ANÁLISE DO

LÍQUOR
- Cibelle L Almeida Cabral
- Patrícia Maziero Furlani

Farmacêuticas Bioquímicas do Laboratório do

HBAP.
OBJETIVO DA AULA
 Apresentar a análise do líquor num contexto
atualizado, de forma segura e precisa.
Nomenclatura
 Líquor
 LCR
 Líquido Cerebroespinal
 Líquido Cefalorraquiano
 Líquido Cefalorraquidiano
Sistema Nervoso Central (SNC)
 Encéfalo Cérebro
Cerebelo
Tronco (Medula Espinal)
MENINGES
 Dura-máter Paquimeninge

 Aracnóide

Leptomeninge
 Pia-máter
LÍQUOR
O líquido cefalorraquiano (LCR) é um líquido
límpido e incolor que circula no espaço
subaracnoideo ao redor do encéfalo e toda medula
espinal.
COMPOSIÇÃO
 99% água (“água de rocha“)
 d = 1,003 a 1,008 g/cm³
 Baixas concentrações de proteína, glicose, lactato.
VOLUME
 Adultos: cerca de 500 mL/dia
 Tempo médio de renovação: a cada 8 horas (3
vezes/dia).
 Volume total em adultos: 90 mL a 150 mL
 Volume total em recém-nascidos (RN): 10 mL a
60 mL.
FUNÇÕES PRINCIPAIS
 Proteção mecânica quando há aceleração e
desaceleração, absorção de impactos;
 Distribuição de nutrientes para o SNC e SNP;
 Remoção de metabólitos do SNC e SNP.
INDICAÇÕES PARA COLETA DO
LCR
 Processos infecciosos do SNC e seus envoltórios.
Ex: Meningites e encefalites
 Processos granulomatosos com imagem
inespecífica. Ex: Tumores, neurotuberculose e
neuromicoses
 Processos desmielinizantes. Ex: Esclerose múltipla
 Leucemias e linfomas. Ex: LLA
INDICAÇÕES PARA COLETA DO
LCR
 Imunodeficiências. Ex: HIV + Patologia associada
 Processos infecciosos com foco não identificado.
Ex: Crianças febris
 Hemorragia subaracnoidea (HSA). Ex:
Traumatismo e AVC
COLETA
 LOCAIS DE PUNÇÃO:

 Lombar
 Ventricular(DVE, DVP)
 Suboccipital
TUBOS DE COLETA
ORDEM DOS TUBOS DE
COLETA
1. Microbiologia
2. Biologia Molecular
3. Bioquímica/Imunologia
4. Citometria/Citologia
RECEBIMENTO DA AMOSTRA
Verificar:
 Dados do paciente (Nome, idade)
 Local da punção
 Hipótese diagnóstica
 Horário da coleta
 Horário de recebimento da amostra
 Houve acidente de punção?
PROCESSAMENTO DA
AMOSTRA
 Anotar volume total recebido

 Análise física antes da centrifugação – aspecto e cor

 Semeadura para cultura

 Contagem global – CÂMARA DE FUCHS-ROSENTHAL

 Centrifugação a baixa rotação (700 a 900 rpm) por 10 a 15

minutos.
PROCESSAMENTO DA
AMOSTRA
 Análise física após a centrifugação – aspecto e cor

 Separação do sobrenadante para análises

bioquímicas e imunológicas

 Utilização do sedimento para preparação e

coloração de lâmina para citologia e
bacterioscopia
TEMPO PARA ANÁLISE

TEMPERATURA REFRIGERAÇÃO
AMBIENTE

ATÉ 2H ATÉ 4H
MICROBIOLOGIA BIOQUÍMICA BIOQ/IMUNO
CITOLOGIA IMUNOLOGIA BIO MOL
ANÁLISE FÍSICA PRÉ E PÓS
CENTRIFUGAÇÃO
 COLORAÇÕES DO LÍQUOR:
-Incolor
-Eritrocrômico
-Xantocrômico
ANÁLISE FÍSICA PRÉ E PÓS
CENTRIFUGAÇÃO
 ASPECTOS DO LÍQUOR:
-Límpido
-Ligeiramente turvo
-Turvo
-Hemorrágico
A. INCOLOR/ LÍMPIDO
B. XANTOCRÔMICO/
LIGEITAMENTE TURVO
C. ERITROCRÔMICO/
HEMORRÁGICO
SEMEADURA PARA CULTURA
 Ágar Sangue
 Ágar Chocolate
 Ágar Macconkey
CITOLOGIA E CITOMETRIA
CONTAGEM GLOBAL DE
CÉLULAS
CÂMARA DE FUCHS-ROSENTHAL (PADRÃO
OURO)
Na Câmara de FUCHS-ROSENTHAL:
 Limpeza da câmara e lamínula;
 Depositar cerca de 20µL do líquor no retículo e observar ao
microscópio;
 Com a objetiva de 10 aumentos, focar o retículo visualizar os 16
quadrantes maiores;
 Com a objetiva de 40 aumentos e observar 256 quadrantes
menores;
 Efetuar a contagem das estruturas observadas e anotar: hemácias,
células nucleadas e tórulas (estruturas fúngicas);
 Dividir a contagem total de cada elemento por 3,2 (Fator de
conversão para µL e/ou mm³).

 ATENÇÃO: A PRESENÇA DE PARASITAS E BACTERIAS

DEVE SER APENAS RELATADA NO LAUDO. NÃO
DEVEM SER CONTADOS.
RETÍCULO
ÁREA FORA DO RETÍCULO
Relatar a presença de:
 Elementos fúngicos
 Grupamentos de células neoplásicas
 Parasitas
COÁGULO/FIBRINA
 Inviabiliza a contagem global e diferencial de
células
 As análises bioquímicas, imunológicas poderão ser
realizadas
 Viável para análise microbiológica biologia
molecular
 RELATAR PRESENÇA DE COÁGULO E
FIBRINA
AUTOMAÇÃO
 De 0 a 100 células nucleadas/ mm³ a automação
sem reprodutibilidade
 Contagem na Câmara de FUCHS-ROSENTHAL
DILUIÇÕES
 Alta celularidade (células nucleadas ou hemácias)
diluir utilizando-se Salina (NaCl 0,9%);
 Multiplica-se o valor final pelo fator de diluição
escolhido (ex. 1:2, 1:4, 1:10, 1:20,...);
 Dividir a contagem total de cada elemento por 3,2
(Fator de conversão para µL e/ou mm³).
DILUIÇÃO COM TURK
 ALTO NÚMERO DE HEMÁCIAS dificultando a
contagem das células nucleadas
 Dificuldade na diferenciação de hemácias e células
nucleadas
 Ex: Diluição 1:5 (10 µL do líquor +40 µL do
líquido de Turk)
 Multiplicar o valor obtido pelo fator de diluição
escolhido
 Dividir a contagem total de cada elemento por 3,2
(Fator de conversão para µL e/ou mm³).
CENTRIFUGAÇÃO
 Baixarotação: 700 a 900 rpm
 Tempo: 10 a 15 minutos.
CONFECÇÃO DAS LÂMINAS
PARA ANÁLISE CITOLÓGICA
 Após a centrifugação prévia da amostra de LÍQUOR a baixa
rotação (700 a 900 rpm) por 10 a 15 minutos, deve-se proceder o
preparo das lâminas para análise citológica.

 Retira-se o sobrenadante, pipeta-se cerca de 20 a 50 µL do

sedimento e segue-se para CITOCENTRIFUGAÇÃO (PADRÃO
OURO)

 No bloco da citocentrífuga devidamente montado, acrescenta-se

ao volume de sedimento da centrifugação anterior igual volume
de ALBUMINA 22% e citocentrifuga-se de 700 a 900 rpm por 10
a 15 minutos;
CONFECÇÃO DAS LÂMINAS
PARA ANÁLISE CITOLÓGICA
Bloco da Citocentrífuga
Montagem
CONFECÇÃO DAS LÂMINAS
PARA ANÁLISE CITOLÓGICA
 Após preparada a lâmina na citocentrífuga, deixa-
se secar naturalmente a temperatura ambiente.
Não utilizar estufa ou outros meios de secagem
rápida.

 Realizar coloração pela técnica de May-Grunwald-

Giemsa
COLORAÇÃO
 Para a coloração de May-Grunwald-Giemsa:
-Cobrir a lâmina com corante de May-Grunwald e
deixar atuar por 2 minutos;
-Acrescentar 20 gotas (1mL) de água destilada e
aguardar por 1 minuto;
-Escorrer sem lavar;
-Cobrir com solução de Giemsa diluída (3 gotas de
Giemsa para cada 2 mL de água destilada) aguardar 7 minutos;
-Lavar com água destilada e deixar secar naturalmente
em posição vertical.
ANÁLISE CITOLÓGICA
 Realizar citologia diferencial ao microscópio.
 ATENÇÃO: Na pesquisa de blastos e células
neoplásicas deve-se concentrar todo volume de
material disponível (por centrifugação e
citocentrifugação) em qualquer contagem celular
global (mesmo se a contagem for ZERO).
ANÁLISE CITOLÓGICA
Poderão ser encontrados:

 Citologia diferencial: linfócitos, monócitos,

neutrófilos, eosinófilos, basófilos, plasmócitos,
macrófagos, eritroblastos e células de revestimento;

 Citologia oncótica: células de tumores sólidos (células

neoplásicas) e células oncohematológicas (blastos).
Monócitos e Linfócitos
Neutrófilos
Eosinófilos
Plasmócitos
Macrófago
Macrófagos com hemácias íntegras
Macrófagos com grânulos de
hemossiderina
Macrófagos com cristais de
hematoidina
Células ependimárias
ANÁLISE CITOLÓGICA
 Terminologias não utilizadas na citologia de
líquor:
- Desvio a esquerda
- Vacuolização citoplasmática
- Granulações tóxicas citoplasmáticas
- Linfócitos atípicos ou reacionais
- Células atípicas
ANÁLISE CITOLÓGICA –
VALORES DE REFERENCIA
 CONTAGEM GLOBAL DE CÉLULAS
NUCLEADAS:
• Punção lombar:
- Adultos: 00 a 04/mm³
- Pré maturos: 00 a 15/mm³
- RNs: 00 a 10/mm³
- 03 meses a 15 anos: 00 a 05/mm³
• Punção ventricular: 00 a 01/mm³
• Punção suboccipital: 00 a 03/mm³
ANÁLISE CITOLÓGICA –
VALORES DE REFERENCIA
 Hemácias:

-Adultos: 00/mm³
-RNs: até 500/mm³

 Tórulas: 00/mm³
ANÁLISE CITOLÓGICA –
VALORES DE REFERÊNCIA
 Contagem celular diferencial:
• Linfócitos: 70% a 90%
• Monócitos: 10% a 30%

OBS: NUNCA LIBERAR PERFIL DE

LINFOMONONUCLEARES E
POLIMORFONUCLEARES
Monócitos e Linfócitos
Pesquisa de Fungos
 Sensibilidade de 50%
Neurossífilis
VDRL
 REAGENTE ou NÃO REAGENTE
 Resultado NÃO REAGENTE não descarta a
neurossífilis, pois a sensibilidade é de apenas 40%
 Não devem ser usadas amostras de líquor com
hemácias, hemolisadas e/ou com coágulos
ANÁLISES BIOQUÍMICAS
GLICORRAQUIA
 Resultado:______mg/dL

 Relação GLICORRAQUIA/GLICEMIA: ≤
0,50 sugestivo de infecção ou neoplasia

 Referência: 0,51 a 0,71

GLICORRAQUIA
Interpretação:
 A redução da GLICORRAQUIA no SNC está
relacionada a um quadro de infecção ou infiltração
neoplásica.

 A relação GLICORRAQUIA/GLICEMIA pode

otimizar a avaliação do quadro agudo suspeito.
PROTEINORRAQUIA
 Resultado:______mg/dL

 Referência:
- PUNÇÃO VENTRICULAR: ATÉ 25 mg/dL
- PUNÇÃO SUBOCCIPITAL: ATÉ 30 mg/dL
- PUNÇÃO LOMBAR:
* PREMATUROS: ATÉ 250 mg/dL
* < 7 DIAS: ATÉ 120 mg/dL
* 2 A 4 SEMANAS: ATÉ 80 mg/dL
* 2 MESES: ATÉ 60 mg/dL
* 3 MESES: ATÉ 50 mg/dL
* 4 A 6 MESES: ATÉ 40 mg/dL
* ADULTOS: ATÉ 40 mg/dL
PROTEINORRAQUIA

Interpretação:
 O aumento da proteinorraquia, não fisiológica
pela idade, está associada a quebra da Barreira
Hemato Liquórica (BHL), sendo as principais
causas: infecções, sangramentos, neoplasias ou
quadros de inflamação.
LACTATORRAQUIA
 Resultado:______mg/dL
 Referência:

- 0 a 15 anos: 9,9 a 16,2 mg/dL

- 16 a 50 anos: 13,5 a 18,9 mg/dL
- > 50 anos: 15,3 a 23,4 mg/dl
 Método: Colorimétrico-enzimático
LACTATORRAQUIA
 Interpretação: O ácido lático no SNC está
relacionado a um déficit de oxigênio na circulação
cerebral.
 A determinação do lactato pode ser utilizado para
estabelecer diagnóstico diferencial entre meningites
bacterianas (aumentado) e virais (normal).
 Nos processos que levam a hipóxia cerebral, o
ácido lático se mostra um indicador sensível e sua
concentração apresenta-se elevada.
CLORORRAQUIA
 Resultado:______mEq/L

-Referência: 118 a 132 mEq/L

 Interpretação:Segundo a literatura é um marcador

para neurotuberculose.
EXAMES
COMPLEMENTARES
 BAAR (Ziehl-Neelsen)
 LÁTEX para pesquisa de antígenos fúngicos e
bacterianos
 Reibergrama – pesquisa de anticorpos
 Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) –
Filmarray e Genexpert
 Imunohistoquímica
 Imunofenotipagem
ESQUEMA PRÁTICO
MENINGITE BACTERIANA
 Anamnese: quadro agudo (rápida evolução)
 Quimiocitológico: geralmente turvo, perfil
neutrofílico, podendo chegar a 100%
• Glicorraquia: diminuída (< 5mg/dL)
• Proteinorraquia: aumentada (> 100 mg/dL)
• Clororraquia: normal
• Lactatorraquia: aumentado (> 20mg/dL)
MENINGITE BACTERIANA
 Culturas em meios específicos: positivas (60 a
90% das amostras), considerar negativa após 96
horas
 Látex: pesquisa de antígenos
 Bacterioscopia: depende da concentração do
agente e do método empregado (60 a 80%)
“Portanto, nem o que planta nem o
que rega são alguma coisa, mas
Deus que faz crescer”
1 Coríntios 3:7

MUITO OBRIGADA