UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MATO GROSSO DO SUL

UNIDADE UNIVERSITRIA DE DOURADOS

QUMICA INDUSTRIAL

RELATRIO DE QUMICA ORGNICA EXPERIMENTAL

Cromatografia em Coluna

Equipe: Fabio Bento Garcia

Srgio Mateus Tinoco Filho
Vinicius Oliveira
Professor: Carlos Eduardo Pereira

Dourados - MS
2012

1. Introduo
At meados do sculo XX, as separaes analticas eram, em grande parte,
realizadas usando mtodos clssicos como a precipitao, destilao e extrao. Hoje
contudo, as separaes analticas so mais comumente feitas por cromatografia e
eletroforese, particularmente em amostras complexas e que contenham muitos
componentes11.
A Cromatografia permite a separao, identificao e determinao de diversos
componentes muito semelhantes de misturas complexas. Muitas dessas separaes so
impossveis por outros meios11.
Cromatografia uma tcnica de separao especialmente adequada para
ilustrar conceitos de interaes intermoleculares, polaridade e propriedades de funes
orgnicas com uma abordagem ilustrativa e relevante2.
Uma das tcnicas mais sensveis de separao de misturas, a cromatografia se
destaca entre as demais tcnicas por ser muito barata dentre muitas tcnicas e pode
fornecer informaes qualitativas e quantitativas, sendo amplamente utilizada em
laboratrios forenses, para comparar amostras de fluidos, por produtores de alimentos
que necessitam testar a qualidade dos produtos e, em Marte, para buscar evidncias de
vida 1.
Todas as tcnicas de separao utilizam diferenas muito pequenas, nas foras
intermoleculares para separar compostos1. Entretanto, nenhum mtodo de separao
to poderoso e de aplicao to generalizada como a cromatografia. Um mtodo
empregado de forma ampla e que permite a separao, identificao e determinao de
componentes qumicos em sistemas complexos3.
O termo cromatografia e difcil de ser definido rigorosamente porque o nome
tem sido aplicado a diversos sistemas e tcnicas. Todos esses mtodos, contudo,
apresentam em comum o uso de uma fase estacionria e de uma fase mvel3.
A direcionalidade desse trabalho a cromatografia em papel (CP). Trate-se de
uma tcnica simples para a anlise de amostras em pequenas quantidades, aplicada
principalmente na separao e identificao de compostos polares, tais como aucares,
antibiticos hidrossolveis, aminocidos, pigmentos e ons metlicos2.
A cromatografia em camada delgada (CCD) uma tcnica de adsoro
lquidoslido. Nesse caso, a separao se d pela diferena de afinidade dos
componentes de uma mistura pela fase estacionria6.

2. Objetivo
Compreender o estudo sobre a cromatografia em coluna.

3. Materiais e Reagentes

Bureta;
Slica (SiO2);
gua destilada;
Bureta;
Bquer;
Algodo;
Marcador de vidraria;
Capela;
Esptula metlica;
Basto de vidro;
Balana analtica;

Placa de Petri;
Pipeta de Pasteur;
Rolha;
Suporte universal
cido Actico (glacial)
Acetato de Etila
(CH3COOCH2CH3);

Alaranjado de Metila;
Vermelho de Metila;
Verde de Malaquita;
Diclorometano;

4. Procedimento Experimental
4.1 Empacotamento da coluna (adaptada em uma bureta)
1.

No empacotamento da coluna com 7g de slica slida que foi dissolvida

com diclorometano at se obter uma pasta fluida, agitando-se com um basto de
vidro e adicionado-se solvente, at atingir maleabilidade suficiente para poder
ser manejada e introduzida na coluna.

2.

Adicionando-se um chumao de algodo na parte inferior da bureta

antes do registro de escoamento para impedir a passagem de slica para o
registro.

3.

Adicionou-se a pasta fluida com o auxlio do basto de vidro a bureta,

deixando-se escorrer pela parede da coluna, tomando os cuidados necessrio

para que no se formassem bolhas de ar, nem mesmo a slica se cristalizasse no

interior da coluna.
4.

O nvel de solvente que foi utilizado para adicionar a slica precisou ser
ajustado abrindo o registro da bureta at atingir o nvel de aproximadamente 1
cm acima do nvel da slica, apresentou o nvel de 38 mL na graduao da
bureta, a slica apresentou o nvel de aproximadamente 37 mL.

4.2 Separao dos analitos

1.

O analito foi preparado misturando-se os indicadores, alaranjado de metila,

vermelho de metila e verde de malaquita, dissolvendo-se os trs com
diclorometano. Em seguida foi adicionado com o auxlio de uma pipeta de
Pasteur, 3 mL da mistura previamente preparada.

2.

Durante a adsoro pela coluna foi sendo adicionado diclorometano at a eluio

pela fase estacionria com a adio de solvente no ser mais eficiente.

3.

Foi preparado um segundo solvente com uma mistura de 1:1 de acetato de etila e
cido actico, que foi eluido pela coluna, em substituio do solvente anterior.

5. Resultados e Discusso
5.1 Preparao da coluna
Primeiramente para que fosse possvel o empacotamento da coluna com a slica
slida, foi dissolvida 7,103g da mesma em um bquer de 50 mL utilizando
diclorometano at se obter uma pasta fluida, agitando-se com um basto de vidro e
adicionado-se solvente, at atingir maleabilidade suficiente para poder ser manejada e
introduzida na coluna.
Foi utilizado como coluna cromatogrfica uma bureta graduada, de 50 mL,
adicionando-se um chumao de algodo na parte inferior da bureta antes do registro de
escoamento, logo acima do algodo adicionou-se a pasta fluida com o auxlio do basto
de vidro a bureta, deixando-se escorrer pela parede da coluna, tomando os cuidados
necessrio para que no se formassem bolhas de ar, nem mesmo a slica se cristalizasse
no interior da coluna.

Como foi preciso adio de bastante solvente at o acondicionamento ideal da

slica no interior da bureta, o nvel da mesma precisou ser ajustado at atingir o nvel de
aproximadamente 1 cm acima do nvel da slica, o nvel do solvente foi de 38 mL na
graduao da bureta, as 7g de slica aps o acondicionamento no interior da bureta
apresentou o nvel de aproximadamente 37 mL.

Figura 1 Cromatografia em Coluna

Fonte: http://toxicoanalitica.wordpress.com/

5.2 Separao dos analitos

A preparao dos analitos foi procedida com adio de trs substncias
diferentes, todas tipos distintos de indicadores, alaranjado de metila, vermelho de metila
e verde de malaquita, dissolvidas em diclorometano compondo um analito. Em seguida,
aps preparao do mesmo, foi adicionado bureta com o auxlio de uma pipeta de
Pasteur, uma alcota de aproximadamente 3 mL dessa soluo.
Imediatamente ao ser adicionado o analito na coluna cromatogrfica pde-se
observar o incio da separao, apresentando faixas com diferentes cores, num primeiro
momento eram duas cores, verde escuro em cima, verde claro em baixo e ao se eluir
diclorometano pela coluna, as faixas de cores foram se desdobrando em outras,
apresentando diferentes velocidades de eluio.

As cores apresentadas quando o analito atingiu toda a extenso de slica de cima

para baixo foi, rosa, laranja, verde, azul, vermelho e amarelo. A slica possui polaridade,
portanto substncias apolares iro eluir com maior facilidade pela fase estacionria
(slica).
O verde de malaquita um solvente orgnico de Frmula - C27H34N2O4S;
alaranjado de metila solvente orgnico de frmula - C14H14N3O3S; vermelho de metila C15H15N3O2 tambm um solvente orgnico, cada um dos indicadores possui sua
polaridade especfica, o que apresentou maior interao com a fase estacionria
composta por slica que polar, ficou retido no interior da coluna, j o indicador que
menos interagiu com a slica foi eluido com o diclorometano por gravidade, sendo
coletado em um bquer.
A eluio do composto retido na slica por interao, foi possvel com a troca do
solvente diclorometano por uma mistura de 1:1 de acetato de etila e cido actico
glacial, com superao da polaridade do solvente frente a fase estacionria, a interao
que o composto apresentava com a slica foi transferida ento ao solvente, sendo
possvel dessa forma a eluio pela coluna cromatogrfica.

6. Concluso
Neste experimento a slica trincou devido a perturbaes no final do
empacotamento, portanto o processo precisou ser repetido. A cor das substncias eluidas
depende dos solventes e do ph destes.
Sendo assim, o alaranjado de metila foi o que eluiu primeiro com o
diclorometano que pouco polar, pois possui a menor polaridade quando comparada
com os outros indicadores. O prximo a eluir foi o vermelho de metila que possui uma
polaridade intermediria entre as substncias usadas para a preparao do analito, com o
acetato de etila que um pouco mais polar que diclorometano. O verde de malaquita
seria o ltimo a eluir, porm no foi realizada, pois seria necessrio um solvente muito
mais polar que o diclorometano

7. Referencias Bibliogrficas
1-

ATKINS, P.; JONES, L. Princpios de Qumica: questionando a vida

moderna e o meio ambiente - 3 edio-2006; editora Bookman;

2-

RIBEIRO, N. M; NUNES, C. R. Anlise de Pigmentos por Cromatografia.

Qumica Nova na Escola. N 29, p. 34-37, Agosto de 2008.

3-

SKOOG, D. A.; WEST, D. M.; HOLLER, F. J.; CROUCH, S. R.,

Fundamentos de Qumica Analtica. Traduo da 8 edio norte-americana, Editora

Thomson, 2006.
4-

em

OLIVEIRA, P. R. Prtica n 2: Cromatografia em papel (CP) e Cromatografia

camada

fina

(TLC).

Disponvel

em:

http://www.

pessoal.utfpr.edu.br/poliveira/arquivos/auladecromatografiapapelecamadafina.pdf Acessado em:

02/11/2012
5-

DEGANI, A. L. G.; CASS, Q. B.; VIEIRA. P. C. Cromatografia: um breve

ensaio. Qumica Nova na Escola. N 7, p. 21-25, Maio de 1998.

6-

Disponvel

Cromatografia

em

em:

papel.

Universidade

Federal

de

Santa

Maria.

www.cesnors.ufsm.br/professores/eliane/quimica-geral-

ambiental/praticas/Microsoft%20Word%20-%20Pratica%2002%20-

Cromatografia.pdf

Acessado em: 02/11/2012

7-

Disponivel

em

www.setor1.com.br/analises/cromatografia/in_tro.htm.

acessado em 05/11/2012 as 09:42 h

8-

OSORIO, Viktoria Klara Lakatos e OLIVEIRa, Wanda de. POLIFOSFATOS

EM DETERGENTES EM P COMERCIAIS. Instituto de Qumica, Universidade de So

Paulo, CP 26077, 05513-970 So Paulo SP Quim. Nova, Vol. 24, No. 5, 700-708, 2001.
9-

DEGANI, Ana Luiza G.; CASS, Quezia B.; e VIEIRA Paulo C.. Coleo

Explorando o Ensino de Qumica. Departamento de Qumica da Universidade Federal de So

Carlos, So Carlos SP., v. 4 Qumica, 2006.
10-

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria / Fundao Oswaldo Cruz.

Farmacopeia Brasileira 5 Ed.. Vol. 1. Braslia, 2010.

11-

HOLLER, F. James; SKOOG, Douglas A.; CROUCH, Stanley R.; Princpios

de Anlise Instrumental. 6 ed. Porto Alegre : Bookman, 2009. ISBN 978-7780-460-3.