ELETROFORESE CAPILAR

Andreia Lucas
Andressa Nogueira
Fbio Miranda
Maria das Graas
Qumica Instrumental- Noturno
FATEC Diadema

HISTRIA DA ELETROFORESE

1930- Tese apresentada pelo qumico sueco Arne

Tiselius;

1967- 1 tentativa de realizao de separao em tubos

por Hjertn;

1981- Reconhecimento da tcnica aps a publicao no

Journal of Analytical Chemistry, pelos qumicos
Jorgenson e Lukacs.

O QUE ?
Separao baseada na diferena de migrao de compostos
inicos ou ionizveis ,ao aplicar corrente eltrica

TIPOS DE ELETROFORESE CAPILAR

Eletroforese capilar de zona (CZE)

Eletroforese capilar em gel (CGE)
Focalizao isoeltrica capilar (CIEF)
Isotacoforese capilar (CITP)
Cromatografia eletrocintica micelar (MEKC)
Cromatografia eletrocintica em microemulso
(MEEKC)
Eletroforese capilar em meio no-aquoso (NACE)

AONDE EMPREGADA A
ELETROFORESE CAPILAR?

Amplificao de DNA;

Estudos de gentica e evoluo de fungos

fitopatognicos;

Estudos de resistncia doenas.

COMPOSTOS ANALISADOS

Hidrocarbonetos aromticos;

Vitaminas hidro e lipossolveis;

Aminocidos dentre outros.

VANTAGENS E DESVANTAGENS DA EC
Vantagens:

Versatilidade
Baixo custo analtico

Desvantagens:

No se aplica a todos os tipos de compostos

No muito adequada para a anlise de polmeros no

inicos de massa molar alta

Detectores mais comuns utilizados em Eletroforese

Capilar
Modo de deteco
UV-Vis

Limite de deteco em mol/L1

5
7
10 -10
13

16

10

10

Fluorescncia (LIF)

10

-10

Espectrometria de Massas (MS)

10 -10

Amperomtrico

10 -10

Condutomtrico

10 -10

EQUIPAMENTO ELETROFORESE
CAPILAR

Fonte:http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S010040422005000400023&script=s
ci_arttext

ELETROFORESE HORIZONTAL

Fonte:http://www.prolab.com.br/produtos/equipamentospara laboratorio/cuba-de-eletroforese

APARELHO ELETROFORESE VERTICAL

Fonte:http://www.bioagency.com.br/conteudoNot.asp?IDMenu=4&idRepCat=9

ELETROFORESE CAPILAR EM GEL (CGE)

Tcnica de separao de molculas que envolve a

migrao de partculas em um gel (matrizes polimricas
hidroflicas, dissolvidas em um tampo apropriado)
durante a aplicao de um diferencial de potencial.
Os gis so estruturas delicadas, sujeitas a mudanas de
morfologia pela ao da:
Temperatura
pH
Fora Inica
Concentrao do meio

ELETROFORESE CAPILAR EM GEL (CGE)

Separao de Fragmentos de DNA

Fonte:http:/www.sobiologia.com.br/conteudos/Biotecnologia/eletroforese.php/

ELETROFORESE CAPILAR EM GEL (CGE)

Identificao de pessoas em testes de paternidade;

Identificao de criminosos;

Industria Farmacutica (Vacinas, Reagentes de

diagnstico);

Agropecuria (Animais e plantas transgnicos

ELETROFORESE CAPILAR EM GEL (CGE)

Vantagens:
O formato do capilar, preenchido com gel possibilita a
dissipao eficiente do calor gerado pelo efeito Joule.
Geometria do capilar e das propriedades anti-convectivas
do gel.
Desvantagens:
Aparecimento de bolhas (perda de condutividade).
Reteno de fragmentos com alto peso molecular.
Degradao do gel por hidrlise.

ELETROFORESE CAPILAR EM GEL (CGE)

Tipos de Eletroforese em Gel

Gel de Agarose: Polissacardeo que forma uma rede que

prende molculas durante a migrao, dependendo da
concentrao da Agarose.

Gel de Poliacrilamida: mistura de dois polmeros,

possibilitando a criao de diferentes gradientes de
separao

ELETROFORESE ZONA, SOLUO SIMPLES

PRINCPIO DA SEPARAO DA ZONA

ESQUEMA DE SEPARAO

ELETROFORESE CAPILAR DE ZONA

A ordem de eluio pode ser revertido aps adio de
sais de alquilamnio.
A "cabea" polar de alquimonio atrado para as
paredes da coluna.
Parte "cauda" apolar os sais formam uma barreira
hidrofbica, que se junta a uma nova camada de
molculas de sal Gerando uma alterao na carga da
parede da coluna.
O resultado final que a parede do capilar tem um tipo
de carga positiva final

SEPARAO DE SOLUTOS NEUTROS (MEKS) NA

PRESENA DE TENSOATIVO ANINICO (ECM)

ELETROFORESE CAPILAR NO PAPEL

O papel introduzido numa soluo aquosa

tamponada.
A amostra colocada num ponto da suporte.
Um potencial DC (100-1000V) geralmente
aplicada durante a separao (usualmente medido
correntes da ordem dos mA) .
as espcies inicas migro para pontos especficos
de suporte.
Depois de um tempo apropriado para separar o
suporte removido e secado.
Se necessrio, o de papel tratada com um agente
corante a fim de observar os turnos bandas

RESULTADO DE ANLISE

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

http://www.ufjf.br/baccan/files/2010/10/Aula-11Eletroforese-Capilar-Modo-de-Compatibilidade.pdf
http://www.splabor.com.br/blog/equipamentos-paralaboratorio/cuba-de-eletroforese-caracteristicas/
http://www.bioagency.com.br/conteudoNot.asp?IDM
enu=4&idRepCat=9
http://profiva.dominiotemporario.com/doc/Genetica1
4.pdf
http://pt.slideshare.net/ChristopherSnchez1/electrof
oresis-capilar-

Obrigado Pela ateno!