Transporte Passivo Transporte Activo

Canal iónico
Transportador

Transporte activo primário

Transporte activo secundário
Vander, Sherman, Luciano- Human Physiology,
(Mc. Graw- Hill, Inc.)
 Na+ / K+ ATPase (NKA)

Preservação dos gradientes transmembranares

No cérebro mais de 50% do ATP é gasto na preservação destes gradientes
Densidade- no cérebro 1 milhão de bombas por célula
nos rins 50 milhões de bombas por célula

Manutenção do volume

Termogénese
a energia libertada pela hidrólise pode não ser toda usada no transporte de Na+ e K+
e é libertada sob a forma de calor
 Na+/K+ ATPase NKA

3Na+ 2K+ Modelo de Albers- Post

E2-P 3Na E2-P E2-P 2K OUT

ADP

E1-P ADP (3Na) E2 (2K) Pi

Pi ATP

E1-ATP 3Na E1-ATP E1-ATP 2K IN

3Na+ 2K+

E1- alta afinidade paraNa+ 3Na+ / 2K+

E2- baixa afinidade para Na+ electrogénica

Ouabaína, esteroide cardiotónico, liga pelo lado extracelular mantendo-a em E2-P

 Estrutura de NKA

Subunidade α

Domínios:
M- membrane

A- actuator
P- phosphorylation
N- nucleotide domain

Horisberger 2004

SUBUNIDADES:
α
β M domain- 10 transmembranar:
γ (FXYD) NTM (M1-M4a) CTM (M4b-M10)

M4 e M6 bolso dos iões a transportar

 CICLO CATALÍTICO

Aspartato D369

Fosforilação / Desfosforilação
Clausen 2017
E1 E2 / E2 E1
 P- ATPase - árvore filogenética

Horisberger 2004

Fosfoenzima com um resíduo de aspartato fosforilado

 Ca2+ - ATPase SERCA

Domínios:

A- Actuator
P- Phosphorylation
N- Nucleotide domain

M- Membrane (10TM)

Kekenes-Huskey Protein Sci 2012

 SERCA- ciclo catalítico

2H+ 2Ca2+

E2-P 2Ca E2-P E2

Pi

ATP

E1 P 2Ca E1 ATP 2Ca E1 ATP

ADP
2H+ 2Ca2+

Carafoli & Brini Curr Opin Chem Biol 2000

2Ca2+ para 2H+

Kekenes-Huskey Protein Sci 2012

 SERCA- regulação

Inibidores:
PLN- phospholamban ligado no m. cardíaco (reduzindo afinidade para Ca2+)
Fosforilação de PLN retira inibição maior contração

SLN- sarcolipin ligado no m. esquelético, reduzindo a velocidade de transporte

desacoplando o transporte da ATPase (termogénese do músculo)

MLN- myoregulin

Activador:
DWORF- dwarf open reading frame

Bloqueadores: Thapsigargin (mantém-na em E2)

CPA-Cyclopiazonic acid
BHQ- 2,5-di-(ter-butyl) hydroquinone
 Ca2+ -ATPase PMCA

1Ca2+ por ATP

Afinidade elevada por Ca2+

[Ca2+]i = 100 nM

Baixa capacidade

Função localizada
(cavéolos)
Di Leva et al. 2008
 PMCA activação

Auto inibição

Calmodulina

Di Leva et al. ArchBiochemBiophy 2008