doença arterial coronariana acelerada (Alen &
Rahkila 1984; Gantenet al. 1989; Hurleyet al. 1984; Rockhold
1993). No presente estudo, em comparação com o veículo, os
camundongos sedentários tratados com mesterolone apresentaram
elevação significativa dos níveis plasmáticos de TC, TG, LDL-c e VLDL-c.
Por outro lado, o programa de treinamento físico aplicado a esses
camundongos aumentou os níveis de HDL-c e diminuiu VLDL-c (o
2008 Os Autores

precursor de LDL-c) e TG significativamente, ambos em
camundongos tratados com veículo ou mesterolone. A diferença
significativa no ganho de BM e PA produzida tanto pelo
mesterolone quanto pelo exercícioper se tomar como referência
Sed-C provavelmente não é relevante do ponto de vista fisiológico.
O treinamento físico regular e moderado tem sido associado a
um risco reduzido de DCV, parcialmente por causa de uma melhora
no perfil de lipoproteínas (LaRosa 1992). No entanto, a quantidade
de treinamento físico necessária para obter benefícios é discutível
(Blairet al. 2004). Em geral, apenas o treinamento de alta
intensidade ou programa de exercícios de resistência de longo
prazo são capazes de melhorar o perfil geral de lipoproteínas,
incluindo elevação de HDL-c e redução dos níveis de TG em
humanos (Seloset al. 1984; Krauset al. 2002; Halverstadtet al. 2007).
Por outro lado, os estudos sobre a melhora do perfil lipoprotéico
mediado pelo exercício em camundongos e ratos devem ser
observados com cautela se o objetivo for comparar com humanos,
principalmente porque existem diferenças na expressão de
proteínas envolvidas no transporte e captação tecidual de
lipoproteínas. . Nesse sentido, o modelo animal aqui estudado
apresentou um perfil lipídico semelhante ao humano e, portanto,
espera-se que a resposta da lipoproteína ao treinamento físico seja
mais viável em comparação com a humana. O programa de
exercícios (6 semanas, 5 vezes⁄ semana e 60 min ⁄ dia) com
velocidade de 17,4 m ⁄ min nas últimas 3 semanas é considerado
alto aeróbio para animais e comparável a exercícios de longa
duração e alta resistência em humanos, considerando a expectativa
de vida de ambos.
Relatos clínicos de uso indevido de AASs por atletas e
estudos em animais experimentais têm mostrado a ocorrência
de alterações estruturais deletérias do miocárdio e hipertrofia
cardíaca (Bauman et al. 1988; Gantenet al. 1989; Nieminen
et al. 1996) (para revisão, ver Hartgens & Kuipers 2004),
incluindo alterações irreversíveis no miocárdio, como
hipertrofia concêntrica do VE, mesmo após a interrupção da
ingestão de AAS (Urhausen et al. 2004). O tratamento de ratos
com doses suprafisiológicas de AASs induziu hipertrofia
miocárdica patológica e, quando combinados com exercícios,
esses esteróides reduziram os efeitos benéficos do exercício na
hipertrofia do VE e na circulação cardíaca (Tagarakiset al.
2000a, b; Woodiwisset al. 2000).
No estudo atual, o mesterolone sozinho (Sed-M) promoveu
apenas ligeiras alterações na estrutura cardíaca, ou seja, uma
tendência limítrofe à hipertrofia do VE (P = 0,054). Por outro lado, o
treinamento físico induziu remodelação cardíaca favorável tanto
em camundongos tratados com mesterolone quanto com veículo.
Isso é evidenciado por uma redução acentuada no interstício
cardíaco (mais proeminente no Ex-C) e aumento do tamanho dos
cardiomiócitos. Níveis aumentados de TnT circulante, um marcador
de lesão do miocárdio, confirmam o efeito deletério
2008 Os Autores
Compilação de jornal 2008 Blackwell Publishing Ltd, International Journal of Experimental Pathology, 89, 358-366
Esteróides, exercícios e remodelação cardíaca 365
do mesterolone em camundongos sedentários e o treinamento
físico atenuaram esse efeito adverso do mesterolone na
integridade cardíaca. Além disso, o treinamento físico
aumentou significativamente a vascularização cardíaca no Ex-C
e, em menor grau, nos grupos Ex-M (em comparação com Sed-
C). Isso provavelmente representa uma resposta ao aumento
da demanda miocárdica de oxigênio imposta pela atividade
física. Efeitos semelhantes do treinamento físico foram
observados em um estudo anterior em ratas ovariectomizadas
(Marqueset al. 2006). Esse aumento da vascularização cardíaca
pode ser importante no caso de eventos isquêmicos. O
tratamento com Mesterolone em camundongos exercitados
suprimiu a melhora dos benefícios da hipertrofia fisiológica, a
melhora da circulação miocárdica e parte da redução do
interstício induzida pelo programa de treinamento físico.
Portanto, nossos resultados mostram os fortes efeitos
adversos da mesterolona no metabolismo de lipídios e
lipoproteínas plasmáticas, que foram prevenidos ou atenuados
pelo treinamento físico neste modelo murino. Por outro lado,
nossos dados também mostram que o exercícioper se induz
alterações benéficas na remodelação cardíaca e no suprimento
vascular do miocárdio, todos total ou parcialmente
prejudicados pelo uso de mesterolone.
Reconhecimentos
Este estudo foi apoiado por bolsas da Fundação de Amparo
à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) (Proc. 04 ⁄
13767-9) e Conselho Nacional de Desenvolvimento
Cientıfico e Tecnológico (CNPq) (Proc. 522131 ⁄ 95-6). KF é
doutoranda pelo Departamento de Farmacologia da
Faculdade de Ciências Médicas da Universidade Estadual de
Campinas (UNICAMP) com bolsa da FA-PESP (Proc. 04⁄
13768-5). Os autores agradecem ao Departamento de
Anatomia pela utilização de suas instalações, ao Sr. Lécio D.
Teixeira do Departamento de Fisiologia e Biofı́sica pelo
cuidado dos animais e à Dra. Marta Krieger do
Departamento de Fisiologia e Biofısica pelo laboratório.
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