Assunto : Banco de Sangue e Serviço de Transfusão.

Professora : Olga Lídia

Unidade #2 : Composição e conservação do sangue
Aula #2
Tópico : 2.1- Sangue total. Conceito. Elementos que o compõem.
Funções . 2.2- Anticoagulantes e soluções conservantes. Conceito.
Formulários. Composição química e mecanismo de ação de EDTA,
Heparina, ACD, CPD, CPDA-1 E SAG Manitol.
No banco de sangue é realizada a extração de sangue total e na bolsa
é suspenso o conservante anticoagulante CPDA-1. O que acontece se
a bolsa de sangue for mantida na geladeira em temperatura abaixo de
2 0 C e acima de 8 0 C?
Cheio de sangue
É um complexo formado por células suspensas em um líquido
amarelado denominado plasma. Os elementos formados consistem em
uma mistura de glóbulos vermelhos, glóbulos brancos e plaquetas. O
plasma contém múltiplas proteínas, produtos químicos, fatores de
coagulação e numerosos compostos metabólicos.
O sangue atua como meio de transporte de seus diferentes
componentes para diversas estruturas do corpo.

Glóbulos vermelhos
São muito pequenos, têm um diâmetro de 7,2 mícrons. Existem cerca
de 5.000.000 por mm 3 de sangue (5 x 10 12 /l). São produzidos na
medula óssea (MO) e quando amadurecem entram na corrente
sanguínea, onde sobrevivem por 120 dias. Eles são então degradados
e removidos pelas células do sistema reticuloendotelial. Essas células
são muito especializadas e estão distribuídas por todo o corpo.
Predominam na medula óssea, fígado, baço e gânglios linfáticos.
Os glóbulos vermelhos contêm hemoglobina e sua função é transportar
oxigênio para os tecidos.
Hemoglobina
É uma molécula grande e complexa composta por frações contendo
ferro e quatro cadeias polipeptídicas. Pode combinar-se
reversivelmente com oxigênio e dióxido de carbono. É responsável por
transportar oxigênio aos tecidos para fornecer-lhes energia e calor. O
oxigênio é capturado nos pulmões e transportado para os tecidos. O
oxigênio liberado é substituído por dióxido de carbono que é
transportado para os pulmões, onde é eliminado e substituído
novamente por oxigênio.
glóbulos brancos (Leucócitos)
Constituem uma família de células nucleadas composta por
granulócitos, linfócitos e monócitos. Existem três tipos de granulócitos:
neutrófilos, eosinófilos e basófilos.
Em condições normais, os granulócitos são derivados do BM, enquanto
os linfócitos são produzidos no BM, no tecido linfático e no timo. A
origem dos monócitos é incerta, mas podem formar-se a partir do
tecido reticuloendotelial, particularmente no baço.
Os granulócitos são os principais responsáveis pelo combate às
infecções. Os linfócitos desempenham um papel relevante na síntese
de anticorpos contra antígenos e vírus estranhos. Os monócitos
ingerem bactérias e outros corpos estranhos. Este processo é
chamado de fagocitose.
plaquetas
Eles são muito menores que os glóbulos brancos e vermelhos. Eles
têm um papel fundamental na coagulação. Eles são depositados em
feridas e combinam-se com fatores de coagulação do plasma para
produzir delicados filamentos de proteínas chamados fibrina. A fibrina
funciona como uma rede que retém os glóbulos vermelhos para formar
um coágulo e evitar mais sangramentos.
Soro e plasma
Quando o sangue é coletado e colocado em um tubo, ele forma uma
massa semissólida de células cercada por um líquido chamado soro .
Se coletadas em um tubo com anticoagulante, as células depositam-se
no fundo e o fluido circundante é o plasma . Portanto, o soro é o líquido
que envolve as hemácias coaguladas e o plasma, que envolve as não
coaguladas.
Anticoagulantes : São substâncias que evitam a formação de coágulos
por diversos mecanismos, permitindo que o sangue permaneça no
estado líquido.
EDTA
Heparina
Oxalatos
Citrato

Mecanismos de ação dos anticoagulantes

EDTA: Além de sequestrar o cálcio, não permite a aglomeração de
plaquetas, por isso não deve ser utilizado quando sua atividade é
necessária, embora seja útil para contá-las. É o mais indicado para
obtenção de amostras em imunohematologia porque inibe a atividade
do complemento nas hemácias, o que normalmente ocorre quando as
amostras são armazenadas a 4 o C. Essa ligação pode causar teste de
Coombs positivo.
Heparina: É utilizada em laboratório. Se for utilizado em sangue
coletado, deve ser utilizado em até 48 horas. É utilizado
secundariamente em procedimentos de aférese como suporte do
citrato para prevenir sua toxicidade. Estimula uma proteína
anticoagulante plasmática chamada antitrombina III e aumenta sua
atividade 1000 vezes. Isso evita a conversão de protrombina em
trombina.
Oxalatos: Eles precipitam íons de cálcio essenciais para a coagulação
do sangue. São utilizados oxalatos de sódio e potássio . A maior
desvantagem deles é que produzem alterações nas células sanguíneas
devido à liberação de fluidos delas; com a consequente diminuição do
volume e alteração da forma, bem como diluição do plasma
Citrato: Sua ação baseia-se no sequestro de cálcio. É utilizado em
soluções anticoagulantes-conservantes para conservação do sangue
doado.
Os anticoagulantes são essenciais para a conservação do sangue,
porém, a sobrevivência desse sangue é limitada se as células não
tiverem substrato para continuar desempenhando suas funções vitais,
portanto, é necessário adicionar substâncias que ajudem a manter
essas funções:
Anticoagulantes – Conservantes.
São aquelas substâncias que impedem a coagulação do sangue e por
sua vez não alteram seus componentes, permitindo que o sangue
mantenha condições ideais desde a extração até a transfusão. e que
os componentes sejam capazes de sobreviver e funcionar
normalmente no receptor.
Requisitos destas soluções:
1- Estabilidade de composição e possibilidade de conservação por
muito tempo sem modificação.
2- Poder anticoagulante alto e estável em relação aos glóbulos
vermelhos.
3- Manutenção da capacidade de transporte de oxigênio dentro dos
limites fisiológicos normais.
4- Manutenção da viabilidade eritrocitária pós-transfusão pelo maior
tempo possível. Ausência de interação com membranas,
componentes celulares e proteínas plasmáticas.
5- Ausência de interação com as paredes do container.

Soluções:
 DAC
 DPC
 CPDA

DAC
C: Citrato --- Anticoagulante
A: Ácido cítrico ---- Determina a acidez do pH
D: Dextrose – síntese de ATP
É utilizado desde 1940 e atualmente é utilizado para procedimentos de
aférese.

DPC
C: Citrato --- Anticoagulante
P: Fosfato --- Estabiliza o pH
Dextrose – síntese de ATP
Permite o armazenamento de eritrócitos por 21 dias, mantidos entre 1-
6 0c

CPDA-1
C: Citrato --- Anticoagulante
P: Fosfato – estabiliza o pH
D: Dextrose – síntese de ATP
A: Adenina---Síntese de ATP
Atualmente é usado em bolsas de coleta de sangue.
 Proporção solução-sangue: 1:4 a 1:10
 Volume----63ml---450±45ml
O sangue pode ser armazenado por até 35 dias entre 1-6 o C

Sistemas Aditivos
 CPDA + SOL. ADITIVO
 Adicionar antes de 72 horas
C: Citrato --- Anticoagulante
P: Fosfato --- pH
D: Dextrose – ATP
R: Adenina --- ATP
Manitol: estabilizador da membrana eritrocitária
Dextrose---ATP
Cloreto de sódio 0,9%

Estas soluções aditivas permitem:

 1- Recuperação de quantidades máximas de plasma.
2- Preparação de unidades eritrocitárias com hematócrito final de
60%. O que favorece melhor fluxo e facilidade de administração.
3- Maior sobrevida dos eritrócitos 42 dias.

Conservação de sangue
Biologia do sangue conservado. Alterações físicas, químicas e
biológicas que ocorrem no sangue preservado. Cadeia fria .
O sangue total anticoagulado sem conservantes inicia imediatamente o
processo de envelhecimento e a sobrevivência dos eritrócitos é
consideravelmente encurtada, razão pela qual são utilizadas
substâncias conservantes, apesar disso as alterações continuam a
ocorrer. Embora dependendo da solução conservante, estas alterações
serão mais ou menos rápidas.
Sangue anticoagulado sem conservantes
Glicose: É totalmente consumida em poucas horas.
Fosfatos inorgânicos: Aumentam quando a glicose é consumida.
Sódio: É um fenômeno tardio e começa a aumentar com rapidez
crescente após o 20º dia de armazenamento, sendo retardado com a
adição de glicose.
A passagem do sódio para os glóbulos vermelhos retira água e causa
inchaço e ruptura.
Potássio: Saída dos eritrócitos para o plasma, processo que se
completa em 72 horas. Esta saída é independente da adição de glicose
ou de qualquer conservante.
Volume corpuscular: Aumenta, tornam-se esferócitos. Essa mudança
se desenvolve à medida que a glicose diminui.
Taxa de hemossedimentação: Atrasada.
Fragilidade osmótica: Aumenta.
Leucócitos: Eles desaparecem em poucas horas.
Plaquetas: Desaparecem em 3 a 5 dias.
Importância da correta conservação do sangue.
O sangue deve ser armazenado entre 2-8 0 C.
As transfusões de células sanguíneas têm como objetivo restaurar ou
preservar a capacidade de transportar oxigênio para os tecidos e
manter o volume sanguíneo. Se o sangue não for armazenado na
temperatura adequada, sua capacidade de transportar oxigênio será
bastante reduzida.
As soluções anticoagulantes adicionadas às bolsas evitam a
coagulação, mas também contêm nutrientes. Apenas glóbulos
vermelhos viáveis podem transportar e liberar oxigênio. A viabilidade
dos glóbulos vermelhos depende principalmente da glicose e do ATP e
é essencial alcançar um equilíbrio entre ATP, glicose e Ph.
Um dos anticoagulantes conservantes mais comuns é o CPDA-1. A
dextrose e a adenina ajudam a preservar o ATP, enquanto o citrato
previne a coagulação. Para que a glicose não seja consumida muito
rapidamente, o sangue ou os glóbulos vermelhos devem ser mantidos
entre 2-8 o C.
Esta temperatura também limita o crescimento bacteriano potencial. Se
o sangue for armazenado acima de 8ºC , a proliferação de
microrganismos potencialmente contaminantes poderá tornar a
transfusão um procedimento fatal .
O limite inferior de 2 o C também é relevante, porque os glóbulos
vermelhos são muito sensíveis ao congelamento. Se isso ocorrer, a
membrana eritrocitária é destruída e a Hb é liberada, ou seja, ocorre
hemólise. A transfusão destes glóbulos vermelhos pode ser fatal.
Alterações bioquímicas nos glóbulos vermelhos armazenados
% células viáveis embora 75%
pH 
ATP 
2.3 DPG 
Potássio 
Hb plasmática 
Lactato e piruvato 
 % Hemólise embora 1

Mudanças Físicas:
Podem ocorrer mudanças físicas no sangue que denotam alterações
na qualidade do sangue:
- A cor muda, do violeta ao preto.
- Aumento de temperatura.
- Presença de coágulos, caroços, espuma.
- Presença de hemólise.
Todos estes podem ser sinais de infecção.

Plasma
Plasma fresco congelado é o plasma que é separado do sangue dentro
de 8 horas após a coleta, congelado rapidamente e mantido a -20 o C
ou menos. O Plasma Fresco Congelado (FFP) é útil para normalizar ou
preservar os fatores de coagulação. Para repor o volume plasmático, é
aconselhável administrar cristaloides e coloides; O plasma só é usado
quando esses agentes não estão disponíveis.
O plasma contém água, eletrólitos, fatores de coagulação e proteínas,
especialmente albumina. A maioria dos factores de coagulação
permanece estável às temperaturas normais do frigorífico, excepto os
factores VIII e V. Se o plasma não for congelado a -20 o C ou menos, os
factores VIII e V deterioram-se e a sua concentração diminui
significativamente.
O plasma deve solidificar. Não há limite inferior para conservar o PFC,
desde que a temperatura seja -20 ou inferior.
Cadeia fria
A cadeia de frio é um sistema de preservação e transporte de sangue e
plasma que permite a manutenção das funções celulares.
Os dois componentes fundamentais da cadeia são:
 Pessoas que organizam e realizam o armazenamento e
transporte de sangue e plasma
 O equipamento utilizado para alcançá-lo.
A cadeia de frio é muitas vezes considerada como uma série de
frigoríficos e congeladores, mas as pessoas envolvidas são cruciais.
Mesmo quando estão disponíveis os dispositivos e veículos mais
completos e modernos, a cadeia de frio não é eficaz se o pessoal não
trabalhar corretamente.
Ao conservar o sangue é essencial lembrar:
 O sangue deve ser mantido entre 2 e 6 o C.
 Os glóbulos vermelhos ou o sangue total nunca devem ser
congelados.
O sangue deve ser armazenado em geladeira designada para esse fim.
Caso essa possibilidade não exista no banco de sangue, utiliza-se uma
geladeira comum, conforme instruções a seguir.
1- O sangue pode ser armazenado com reagentes e amostras, mas
em compartimentos separados. Se apenas um refrigerador
estiver disponível, diferentes áreas serão designadas para
sangue estudado e não estudado.
2- Abra a porta apenas para armazenar ou retirar sangue.
3- Permita a circulação de ar frio dentro do refrigerador. Coloque os
sacos na vertical em cestos ou nas prateleiras. Eles nunca
devem estar muito próximos um do outro.
4- Nunca coloque sangue na porta da geladeira doméstica, pois a
temperatura é mais elevada do que no interior.
5- Nunca coloque sangue próximo ao freezer de uma geladeira
doméstica.
6- Não armazene alimentos ou bebidas com sangue.
7- É fundamental poder monitorar e documentar a temperatura dos
refrigeradores e freezers e possuir sistema de alarme. O controle
deve ser realizado pelo menos duas vezes ao dia. A temperatura
deve ser anotada no registro.

Tempo de conservação do sangue tratado com diferentes

anticoagulantes. Soluções de rejuvenescimento. Usos e
aplicações .
Anticoagulantes conservantes estudados
ACD------------15 dias
CPD ------------- 21 dias
 CPDA-----------35 dias
SAG Manitol --- 42 dias
Esclareça que de acordo com a composição química destes
compostos, a conservação do sangue é o que temos refletido, porém,
em nosso país está estabelecido que todo sangue, independente da
substância utilizada, é armazenado por 15 dias. Esta decisão não se
deve à qualidade do conservante mas porque, em todos os centros de
dádiva do nosso país, não existe o mesmo nível tecnológico para a
extracção, processamento e transporte de sangue.

Soluções de rejuvenescimento
São soluções que são adicionadas aos eritrócitos armazenados para
restaurar os níveis de 2,3 DPG e ATP e assim prolongar o seu período
de armazenamento.
As soluções geralmente contêm:
Piruvato
Inosina
Fosfato
Adenina
Os eritrócitos podem ser rejuvenescidos até três dias após a expiração.