UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MATO GROSSO DO SUL UNIDADE UNIVERSITRIA DE DOURADOS QUMICA INDUSTRIAL

RELATRIO DE QUMICA ORGNICA EXPERIMENTAL Cromatografia m Co!"#a

E$"i% & 'a(io ) #to Gar*ia S+rgio Mat ", Ti#o*o 'i!-o Vi#i*i", O!i. ira Prof ,,or& Car!o, E/"ar/o P r ira

Do"ra/o, 0 MS
1231

34 I#tro/"56o
At meados do sculo XX, as separaes analticas eram, em grande parte, realizadas usando mtodos clssicos como a precipitao, destilao e extrao. Hoje contudo, as separaes analticas so mais comumente feitas por cromatografia e eletroforese, particularmente em amostras complexas e componentes"". A #romatografia permite a separao, identificao e determinao de di$ersos componentes muito semel!antes de misturas complexas. %uitas dessas separaes so imposs$eis por outros meios"". #romatografia uma tcnica de separao especialmente ade uada para ilustrar conceitos de interaes intermoleculares, polaridade e propriedades de funes org&nicas com uma a'ordagem ilustrati$a e rele$ante(. )ma das tcnicas mais sens$eis de separao de misturas, a cromatografia se destaca entre as demais tcnicas por ser muito 'arata dentre muitas tcnicas e pode fornecer informaes ualitati$as e uantitati$as, sendo amplamente utilizada em la'orat*rios forenses, para comparar amostras de fluidos, por produtores de alimentos ue necessitam testar a ualidade dos produtos e, em %arte, para 'uscar e$id+ncias de $ida ". ,odas as tcnicas de separao utilizam diferenas muito pe uenas, nas foras intermoleculares para separar compostos". -ntretanto, nen!um mtodo de separao to poderoso e de aplicao to generalizada como a cromatografia. )m mtodo empregado de forma ampla e ue permite a separao, identificao e determinao de componentes umicos em sistemas complexos.. / termo cromatografia e difcil de ser definido rigorosamente por ue o nome tem sido aplicado a di$ersos sistemas e tcnicas. ,odos esses mtodos, contudo, apresentam em comum o uso de uma fase estacionria e de uma fase m*$el.. A direcionalidade desse tra'al!o a cromatografia em papel 0#12. ,rate3se de uma tcnica simples para a anlise de amostras em pe uenas uantidades, aplicada principalmente na separao e identificao de compostos polares, tais como aucares, anti'i*ticos !idrossol4$eis, aminocidos, pigmentos e ons metlicos(. A cromatografia em camada delgada 0##52 uma tcnica de adsoro l uido6s*lido. 7esse caso, a separao se d pela diferena de afinidade dos componentes de uma mistura pela fase estacionria8. ue conten!am muitos

14 O(7 ti.o
#ompreender o estudo so're a cromatografia em coluna.

84 Mat riai, R ag #t ,
9ureta: ;lica 0;i/(2: <gua destilada: 9ureta: 9 uer: Algodo: %arcador de $idraria: #apela: -sptula metlica: 9asto de $idro: 9alana analtica:

1laca de 1etri: 1ipeta de 1asteur: =ol!a: ;uporte uni$ersal <cido Actico 0glacial2 Acetato de -tila
0#H.#//#H(#H.2:

Alaranjado de %etila: >ermel!o de %etila: >erde de %ala uita: 5iclorometano:

94 Pro* /im #to E:% rim #ta!

4.1 Empacotamento da coluna (adaptada em uma bureta) ". 7o empacotamento da coluna com ?g de slica s*lida ue foi dissol$ida com diclorometano at se o'ter uma pasta fluida, agitando3se com um 'asto de

$idro e adicionado3se sol$ente, at atingir malea'ilidade suficiente para poder ser manejada e introduzida na coluna. (. registro. .. Adicionou3se a pasta fluida com o auxlio do 'asto de $idro a 'ureta, deixando3se escorrer pela parede da coluna, tomando os cuidados necessrio para ue no se formassem 'ol!as de ar, nem mesmo a slica se cristalizasse no interior da coluna. @. / n$el de sol$ente ue foi utilizado para adicionar a slica precisou ser ajustado a'rindo o registro da 'ureta at atingir o n$el de aproximadamente " cm acima do n$el da slica, apresentou o n$el de .A mB na graduao da 'ureta, a slica apresentou o n$el de aproximadamente .? mB. 4.2 Separao dos analitos ". / analito foi preparado misturando3se os indicadores, alaranjado de metila, $ermel!o de metila e $erde de mala uita, dissol$endo3se os tr+s com diclorometano. -m seguida foi adicionado com o auxlio de uma pipeta de 1asteur, . mB da mistura pre$iamente preparada. (. .. 5urante a adsoro pela coluna foi sendo adicionado diclorometano at a eluio pela fase estacionria com a adio de sol$ente no ser mais eficiente. Coi preparado um segundo sol$ente com uma mistura de "D" de acetato de etila e cido actico, ue foi eluido pela coluna, em su'stituio do sol$ente anterior. Adicionando3se um c!umao de algodo na parte inferior da 'ureta antes do registro de escoamento para impedir a passagem de slica para o

;4 R ,"!ta/o, Di,*",,6o
5.1 Preparao da coluna 1rimeiramente para ue fosse poss$el o empacotamento da coluna com a slica s*lida, foi dissol$ida ?,"E.g da mesma em um ' uer de FE mB utilizando diclorometano at se o'ter uma pasta fluida, agitando3se com um 'asto de $idro e adicionado3se sol$ente, at atingir malea'ilidade suficiente para poder ser manejada e introduzida na coluna.

Coi utilizado como coluna cromatogrfica uma 'ureta graduada, de FE mB, adicionando3se um c!umao de algodo na parte inferior da 'ureta antes do registro de escoamento, logo acima do algodo adicionou3se a pasta fluida com o auxlio do 'asto de $idro a 'ureta, deixando3se escorrer pela parede da coluna, tomando os cuidados necessrio para ue no se formassem 'ol!as de ar, nem mesmo a slica se cristalizasse no interior da coluna. #omo foi preciso adio de 'astante sol$ente at o acondicionamento ideal da slica no interior da 'ureta, o n$el da mesma precisou ser ajustado at atingir o n$el de aproximadamente " cm acima do n$el da slica, o n$el do sol$ente foi de .A mB na graduao da 'ureta, as ?g de slica ap*s o acondicionamento no interior da 'ureta apresentou o n$el de aproximadamente .? mB.

'ig"ra 3 Cromatografia m Co!"#a ConteD !ttpDGGtoxicoanalitica.Hordpress.comG

5.2 Separao dos analitos A preparao dos analitos foi procedida com adio de tr+s su'st&ncias diferentes, todas tipos distintos de indicadores, alaranjado de metila, $ermel!o de metila e $erde de mala uita, dissol$idas em diclorometano compondo um analito. -m seguida,

ap*s preparao do mesmo, foi adicionado I 'ureta com o auxlio de uma pipeta de 1asteur, uma alcota de aproximadamente . mB dessa soluo. Jmediatamente ao ser adicionado o analito na coluna cromatogrfica pKde3se o'ser$ar o incio da separao, apresentando faixas com diferentes cores, num primeiro momento eram duas cores, $erde escuro em cima, $erde claro em 'aixo e ao se eluir diclorometano pela coluna, as faixas de cores foram se desdo'rando em outras, apresentando diferentes $elocidades de eluio. As cores apresentadas uando o analito atingiu toda a extenso de slica de cima para 'aixo foi, rosa, laranja, $erde, azul, $ermel!o e amarelo. A slica possui polaridade, portanto su'st&ncias apolares iro eluir com maior facilidade pela fase estacionria 0slica2. / $erde de mala uita um sol$ente org&nico de C*rmula 3 # (?H.@7(/@;: alaranjado de metila sol$ente org&nico de f*rmula 3 #"@H"@7./.;: $ermel!o de metila 3 #"FH"F7./( tam'm um sol$ente org&nico, cada um dos indicadores possui sua polaridade especfica, o ue apresentou maior interao com a fase estacionria composta por slica ue polar, ficou retido no interior da coluna, j o indicador ue menos interagiu com a slica foi eluido com o diclorometano por gra$idade, sendo coletado em um ' uer. A eluio do composto retido na slica por interao, foi poss$el com a troca do sol$ente diclorometano por uma mistura de "D" de acetato de etila e cido actico glacial, com superao da polaridade do sol$ente frente a fase estacionria, a interao ue o composto apresenta$a com a slica foi transferida ento ao sol$ente, sendo poss$el dessa forma a eluio pela coluna cromatogrfica.

<4 Co#*!",6o
7este experimento a slica trincou de$ido a pertur'aes no final do empacotamento, portanto o processo precisou ser repetido. A cor das su'st&ncias eluidas depende dos sol$entes e do p! destes. ;endo assim, o alaranjado de metila foi o ue eluiu primeiro com o diclorometano ue pouco polar, pois possui a menor polaridade uando comparada com os outros indicadores. / pr*ximo a eluir foi o $ermel!o de metila ue possui uma polaridade intermediria entre as su'st&ncias usadas para a preparao do analito, com o

acetato de etila ue um pouco mais polar ue diclorometano. / $erde de mala uita seria o 4ltimo a eluir, porm no foi realizada, pois seria necessrio um sol$ente muito mais polar ue o diclorometano

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mo/ r#a o m io am(i #t A 3 .N edio3(EE8: editora 9ooOman:

(3

=J9-J=/, 7. %: 7)7-;, #. =. A#>!i, / Pigm #to, %or Cromatografia .

Pumica 7o$a na -scola. 7Q (R, p. .@3.?, Agosto de (EEA.

.3

;L//S, 5. A.: T-;,, 5. %.: H/BB-=, C. M.: #=/)#H, ;. =., Q"@mi*a A#a!@ti*aA. ,raduo da AN edio norte3americana, -ditora

?'"#/am #to, / ,!omson, (EE8.

4-

/BJ>-J=A, 1. =. 1rtica nQ (D #romatografia em papel 0#12 e #romatografia camada fina 0,B#2. 5ispon$el emD !ttpDGGHHH.

em

pessoal.utfpr.edu.'rGpoli$eiraGar ui$osGauladecromatografiapapelecamadafina.pdf Acessado emD E(G""G(E"(

5-

5-SA7J, A. B. S.: #A;;, P. 9.: >J-J=A. 1. #. Cromatografia& "m (r .

#,aio4 Pumica 7o$a na -scola. 7Q ?, p. ("3(F, %aio de "RRA.

6-

Cromatografia emD

%a% !4

)ni$ersidade

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5ispon$el

HHH.cesnors.ufsm.'rGprofessoresGelianeG uimica3geral3 #romatografia.pdf

am'ientalGpraticasG%icrosoftU(ETordU(E3U(E1raticaU(EE(U(E3 Acessado emD E(G""G(E"(

?3

5isponi$el

em

HHH.setor".com.'rGanalisesG*romatografiaGinVtro.!tm.

acessado em EFG""G(E"( as ERD@( !

A3

/;/=J/, >iOtoria Llara BaOatos e /BJ>-J=a, Tanda de. 1/BJC/;CA,/;

-% 5-,-=S-7,-; -% 1W #/%-=#JAJ;. Jnstituto de Pumica, )ni$ersidade de ;o 1aulo, #1 (8E??, EFF".3R?E ;o 1aulo 6 ;1 Puim. 7o$a, >ol. (@, 7o. F, ?EE3?EA, (EE".

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E:%!ora#/o o E#,i#o / Q"@mi*a. 5epartamento de Pumica da )ni$ersidade Cederal de ;o #arlos, ;o #arlos 6 ;1., $. @ 6 Pumica, (EE8.

10-

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