CITOQUÍMICA

a
Preparações corados com HE,
(hematoxilina – eosina):

a) Tumor com vasos sanguíneos

b) Epitélio
c) Sangue humano

b b c
a b

Material corado com Giemsa

a) Sangue humano
b) Medula óssea
c) Cromossomos

c
 Reações citoquímicas

São aquelas para as quais é conhecida a estequiometria da reação.

Acidofilia
Substrato catiônico (+) + Corante aniônico (-)

Exemplo de substrato catiônico = Proteínas. A baixo pH a maioria está

positiva. Em pH 2,5 (abaixo do ponto isoelétrico das proteínas,
quando todas se encontram positivas) coram-se “proteínas totais”.
Em alto pH (8,2) coram apenas as histonas (pI = 10).

Corantes mais usados: Fast Green

Xilidine Ponceau
 Fast Green
(Verde Rápido)

Xilidine Ponceau
 Como se obtém moléculas com cor?

A absorção de energia radiante nas regiões do espectro visível

(e ultravioleta) depende primeiramente do número e arranjo dos
elétrons nas moléculas ou íons absorventes.

- Compostos totalmente saturados não mostram absorção seletiva.

- Compostos com um grupo insaturado absorve no ultravioleta.

- Compostos com grupos conjugados (duplas e simples alternadas)

tem absorção em maiores comprimentos de onda.
Comprimentos de onda e suas
cores complementares.
Coloração com Fast Green:

a) Tubo seminífero a pH 8,0 e fixado

com formalina
b) Tubo seminífero a pH 8,0 e fixado
com ácido acético
c) Tecido muscular.

c
Cartilagem corado com Xilidine Ponceau:

No pericôndrio a coloração é mais intensa devido à presença de

grande quantidade de colágeno.
 Basofilia

Substrato aniônico (-) + Corante catiônico (+)

Exemplos de corantes: azul de toluidina (AT); azul de alcian.

A pH 4, o AT cora glicosamino glicanos que tem grupos carboxila

(-COO -) e radicais sulfito (–SO32-), além de ácidos nucléicos com
radicais fosfato (–PO4-) . O pH deve ser controlado porque acima
de um determinado pH as proteínas começam a adquirir grupos
–COO - que também reagem com os corantes.

Azul de Toluidina
 1 2 3 4 5

Tabela de valores -
-
de pI para:
10 - - - -
1) Proteínas em geral
2) Histonas
3) DNA-RNA
4) Açúcares com o
grupo –COO- 6,7-
5) Açúcares com o
grupo -SO42-
+ +
3,5-

+ 2-
+ 0,5 -
+
Proteínas Histonas DNA - RNA Açúcares
-COO- -SO42-
 Metacromasia
Definições para a metacromasia:
- Modificação do espectro de absorção de alguns
corantes básicos quando se unem a polímeros
polianiônicos.

- Abaixamento do pico de absorção (menor

comprimento de onda = cor mais vermelha)
devido à agregação das moléculas de corante.