Histórico

ELETROFORESE
As bases da eletroforese têm sua origem a partir
dos estudos do bioquímico alemão Leonor Michaelis,
no ano de 1909, quando ele notou que proteínas ao
serem submetidas a um Conceitos e aplicações
campo elétrico se moviam.
Percebendo isso, chegou à
conclusão de que seria
possível realizar a separação
dessas moléculas em
frações menores.
Mas, o que tomamos como
base atual para a
eletroforese das proteínas
vem do trabalho
desenvolvido pelo UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA
bioquímico sueco Arne CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Tiselius, em 1937. Por este Arne Tiselius BIOLOGIA MOLECULAR I
motivo, Tiselius ganhou o prêmio Nobel de Química

de 1948 devido às suas contribuições. O seu trabalho

falava sobre o fracionamento das proteínas séricas

através da eletroforese, que era feita à época com

equipamentos muito semelhantes a baterias de ATIVIDADE ELABORADA PELOS ALUNOS DO

automóveis. Como essas separações ocorriam em CURSO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS DA UFSC
meio líquido, ela recebeu o nome de eletroforese em PARA PRÁTICA PEDAGÓGICA COMO
fase líquida.
COMPONENTE CURRICULAR DA DISCIPLINA DE
BIOLOGIA MOLECULAR I, MINISTRADA PELO
DOCENTE ANDRÉ DE ÁVILA RAMOS

ANA CAROLINA CORRÊA

ERICK HILARIUS CAPITÂNIO
GUILHERME AUGUSTO CONSOLIN
Alga do grupo das Rodofíceas, popularmente GUSTAVO FERNANDES DE SOUZA
conhecidas como "Algas Vermelhas", usadas para JACÓ FERREIRA CANIBAL
extração de ágar

O que é?
A eletroforese é uma técnica usada para amplificar
e separar fragmentos, que podem ser desde
proteínas até moléculas carreadoras de informação
genética, como DNA e RNA. É muito comum ser
realizada para observar os resultados obtidos
através da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR),
usada para amplificar um trecho específico de DNA
in vitro.
A separação ocorre pelas diferenças de tamanho
das moléculas (que serão “selecionadas” pelos
poros do gel) e pela carga elétrica, através do
dipolo que será aplicado na cuba.
Quando imaginamos um gel de eletroforese, vem
na cabeça uma imagem semelhante a da capa,
contendo poços onde serão aplicadas as amostras.
Geralmente no 1º poço, colocamos, uma espécie de
marcador, chamado de “ladder”, escada, em inglês.
O lader serve como régua para podermos comparar
o resultado esperado com o resultado inespecífico.
Com isso, pode-se ter uma ideia do número de
bases no trecho de DNA.
Resultado Cuba com
polos negativo
e positivo
Componentes Aplicações
Para realizar a eletroforese, o principal componente Em biologia molecular, a eletroforese é usada em
que necessitamos é o famoso gel. O gel se trata de diversos processos. São exemplos:
uma substância gelatinosa que geralmente é feita de
agarose, um polissacarídeo bastante encontrado em Ciência forense: Com o objetivo de comparar o DNA
algas. Sua concentração varia muito a depender do presente num local de crime com suspeitos em
resultado pretendido. Imagine que o gel funciona potencial.
como uma peneira, possuindo poros que farão uma Genética: Ao se realizar testes de paternidade, para
certa seleção do que ficará retido e o que passará. O diferenciação de espécies ou linhagens e, também, na
mais comum é uma concentração de 1 a 3%, mas engenharia genética.
pode ser utilizada concentrações de até 0,3%, Microbiologia: Pode ser usada para detectar
quando se deseja que os poros sejam bem grandes, diferentes tipos de patógenos como vírus, bactérias e
permitindo a passagem de fragmentos maiores. fungos.
O gel também pode ser produzido com Bioquímica: Para se identificar a expressão de
poliacrilamida, o que permite maior sensibilidade e proteínas.
estabilidade ao gel, no entanto, é mais trabalhoso
sendo mais viável o uso do de ágar.
Outro componente indispensável é a cuba. Trata-se
de uma caixinha que dará suporte ao gel, possuindo
uma orientação vertical ou horizontal, onde estarão
os dipolos. Vale se atentar que o DNA possui carga
elétrica negativa e a corrente fluirá do polo negativo
para o positivo
A técnica também requer um tampão, um líquido
que cobrirá a cuba, garantindo que as moléculas
“corram” de maneira uniforme no gel e, obviamente,
Brometo de etídio
a amostra com um corante. Antigamente, as
eletroforeses dos produtos das PCRs eram realizadas
com o brometo de etídio, uma molécula que tem a
capacidade de se intercalar com o DNA produzindo Para uma visão mais aprofundada, leia este QR CODE
fluorescência, no entanto, como você deve imaginar,
ele não escolhe o DNA em que vai se intercalar,
podendo causar mutações e até câncer no
manipulador.
Arne Tiselius