ATIVIDADE CARDÍACA AVALIADA IN VIVO E IN VITRO EM

RATOS TRATADOS COM PROPILTIOURACIL (PTU)

Márcio Araújo de Almeida

Orientadora: Prof.ª Dra. Gessi Carvalho de Araújo

Coorientador: Prof. Dr. Wataro Nelson Ogawa
 1 INTRODUÇÃO

Hipotireoidismo

Alterações Manifestações
endócrinas e Alterações
Clínicas: fadiga
metabólicas Cardiovasculares:
muscular, lentidão
Crescente Problema
na mobilidade,
de Saúde Pública
mudanças na pele,
alterações
cardiovasculares.

(GRAIS; SOWERS, 2014)

1 INTRODUÇÃO

Propiltiouracil (PTU)

Tratar hipertireoidismo Induzir ao hipotireoidismo em

estudos experimentais

Novas perspectivas para

tratamento humano

(HAJJE et al., 2014)

2 PROBLEMA

As alterações cardiovasculares do
hipotireoidismo acometem milhares de pessoas
ao redor do mundo. Este trabalho tem como
ponto de partida compreender de que forma a
disfunção tireoidiana estaria envolvida na
atividade elétrica cardíaca em ratos.
3 HIPÓTESE
•Ohipotireoidismo, induzido por administração de
PTU em ratos, promove alterações em
parâmetros eletrofisiológicas do coração, tais
como FC, amplitude de onda P, complexo QRS,
Onda T e intervalos PR, QRS e QT obtidos e
mensurados em traçados de ECG, tanto in vivo
como in vitro (preparação de Langendorff).
4 JUSTIFICATIVA
A avaliação da atividade cardíaca a partir
de modelo experimental, fornecem valiosas
informações acerca da fisiopatologia
cardiovascular provocada pela disfunção
tireoidiana, os quais incidem nas alterações
de parâmetros eletrofisiológicos mensurados
pelo método Langendorff não antes
experimentadas no Estado.
5 OBJETIVOS
5.1 Geral

Estudar os efeitos do hipotireoidismo na

atividade elétrica cardíaca em ratos em
condições experimentais in vivo e in vitro.
5 OBJETIVOS

5.2 Específicos

Avaliar atividade cardíaca (ECG).

Avaliar atividade do coração (ECG)- Langendorff.

6 METODOLOGIA
Grupo controle = Aspartame por 4
10 ratos semanas

Grupo amostral =
20 ratos
Grupo Aspartame + PTU
experimental = 10 por 4 semanas
ratos

Em ambos os grupos: ECG in vivo e in vitro

Anestesia: Tiopental sódico - 50mg/kg
(FC; P,QRS,T, PR, QRS, QT)

FERREIRA et al.,2007
6 METODOLOGIA
ASPECTO MORFOLÓGICO DA GLÂNDULA TIREOIDE

GC ASPECTO ANATÔMICO NORMAL GE HIPERTROFIA DA TIREOIDE

Fonte: Autores (2018).

6 METODOLOGIA

No hipotireoidismo por indução com PTU os sinais

clínicos predominantes como redução do peso corporal,
redução da qualidade dos pelos com quedas e eriçamento,
redução da ingesta hídrica e o aumento do volume da
glândula tireoide são os sinais da presença do déficit dos
HTs (SARANDOL et al., 2005; CHEN et al., 2012; FERRER
et al., 2012; HAJJE et al.,2014; AKHONDALI et al. ,2015).
6 METODOLOGIA

As mudanças da atividade cardíaca em modelo

experimental de hipotireoidismo são comprovadas pela
avaliação do perfil do ECG com alterações significativas no
cronotropismo, inotropismo e dromotropismo cardíaco
sendo preditor do sinal da disfunção da tireoide
(MOTANHA, 2011; FERRER et. al.,2012; AKHONDALI et.
al. ,2015). 
6 METODOLOGIA
Protocolo in vivo ECG DeltaLife / Software DeltaVet
7

Fonte: Autores (2018). Adaptado de Christofoletti (2013).

 6 METODOLOGIA
PROTOCOLO IN VITRO - EQUIPAMENTO LANGENDORFF

Fonte: Liao; Podesser; Lim (2012, p.160).

Nota = A- Carbogênio; B-Tubo Dispersão; C-Reservatório; D- Linha Perfusão; E- Linha de

Pressão; G- Câmara de Conformidade; H-Balão; I-Eritrócitos; J- Oxigenador ; K- Filtragem;
6 METODOLOGIA
EQUIPAMENTO LANGERDORFF - OGAWA.

Fonte: Autores (2018).

6 METODOLOGIA
EQUIPAMENTO LANGERDORFF - OGAWA.

1. RECIPIENTE
2. TERMOSTATO
3. FRASCO DE
AERAÇÃO
4. APARELHO AQUARIO
5. FRASCO DE
PERFUSÃO
6. BOLSA COLETORA
RINGER
7. ELETROCARDIÓ-
GRAFO/NOTEBOOK
Fonte: Autores (2018).
6 METODOLOGIA
PREPARO DE LANGENDORFF - TORACOTOMIA

Fonte: Autores (2018). Adaptado de Bell; Mocanu; Yellon ( 2011).

6 METODOLOGIA
PREPARO DE LANGENDORFF - OGAWA – FRASCO DE
PERFUSÃO

Fonte: Autores (2018).

6 METODOLOGIA
PROTOCOLO IN VITRO

Coração Isolado ECG – Software DELTAVET 7

Fonte: Autores (2018).

6 METODOLOGIA
PROTOCOLO IN VITRO

Fonte: Autores (2018).

7 RESULTADOS
FREQUÊNCIA CARDÍACA (FC)

Intervalo RR = 132 ms, convertido para 0,132 s.

Então, FC = 1 / 0,132 = 7,575 x 60 s = 454,54 BPM.

Fonte: Autores. Software ECG – DeltaVet 7 – (2018).

NICOLAU et al. (2003). CHRISTOFOLETTI et al. (2013). PEZOLATO et al 2017.

7 RESULTADOS
AMPLITUDE ONDA P

Fonte: Autores. Software ECG – DeltaVet 7 – (2018).

NICOLAU et al. (2003). CHRISTOFOLETTI et al. (2013). PEZOLATO et al 2017.

 7 RESULTADOS
AMPLITUDE DO COMPLEXO QRS

Fonte: Autores. Software ECG – DeltaVet 7 – (2018).

NICOLAU et al. (2003). CHRISTOFOLETTI et al. (2013). PEZOLATO et al 2017.

7 RESULTADOS
AMPLITUDE ONDA T

Fonte: Autores. Software ECG – DeltaVet 7 – (2018).

NICOLAU et al. (2003). CHRISTOFOLETTI et al. (2013). PEZOLATO et al 2017.

 7 RESULTADOS
INTERVALO PR

Fonte: Autores. Software ECG – DeltaVet 7 – (2018).

NICOLAU et al. (2003). CHRISTOFOLETTI et al. (2013). PEZOLATO et al 2017.

7 RESULTADOS
INTERVALO QRS

Fonte: Autores. Software ECG – DeltaVet 7 – (2018).

NICOLAU et al. (2003). CHRISTOFOLETTI et al. (2013). PEZOLATO et al 2017.

7 RESULTADOS
INTERVALO QT

Fonte: Autores. Software ECG – DeltaVet 7 – (2018).

NICOLAU et al. (2003). CHRISTOFOLETTI et al. (2013). PEZOLATO et al 2017.

7 RESULTADOS
MÉDIA DE PARÂMETROS OBTIDOS DOS TRAÇADOS ECG IN VIVO

PARÂMETROS CONTROLE PTU

FC(BPM) 412,24 ± 24,84; 10 235,36 ± 13,63; 10 *
P(Mv) 0,15 ± 0,02; 10 0,15 ± 0,03; 10
QRS(Mv) 0,78 ± 0,14; 10 0,90 ± 0,36; 10
T(Mv) 0,18 ± 0,02; 10 0,44 ± 0,16;10
PR(Ms) 35,07 ± 1,70; 10 45,13 ± 1,96; 10 *
QRS(Ms) 48,16 ± 3,1; 10 55,93 ± 3,35; 10 *
QT(Ms) 90,26 ± 5,23; 10 186,70 ± 5,45; 10 *
Fonte: Autores (2018).
Nota: Parâmetros cardíacos (média ± desvio padrão; n) obtidos dos traçados ECG IN VIVO de
ratos controle e de tratados com PTU. Frequência cardíaca (FC), amplitudes das ondas P, QRS
e T e intervalos dos segmentos isoelétricos PR, QRS e QT.
(* P ≤ 0,05).
7 RESULTADOS
MÉDIA DE PARÂMETROS OBTIDOS DOS TRAÇADOS ECG IN VITRO

PARÂMETROS CONTROLE PTU

FC(BPM) 134,76 ± 13,06; 5 99,35 ± 18,21; 5 *
P(Mv) 0,12 ± 0,003; 5 0,08 ± 0,01; 5 *
QRS(Mv) 0,70 ± 0,57; 5 0,58 ± 0,38; 5
T(Mv) 0,14 ± 0,01; 5 0,26 ± 0,08; 5
PR(Ms) 27,68 ± 1,97; 5 49,65 ± 1,55; 5 *
QRS(Ms) 42,45 ± 1,7; 5 49,84 ± 5,01; 5 *
QT(Ms) 115,12 ± 8,1; 5 203,41 ± 13,94; 5 *
Fonte: Autores (2018).
Nota: Parâmetros cardíacos (média ± desvio padrão; n) obtidos dos traçados ECG IN VITRO
de ratos controle e de tratados com PTU. Frequência cardíaca (FC), amplitudes das ondas P,
QRS e T e intervalos dos segmentos isoelétricos PR, QRS e QT.
(* P ≤ 0,05).
 8 DISCUSSÃO
ELETROFISIOLOGIA - POTENCIAL DE AÇÃO RÁPIDO:
Miocárdio Atrial e Ventricular - Feixe de His e Fibras de Purkinje

Fase 1 - Ito Fase 2 - ICa,L

Fase 0 - INa Fase 3 - IKr IKs

Fase 4 - IK1

Fonte: CURI; ARAÚJO FILHO (2011, p.379).

8 DISCUSSÃO
ELETROFISIOLOGIA - POTENCIAL DE AÇÃO LENTO
Células Nodais do NSA e NAV
Fase 0 - I Ca , L

Fase 3 – Ikr IKs

Fase 4 – If ICa,T
Fonte: CURI; ARAÚJO FILHO (2011, p.379).
8 DISCUSSÃO

ALTERAÇÕES ELETROCARDIOGRÁFICAS NO HIPOTIROIDISMO

Dillmann (2002)

Biológico Nervoso Circulatório

8 DISCUSSÃO

BRADICARDIA
AUTORES RESULTADOS
Ohga et al., 2002 ↓ RyR ↑ PLB ↓ SERCA ↑ β-MHC
In Vitro (Rats) (L / A)
Chen et al., 2012 ↑ PTU (1,5) ↑ PTU (12) ↑ PTU (3) ↑ PTU (12)
In Vivo / In Vitro ↓ FC , FE ↓FC,FE, IC ↓ D.C. 20% ↓ D.C. 30%
(Rats) (Eco/A)
(T3) ↑ FC, FE ↓ VE ↑ ANGIOGENESE (T3)
Sarati et al., 2012 ↓FC ↑ RVP NO SERCA
In Vivo / In Vitro ↓PAM RyR ICa,L
(Rats) (Eco/A)
Ferrer et al., 2012 = FC = R-R ↑ DPA ↓ Ito
In Vivo / In Vitro
= P-R ↓ IF Na+/K+
(Rats) (Ecg /L / A)
8 DISCUSSÃO

AMPLITUDE ONDA P
AUTORES RESULTADOS
Panciera, 1994 ↓ ONDA P ↓ ONDA R ↓ SERCA
In Vivo (Dogs) ↓ Na/Ca
8 DISCUSSÃO

AMPLITUDE DO QRS

AUTORES RESULTADOS

Akhondali et al., 2015 ↓ QRS ↓ SERCA ↑ PLB

In Vivo ( Rats) (ECG)
PTU APELINA T4
Ono et al., 2016 ↓ QRS EDEMA ICC
In Vivo (Rabbit) (A / ECG)
SRIKALA, D.; KUMAR, K. Satish., ↓ QRS ↑ VE ↓ FE
2014 In Vivo (Dogs) ECG e ECO
8 DISCUSSÃO

AMPLITUDE ONDA T
AUTORES RESULTADOS
Alonso et al., 2015 ↓ ONDA T ↓ Ito ↑ ICa-L
In Vitro (Rats) (TSH / A) ↑ TSH ↑ DPA ↓ IK 1
24 h
8 DISCUSSÃO

INTERVALO PR
AUTORES RESULTADOS
Bouter et al., 2003 ↑ PR GE GC
In vitro (Rats) 42 ms (↑17%) 32 ms
↑P 32 ms (↑52,38%) 21 ms

↑ PBL ↑ Ica,L ↑ Na/Ca ↓ SERCA

Montanha; Lopes, 2011
In vivo (Dogs) (R) ↑ PR ↓ T3 ↓ AV
8 DISCUSSÃO

INTERVALO COMPLEXO QRS

AUTORES RESULTADOS
Venkatesh et al., 1991 = QRS = PR ↓ T4 ↑ TSH
In vivo (Dogs) (ECG) = FC = QT
Bosch et al., 1999 ↑ R-R ↓ IKS ↑ TSH
In vivo / In vitro (Pigs) ↑ QT
(ECG/ L) = PR =QRS
= Ito, K1
8 DISCUSSÃO
INTERVALO QT
AUTORES RESULTADOS
SUN et al.,2000 ↓ Ito ↑ DPA ↑ QT ↑T3 ↑IK1
In vitro (Langendorrf) (Rats) ↓ DPA ↑IKr,s
Bouter et. al., 2003 ↑ QT ↑ PLB ↑ Na/Ca ↓ SERCA
(Rats) In vitro GE-86ms (72%) / GC-50ms / ↑ ICa,L (60%)
Ferrer et al., 2012 ↑ QT ↑ DPA ↓ 50% Ito
In vivo / In vitro
(Langendorff) (Rats)
9 CONSIDERAÇÕES FINAIS

DESFECHO PRIMÁRIO

• ↑ Glândula Tireoide (PTU).

• ↓ HT ( ECG).
9 CONSIDERAÇÕES FINAIS

DESFECHOS SECUNDÁRIOS

• ↓ Cronotropismo

• = Inotropismo
LU, et al. , 2010 ↑ QRS ↓ Na ↓↓ Na/ PA /ISQ.
• ↓ Dromotropismo
(Rabbits / Drugs)
Antiarrítmicos Lidocaína (Ib) Flecainida (Ic)
In vitro

•AKAR,↑etMétodo
al. 2004
de Langendorff Cx43
(Dogs) In vitro ↑ QRS ↓ Conexinas ↑
Fibrose
10 REFERÊNCIAS
BIBLIOGRÁFICAS
ALONSO, H. et al. Thyroid stimulating hormone directly modulates cardiac electrical activity. Journal of Molecular and Cellular Cardiology, v.
89, p. 280–286, 2015.
 
BELL, R. M.; MOCANU, M. M.; YELLON, D. M. Retrograde heart perfusion: the Langendorff technique of isolated heart perfusion. Journal of
molecular and cellular cardiology, v. 50, n. 6, p. 940-950, 2011.
 
BOSCH, R. F. et al. Electrophysiological mechanisms by which hypothyroidism delays repolarization in guinea pig hearts. American Journal of
Physiology-Heart and Circulatory Physiology, v. 277, n. 1, p. H211-H220, 1999.

CHENG, S. et al. Preoperative ultrasonography assessment of vocal cord movement during thyroid and parathyroid surgery. World Journal of
Surgery, v. 36, n. 10, p. 2509-2515, 2012.
 
CHRISTOFOLETTI, D. C. et al. Eletrocardiografia: um método útil na seleção de animais de experimentação. Saúde em Revista, v. 13, n. 33, p. 39-
46, 2013.
FERRER, T. et al. Mechanisms responsible for the altered cardiac repolarization dispersion in experimental hypothyroidism. Acta Physiologica, v.
204, n. 4, p. 502-512, 2012
 
GRAIS, I. M.; SOWERS, J. R. Thyroid and the heart. The American Journal of Medicine, v. 127, n. 8, p. 691-698, 2014.
 
HAJJE, G. et al. Hypothyroidism and its rapid correction alter cardiac remodeling. PLoS One, v. 9, n. 10, p. e109753, oct, 2014.

LIAO, R.; PODESSER, B. K.; LIM, C. C. The continuing evolution of the Langendorff and ejecting murine heart: new advances in cardiac
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MONTANHA, F. P.; LOPES, A. P. S. Hipotireoidismo Canino-revisão. Revista Científica Eletrônica de Medicina Veterinária. v. 9, n. 17, p.
Fonte:http://faef. revista. inf. br/imagens_arquivos/arquivos_destaque/1ozIVPK2Cm5WlLx_2013-6-27-15-34-43. pdf, 2011.
10 REFERÊNCIAS
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OHGA, Y. et al. Cardiac dysfunction in terms of left ventricular mechanical work and energetics in hypothyroid rats. American Journal of
Physiology-Heart and Circulatory Physiology, v. 283, n. 2, p. H631-H641, 2002.

PANCIERA, D. L. An echocardiographic and electrocardiographic study of cardiovascular function in hypothyroid dogs. Journal of the American
Veterinary Medical Association, v. 205, n. 7, p. 996-1000, 1994.

PANTOS, C. et al. Propylthiouracil-induced hypothyroidism is associated with increased tolerance of the isolated rat heart to ischaemia-reperfusion.
Journal of Endocrinology, v. 178, n. 3, p. 427-435, 2003.
 
SARATI, L. I. et al. Hypothyroidism: age-related influence on cardiovascular nitric oxide system in rats. Metabolism-Clinical and Experimental, v.
61, n. 9, p. 1301-1311, 2012.
 
SCOTT-MONCRIEFF, J. C. R; GUPTILL-YORAN L. Hypothyroidism. In: ETTINGER S.J.; FELDMAN E.C.. Textbook of Veterinary Internal
Medicine. 5. ed. Philadelphia: WB Saunders, p. 1419-1429.

SUN, Z. Q.; OJAMAA, K.; COETZEE, W. A.; Artman, M.; Klein, I. Effects of thyroidhormone on action potential and repolarizing currents in rat
ventricular myocytes. American Journal of Physiology-Endocrinology and Metabolism. v. 278, n. 2, p.302-307, 2000.

VENKATESH, N. et al. Hypothyroidism renders protection against lethal ventricular arrhythmias in a conscious canine model of sudden death.
Journal of Cardiovascular Pharmacology, v. 18, n. 5, p. 703-710, 1991.