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2. RECURSOS ADMINISTRATIVOS
HEMATOLOGIA E
IMUNOLOGIA
MICROBIOLOGIA BIOQUÍMICA
INICIO COM
INTRODUÇÃO
TEÓRICA EM
BIOSSEGURANÇA
UROANÁLISE COLETA
PARASITOLOGIA
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3. RECURSOS TÉCNICOS
HEMATOLOGIA / IMUNOLOGIA
PARASITOLOGIA / MICROBIOLOGIA
UROANÁLISE
BIOQUÍMICA
COLETA
3.2.1 Hematologia
CONTAGEM DE RETICULÓCITOS:
DOSAGEM DE HEMOGLOBINA:
HEMATÓCRITO:
CONTAGEM DE LEUCÓCITOS:
Consiste na determinação de leucócitos por mm° de sangue total. Estas são células
incolores do sangue circulante, e seus precursores no tecido hematopoiético.
ÍNDICES HEMATIMETRICOS:
VCM:
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É volume corpuscular médio. Avalia o tamanho médio dos glóbulos vermelhos (GV)
HCM:
CHCM:
CONTAGEM DE PLAQUETAS:
TIPAGEM SANGUÍNEA:
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3.2.2 Microbiologia
COLORAÇÃO GRAM:
O meio de Agar sangue, usando uma base rica como abaixo descrita, oferece ótimas
condições de crescimento a maioria dos microrganismos. A conservação dos eritrócitos
íntegros a formação de halos de hemólise nítidos, uteis para diferenciação de Streptococcus
spp. e Staphylococcus spp. Usado para isolamento e quantificação de microrganismos
presentes em amostras de urina. A deficiência de eletrólitos inibe o véu de cepas de
Proteus.
Agar padronizado por Kirby e Bauer e pelo NCCLS que oferece condições de crescimento
das principais bactérias. Meio utilizado para a realização do teste de avaliação da
resistência aos antimicrobianos pelos métodos de difusão em disco e E-test para
enterobactérias, não fermentadores, Staphylococcus. Enterococcus sp.
Ágar padronizado por Kirby e Bauer e pelo NCCLS que oferece condições de crescimento
das principais bactérias. Meio utilizado para a realização do teste de avaliação da
resistência aos antimicrobianos pelos métodos de difusão em disco e E-test de cepas de
Estreptococcos pneumoniae e estreptococos beta-hemoliticos dos grupos A, B, C e G
conforme intruções do NCCLS.
3.2.3 Bioquímica
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A determinação das proteínas totais em amostras de sangue e outros líquidos biológicos é
útil para avaliar o estado nutricional e as alterações proteicas nas doenças. É utilizado como
base na realização do exame o espectrofotómetro para analisar a absorbância, realizar
cálculos, e exige muita precisão em sua execução, pois a quantidade de amostras e
reagentes pode alterar o mínimo de resultado. Tem como finalidade o sistema para
determinação colorimétrica das proteínas totais em amostras de sangue e líquidos pleural,
sinovial e ascético por reação de ponto final.
3.2.4 Uroanálise
URINA 24h:
URINA TIPO I
Exame Físico-químico
Realizada através de tiras reativas (reagentes) contendo seguintes áreas reagentes: pH,
proteínas, glicose, cetona, sangue, bilirrubina, urobilinogénio, nitrito, leucócitos e densidade.
Exame microscópico
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À maneira pela qual o exame microscópico é realizado tem que ser consistente incluindo a
observação de no mínimo dez campos em menor e maior aumento (100 é 400x). A
observação em menor aumento tem por objetivo avaliar a disposição dos elementos, a
composição geral do sedimento e a presença ou não de cilindros. A identificação e
contagem de todos os elementos presentes são realizadas em aumento de 400x.
3.2.5 Imunologia
TESTE DE HIV:
Por fase sólida, é uma técnica rápida de imunologia que possui a forma de um pente com 12
dentes, onde cada um possui uma área com anticorpos anti-imunoglobina humana para o
controle da reação, uma área com anticorpos HIV-1 e uma com antigenos HIV-2. O dente é
colocado em um recipiente que contém a amostra. As imunoglobulinas da amostra dos
exames falso negativo em teste de gravidez. Após colhida, a amostra deve ser entregue ao
laboratório e ser analisada de 1 à 2 horas. No exame macroscópico é observado o volume,
aspecto e odor. No físico-químico é utilizado as teias reagentes, onde analisamos pH,
proteína, glicose, cetona, sangue, bilirrubina, urobilinogênio, nitrito, leucócitos e densidade.
No microscópio é feito a observação de no minimo 10 campos de menor e maior aumento. A
identificação é contagem de todos os elementos presentes.
HCG Latex é um leste (método direto) qualitativo para detecção de gonadotrofina conónica
(hCG) na urina. O hCG presente na amostra de urina não diluída reage imunologicamente
com anticorpos monocionais anti-hCG presos às partículas de látex. A reação positiva é
indicada através da visível aglutinação das partículas de látex na lâmina utilizada.
FATOR REUMATÓIDE
O Látex FR é um teste bastante sensível, que utiliza partículas de látex revestidas com IGG
humana altamente purificada, que quando misturadas cor soro de pacientes contendo
fatores reumatoides ocorre a indicação de positivo através da aglutinação.
SÍFILIS-VDRL
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constituída de lecitina, colesterol e cardiol pina e tem semelhança imunológica com os
antígenos do Treponema pallidum.
PROTEÍNA C REATIVA
O teste baseia-se na aglutinação das partículas de látex sensibilizadas com anticorpos anti-
PCR humana (antígeno), quando misturadas com soro de pacientes contendo uma
concentração de Proteina C Reativa (PCR) igual ou superior a 6mg/L, que é uma proteina
de fase aguda.
ALO (Antiestreptolisina)
3.2.6 Coleta
VENOPUNÇÃO:
Pode ser coletada em seringa e agulha descartável, ou com sistema a vácuo e coleta
múltipla. Os tubos utilizados são identificados como: roxo (anticoagulante EDTA), amarelo
(separado com ativador de coágulo), azul (citrato de sódio), vermelho (siliconado sem
anticoagulante), e cinza (fluoreto de sódio + EDTA). Na coleta o paciente deve estar em
condições de mobilidade normais, sentado confortavelmente com descanso para braço, o
coletador deve higienizar os braços, colocar luvas, identificar os tubos e encaixar a agulha
na seringa com o auxílio de uma pinça inspecionar o ponto da agulha e mover o embolo da
seringa. Se a coleta for feita a vácuo, deve-se rosquear a agulha no suporte com o auxílio
de uma pinça, inspecionar as vias cuidadosamente e verificar o mais adequado para
punção. Fazer a assepsia do local e puncionar a via.
3.2.7 Coleta
MÉTODO DE HOFFMAN:
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Para pesquisadores de ovos e larvas de helmintos, deve-se fazer a homogeneização das
fezes com uma pequena quantidade de amostra e agua em um recipiente pequeno com o
auxílio de uma espátula descartável para ocorrer suspensão, depois deve-se peneirar a
amostra homogeneizada com uma peneira descartável diretamente em um cálice e
adicionar água, e deixar em repouso de 2 à 24h. Com o auxílio de uma pipeta descartável, é
retirada uma pequena porção da amostra e depositada em uma lâmina, onde será analisada
no microscópio depois de adicionar uma gota de Lugol e lamínula.
METODO DE FAUST:
Para pequenos protozoários e ovos de helmintos, utiliza-se centrifugação. Deve-se diluir 10g
da amostra de fezes em 200ml de água, e filtrá-la em um cálice, depois colocar em um tubo
com tampa e centrifugar a 2500rpm por 2 minutos e descartar o sobrenadante, adicionar 2
ou 3ml de sulfato de zinco 33% no sedimento, tampar o tubo e agitar até suspender o
sedimento e centrifugar a 2500rpm novamente. Com o auxílio de uma alça, deve-se pegar a
camada superficial e depositar em uma lâmina adicionando Lugol e lâmina para depois
observar em microscópio.
MÉTODO DE BAERMANN-MORAES:
MÉTODOS DE RICHIE:
MÉTODO DE WILLIS:
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empregadas fezes preservadas. É substituído em grandes vantagens, pelos outros métodos
de rotina (sedimentação e Ritchie).
A presença de sangue oculto nas fezes geralmente é recomendada anualmente a partir dos
40 anos de idade, em associação ao exame de toque retal, e baseia-se na observação de
que pequenos sangramentos de tumores do cólon podem causar perda crônica de sangue
(em alguns casos provocando anemia por deficiência de ferro), sendo, portanto, bastante útil
como método de triagem do carcinoma colorretal. Pode ser derivado também do trato
gastrointestinal alto, bem como do intestino delgado e do cólon.
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4. GARANTIA DA QUALIDADE
Cuidados com o paciente: caso haja contato com o paciente, sempre tratar com
cordialidade e respeito, ouvindo atentamente suas queixas e proporcionando o
suporte necessário.
Cuidados com a amostra: cautela no manuseio de amostras, sempre utilizar EPIS
(luvas, jaleco, máscara, etc).
Possíveis riscos para o profissional: riscos físicos, biológicos, ergonômicos,
mecânicos e químicos. Comparação da eficiência e possíveis erros nos exames
manuais para automatizados: atentar-se aos calibradores e pipetagem para evitar
erros analíticos.
Durante a rotina, deve-se manter atenção ao roteiro tendo-o sempre próximo a você.
Pode ser efetuada marcação com caneta sob cada item realizado do experimento de forma
a não se perder durante a execução. Ler sempre o roteiro antes de iniciar a prática e mesmo
antes das explicações do supervisor/professor.
Os EPIS:
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- Sempre identificar o conteúdo presente nos frascos ou tubos utilizados no
experimento com caneta para vidros. Facilitando seu descarte adequado
- Utilizar a capela sempre quando manipular algum reagente ou solvente que libere
vapores.
Deve ser identificado o nome do funcionário que efetuou a coleta ou que recebeu a amostra
de forma a garantir rastreabilidade. A amostra de paciente deve ser transportada e
preservada em recipiente isotérmico, higienizável, impermeável, garantindo a sua
estabilidade desde a coleta até a realização do exame, identificado com a simbologia de
risco biológico, com os dizeres "Espécimes para Diagnóstico" e com nome do laboratório
responsável pelo envio. As cópias dos laudos de análises bem como dados brutos devem
ser arquivados pelo prazo de 5 anos. O laboratório deve garantir a recuperação e
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disponibilidade de seus registros críticos, de modo a permitir a rastreabilidade do laudo
liberado.
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5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Disponível em https:/lbvsms.saude.gov.br/bys/saudelegis/anvisa/2005/res0302_13_10_2005
Disponível em https:/#kasvi.com.br/tubos-de-coleta-vacuo-analise-sanque-cores-beneficios
https:/lautoclac.com.br/blog/setores-tecnicos-do-laboratorio-de-analises-clinicas. Último
acesso em 28 de abril de 2022
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