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PATULINA

Acadmicos: Amandha Prado Hannae Freitas Rafaella Xavier

Clarissa Lira Naiane Gomes Thieres Andriolle

INTRODUO
Micotoxinas y Mykes : Fungo. y Toxicum : Veneno ou toxina. As micotoxinas so metabolitos secundrios com elevada toxicidade. A contaminao de alimentos com

micotoxinas pode dever-se influncia de fatores ambientais e biolgicos.

PATULINA
A patulina uma micotoxina termoresistente tambm chamada clavicina, claviformina ou expansina. Aspergillus clavatus y Penicillium espansum y Byssochlamys nivea
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Apresenta estabilidade em cidos diludos e resistente temperatura de 125C na faixa de pH entre 3,5 e 5,5.

A patulina causa diversos efeitos txicos: teratognico e cancergeno.

Ocorrncia: mas y uvas y cerejas y peras y morangos y framboesas y pssegos


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Histrico

Histrico
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Aspergillus clavatus, Penicillium espansum e Byssochlamys nivea 1941 - ao como antibitico e posteriormente por suas propriedades fitotxicas e carcinognicas; 1953, estudos sobre o possvel uso teraputico para combater enfermidades humanas mas observou-se que esta micotoxina era txica para ser utilizada como agente antimicrobiano; 1961- carcinogenicidade em bovinos, sunos, coelhos e ratos; Distrbios respiratrios e motor.

y -

Efeito txico caracterizado por: distrbios respiratrio e motor, espasmos, asfixia, hemorragia no pulmo e crebro Alm disso, tem ao teratognica

Esta micotoxina tem sido detectada em frutas, sucos, vegetais e outros cereais mas a maior fonte de contaminao so as mas e produtos derivados da ma.

Exposio Patulina

Exposio Patulina

Empregada como indicador de qualidade nos frutos e produtos de ma (MOSS, 1996) Limite mximo permitido de at 50 g/L, recomendado pela Organizao Mundial de Sade (OUGH; CORISON, 1980) Se desenvolvem nas regies da fruta que sofreram danos por pragas ou ao mecnica, formando focos de apodrecimento Estudos no provam conclusivamente os efeitos da patulina na sade humana

O comrcio interno de suco de fruta em torno de 5 a 7 litros anuais por habitante Insignificante quando comparado com a Europa e os Estados Unidos, onde o consumo de sucos de fruta chega a 30 litros anuais por habitante Consumo dirio de suco de ma no Brasil por pessoa de 0,3 g (GEMS, 2003) Ingesto Diria Tolervel Provisria (PTDI) = 0,4 Qg/kg p.c./dia (JECFA, 1995) o segundo suco mais consumido no mundo

A atividade biolgica da patulina instvel em meio alcalino porm apresenta estabilidade em cidos diludos, resistente temperatura de 125C A Patulina est associada a danos no trato gastrointestinal, incluindo lceras e inflamao do estmago e intestino

Sintomas agudos podem incluir agitao, convulses, congesto pulmonar, edema, ulcerao, degenerao de clulas epiteliais e danos nos rins
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Toxicocintica e Toxicodinmica

Absoro
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Passagem atravs da membrana

Ingesto de alimentos contaminados

Ocorre no trato gastrointestinal

Fgado, rgos reprodutores e nos rins

Distribuio

So transportadas pelo sangue

Distribuem nos rgos, sistemas e todos os tecidos

Biotransformao
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Fgado o rgo mais lesado resultando numa srie de danos ao metabolismo das protenas, carboidratos e lipdeos.

Ncleo do hepatcito inibio da enzima RNA- polimerase, inibindo a sntese protica Mitocndria ocorre aumento permeabilidade, interrompendo o transporte de eltrons inibindo a respirao celular. No retculo endoplasmtico ocorre a degranulao com ruptura dos polissomos inibindo muitas funes metablicas, como sntese de protenas, induo de enzimas e interferindo na coagulao sangunea pela inibio de fatores.

Armazenamento
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Ocorre elevada concentrao dessa toxina:

Tecido Adiposo

Fgado

rgos reprodutores

Rins

Excreo
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Sete dias aps a ingesto da toxina ainda recuperada excretado cerca de 87%

Sendo 49% nas fezes


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36% na urina

1 a 2% pela via respiratria na forma de dixido de carbono

Toxicodinmica
Micotoxina

Membrana celular

DNA ou RNA

Reduo sntese protenas e metablitos

Reduo Ig ,enzimas, co-fatores, etc

Biossntese de patulina
1 acetil-Coenzima A e 3 malonil-Coenzima A
cido 6-metilsalicilico sintetase (6-MAS sintetase)

cido 6-metilsalicilico (6-MAS)


6-MAS descarboxilase

m-cresol
m-cresol hidrolase

lcool m-hidroxibenzil
lcool m-hidroxibenzil desidrogenase

gentisaldeido m-hidroxibenzaldehido lcool gentisil

Isopoxidona Filostina Neopatilina E-ascladiol Patulina

ANALISES CLNICAS TOXICOLGICAS

ANALISES CLNICAS TOXICOLGICAS


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Mtodos de deteco de patulina: Cromatografia em camada delgada (CCD) Cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE) Cromatografia gasosa (CG) Eletroforese capilar (EC).

1. 2. 3. 4.

Etapa de preparao de amostras:

1.

Extrao lquido-lquido (ELL): Partio da amostra entre duas imiscveis, orgnica e aquosa.

fases

2.

Extrao em fase slida (EFS): Separa amostras a serem analisadas usando uma fase slida e uma lquida

Cromatografia em camada delgada (CCD)


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Tipo adsoro Fase mvel: soluto Fase estacionria: slido altamente polar A distncia que cada um corre geralmente expressa em valor de Rf (fator de reteno).

Visualizao: 1. Mtodo no-destrutivo: utiliza lmpada de UV. 2. Mtodo destrutivo: utiliza um reagente apropriado que produz uma cor caracterstica.
y y

A anlise de cromatografia em camada delgada nos permite obter um perfil ("fingerprint") da amostra.

Aplicao na placa

Desenvolvimento: cuba

Visualizao

Revelao

Cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE ou HPLC)


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Fase mvel: lquida Fase estacionria: dividida Para ter um fluxo razovel, opera a presses elevadas Utiliza-se colunas metlicas e fase mvel pressurizada, obtida com o auxlio de bombas de alta presso Os detectores mais empregados so os fotmetros no UV e os espectrofotmetros UV/VIS

Cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE ou HPLC)

Instrumentao bsica do mtodo de HPLC

Cromatografia gasosa (CG)


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Principio bsico: tcnica de separao e anlise de misturas por interao dos seus componentes entre uma FASE ESTACIONRIA e uma FASE MVEL.

A amostra injetada e arrastada pela fase mvel atravs da coluna que contem a fase estacionaria, onde ocorre a separao da mistura. Aps serem separadas as amostrar vo para um detector que vai quantificar o material.

Instrumentalizao:

Caractersticas da fase mvel, ou gs de arraste:


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Inerte: apenas transporta a amostra pela coluna. Puro: isenta de impurezas que possam contaminar a amostra. Compatvel com o detector.

Caractersticas da fase estacionaria:


y y y y y y

Quimicamente inerte a amostra. Volatilidade baixa. Estabilidade trmica. Pouco viscosa. Pura. Caractersticas prximas das dos solutos a serem separados. Seletividade deve ter um bom solvente diferencial dos componentes da amostra. As FE mais usadas: silicones, poliglicis e polisteres.

Eletroforese Capilar
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Principio bsico: Transporte em soluo eletroltica de compostos carregados eletricamente sob a influncia de um campo eltrico, no qual a separao entre dois solutos ocorre de acordo com as diferenas entre suas mobidades eletroforticas. H diversos modos de separao: Cromatografia eletrocintica micelar (MEKC),Isotacoforese Capilar (CITP),Focalizao Isoeltrica Capilar (CIEF), Eletroforese Capilar em Gel (CGE), Eletrocromatografia Capilar (CEC), no entanto o mais utilizado o Eletroforese Capilar de Zona (CZE).

Instrumentalizao:

Na eletroforese de zona, a migrao das espcies ocorre pela combinao dos efeitos dos fluxos eletroosmtico e eletrofortico que so gerados quando o campo eltrico aplicado. Ao passar uma soluo alcalina atravs do capilar, adquire uma carga negativa. Uma camada de contra-ons formada prxima parede (eletroneutralidade) Dupla camada eltrica que possui uma camada compacta (fixa) e outra difusa (mvel).

O fluxo eletrofortico direcionado ao eletrodo de carga contrria ao analito. Todas as espcies presentes do analito sero direcionadas para o sistema de deteco pelo fluxo eletroosmtico. A separao: mobilidades inicas dos analitos = densidades de carga.

y y

Tempo de migrao. Introduo da amostra capilar: Hidrodinmica e eletrocintica possvel obter picos com alta definio (resoluo), pois os efeitos de alargamento dos picos so mnimos. no existe de fase estacionria diminuindo o efeito de alargamento, causado pela transferncia de massa entre as fases estacionria e mvel. O fluxo eletroosmtico gerado uniformemente ao longo de todo o capilar e migra de forma segmentada. A resoluo do capilar depende como em outras tcnicas cromatogrficas, do nmero de pratos tericos

Consideraes finais:
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Perigo inerente de contaminao pela toxina. Pesquisas quanto as caractersticas biolgicas e qumicas da patulina possibilitou o avano em mtodos de quantificao, preveno e tratamento. O estudo da patulina de grande interesse para a segurana alimentar.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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OBRIGADO!