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INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAO, CINCIA E

TECNOLOGIA DO RIO GRANDE DO NORTE

Campus Macau

Curso de Licenciatura em
Biologia
MICROBIOLOGIA
IFRN/Macau - Curso de Biologia - Microbiologia- Profa Llian Vieira (lilian.vieira@ifrn.edu.br)

FISIOLOGIA E
METABOLISMO
MICROBIANO

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Fisiologia Microbiana:
Nutrio e Crescimento
Nutrio Microbiana
Componentes necessrios s clulas
Meios de Cultura
Condies Ambientais
Crescimento Populacional
Ciclo de Crescimento
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NUTRIO
MICROBIANA

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NUTRIO MICROBIANA
Todos os organismos vivos compartilham
algumas necessidades nutricionais em comum:
carbono, nitrognio e gua.

Os elementos qumicos
principais
para
o
crescimento das clulas
incluem C, H, O, N, P e
S e so denominados
de macronutrientes.
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NUTRIO MICROBIANA
Cultivo in vitro: quando se conhece as
exigncias nutricionais .
Cultivo in vivo: quando exigncias
nutricionais especficas so desconhecidas.

Para o cultivo in vitro so utilizados meios


de cultura que simulam e at melhoram as
condies naturais.

O carbono um dos elementos mais


importantes
para
o
crescimento
microbiano todos requerem carbono.
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NUTRIO MICROBIANA
MACROnutrientes:
necessrios
em
grande
quantidade. Tem papel importante na estrutura e
metabolismo.
MICROnutrientes: quantidades mnimas. Funes
enzimticas e estruturais das biomolculas.
Uma clula tpica

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Componentes necessrios
clulas
s
Fonte
de Carbono
Compostos
heterotrficos):

orgnicos
(microrganismos
- Carboidratos
- Lipdeos
- Protenas

Deles se obtm energia e unidades bsicas


para o crescimento celular.
Utilizao
de
CO2
(microrganismos
autotrficos) a fonte de energia provm da luz.
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Componentes necessrios
s clulas
Fonte de Nitrognio
o elemento mais abundante depois do C,
cerca de 12%.

Molculas

orgnicas

(aminocidos,

protenas, etc.)
Molculas inorgnicas (NH3, NO3-, N2)
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Componentes necessrios
s
clulas

Hidrognio
Principal elemento dos compostos orgnicos e
de diversos inorgnicos (gua, sais e gases).
Funes do H:
Manuteno do pH;
Formao de ligaes de H entre molculas;
Serve como uma fonte de energia nas reaes
de oxi-reduo da respirao.
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Componentes necessrios
s clulas

Oxignio
Elemento comum encontrado nas molculas
biolgicas
(aminocidos,
nucleotdeos,
glicerdeos ...).
obtido a partir das protenas e gorduras.
Na forma de oxignio molecular (O 2),
requerido por muitos (aerbios)
processos de gerao de energia.

para

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os

Componentes necessrios
clulas
s
Outros
macronutrientes:
P
Snese de cidos nuclicos, ATP;
S
Estabilidade de aminocidos, componente de
vitaminas;
K
Atividade de enzimas;
Mg Estabilidade dos ribossomos;
Ca Estabilidade da parede celular;
Na Requerido por microrganismos marinhos;
Fe
Papel-chave na respirao, componente dos
citocromos e das protenas envolvidas no transporte de
eltrons.
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Componentes necessrios
clulas :
s
Micronutrientes
Traos dos seguintes METAIS so necessrios
na composio de um meio de cultura:
Zn, Cu, Mn, Co, Mo e B
Exercem funo estrutural em vrias enzimas
Nem sempre sua adio necessria.
Meios sintticos com compostos de alto
grau de pureza e gua ultra pura podem
apresentar deficincias desses elementos.
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MEIOS DE
CULTURA
Solues de nutrientes para promover o
crescimento de microrganismos.
No existe um meio de cultura universal, e
sim vrios tipos de meios para diversas
finalidades.
Para
obter
sucesso
no
cultivo
de
microrganismos necessrio o conhecimento
de suas exigncias nutricionais, para que os
nutrientes sejam fornecidos de forma e
proporo adequada.
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Como
determinar
uma
composio inicial para um meio
de
cultivo:
Passo
1: utilizar dados da composio elementar
Elemento

Composio
elementar mdia
(% do peso seco)

Bactria

Fungo

Carbono

52

51

hidrognio

Nitrognio

13

8,5

Fsforo

2,5

0,4-4,5

Enxofre

0,6

0,1-0,5

Potssio

2,5

0,2-2,5

Sdio

0,75

0,02-0,5

Clcio

0,55

0,1-1,4

Magnsio

0,25

0,1-0,5

Cloro

0,5

Ferro

0,1

0,15

Relao C:N mdia

4:1

6:1

Relao C:N:P:S

85:23:4:1

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MEIOS DE
CULTURA
Ex: Para
produzir 10 g
de clulas
bacterianas
so
necessrios
de 1,3 g
(13%) de N.

(% do peso seco)

Elemento

Bactria

Fungo

Carbono

52

51

hidrognio

Nitrognio

13

8,5

Fsforo

2,5

0,4-4,5

Enxofre

0,6

0,1-0,5

Potssio

2,5

0,2-2,5

Sdio

0,75

0,02-0,5

Clcio

0,55

0,1-1,4

Magnsio

0,25

0,1-0,5

Cloro

0,5

Ferro

0,1

0,15

Relao C:N mdia

4:1

6:1

Relao C:N:P:S

85:23:4:1

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MEIOS DE
CULTURA

10 g de clulas bacterianas

Com relao ao carbono considerar tambm frao


para energia e manuteno (heterotrficos)
Frao para biomassa: = 5,2 g de C ou 13 g de
glicose (40% de C)
Relao C:N = 5,2/1,3 = 4:1

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Como
determinar
uma
composio inicial para um meio
de
cultivo:
Passo 2: otimizao
Condies Ambientais
Temperatura;
Oxignio;
pH;
Radiao

eletromagntica;
Presso
atmosfrica,
hidrosttica
osmtica.
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Efeito da Temperatura no
Crescimento Microbiano

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Efeito do Oxignio no Crescimento


Microbiano
Meio
gelatinoso
com
indicador redox:
Rosa quando oxidado
Incolor quando reduzido

a) Aerbio
b) Anaerbio
c) Facultativo
d) Microaerfilo
e) Anaerbio aerotolerante
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CRESCIMENTO
MICROBIANO

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CRESCIMENTO MICROBIANO
Em Microbiologia crescimento geralmente o
aumento do nmero de clulas.
Na maioria dos procariotos
ocorre a fisso binria:
crescimento e diviso.
Escherichia Coli - 20 minutos
Pisolithus microcarpus 2,5d

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CRESCIMENTO MICROBIANO
O padro de crescimento o exponencial

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CRESCIMENTO MICROBIANO
Tratando-se
bactrias,
algas
unicelulares
e
leveduras
que
se
multiplicam por diviso binria, temos:
Expresso matemtica do crescimento
(Progresso geomtrica de razo 2)
1

16 32 ......... X

20 21 22 23 24 25 ......... 2n
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CRESCIMENTO MICROBIANO
A relao entre o nmero de clulas e de
geraes pode ser expressa em uma
srie de equaes matemticas:
Sendo a populao inicial = N0

1 gerao = 2N0
2 gerao = 2 x 2N0 = 22 x N0
3 gerao = 2 x 22N0 = 23N0
n gerao = 2nN0
Populao final (N) = N0 x 2n
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CRESCIMENTO MICROBIANO
Populao final (N) = N0 x 2n
Aplicando-se logaritmo na equao , tem-se
que:
logN = log N0 + nlog2
n = (log N - log N0)/log2
como log2 = 0,301, obtm-se:
Nmero de geraes (n) = 3,3 log (N/ N 0)

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CRESCIMENTO MICROBIANO
Tempo de gerao: tempo necessrio
para a diviso das clulas.
Depende da espcie e das condies de
crescimento

g = t/n
onde:
g = tempo de gerao
t = tempo de crescimento
n = nmero de geraes dentro de um
tempo t de crescimento.
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Exerccio
Sabendo-se de o tempo de gerao de E. coli de 20
minutos, partindo-se de uma nica clula quantas
clulas bacterianas sero obtidas aps 1 hora de
cultivo? E aps 2 horas de cultivo?

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O Ciclo de Crescimento
A fase exponencial reflete apenas uma
parte do ciclo de crescimento de uma
populao microbiana.
O crescimento de microrganismos em um
recipiente fechado (batelada) apresenta um
ciclo tpico com todas as fases de crescimento.

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O Ciclo de Crescimento

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O Ciclo de Crescimento
1) Fase Lag
Perodo de adaptao da cultura
Mudana de meio,
complexo enzimtico;

preparao

Reparao das clulas com danos.

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do

O ciclo de crescimento
2) Fase exponencial
Fase mais saudvel das clulas onde
todas esto se dividindo.
A
maioria
dos
microrganismos
unicelulares apresentam essa fase,
mas as velocidades de crescimento so
bastante variveis:
Procariticos

crescem
mais
rapidamente que os eucariticos.
Eucariticos
menores
crescem
mais rapidamente que os maiores.
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O ciclo de crescimento
3) Fase estacionria:
Num sistema fechado (tubo, frasco ou
biorreator) o crescimento exponencial no
pode ocorrer indefinidamente.
Ocorre a limitao por depleo de nutrientes
e acmulo de metablitos.
Diviso = morte crescimento lquido nulo
Ainda pode ocorrer: metabolismo energtico
e produo de metablitos secundrios
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O ciclo de crescimento
4) Fase de morte (declnio):
A manuteno de uma cultura no estado
estacionrio por longo tempo conduz as
clulas ao processo de morte.

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