Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
PORCENTAGEM
95,0-98,0% H2SO4
36,5-38,0% HCl
69,0-71,0% HNO3
90,0% HNO3
99,7% HC2H3O2
47,0-49,0% HBr
28,0-30,0% NH3
85,0% H3PO4
Preparaes comerciais de determinadas solues devem ser testadas quanto sua aplicabilidade, pois
podem conter tampes, preservativos, agentes quelantes.
O termo soluo, quando utilizado sem outra qualificao, refere-se a uma soluo aquosa.
A expresso (1+2), (1+4), etc., usadas em conexo com o nome de reagentes indica que o primeiro
Onde:
CF = concentrao do analito medida na amostra fortificada
CN = concentrao do analito medida na amostra no fortificada
CA = concentrao do analito adicionada
Observao: CA o valor calculado, no o valor medido pelo mtodo. A concentrao do analito
adicionada mais a quantidade presente na amostra antes da fortificao no devem exceder o valor real
observado para o substrato utilizado. Tambm no devem exceder a faixa tima linear da curva padro.
As amostras devem ser tratadas de maneira idntica, durante o procedimento analtico, de modo a
minimizar os erros experimentais.
A escala de temperatura usada a centgrada (Celsius).
Lugar fresco significa que a temperatura no dever ultrapassar 25 C; lugar frio significa que a
temperatura no superior a 15 C; gua quente aquela cuja temperatura situa-se entre 60 e 70 C;
e muito quente entre 85 e 95 C.
Unidades de comprimento
Milmetro
micrmetro, microm ou mm
Nanmetro
mm = 10-3 m
mm = 10-6 m
nm = 10-9 m
Unidades de volume
Mililitro (= cm3 ou cc)
Microlitro
mL
mL
Unidades de massa
micrograma
Nanograma
mg (ou mcg)
Ng
Para
mg%
mEq/L
mg/L
mg%
mEq/L
mg/L
mg%
mg%
mg/L
mg/L
Ppm
% em peso
mg%
mg%
MEq/L
g/L
molar
Multiplicar por
1.000
(10/eqg)
10
0,001
(0,01/eqg)
0,01
0,1 x eqg
100 x eqg
eqg
1.000 x peso atmico
10.000
0,0001
0,1
100
(1 / eqg)
0,001
(1 / 1.000 x peso atmico)
BIBLIOGRAFIA
FUNDAO CERTI. Calibrao. In:____. Curso metrologia
e confiabilidade metrolgica. Florianpolis:
Centros de Referncias em Tecnologias Inovadas, 1998.cap.6.
HELRICH, K. (Ed.). Definition of Terms and Explanatory Notes. In:_____. Official methods of analysis
of the Association of Official Analytical Chemists: food composition: additives: natural contaminants.
15th ed. Arlington: Association of Official Analytical Chemists, 1990. v. 2, p.xi-xvii..
INMETRO. Vocabulrio Internacional de termos fundamentais e gerais em metrologia. Duque de Caxias,
RJ, 1995. 52p.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
PREGNOLATTO, W.; PREGNOLATTO, N. (Coord.) Generalidades.
In: _____. Normas analticas do Instituto Adolfo Lutz:
mtodos qumicos e fsicos para anlise de alimentos. 3. ed. So Paulo: Instituto Adolfo Lutz, 1985. v. 1,
cap.1, p.1- 3.
II - RECOMENDAES GERAIS
CUIDADOS GERAIS DE LABORATRIO
Usar sempre o material de proteo (luvas, culos, mscaras, etc.) indicado para cada caso particular.
Segurana um dever e uma obrigao.
Manter sempre limpo o local de trabalho, evitando obstculos inteis que possam dificultar as anlises.
Usar uniformes adequados, de preferncia em tecido de algodo, longo e fechado com velcro e sem
bolsos inferiores.
Proteger muito bem os ps, usando calados adequados, bem fechados.
No correr dentro do laboratrio.
Comer, beber ou fumar somente nos locais permitidos.
No jogar na cesta de lixo fsforos acesos. Usar cinzeiros nos locais onde for permitido fumar.
No usar nenhum objeto ou utenslio de laboratrio para uso individual. Por exemplo, no tomar gua em
bquer.
Ler os rtulos dos reagentes com ateno (inflamvel, txicos, etc.) e utilizar os mesmos com os devidos
cuidados.
Tomar os cuidados necessrios ao trabalhar com substncias cidas e bsicas.
Quando for diluir cidos fortes, adicionar sempre o cido gua e nunca o contrrio.
Ao preparar solues que produzem reaes exotrmicas fortes utilizar capela de exausto e banho de
gelo.
No colocar as tampas dos frascos e pipetas sobre a bancada.
Ao preparar reagentes, rotular imediatamente os frascos, para evitar confuses.
Ao derramar alguma substncia sobre a bancada ou cho, limpar imediatamente o local para evitar
acidentes.
No trabalhar e no deixar frascos com inflamveis prximos de chamas ou resistncias eltricas.
No aquecer substncias combustveis (lcool, benzeno, etc.) sem os devidos cuidados. Usar manta
trmica ou banho-maria.
No inalar vapores de gases irritantes ou venenosos. Utilizar a capela de exausto na presena dos
mesmos.
Ter muita cautela ao testar um novo produto qumico; no coloc-lo prximo ao nariz.
Nunca deixar sem ateno qualquer operao onde haja aquecimento ou reao violenta.
No deixar sobre a bancada vidros quentes; se isto for necessrio, avisar a todos os colegas.
Nunca trabalhar ou aquecer tubos de ensaio com abertura dirigida contra si ou outra pessoa. Direcionar
para o interior da capela.
No aquecer reagentes em sistemas fechados.
Ligar o exaustor sempre que houver escape de vapores ou gases no laboratrio.
Antes de proceder uma reao da qual no saiba totalmente os resultados, fazer uma em escala na capela.
No trabalhar com material imperfeito principalmente vidros.
Improvisaes so o primeiro passo para um acidente.
Aps trabalhar com material txico, lavar bem as mos, o local de trabalho e os materiais utilizados.
Lubrificar os tubos de vidro, antes de tamp-los com uma rolha.
Proteger as mos com luvas apropriadas.
No jogar nenhum material slido dentro da pia ou nos ralos.
Colocar em recipientes especiais para lixo. Quando no forem inflamveis ou txicos, podem ser
despejados na pia, com bastante gua.
Ter o conhecimento da localizao dos chuveiros de emergncia, lavadores de olhos e extintores e saber
utiliz-los corretamente.
Combustveis e substncias altamente inflamveis devem ter local prprio e bem determinado no
laboratrio, pois podem inflamarse acidentalmente devido falhas nas instalaes eltricas ou por
elevao da temperatura local acima do ponto de ignio das mesmas.
Algumas substncias se alteram temperatura ambiente devendo ser conservadas em cmara fria,
geladeira ou freezer.
Substncias higroscpicas devem ser acondicionadas em dessecador.
Manter ao abrigo da luz substncias fotossensveis.
Em incndio produzido por papel, madeira ou material que deixa brasa ou cinzas, usar gua. Dirigir o jato
de gua para a base do fogo.
Os recipientes contendo lquido, quando se inflamam devem ser cobertos com tela de amianto, ou outro
objeto apropriado, para evitar a entrada de ar, apagando deste modo o fogo.
No jogar gua em fogo produzido por lquidos inflamveis que no sejam miscveis em gua. Apague as
chamas com extintores (espuma, p qumico ou CO2) ou abafe imediatamente.
No usar extintores de lquido em circuitos eltricos; usar sempre extintores de CO2.
Ao se retirar do laboratrio, verificar se no h torneiras de gua ou gs abertas. Desligar todos os
aparelhos, deixar todo o equipamento limpo e lavar as mos. Fechar as janelas, apagar a luz e fechar a
porta.
NORMAS DE RECEBIMENTO DE AMOSTRAS NO LABORATRIO
A colheita da amostra constitui a primeira fase da anlise do produto.
Dentro do conceito de que a anlise comea com a colheita da amostra, o servio de colheita deve estar
bem integrado com o laboratrio, devendo haver sincronismo entre a remessa e a capacidade do
laboratrio em executar as anlises.
As amostras para anlises fsico-qumicas devero ser enviadas separadas daquelas destinadas anlises
microbiolgicas.
As amostras devem ser enviadas em sua embalagem original, para evitar modificaes em suas
caractersticas.
As amostras para anlises fsico-qumicas devero ser acondicionadas em recipientes limpos e ntegros
(sem perfuraes, rachaduras, etc.). A quantidade mnima de amostra a ser encaminhada deve ser de 500
g ou 1.000 mL no caso de leite fludo. Quando o peso unitrio no atingir o mnimo aqui estabelecido,
devero ser colhidas tantas unidades quantas necessrias para se obter aquele quantitativo. Neste caso,
cuidados especiais so necessrios para que todas as unidades pertenam ao mesmo lote, partida, data de
fabricao, etc., a fim de serem mantidas as caractersticas de homogeneidade da amostra.
Em casos especiais, a amostra poder ser acompanhada de relatrio adicional, contendo informaes que
possam auxiliar o analista na conduo do seu trabalho.
As amostras devero ser acompanhadas de indicao precisa dos tipos de anlises a serem realizadas.
Depois de colhidas, as amostras devero ser acondicionadas adequadamente, para evitar qualquer
alterao nas mesmas at sua chegada ao laboratrio. Assim, as amostras de produtos facilmente
perecveis devero ser acondicionadas em recipientes isotrmicos, embaladas em sacos plsticos e
acompanhadas de gelo ou outra substncia refrigerante, cuidando-se sempre para que no haja contatos
desses com a amostra.
Providncias especiais devero ser tomadas para que o tempo decorrido entre a colheita da amostra e sua
chegada ao laboratrio seja o mais breve possvel, recomendando-se que seja evitada a utilizao de
mecanismos que impliquem em estocagem intermediria entre o ponto de colheita e o laboratrio.
Somente sero aceitas para anlise, amostras acondicionadas em embalagem lacrada pelo fiscal que
efetuou a colheita, sugerindose para tal, a utilizao de lacre ou outro tipo de fechamento hermtico, que
no possa ser violado sem que se torne evidente. Tal providncia se faz necessria para evitar a
substituio ou adulterao da amostra entre o ponto de colheita e o laboratrio, com reflexos no resultado
da anlise.
Todas as amostras que chegarem ao laboratrio em condies diferentes das preconizadas, sero
recusadas, cabendo ao laboratrio notificar o fiscal que realizou a colheita as razes da no aceitao.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Recomendaes gerais. In:_____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtosde origem animal
e seus ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, p. L/1-L/ 6.
MANUAL de legislao: segurana e medicina do trabalho. So Paulo: Atlas, 1997.
THE MERCK index. 10th ed. New Jersey, 1983. 22 p.
III - CARACTERSTICAS SENSORIAIS E PREPARO DE AMOSTRAS
CASENA INDUSTRIAL
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto: granuloso ou pulverizado;
1.2. Cor: branca ou amarelada;
1.3. Odor: levemente de soro azedo.
2. Preparo da amostra Homogeneizar a amostra, passar quantidade suficiente para frasco de boca larga e
fechar hermeticamente.
CREME DE LEITE
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto: cremoso;
1.2. Cor: branco-creme;
1.3. Odor: caracterstico;
1.4. Sabor: caracterstico.
2. Preparo da amostra
Agitar a embalagem, abrir e homogeneizar com basto de vidro e quando necessrio aquecer at 55 C em
banho-maria durante 10 minutos.
DOCE DE LEITE
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto: homogneo e pastoso ou slido quando em barra;
1.2. Cor: caramelo variando do claro ao escuro;
1.3. Odor: agradvel e caracterstico;
1.4. Sabor: agradvel e caracterstico.
2. Preparo da amostra
Homogeneizar. Conservar em geladeira.
LEITE CONDENSADO
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto: homogneo, lquido semi-fludo;
1.2. Cor: branco-amarelada;
1.3. Odor: caracterstico;
1.4. Sabor: doce e caracterstico.
2. Preparo da amostra
Agitar a embalagem, abrir e homogeneizar com basto de vidro.
LEITE FERMENTADO
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto: fludo, pastoso ou gelificado;
1.2. Cor: branco ou de acordo com a(s) substncia(s) alimentcia(s) e/ou corante(s) adicionado(s);
1.3. Odor: acidulado, de acordo com a(s) substncia(s) alimentcia(s) e/ou substncia(s) aromatizante(s)
adicionada(s);
1.4. Sabor: acidulado, de acordo com a(s) substncia(s) alimentcia(s) e/ou substncia(s) saborizante(s)
adicionada(s).
2. Preparo da amostra
Iogurte natural: agitar a embalagem, abrir e homogeneizar com basto de vidro;
Iogurte com frutas: homogeneizar em gral ou processador.
LEITE FLUDO BENEFICIADO
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto: lquido opaco, no deve apresentar grumos, cogulo, flculos ou mucosidade e a camada de
gordura no deve ser filante;
1.2. Cor: branca ou levemente amarelada;
1.3. Odor: caracterstico, no deve ser aromtico, ptrido ou ranoso;
1.4. Sabor: caracterstico, no deve ser de gosto amargo, cido ou ranoso.
2. Preparo da amostra
Homogeneizar a amostra a 15 C, agitando e invertendo o recipiente ou embalagem 5 ou 6 vezes. Quando
a amostra contiver grumos de creme, aquecer de 38 a 40 C em banho-maria, esfriar at 15 C agitando
ocasionalmente.
LEITE IN NATURA
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto: lquido opaco;
1.2. Cor: branca ou levemente amarelada;
1.3. Odor: caracterstico;
1.4. Sabor: caracterstico.
2. Preparo da amostra
Homogeneizar a amostra a 15 C ou se necessrio, em banho-maria a 40 C.
LEITE EM P
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto: p, no deve conter grumos ou partculas queimadas;
1.2. Cor: branca ou levemente amarelada;
1.3. Odor: caracterstico;
1.4. Sabor: caracterstico.
2. Preparo da amostra
O leite em p higroscpico, sendo recomendado homogeneizar rapidamente a amostra. Passar
quantidade suficiente para vidro de boca larga e fechar hermeticamente.
MANTEIGA
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto: homogneo e brilhante;
1.2. Consistncia: untuoso ao tato sem granulao, textura firme em temperatura de refrigerao;
1.3. Cor: amarelada e homognea;
1.4. Odor: caracterstico;
1.5. Sabor: caracterstico.
2. Preparo da amostra
Com auxlio de uma esptula limpa e seca, passar diversas pores de amostra para vidro de boca larga de
250 mL de capacidade, colocando 2/3 do seu volume. Fechar o frasco e aquecer em banhomaria a 35 C
ou em estufa. A operao de aquecimento deve ser cuidadosa, pois se for exagerada haver fuso da
amostra, tornando-se impossvel de reconstitu-la novamente. Retirar do aquecimento e agitar com basto
de vidro, com movimentos de rotao at que a massa fique homognea. Esfriar, colocando o vidro em
gua gelada.
MANTEIGA DA TERRA, OU DE GARRAFA, OU DO SERTO
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto: pastoso e/ou lquido, podendo ocorrer separao de fase entre a gordura insaturada (lquida)
e gordura saturada (cristalizada temperatura ambiente);
1.2. Cor: amarela na fase lquida, podendo apresentar colorao amarelo-esbranquiada na fase slida;
1.3. Odor: prprio, no ranoso, isento de odores estranhos ou desagradveis;
1.4. Sabor: prprio, isento de sabores estranhos ou desagradveis.
2. Preparo da amostra Aquecer a amostra a 35 C e homogeneizar (quando necessrio).
Resfriar para obter consistncia pastosa e homogeneizar novamente.
MARGARINA
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto: emulso plstica ou fluda, homognea ou uniforme;
1.2. Cor: amarela ou branca-amarelada, homognea;
1.3. Odor: caracterstico;
1.4. Sabor: caracterstico.
2. Preparo da amostra
Homogeneizar. Conservar em geladeira.
QUEIJO TIPO BATAVO
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: compacta, semi-dura de untura manteigosa;
1.2. Cor: amarelada;
1.3. Crosta: fina, lisa, de cor amarelada e parafinada;
1.4. Odor: caracterstico;
1.5. Sabor: forte e tendendo a picante;
1.6. Textura: olhadura irregular pequena e pouco numerosa.
2. Forma e peso
2.1. Formato: cilndrico baixo ou paraleleppedo;
2.2. Peso: 1 a 3 kg
3. Preparo da amostra
Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no anexo I. Retirar a parte
no comestvel da amostra e triturar em processador, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca
larga com tampa. Conservar em geladeira.
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: semi-dura, elstica;
1.2. Cor: branco - amarelado, uniforme;
1.3. Crosta: no possui;
1.4. Odor: caracterstico, pouco acentuado;
1.5. Sabor: lctico, suave, ligeiramente salgado, caracterstico;
1.6. Textura: compacta, lisa, no granulada ou com algumas olhaduras pequenas bem distribudas.
2. Forma e peso
2.1. Formato: paraleleppedo de seo transversal retangular;
2.2. Peso: 2 a 6 kg.
3. Preparo da amostra
Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no anexo I. Triturar em
processador, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca larga. Conservar em geladeira.
QUEIJO TIPO EDAM OU REINO
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: massa semi-dura, pouco elstica de untura tendendo a seca;
1.2. Cor: amarelo-palha ou amarelada, homognea, podendo ter tonalidade rsea;
1.3. Crosta: fina, lisa de colorao vermelho ou rseo com ou sem parafina;
1.4. Odor: caracterstico;
1.5. Sabor: caracterstico, suavemente picante, com sabor adocicado;
1.6. Textura: aberta , com olhos de contorno ntido de fundo brilhante de aproximadamente 3 mm.
2. Forma e Peso
2.1. Formato: esfrico;
2.2. Peso: 1,8 a 2 kg 3. Preparo da amostra Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema
apropriado contido no anexo I. Retirar a parte no comestvel da amostra e triturar em processador,
homogeneizar e acondicionar em frasco de boca larga com tampa. Conservar em geladeira.
QUEIJO TIPO EMENTAL
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: semi-dura, elstica de untura semi-manteigosa;
1.2. Cor: amarelo-claro, homognea e translcida;
Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no anexo I. Retirar a parte
no comestvel da amostra e triturar em processador, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca
larga com tampa. Conservar em geladeira.
QUEIJO MINAS FRESCAL
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: branda, macia;
1.2. Cor: esbranquiada;
1.3. Crosta: no possui ou crosta fina;
1.4. Odor: caracterstico, suave;
1.5. Sabor: caracterstico, suave ou levemente cido;
1.6. Textura: com ou sem olhaduras mecnicas.
2. Forma e peso
2.1. Formato: cilndrico;
2.2. Peso: 0,3 a 5 kg.
3. Preparo da amostra Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no
anexo I. Triturar em gral, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca larga com tampa. Conservar
em geladeira.
QUEIJO MUSSARELA, QUEIJO MUZZARELLA OU QUEIJO MOZZARELLA
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: semi-dura e semi-suave;
1.2. Cor: branco a amarelado, uniforme, segundo o contedo de matria gorda, umidade e grau de
maturao;
1.3. Crosta: no possui;
1.4. Odor: lctico, pouco perceptvel;
1.5. Sabor: lctico, pouco desenvolvido a ligeiramente picante;
1.6. Textura: fibrosa, elstica e fechada.
2. Forma e peso
2.1. Formato: varivel;
2.2. Peso: varivel.
Observao: Quando o queijo mussarela contiver especiarias, condimentos e substncias e/ou
aromatizante/saborizante, apresentar as caractersticas sensoriais de acordo com as adies efetuadas.
3. Preparo da amostra
Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no anexo I. Triturar em
processador, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca larga com tampa. Conservar em geladeira.
QUEIJO EM P
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aroma: de queijo, caracterstico de cada variedade, livre de odores estranhos;
1.2. Aspecto: p fino, homogneo;
1.3. Cor: esbranquiado, amarelado, salvo naqueles produtos que contenham corantes ou outro
ingrediente opcional em sua formulao, que confiram cor ao produto final;
1.4. Sabor: de queijo, de acordo com a variedade ou as variedade de queijos que lhe transfiram sabor
caracterstico ou de acordo ao aromatizante/saborizante utilizado em sua elaborao e livre de sabores
estranhos.
2. Preparo da amostra
Homogeneizar a amostra, passar quantidade suficiente para vidro de boca larga e fechar hermeticamente.
QUEIJO PATEGRS SANDWICH
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: semi-dura, elstica;
1.2. Cor: branco amarelado, uniforme;
1.3. Crosta: lisa, consistente, bem formada, sem rachaduras nem trincas, ou sem crosta;
1.4. Odor: caracterstico;
1.5. Sabor: acentuado, caracterstico, ligeiramente picante;
1.6. Textura: compacta, lisa, no granulosa, podendo apresentar algumas aberturas mecnicas e alguns
olhos pequenos ou mdios bem distribudos.
2. Forma e peso
2.1. Formato: paraleleppedo de seo transversal retangular;
2.2. Peso: 3 a 5 kg.
3. Preparo da amostra
Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no anexo I. Triturar em
processador, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca larga com tampa. Conservar em geladeira.
QUEIJOS TIPO PARMESO, PARMESANO REGGIANO, REGGIANITO E SBRINZ
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: dura e macia de untura seca;
processador, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca larga com tampa. Conservar em geladeira.
QUEIJO PROCESSADO OU FUNDIDO, PROCESSADO
PASTEURIZADO E PROCESSADO FUNDIDO UHT
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: firme, macia ou cremosa;
1.2. Cor, odor e sabor: similar ao queijo ou mistura de queijos utilizados, ou de acordo com os corantes,
saborizantes/aromatizantes e ou outras substncias alimentcias utilizadas em sua elaborao;
1.3. Textura: fechada e fina.
2. Forma e peso
2.1. Formato: varivel, ralado ou fatiado,(em fatias ou em rodelas) e outras.
3. Preparo da amostra
Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no anexo I. Triturar,
homogeneizar e acondicionar em frasco de boca larga com tampa. Conservar em geladeira.
QUEIJO TIPO PROVOLONE FRESCO
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: semi-dura e semi-suave;
1.2. Cor: branco a amarelado, uniforme, segundo o contedo de matria gorda, umidade e grau de
maturao;
1.3. Crosta: no possui;
1.4. Odor: lctico, pouco desenvolvido;
1.5. Sabor: lctico, pouco desenvolvido a ligeiramente picante;
1.6. Textura: fibrosa, elstica e fechada.
2. Forma e peso 2.1. Formato: varivel, tendente a esfrico;
2.2. Peso: 0,5 kg a 2,0kg.
3. Preparo da amostra
Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no anexo I. Triturar em
processador, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca larga com tampa. Conservar em geladeira.
QUEIJO TIPO PROVOLONE CURADO
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: dura, no elstica, quebradia, de untura semi-seca;
1.2. Cor: branco-creme, homognea;
1.3. Crosta: fina, lisa, resistente, destacvel, cor amareloparda com ou sem parafina;
1.4. Odor: caracterstico;
1.5. Sabor: caracterstico, forte e picante;
1.6. Textura: fechada ou apresentando poucos olhos em formato de cabea de alfinete.
2. Forma e peso
2.1. Formato: tendente a esfrico ou oval;
2.2. Peso: 1 a 8 kg.
3. Preparo da amostra
Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no anexo I. Retirar a parte
no comestvel da amostra e triturar em processador, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca
larga com tampa. Conservar em geladeira.
QUEIJO RALADO
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Aspecto e textura: grnulos ou filetes mais ou menos finos;
1.2. Cor: branco amarelado e amarelo, dependendo da variedade de queijos das quais provenha;
1.3. Odor: caracterstico, mais ou menos intenso, de acordo com a variedade ou variedades de queijos das
quais provenha.
2. Preparo da amostra
Homogeneizar a amostra, passar quantidade suficiente para vidro de boca larga com tampa. Conservar em
geladeira.
QUEIJO TIPO ROQUEFORT E GORGONZOLA
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: mole, esfarelante, com untura manteigosa;
1.2. Cor: branco-creme amarelada, apresentando formaes caractersticas verde-azuladas bem
distribudas, devido ao Penicilium roquefort;
1.3. Crosta: fina, mida, pegajosa, de cor amarelada;
1.4. Odor: caracterstico;
1.5. Sabor: salgado e picante;
1.6. Textura: fechada ou com poucos e pequenos buracos mecnicos.
2. Forma e peso
2.1. Formato: cilndrico;
1.6. Textura: compacta, lisa no granulosa, podendo apresentar algumas aberturas mecnicas, e alguns
olhos pequenos, bem distribudos.
2. Forma e peso
2.1. Formato: paraleleppedo de seco transversal, quadrado ou retangular;
2.2. Peso: 1 a 4kg.
3. Preparo da amostra
Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no anexo I. Triturar em
processador, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca larga com tampa. Conservar em geladeira.
QUEIJO TILSIT
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: semi-dura, elstica;
1.2. Cor: branco amarelado, uniforme;
1.3. Crosta: no possui;
1.4. Odor: caracterstico, pouco acentuado;
1.5. Sabor: lctico, suave, ligeiramente salgado, caracterstico;
1.6. Textura: compacta, lisa, no granulosa ou com alguns olhos pequenos, bem distribudos.
2. Forma e peso
2.1. Formato: paraleleppedo de seo transversal retangular;
2.2. Peso: 2 a 4 kg.
3. Preparo da amostra
Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no anexo I. Triturar em
processador, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca larga com tampa. Conservar em geladeira.
QUEIJO TYBO
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: semi-dura, elstica;
1.2. Cor: branco amarelado, uniforme;
1.3. Crosta: lisa, consistente, bem formada, sem rachaduras, nem trincas ou sem crosta;
1.4. Odor: caracterstico, pouco acentuado;
1.5. Sabor: lctico suave, ligeiramente salgado, caracterstico;
1.6. Textura: compacta, lisa, no granulosa, podendo apresentar alguns olhos pequenos e bem
disseminados.
2. Forma e peso
2.1. Formato: paraleleppedo de seo transversal retangular;
2.2. Peso: 3 a 5 kg.
3. Preparo da amostra
Cortar vrias pores da amostra de acordo com o esquema apropriado contido no anexo I. Triturar em
processador, homogeneizar e acondicionar em frasco de boca larga com tampa. Conservar em geladeira.
REQUEIJO, REQUEIJO CREMOSO E REQUEIJO DE MANTEIGA (REQUEIJO DO NORTE)
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: untvel ou fativel;
1.2. Cor: caracterstica;
1.3. Odor: caracterstico;
1.4. Sabor: creme levemente cido, opcionalmente salgado para o requeijo ou requeijo cremoso,
levemente cido, salgado a rano para o requeijo de manteiga ou do norte;
1.6. Textura: cremosa, fina, lisa ou compacta.
2. Forma e peso
2.1. Formato: varivel;
2.2. Peso: varivel.
3. Preparo da amostra
Para requeijo da regio norte, cortar pores da amostra de acordo com esquema apropriado contido no
anexo I. Homogeneizar em gral, acondicionar em frasco de boca larga com tampa e conservar em
geladeira. Para requeijo cremoso, homogeneizar a amostra.
RICOTA DEFUMADA
1. Caractersticas sensoriais
1.1. Consistncia: dura;
1.2. Cor: creme-parda e homognea;
1.3. Crosta: rugosa de cor acastanhada;
1.4. Odor: caracterstico, meio picante;
1.5. Sabor: caracterstico, meio picante;
1.6. Textura: fechada.
2. Forma e peso
BRASIL. Portaria n 365, de 4 de setembro de 1997. Aprovar o regulamento tcnico para fixao de
identidade e qualidade de queijo Tandil. Dirio Oficial [da] Repblica Federativa do Brasil, Poder
Executivo, Braslia, DF, 8 set. 1997. Seo 1, p. 19695.
BRASIL. Portaria n 366, de 4 de setembro de 1997. Aprovar o regulamento tcnico para fixao de
identidade e qualidade de massa para elaborar queijo Mozzarella (Muzzarella ou Mussarela). Dirio
Oficial [da] Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF, 8 set. 1997. Seo 1, p. 19695.
BRASIL. Ministrio da Agricultura do Abastecimento e da Reforma Agrria. Departamento de Inspeo
de Produtos de Origem Animal. Regulamento Tcnico de identidade e qualidade de queijos. In: _____.
Regulamentos tcnicos de identidade e qualidade dos produtos lcteos. Braslia, DF, 1996. p. 1-6.
BRASIL. Regulamento Tcnico de identidade e qualidade de manteiga. In: _____. Regulamentos tcnicos
de identidade e qualidade dos produtos lcteos. Braslia, DF, 1996. p. 11-14.
BRASIL.. Regulamento Tcnico de identidade e qualidade de creme de leite. In: _____. Regulamentos
tcnicos de identidade e qualidade dos produtos lcteos. Braslia, DF, 1996. p. 15-19.
BRASIL.Instruo Normativa n30 de 26 de julho de 2001.
Regulamento Tcnico de Identidade e Qualidade de Queijo de Coalho.
Dirio Oficial [da] Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF,16 julho. 2001. Seo 1,
p. 14-15.
BRASIL.Instruo Normativa n30 de 26 de julho de 2001.
Regulamento Tcnico de Identidade e Qualidade de manteiga da terra ou manteiga de garrafa. Dirio
Oficial [da] Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF,16 julho. 2001. Seo 1,
p.13-14.
BRASIL.Instruo Normativa n30 de 26 de julho de 2001.
Regulamento Tcnico de Identidade e Qualidade de Queijo de Manteiga.
Dirio Oficial [da] Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF,16 julho. 2001. Seo 1,
p.15.
IV - MTODOS QUALITATIVOS
CIDO BRICO E SEUS SAIS
1. Princpio
O glicerol ou manitol reage com cido brico formando um ster complexo do cido ortobrico e o grupo
hidroxila do glicol tornase fortemente cido, descolorindo a fenolftalena usada como indicador.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
1. Princpio
Ocorrncia de coagulao por efeito da elevada acidez ou do desequilbrio salino, quando se promove
desestabilizao das micelas pelo lcool. O alizarol atua como indicador de pH, auxiliando a
diferenciao entre o desequilbrio salino e a acidez excessiva.
2. Material
2.1. Vidraria, utenslios e outros:
Tubo de ensaio.
2.2. Reagentes:
Soluo de 1,2 dihidroxiantraquinona (C14H8O4) a 0,2 % (m/v) em lcool etlico (C2H5OH)
neutralizado de concentrao varivel entre 68 a 80 % (depende do tratamento trmico a ser aplicado ao
leite e a vida de prateleira que se pretende obter do produto a ser elaborado).
Estas concentraes de alizarina ou do lcool etlico neutralizado, podem variar de acordo com
especificaes da legislao sanitria ou o interesse da indstria.
Neutralizao do lcool etlico (C2H5OH): transferir o volume de lcool etlico desejado para um bquer.
Adicionar 5 gotas de soluo alcolica de fenolftalena (C20H14O4) (m/v) a 1 %. Agitar lentamente com
um basto de vidro. No ocorrendo alterao de cor, gotejar soluo de hidrxido de sdio 1 N ou 0,1 N
at leve colorao rosada.
Agitar lentamente com o basto. Desaparecendo a cor, continuar com a adio de soluo de hidrxido de
sdio 0,1 N at leve colorao rsea persistente.
3. Procedimento
Misturar partes iguais da soluo de alizarol e de leite fludo em um tubo de ensaio, agitar e observar a
colorao e o aspecto (formao de grumos, flocos ou cogulos grandes).
4. Resultado
Leite com resposta normal (boa resistncia): colorao vermelho tijolo. Aspecto das paredes do tubo de
ensaio sem grumos ou com uma ligeira precipitao, com poucos grumos muito finos.
Leite cido: tendncia a um esmaecimento da cor, passando para uma tonalidade entre o marron claro e
amarelo. Na acidez elevada ou no colostro, a colorao amarela, com coagulao forte.
Leite com reao alcalina (mamites, presena de neutralizantes):
colorao lils a violeta.
BIBLIOGRAFIA
ALDRICH. Handbook of fine chemicals and laboratory equipament:
2001. [S. l] p. 44. BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria.
Laboratrio Nacional de Referncia Animal. Leite fluido. In: _____. Mtodos analticos oficiais para
controle de produtos de origem animal e seus ingredientes: mtodos fsicos e qumicos.
Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 14, p. 22.
LCOOL ETLICO
1. Princpio
Na presena de lcool etlico em meio cido ocorre a reduo do cromo+6 a cromo+3, modificando a
colorao da soluo sulfocrmica.
2. Material
2.1. Equipamento:
Bico de Bunsen ou placa aquecedora.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Kitazato de 500 mL;
Pipeta graduada de 10 mL;
Pipeta de Pasteur;
Proveta de 100 mL;
Rolha de borracha, para vedao da abertura superior do kitazato;
Tubo de ensaio 20 x 200 mm;
Tubo de silicone ou ltex de 25 cm;
2.3. Reagentes:
Antiespumante (soluo a 3 %);
Soluo sulfocrmica: dissolver 1,15 g de dicromato de potssio (K2Cr2O7) p.a. em 10 mL de gua,
transferir para balo volumtrico de 100 mL e completar o volume com cido sulfrico (H2SO4) p.a.
3. Procedimento
Medir 100 mL da amostra e transferir para o kitazato. Adicionar 10 mL de antiespumante e misturar bem.
Transferir para um tubo de ensaio 2 mL da soluo sulfocrmica e mergulhar nessa soluo a extremidade
da pipeta de Pasteur acoplado ao kitazato por um tubo de silicone ou ltex, de modo a formar um sistema
fechado. Aquecer a amostra contida no kitazato mantendo em fervura por 5 minutos.
4. Resultado
Negativo: colorao da soluo sulfocrmica inalterada ou levemente amarelo-acinzentada.
Positivo: colorao da soluo sulfocrmica verde.
Interferente: formaldedo.
BIBLIOGRAFIA
ALEXEIEV, V.N. Semi-microanlisis quimico qualitativo. [S.l: s.n.] [197-]
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93.
em p e soro de leite em p; Cap.16,p.4: Leite condensado e doce de leite; Cap.19, p.1: Leite fermentado;
Cap.17, p.6: Queijos.
CLORETOS
1. Princpio
Fundamenta-se na reao do nitrato de prata com os cloretos em presena de cromato de potssio como
indicador.
2. Material
2.1. Vidraria, utenslios e outros:
Pipetas graduadas de 1, 5 e 10 mL;
Tubo de ensaio de 20 x 200 mm.
2.2. Reagentes:
Soluo de cromato de potssio (K2CrO4) a 5 % (m/v);
Soluo de nitrato de prata (AgNO3) 0,1 N.
3. Procedimento
Em tubo de ensaio colocar 10 mL de leite, adicionar 0,5 mL de soluo de cromato de potssio a 5 % e
4,5 mL de soluo de nitrato de prata 0,1 N e agitar.
4. Resultado
Positivo: colorao amarela.
Observao: O resultado positivo de colorao amarela indica a presena de cloretos em quantidades
superiores faixa normal (0,08 a 0,1 %).
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal. Leite fluido. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de
origem animal e seus ingredientes: mtodos fsicos e qumicos.
Braslia, DF, 1981. v. II, cap.14, p.11.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
CLORO E HIPOCLORITO
1. Princpio
Fundamenta-se na formao do iodo livre a partir do iodeto de potssio, pela ao do cloro livre ou
hipoclorito.
2. Material
2.1. Equipamento:
Banho-maria.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Pipetas graduadas de 1 e 5 mL;
Tubo de ensaio de 20 x 200 mm.
2.3. Reagentes:
Soluo de cido actico (CH3COOH) (1+2) ou soluo de cido cloridrco (HCl) (1+2) ;
Soluo de amido (C6H10O5)n a 1 % (m/v);
Soluo de iodeto de potssio (KI) a 7,5 % (m/v).
3. Procedimento
Em tubo de ensaio, colocar 5 mL de leite e adicionar 0,5 mL de soluo de iodeto de potssio a 7,5 %,
agitar. Na presena de cloro livre aparecer colorao amarela (se necessrio, confirmar pela adio de 1
mL de soluo de amido a 1 %, que desenvolver colorao azul violeta). Se no houver mudana de
colorao, pesquisar a presena de hipocloritos adicionando ao mesmo tubo 4 mL de soluo de cido
actico ou cido clordrico (1+2) e colocar em banho-maria a 80 C por 10 minutos (no ultrapassar 80
C). Esfriar em gua corrente. O aparecimento de colorao amarela indica a presena de hipocloritos
(confirmar, se necessrio, pela adio de gotas de soluo de amido a 1 %, que desenvolver colorao
azul ou violeta).
4. Resultado
Positivo: colorao amarela
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal. Leite fluido. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de
origem animal e seus ingredientes: mtodos fsicos e qumicos.
Braslia, DF, 1981. v. II, cap.14, p. 10-11. MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93.
Darmstadt, 1993. 1584 p.
DICROMATO DE POTSSIO
1. Princpio
O dicromato de potssio reage com nitrato de prata, formando o dicromato de prata de colorao
vermelho tijolo.
2. Material
2.1. Vidraria, utenslios e outros:
Pipetas graduadas de 2 e 5 mL;
Tubo de ensaio de 25 mL.
2.2. Reagentes:
3. Procedimento
Homogeneizar a amostra de manteiga e transferir cerca de 100 g da amostra para bquer de 150 mL,
fundir em estufa a 50 C. Deixar separar as camadas. Colocar em tubo de ensaio 2 mL da fase aquosa da
manteiga e adicionar 2 mL de soluo de hidrxido de sdio a 33 % e 1 mL de soluo de creatinina a 0,5
%. Agitar em agitador de tubo e esperar 10 minutos.
4. Resultado
Positivo: desenvolve-se uma colorao rsea a vermelho, conforme a quantidade de diacetil presente.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Manteiga.In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos.
Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 21, p. 10.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93.
Darmstadt, 1993. 1584 p.
FERVURA
1. Princpio
Quando a acidez elevada, h precipitao das protenas do leite pelo aquecimento.
2. Material
2.1. Equipamento:
Bico de Bunsen.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Garra metlica;
Pina para tubo de ensaio;
Tubo de ensaio.
3. Procedimento
Aquecer at a fervura, em tubo de ensaio, pequena quantidade de leite agitando constantemente. Observar
se o leite coagula.
4. Resultado
Positivo: formao de grumos.
BIBLIOGRAFIA BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria.
Laboratrio Nacional de Referncia Animal. Leite fluido. In: _____. Mtodos analticos oficiais para
controle de produtos de origem animal e seus ingredientes: mtodos fsicos e qumicos.
2. Material
2.1. Equipamento:
Balana analtica.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Bqueres de 50 e 100 mL;
Funil;
Papel de filtro qualitativo;
Pipetas volumtricas de 5, 10 e 20 mL;
Tubos de ensaio 20 x 200 mm.
2.3. Reagentes:
Soluo cida de nitrato de mercrio (Hg (NO3)2) 0,265 N:
mercrio (Hg) dissolvido em duas vezes o seu peso em cido ntrico, e essa soluo diluda 25 vezes o seu
volume com gua, ou soluo de nitrato de mercrio II monohidratado Hg (NO3)2.H2O 0,1 N;
Soluo saturada de cido pcrico (C6H3N3O7).
3. Procedimento
Leite fludo e leite fermentado: transferir 10 mL ou 10 g de amostra para um bquer de 100 mL.
Adicionar 10 mL de soluo de nitrato de mercrio e misturar. Adicionar 20 mL de gua e misturar
novamente. Deixar em repouso por 5 minutos e filtrar para bquer de 50 mL. Transferir 5 mL do filtrado
obtido para tubo de ensaio e adicionar igual volume de soluo saturada de cido pcrico. Fazer em
paralelo uma prova em branco para comparao final. Observar os tubos no momento e tornar a
observ-los no dia seguinte. Opcionalmente, a soluo cida de nitrato de mercrio 0,265 N poder ser
substituda por uma soluo de nitrato de mercrio II 0,1 N. Neste caso, aos 10 mL ou 10 g da amostra
adicionar 25 mL da soluo de nitrato de mercrio II 0,1 N e misturar. Adicionar 5 mL de gua e misturar
novamente. Deixar em repouso por 5 minutos e filtrar para bquer de 50 mL. A partir deste ponto, seguir
o procedimento j descrito.
4. Resultado
Positivo: formao de um precipitado amarelo, de partculas finamente divididas que sedimentam
lentamente. Aps uma noite em repouso o depsito viscoso estar aderido no fundo e nas paredes laterais
do tubo, de tal forma que, agitando e vertendo o tubo com enxague simples no se desprender.
Negativo: formao de um precipitado amarelo floculento, com produo de um soro praticamente
lmpido. Esse precipitado no adere s paredes do tubo e facilmente removvel com gua, mesmo aps
uma noite de repouso.
Prova em branco: filtrado levemente turvo. Aps repouso, o depsito se desprender facilmente do fundo
do tubo por simples agitao.
BIBLIOGRAFIA
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1999/2000. Darmstadt, 1440 p.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Banho-maria;
Placa aquecedora.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Bureta de 10 mL;
Bquer de 150 mL;
Pipetas volumtricas de 1, 2 e 11 mL.
2.3. Reagentes:
Soluo alcolica de fenolftalena (C20H14O4) a 1 % (m/v);
Soluo de cido sulfrico (H2SO4) 0,025 N;
Soluo de hidrxido de sdio (NaOH) 0,1 N.
3. Procedimento
Transferir 11 mL da amostra para bquer de 150 mL, adicionar 5 gotas de soluo alcolica de
fenolftalena a 1 % e titular com soluo de hidrxido de sdio 0,1 N at colorao rsea persistente.
Reacidificar com 1 mL de soluo de cido sulfrico 0,025 N, aquecer at ebulio, esfriar rapidamente
em banho de gelo e adicionar 2 mL de soluo alcolica de fenolftalena a 1 %.
4. Resultado
Positivo: colorao rsea, neutralizao com carbonato de sdio (Na2CO3) ou com bicarbonato de sdio
(NaHCO3).
BIBLIOGRAFIA
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
ROSELL, J.M.; GOMEZ, J.Investigacion de conservadores em la leche.In _____. Manual de analisis
lactologicos y fabricacion de quesos e mantecas. La Coruna: Trofos, 1960.cap.12,p.149-150.
PEROXIDASE
1. Princpio
A peroxidase, ao hidrolisar o perxido de hidrognio, libera oxignio, o qual transformar o guaiacol da
sua leucobase para a forma corada.
2. Material
2.1. Equipamento:
Banho-maria.
Leite fluido. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap.14, p. 9.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
PUS
1. Princpio
A soluo hidroalcolica de fucsina de Ziehl provoca o aparecimento de filamento ou grumos quando em
presena de pus, em amostras levemente alcalinizadas.
2. Material
2.1. Vidraria, utenslios e outros:
Lmina de microscpio;
Pipeta graduada de 1 mL.
2.2. Reagentes:
Hidrxido de amnio (NH4OH) p.a.;
Soluo fucsina de Ziehl: soluo de fucsina bsica (C19H19N3O) p.a. a 1 % (m/v) em soluo
hidroalcolica a 50 %.
3. Procedimento
Colocar em uma lmina 0,1 mL de leite in natura e 0,1 mL de hidrxido de amnio. Misturar e deixar em
repouso por 30 segundos. Colocar 1 gota da soluo fucsina de Ziehl e lavar lentamente com gua
corrente. Agitar levemente.
4. Resultado
Positivo: formao de filamentos, grumos, ou vu avermelhado, que no se desfazem com leve agitao.
BIBLIOGRAFIA BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria.
Laboratrio Nacional de Referncia Animal.
Leite fluido. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap.14, p. 21.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
Revista do Instituto de Laticnios Cndido Tostes, Juz de Fora, MG, v. 39, n. 236, p. 13-17, 1984.
SANGUE
1. Princpio
Fundamenta-se na separao das hemcias por centrifugao.
2. Material
2.1. Equipamento:
Centrfuga.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Pipeta graduada de 10 mL;
Tubo de centrfuga.
3. Procedimento
Colocar 10 mL de leite in natura em tubo de centrfuga e centrifugar a 1200 - 1500 rpm por 5 minutos.
4. Resultado
Em presena de sangue forma-se um depsito avermelhado no fundo do tubo.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Leite fluido. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 14, p. 21.
V - MTODOS QUANTITATIVOS
ACIDEZ TITULVEL DE CREME DE LEITE, DOCE DE LEITE E LEITE CONDENSADO
1. Princpio
Consiste na titulao de determinada massa da amostra por uma soluo alcalina de concentrao
conhecida, utilizando como indicador fenolftalena.
2. Material
2.1. Equipamento:
Balana analtica.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Basto de vidro;
Bquer de 150 mL;
Bureta de 10 mL.
2.3. Reagentes:
Soluo de hidrxido de sdio (NaOH) 0,1 N;
Soluo alcolica de fenolftalena (C20H14O4) a 1 % (m/v).
3. Procedimento
Adicionar a amostra previamente preparada conforme (3.1. e 3.2.) 10 gotas de soluo de fenolftalena a 1
% e titular com a soluo de hidrxido de sdio 0,1 N at aparecimento de colorao rsea persistente por
aproximadamente 30 segundos.
3.1. Creme de leite: pesar 10 g de amostra, adicionar 50 mL de gua isenta de gs carbnico (CO2) e
homogeneizar;
3.2. Doce de leite e leite condensado: Pesar 5 g de amostra, adicionar 50 mL de gua morna (50 C) e
homogeneizar.
4. Clculos
% de cido ltico = V x f x 0,9 m
Onde:
V = volume de soluo de hidrxido de sdio 0,1 N gasto na titulao, em mL;
f = fator de correo da soluo de hidrxido de sdio 0,1 N;
m = massa da amostra, em gramas.
Observao: Para expressar o resultado em graus Dornic, multiplicar a % de cido ltico por 100.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Creme. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos.
Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 18, p. 2.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
ACIDEZ TITULVEL DE LEITE DESIDRATADO
Mtodo A
1. Princpio
Consiste na titulao potenciomtrica at pH 8,4 de determinada massa de amostra reconstituda
correspondente a 10 g de slidos no gordurosos (SNG), com soluo alcalina de concentrao conhecida.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
pH-metro.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Barra magntica;
Bureta de 10 mL;
2. Material
2.1. Equipamento:
Balana analtica.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Barra magntica;
Buretas graduadas de 0,1 e 10 mL;
Erlenmeyer de 125 mL;
Pipeta volumtrica de 2 mL;
Proveta de 50 mL.
2.3. Reagentes:
Soluo hidroalcolica de fenolftalena a 2 %: pesar 2 g de fenolftalena (C20H14O4) p.a., dissolver em
75 mL de lcool etlico (C2H5OH) p.a. e acrescentar 20 mL de gua. Gotejar soluo de hidrxido de
sdio (NaOH) 0,1 N at colorao levemente rsea, transferir para balo volumtrico de 100 mL e
completar o volume com gua;
Soluo de hidrxido de sdio (NaOH) 0,1 N;
Soluo referncia de cor: soluo de sulfato de cobalto heptahidratado (CoSO4.7H2O) a 3 % (m/v).
3. Procedimento
Conhecendo previamente os teores de gordura e umidade, obtidos atravs de metodologia apropriada,
somar ambos os valores e subtra-los de 100. Dividir 500 pelo resultado da subtrao mencionada
acima.Exemplo: 26 % de gordura + 2,5 % de umidade = 28,5\100 - 28,5 = 71,5\500 71,5 = 6,993. Pesar a
alquota da amostra sob anlise diretamente no erlenmeyer, efetuando os clculos necessrios para
determinar o seu valor, conforme exemplo acima. Reconstituir em duplicata a amostra com 50 mL de
gua, agitar vigorosamente e deixar em repouso por 20 minutos. Adicionar a um dos erlenmeyer 2 mL da
soluo de referncia de cor e agitar ligeiramente, de modo a obter um padro de cor, o qual poder ser
usado por um perodo de 2 horas. Adicionar 2 mL da soluo hidroalcolica de fenolftalena a 2 % ao
outro erlenmeyer, misturando com ligeira agitao. Titular o contedo do segundo erlenmeyer, sob
agitao, com a soluo de hidrxido de sdio 0,1 N at o surgimento de uma colorao rsea persistente.
A titulao dever ser concluda em 45 segundos.
4. Clculos
Acidez Titulvel, mL de NaOH 0,1N/10g de SNG = 2 x V x f
Onde:
V = volume de soluo de hidrxido de sdio 0,1N gasto na
titulao, em mL;
f = fator de correo da soluo de hidrxido de sdio 0,1 N.
Observao: A diferena entre resultados de duas determinaes conduzidas em rpida sucesso pelo
mL dessa soluo para 500 mL com uma mistura de lcool etlico p.a. e gua em iguais propores por
volume (soluo de trabalho). Ambas as solues devem ser estocadas em local escuro, em garrafas
mbar tampadas com rolhas de borracha. Adicionar 1 mL da soluo de trabalho a 10 mL da amostra a ser
titulada, agitar bem e adotar a colorao obtida como referncia para o trmino da titulao.
3. Procedimento
Transferir 10 mL da amostra para o bquer e adicionar 4 - 5 gotas da soluo de fenolftalena a 1 % e
titular com soluo de hidrxido de sdio 0,1 N ou com a soluo Dornic, at aparecimento de colorao
rsea persistente por aproximadamente 30 segundos.
4. Clculos
4.1. Usando soluo de hidrxido de sdio 0,1 N:
Acidez (oDornic) = V x f x 0,9 x 10 Onde:
V = volume da soluo de hidrxido de sdio 0,1 N gasto na titulao, em mL;
f = fator de correo da soluo de hidrxido de sdio 0,1 N;
0,9 = fator de converso do cido ltico;
10 = transformao de cido ltico para grau Dornic.
4.2. Usando Soluo Dornic:
1 mL de NaOH 0,1 N = 0,0090 g de cido ltico
Acidez (Dornic) = V x f x 10
Onde:
V = volume da soluo de hidrxido de sdio 0,1 N gasto na titulao, em mL;
f = fator de correo da soluo de hidrxido de sdio 0,11 N ou N/9.
10 = transformao de cido ltico para grau Dornic.
BIBLIOGRAFIA
ATHERTON, H.V.; NEWLANDER, J.A. Acidity of milk and its produts. In: _____. Chemistry and
testing of dairy products. 4th ed.
Westport:AVI. 1977p.246-253.
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Leite fluido. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 14, p. 1.
DAVIS, J. G. Food Industries Manual, 1970.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
ACIDEZ TITULVEL DA MANTEIGA
1. Princpio
Consiste na titulao de determinada massa de gordura filtrada, dissolvida em solvente apropriado por
uma soluo alcalina de concentrao conhecida, utilizando como indicador fenolftalena.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Estufa ou banho-maria.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Bqueres de 100 e 250 mL;
Bureta de 25 mL;
Funil;
Papel de filtro qualitativo;
Proveta de 50 mL.
2.3. Reagentes:
Soluo de lcool etlico (C2H5OH) e ter etlico (C4H10O) (1+2) neutralizada;
Soluo alcolica de fenolftalena (C20H14O4) a 1 % (m/v);
Soluo de hidrxido de sdio (NaOH) 0,1 N.
3. Procedimento
Fundir uma determinada quantidade da amostra em estufa a 40 - 50 C em bquer. Deixar que ocorra a
separao de fase e filtrar a fase lipdica em papel de filtro, recebendo em outro bquer. Pesar uma
alquota de aproximadamente 5 g da gordura filtrada, em bquer de 250 mL, acrescentar cerca de 40 mL
de soluo lcool etlico e ter etlico (1+2) neutralizada. Adicionar 5 gotas de soluo alcolica de
fenolftalena a 1 % e titular com soluo de hidrxido de sdio 0,1 N, at leve colorao rsea, persistente
por 15 a 20 segundos.
4. Clculos
Soluo alcalina normal (SAN) % = V x f x N x 100 m
Onde:
V = volume da soluo de hidrxido de sdio 0,1 N gasto na titulao, em mL;
f = fator de correo da soluo de hidrxido de sdio 0,1 N;
N = normalidade da soluo de hidrxido de sdio 0,1N;
m = massa da gordura, em gramas.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Manteiga. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 21, p., p. 4-5.
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Salsicharia In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap 2, p. 29.
WOOLLEN,H.(Ed). Food Industries Manual, 20 th ed.New Iork1:Chemical Publishing, {1970?] .
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
ACIDEZ TITULVEL DE QUEIJO
1. Princpio
Os cidos graxos livres soluveis so extrados com gua a 40 C e neutralizados at o ponto de
equivalncia, com soluo alcalina de concentrao conhecida, utilizando como indicador fenolftalena.
2. Material
2.1. Equipamento:
Balana analtica.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Balo volumtrico de 100 mL;
Bquer de 150 mL;
Bureta de 25 mL;
Funil;
Pipeta volumtrica de 50 mL.
2.3. Reagentes:
Soluo alcolica de fenolftalena (C20H14O4) a 1 % (m/v);
Soluo de hidrxido de sdio (NaOH) 0,1 N.
3. Procedimento
Transferir 10 g da amostra para um bquer de 150 mL, acrescentar cerca de 50 mL de gua morna isenta
de gs carbnico (CO2) (40 oC) e agitar com basto de vidro at dissoluo possvel.
Transferir quantitativamente para balo volumtrico de 100 mL, esfriar em gua corrente e completar o
volume. Transferir uma alquota de 50 mL para um bquer de 150 mL, acrescentar 10 gotas de soluo
alcolica de fenolftalena a 1 % e titular com soluo de hidrxido de sdio 0,1 N at leve colorao rsea
Funil de vidro;
Papel de filtro qualitativo;
Pipetas automticas de 0,1, 0,5 e 1,0 mL;
Pipetas graduadas de 5 e 10 mL;
Tubos de centrfuga;
Tubos de ensaio.
2.3. Reagentes:
cido actico (CH3COOH) glacial;
cido Silico (C11 H19NO9) p.a.;
lcool etlico a 95%;
Soluo de cido fosfotngstico (H3[P(W3O10)4].xH2O) a 20 % (m/v);
Soluo de cido tricloroactico (C2HCl3O2) a 24 % (v/v);
Soluo de ninidrina cida: dissolver 1g de ninidrina (C9H6O4) p.a. em 16 mL de cido clordrico p.a. e
24 mL de cido actico (CH3COOH) glacial.
3. Procedimento
Adicionar sob agitao, 10 mL de soluo de cido tricloroactico (TCA) a 24 % em 10 mL de leite,
misturar e deixar em repouso por 30 minutos. Filtrar e transferir 10 mL do filtrado para tubo de
centrfuga, adicionar 1 mL de soluo de cido fosfotngstico a 20 %, centrifugar a 3500 rpm por 10
minutos (ou 2.000 gravidades).
Descartar cuidadosamente o sobrenadante e adicionar 4 mL de lcool etlico a 95 %, dispersar o
sedimento com basto de vidro. Lavar o basto com 2 mL de lcool etlico a 95 %. Centrifugar
novamente a 3500 rpm por 10 minutos, descartar o sobrenadante e adicionar 2 mL de cido actico glacial
e 1 mL da soluo de ninidrina cida. Misturar e levar ao banho-maria por exatamente 10 minutos para
desenvolvimento de cor, que dever variar do amarelo claro ao marrom amarelado. Esfriar at
temperatura ambiente em banho de gelo. Fazer a leitura da absorbncia a 470 nm, utilizando-se a curva
padro previamente elaborada com cido silico.
4. Clculos
Preparo da curva padro de cido silico:
Preparar uma soluo estoque contendo 294 mg de cido silico/mL. Diluir at uma soluo de trabalho
contendo 98 mg de cido silico/mL, de onde devero ser tomadas 10 alquotas em duplicata, sendo a
inicial de 0,001 mL e a final de 1 mL, representando concentraes variando de 9,8 a 98 mg de cido
silico. Completar os volumes das alquotas at um total de 1 mL com gua. Acrescentar a cada tubo 1
mL de cido actico glacial e 1 mL de soluo de ninidrina cida. Transferir os tubos para banho-maria
durante 10 minutos.
Esfriar at temperatura ambiente em banho de gelo. Realizar leitura em espectrofotmetro a 470 nm.
Construir a curva.
Relacionar a leitura da absorbncia da amostra com a curva padro de cido silico, e expressar o
Onde:
V = diferena entre os volumes da soluo de cido clordrico 0,1 N adicionado e da soluo de hidxido
de sdio 0,1 N gasto na titulao, em mL;
N = normalidade da soluo de hidrxido de sdio 0,1 N;
f = fator de correo da soluo de hidrxido de sdio 0,1 N;
0,053 = miliequivalente-grama do carbonato de sdio;
m = massa da amostra, em gramas.
Observao: Valores normais para leite fludo: entre 0,015 % e 0,030 %. Valores superiores, sobretudo
acima de 0,040 %, caracterizam adio de substncias alcalinas.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Leite fluido. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 14, p. 13-14.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
RICHARDSON,G.H. Dairy products. In: HELRICH, K.
(Ed.) Official methods of analysis of the Association of Official Analytical Chemists: food composition:
additives: natural contaminants.
15th ed. Arlington: Association of Official Analytical Chemists, 1990. v. 2, cap 33, p. 835.
CLCIO
1. Princpio
O clcio se precipita como oxalato a pH 4,0, para impedir interferncias de ons fosfatos. O oxalato de
clcio dissolvido em cido sulfrico e o cido oxlico que se libera titulado com permanganato de
potssio.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Forno mufla;
Placa aquecedora.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Balo volumtrico de 200 mL;
Basto de vidro de aproximadamente 25 cm de comprimento;
Pesar exatamente entre 5 e 10 g da amostra de leite fludo ou quantidade adequada de outros produtos em
cadinho. Carbonizar em placa aquecedora (pode ser conveniente secar inicialmente em fluxo de vapor) e
levar mufla a 550 - 600 oC at obteno de cinzas brancas (3 horas no mnimo). Esfriar sobre a bancada
at temperatura ambiente. Com auxlio de basto de vidro e gua destilada, transferir as cinzas para
bquer de 300 mL de forma alta. Lavar o cadinho com pequenas pores de cido clordrico (1 + 1),
totalizando 40 mL.
Lavar em seguida com mais algumas pores de gua destilada completando o volume final de
aproximadamente 100 mL. Cobrir com vidro de relgio e aquecer em placa aquecedora a 180 C, at
obter reduo de 1/3 do volume inicial. Esfriar. Filtrar em papel de filtro qualitativo, recebendo o filtrado
em balo volumtrico de 200 mL.
Lavar o papel de filtro com gua, misturar o contedo do balo e completar o volume. Esse material
constituir a soluo estoque, e ser utilizado para a determinao de clcio por oxidimetria e de fsforo
por colorimetria. Pipetar volumetricamente uma alquota adequada da soluo estoque para bquer de 400
mL. Adicionar 2 a 3 gotas de soluo alcolica de vermelho de metila a 0,1 % e diluir com gua at cerca
de 50 mL. Aquecer brandamente em placa aquecedora at incio de fervura. Acrescentar, sob agitao
constante, 25 mL de soluo saturada de oxalato de amnio a quente. Em seguida, adicionar soluo de
hidrxido de amnio (1 + 1) gota a gota at modificao da colorao avermelhada para amarelo - plido.
Deixar em repouso durante 1 hora. Filtrar lenta e cuidadosamente sob vcuo, usando cadinho de Gooch
com elemento filtrante. Lavar o bquer e o cadinho de Gooch com cerca de 100 mL de soluo de amnio
(1 + 50), mantendo o cadinho acoplado ao sistema de vcuo. Evitar suspender o elemento filtrante na
soluo de lavagem durante a operao.
Transferir o cadinho de Gooch com o precipitado de oxalato de clcio retido pelo filtro para o bquer
original. Adicionar gua at cobrir o cadinho, acrescentar 10 mL da soluo de cido sulfrico (1 + 1) e
aquecer em placa aquecedora at prximo ebulio, para dissolver o precipitado. Nesse ponto, o
material poder ser reservado at o dia seguinte para continuar com a determinao, se necessrio, sem
que ocorram perdas. O cido oxlico liberado a partir da hidrlise cida do oxalato de clcio dever ser
titulado com soluo de permanganato de potssio 0,05 N sob constante agitao at que seja obtida
colorao rsea clara persistente por 30 segundos, utilizando, para isso, um basto de vidro que dever ser
inserido no interior do cadinho. Este dever ser girado junto parede do bquer, de maneira uniforme e
constante. A temperatura do lquido no interior de bquer no dever cair para valores abaixo de 75 oC.
4. Clculos
% clcio = V x N x f x 0,02004 x S x 100 m x A
Onde:
V = volume da soluo de permanganato de potssio 0,05 N gasto na titulao, em mL;
N = normalidade da soluo de permanganato de potssio 0,05 N;
f = fator de correo da soluo de permanganato de potssio 0,05 N;
S = volume total da soluo estoque 200 mL;
m = massa da amostra, em gramas;
A = alquota utilizada da soluo estoque;
0,02004 = miliequivalente-grama do clcio.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. MINISTRIO DA AGRICULTURA E DO ABASTECIMENTO.
2. Material
2.1. Vidrarias, utenslios e outros:
Proveta de 500 mL ou de 1000 mL;
Papel toalha absorvente;
Termolactodensmetro.
3. Procedimento
Transferir cerca de 500 mL (ou cerca de 1000 mL) de leite para uma proveta de capacidade
correspondente, evitando incorporao de ar e formao de espuma. Introduzir o termolactodensmetro
perfeitamente limpo e seco na amostra, deixar flutuar sem que encoste na parede da proveta. Observar a
densidade aproximada, erguer cuidadosamente o termolactodensmetro e enxugar sua haste com papel
absorvente, retornando o aparelho posio anteriormente observada.
Deixar em repouso por 1 a 2 minutos e fazer a leitura da densidade na cspide do menisco. Observar a
temperatura sempre que possvel, fazer a leitura da densidade a 15C. Pode-se fazer a correo para 15C
acrescentando leitura 0,0002 para cada grau acima de 15C ou subtraindo 0,0002 para cada grau abaixo.
De qualquer forma no devero ser feitas leituras de densidade em amostras com temperatura inferior a
10oC ou superior a 20oC.
Observao: Calibrao do termolactodensmetro: dessecar cloreto de sdio (NaCl) p.a. em forno mufla a
300 C por 2 horas ou em estufa a 105 C por 24 horas. Pesar rpida e exatamente 44 g de cloreto de
sdio. Dissolver e transferir para balo volumtrico de 1000 mL, completando o volume com gua
destilada. Esta soluo dever apresentar a densidade de 1,030 g/mL a 20 C. Introduzir o
termolactodensmetro na soluo a 20 C e calcular a correo.
C=D-L
Onde:
C = fator de correo;
D = densidade da soluo preparada (1,030) L = leitura no termolactodensmetro.
O fator de correo dever ser adicionado ao valor da leitura da densidade da amostra de leite
previamente a correo da densidade para 15 C.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Leite fluido. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 14, p. 2.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
SILVA, P.H.F. Controle interno de qualidade. In: CURSO SOBRE CONTROLE INTERNO DE
QUALIDADE DOS LABORATRIOS DE LATICNIOS. [Juiz de Fora]: Instituto de Laticnios Cndido
Tostes, 1992. Parte I. Ministrado na XXXIII Semana do Laticinista, 1992).
DEPRESSO DO PONTO DE CONGELAMENTO
1. Princpio
O super congelamento de uma amostra de leite a uma temperatura apropriada e aplicao de uma agitao
mecnica ocasiona um rpido aumento da temperatura at um patamar o qual corresponde ao ponto de
congelamento da amostra.
2. Material
2.1. Equipamento:
Crioscpio eletrnico.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Pipeta graduada de 5 mL;
Tubo de vidro.
2.3. Reagentes:
Solues de cloreto de sdio (NaCl) a 0,6859 % (m/v) (
0,422 H) ou (-0,408 C) e a 1,0155 %(m/v) (-0,621 H) ou (-0,600 C): secar o cloreto de sdio p.a em
forno mufla a 300 C por 5 horas ou em estufa a 130 C por 24 horas, esfriar em dessecador e pesar, exata
e rapidamente 6,859 g e 10,155 g do sal. Dissolver e transferir para bales de 1000 mL, completando o
volume com gua fervida e resfriada a 20 C. Estocar as solues em frasco plstico rgido, com tampa
interna de presso e externa rosquevel. Conservar em geladeira.
3. Procedimento
Seguir atentamente as instrues do fabricante do aparelho, especialmente no que se referir ao banho de
refrigerao, o agitador e o procedimento de calibrao com as solues padres -0,422 H e -0,621 H ou
as recomendadas pelo fabricante. Realizar calibrao com os padres na mesma temperatura das
amostras. De modo geral o volume recomendado de soluo de calibrao e de amostra de 2,5 mL para
cada determinao. Efetuar trs determinaes para cada amostra em 3 tubos distintos. Os resultados dos
testes devem ser prximos, com uma tolerncia de mais ou menos 2 miligraus ( 0,002 H). Aps cada
leitura, limpar cuidadosamente o sensor e o agitador com gua e secar delicadamente com papel
absorvente fino.
4. Clculos
Uma vez obtida as trs leituras, calcular a mdia aritmtica.
Considerar apenas as leituras dentro dos limites de tolerncia de mais ou menos 2 miligraus.
Equivalncia entre as escalas Hortvet (H) e Celsius(C)
T(C) = 0,9656 x T(H)
T(H) = 1,0356 x T(C)
Observao: Uma soluo de cloreto de sdio (NaCl) 0,8646 % (-0,530 H ou -0,512 C) servir para
verificar a calibrao do aparelho.
BIBLIOGRAFIA
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 108 B:1991:
+ 0,3 mm, sem fundo, com extremidades esmerilhadas paralelas formando ngulos retos com eixo
longitudinal.
3. Procedimento
Transferir cuidadosamente uma poro de leite em p instantneo para um frasco com tampa hermtica e
com capacidade 2 vezes superior ao volume da amostra. Misturar cuidadosa e totalmente a amostra por
inverso e rotao do frasco. A amostra dever permanecer a temperatura do laboratrio por no mnimo
48 horas.
Paralelamente determinar o teor de slidos totais da amostra. Pesar uma alquota de 26 + 0,1 g de leite em
p desnatado instantneo ou 34 + 0,1 g de leite em p integral instantneo. Conduzir o teste em duplicata.
Pesar 250 + 0,1 g de gua a 25 + 1 C em um bquer de 600 mL, tendo o cuidado para que a parte interna
do bquer acima do nvel da gua permanea seca. Colocar o bquer na base do suporte do tubo de vidro.
Colocar a placa de vidro centralizada sobre o bquer e instalar o tubo de vidro sobre a placa fixando-o
com um gancho de tal forma que fique centralizado sobre o bquer e que deixe a placa de vidro livre o
suficiente para ser retirada. Transferir a poro pesada da amostra para o tubo de vidro, usando a escova
se necessrio e distribuir a amostra uniformemente sobre a placa de vidro com a ajuda da esptula.
Acionar o cronmetro e, aps exatamente 1 minuto, retirar a placa de vidro com uma das mos, segurando
o bquer com a outra de modo que a amostra caia progressivamente sobre a superfcie da gua contida no
bquer. A retirada da placa deve ser conduzida atravs de movimento contnuo e suave, sendo concluda
dentro de aproximadamente 2,5 segundos.
Remover imediatamente o bquer de debaixo do tubo e, quando o ponteiro principal do cronmetro
indicar 5 segundos, inserir a esptula no bquer at tocar o fundo. Durante os prximos 5 segundos, agitar
o contedo do bquer com a esptula, fazendo um movimento completo por segundo, isto , levando a
esptula de um ponto ao outro diametralmente oposto e retornando posio inicial. A extremidade da
esptula dever estar sempre tocando o fundo do bquer.
Inclinar ligeiramente a esptula ao final de cada metade do seu movimento completo, para minimizar o
acmulo de leite em p no umedecido junto parede do bquer. Sem interrupo, continuar a agitao
por mais 15 segundos, da mesma maneira, deixando a esptula sempre na posio vertical. No mesmo
tempo em que estiver sendo feito o movimento com a esptula, o bquer dever ser girado aos poucos, de
forma que, ao final dos 20 segundos de tempo total de agitao da amostra na gua, o bquer desenvolva
um giro de 360 C.
Concluda a agitao, deixar o contedo do bquer em repouso por 30 segundos, ou seja, at que o
ponteiro principal do cronmetro atinja 55 segundos. Em seguida, sem produzir qualquer distrbio no
sedimento, verter na peneira, da maneira mais uniforme possvel, a camada superior do lquido at que
este atinja a marca de 150 mL.
Debaixo da peneira estar adaptado o vasilhame receptor. O conjunto peneira/receptor no dever ser
inclinado ou movido durante a filtrao.
Para facilitar a passagem do lquido durante a filtrao, a peneira dever ser umedecida com gua antes do
seu uso, retirandose o excesso de gua com um papel toalha. As superfcies superior e inferior da malha
metlica devero ser apenas superficialmente enxutos, ao passo que o vasilhame receptor dever
permanecer limpo e seco antes do seu uso. Trinta segundos aps o incio da operao de filtrao atravs
da peneira, ou seja, quando o ponteiro principal do cronmetro tiver retornado posio de 25 segundos,
transferir, to completamente quanto possvel, o contedo do vasilhame receptor para um erlenmeyer por
intermdio de um funil, fechando, a seguir, o erlenmeyer com sua tampa. Misturar completamente o
lquido no frasco mediante repetidas inverses deste ltimo. Determinar, neste material, o teor de slidos
totais, em duplicata, extraindo a mdia das duas determinaes.
4. Clculos
Calcular o valor de cada duplicata da determinao da dispersibilidade, em porcentagem, usando a
seguinte frmula:
a) Leite em p desnatado instantneo:
D = _ S x 962__100 - (U+S)
b) Leite em p integral instantneo:
D = S x 735___100 - (U + S)
Onde:
D = % dispersibilidade;
S = % de slidos totais do lquido obtido na filtrao, (m/m);
U = % de umidade, (m/m).
A diferena entre valores obtidos em duplicata para a dispersibilidade no devero exceder a 4 %.
BIBLIOGRAFIA
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 87:1979: determination of the dispersibility and
wettabilityof instant dried milk.
Brussels, 1987. 4 f.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
EXTRATO SECO TOTAL E DESENGORDURADO Mtodo A: Gravimtrico
1. Princpio
Consiste na perda da umidade e volteis por dessecao e pesagem do resduo assim obtido.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria;
Estufa.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Cpsula com tampa (de ao inoxidvel, alumnio ou nquel) com 20 a 25 mm de altura e 50 a 75 mm de
dimetro;
Dessecador; Pipeta graduada de 5 mL; Tenaz metlica.
3. Procedimento
Aquecer a cpsula e tampa em estufa a 102 + 2 C por no mnimo 1 hora. Colocar a tampa na cpsula,
esfriar em dessecador at temperatura ambiente (no mnimo 30 minutos) e pesar. Pesar exatamente cerca
de 5 g de leite fludo homogeneizado. Inclinar a cpsula para espalhar a poro por igual no fundo.
Pr-aquecer a cpsula por 30 minutos em banho-maria. Aquecer a cpsula, com sua tampa ao lado, em
estufa 102 + 2 C por 2 horas. Colocar a tampa sobre a cpsula, esfriar em dessecador temperatura
ambiente (no mnimo 30 minutos) e pesar. Repetir a operao de aquecimento por 1 hora, esfriar e pesar.
Repetir esta ltima operao at que a diferena entre as duas pesagens consecutivas no exceda a 1 mg.
Para a determinao da porcentagem de extrato seco desengordurado, determinar a porcentagem de
gordura na amostra.
4. Resultados
4.1. % extrato seco total = [(m2 - m0) / (m1 - m0)] x 100 Onde:
mo = massa da cpsula e tampa, em gramas;
m1 = massa da cpsula, tampa e amostra, em gramas;
m2 = massa da cpsula, tampa e amostra seca, em gramas.
4.2. % extrato seco desengordurado = % extrato seco total - % gordura
BIBLIOGRAFIA
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 21B:1987:
milk. cream and evaporated milk: determination of total solids content (reference method).Brussels, 1987.
2 f.
EXTRATO SECO TOTAL E DESENGORDURADO Mtodo B: Disco de Ackermann
1. Princpio
A utilizao de instrumento apropriado permite determinar o teor de extrato seco total por meio dos
valores de densidade e do teor de gordura.
2. Material
2.1. Equipamento:
Disco de Ackermann
3. Procedimento
3.1. Determinao do extrato seco total:
Fazer coincidir as graduaes dos crculos interno e mdio, correspondentes a densidade corrigida e a
porcentagem de gordura. A posio da seta indicar no crculo externo a porcentagem de extrato seco
total.
NOTA:
A porcentagem de extrato seco total poder ser tambm calculada atravs das seguintes frmulas:
Frmula de Fleishmann:
% extrato seco = 1,2 G + 2,665 [(100 D - 100)/D]
Frmula Prtica:
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Placa aquecedora;
Banho-maria.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Balo volumtrico de 100 e 250 mL;
Bquer de 150 mL;
Bureta de 50 mL;
Condensador;
Erlenmeyer de 250 mL;
Funil;
Papel de filtro qualitativo;
Papel indicador de pH;
Pipetas volumtricas de 2, 5 e 10 mL.
2.3. Reagentes:
cido clordrico (HCl) p.a.;
lcool etlico (C2H5OH) p.a.;
Soluo de azul de metileno (C16H18ClN3.3H2O) a 1 % (m/v);
Soluo de ferrocianeto de potssio trihidratado (K4[Fe(CN)6].3H2O) a 15 % (m/v);
Soluo de hidrxido de sdio (NaOH) a 40 % (m/v);
Soluo de sulfato de zinco heptahidratado (ZnSO4.7H2O) ou soluo de acetato de zinco dihidratado
((CH3COO)2Zn.2H2O) a 30 % (m/v);
Soluo de Fehling A: dissolver 34,65 g de sulfato de cobre pentahidratado (CuSO4.5H2O) p.a., transferir
para um balo volumtrico de 1000 mL e completar o volume;
Soluo de Fehling B: dissolver 173 g de tartarato duplo de potssio e sdio (C4H4KNaO6.4H2O) p.a.,
em soluo de hidrxido de sdio (NaOH) p.a. 125 g em 300 mL, completar o volume para 1000 mL e
deixar em repouso por 24 horas.
Padronizao da soluo de Fehling: pesar exatamente 0,5 g de glicose (C6H12O6) p.a., previamente seca
em estufa a 70 0C, durante 1 hora. Transferir para balo volumtrico de 100 mL com auxlio de gua.
Dissolver bem e completar o volume. A soluo padro de glicose para titular a soluo de Fehling deve
ser recentemente preparada. Colocar na bureta a soluo padro de glicose.
Transferir, com pipeta volumtrica, 10 mL de cada uma das solues de fehling A e B para erlenmeyer de
250 mL. Adicionar 40 mL de gua e aquecer at ebulio. Gotejar a soluo padro, sem agitao at
quase o final da titulao, mantendo a ebulio. Adicionar 1 gota de soluo de azul de metileno a 1 % e
completar a titulao at descoramento do indicador. O tempo da titulao no deve ultrapassar a 3
minutos. O final da titulao ser em torno de 10 mL da soluo padro de glicose.
O ttulo da soluo de Fehling ser obtido pelo clculo:
T = V x m 100
Onde:
V = volume gasto de glicose na titulao, em mL;
m = massa da glicose, em gramas.
3. Procedimento
Glicdios redutores em lactose: adicionar s amostras preparadas conforme os itens 3.1. a 3.4., 5 mL de
soluo de ferrocianeto de potssio a 15 % e 5 mL de soluo de sulfato ou acetato de zinco a 30 %.
Agitar e completar o volume com gua. Deixar sedimentar e filtrar em papel de filtro e receber o filtrado
em erlenmeyer. Reservar o resduo da filtrao para anlise de amido. Transferir o filtrado obtido para
uma bureta de 50 mL. Pipetar volumetricamente para um erlenmeyer 5 mL da soluo de Fehling A e 5
mL de soluo de Fehling B. Adicionar 40 mL de gua, aquecer at a ebulio e gotejar a soluo da
amostra, sem agitao, at que o lquido sobrenadante fique levemente azulado. Manter a ebulio e
adicionar 1 gota de soluo de azul de metileno a 1 % e continuar at descolorao do indicador.
Glicdios no redutores em sacarose: transferir 50 mL do filtrado obtido na determinao da lactose para
balo volumtrico de 100 mL. Adicionar 2 mL de cido clordrico p.a. e levar ao banhomaria a 60 0C por
60 minutos. Esfriar, neutralizar com soluo de hidrxido de sdio a 40 %, e se necessrio adicionar 5 mL
de soluo de ferrocianeto de potssio a 15 % e 5 mL de soluo de sulfato ou acetato de zinco a 30 %.
Completar o volume para 100 mL. Filtrar e transferir o filtrado para bureta e proceder como na
determinao da lactose.
Amido: Lavar no prprio funil o resduo obtido na determinao de lactose, com pores de lcool etlico
p.a. e deixar filtrar.
Levar o funil para outro erlenmeyer, romper o papel de filtro e transferir o resduo com 100 mL de gua.
Adicionar 10 mL de cido clordrico p.a., o volume do cido deve ser proporcional a quantidade de gua
utilizada para transferir o resduo. Aquecer sob refluxo em banho-maria durante 2 horas no mnimo, ou
em autoclave a 120 oC por 20 minutos. Esfriar e neutralizar com soluo de hidrxido de sdio a 40 %,
usando papel indicador de pH. Transferir para balo volumtrico de 250 mL lavando o erlemeyer e o
papel de filtro.
Adicionar 5 mL de soluo de ferrocianeto de potssio a 15 % e 5 mL de soluo de acetato ou sulfato de
zinco a 30 %, agitar e completar o volume. Filtrar para erlemeyer e transferir o filtrado obtido para bureta
de 50 mL. Pipetar volumetricamente para um erlenmeyer 5 mL da soluo de Fehling A e 5 mL de
soluo de Fehling B. Adicionar 40 mL de gua, aquecer at a ebulio e gotejar a soluo da amostra,
sem agitao, at que o lquido sobrenadante fique levemente azulado. Manter a ebulio e adicionar 1
gota de soluo de azul de metileno a 1 % e continuar at descolorao do indicador.
3.1. Leite fludo: pipetar 10 mL da amostra para balo de 250 mL;
3.2. Leite desidratado (leite em p integral ou desnatado, soro em p, leite em p modificado e similares):
pesar em balana analtica exatamente cerca de 5 g da amostra em bquer de 150 mL ou diretamente num
balo volumtrico de 250 mL, com auxlio de um funil, e dissolver em cerca de 50 mL de gua. Transferir
quantitativamente para balo volumtrico de 250 mL, quando a pesagem e dissoluo tiver sido feita em
bquer;
3.3. Doce de leite: pesar cerca de 5 g da amostra, dissolver em cerca de 50 mL de gua e transferir para
balo volumtrico de 250 mL;
3.4. Leite fermentado: pesar cerca de 10 g da amostra diretamente em balo volumtrico de 250 mL.
4. Clculos
% de glicdios redutores em glicose = 100 x 250 x (T/2) V x m
% de glicdios redutores em lactose = 100 x 250 x (T/2) x 1,39
Vxm
Onde:
T = ttulo da soluo de Fehling;
V = volume de amostra gasto na titulao, em mL;
m = massa da amostra em gramas;
1,39 = fator de converso da glicose para lactose.
% de glicdios totais em glicose = 100 x 100 x (T/2) V1 x m1
Onde:
T = ttulo da soluo de Fehling;
V1 = volume de amostra gasto na titulao, em mL;
m1 = massa da amostra em gramas, na alquota.
% glicidios no redutores em sacarose = (% glicdios totais em glicose - % glicdios redutores em glicose)
x 0,95 Onde:
0,95 = fator de converso da glicose para sacarose. % amido = 100 x 250 x (T/2) x 0,90 V x m
Onde:
T = ttulo da soluo de Fehling;
V = volume de amostra gasto na titulao, em mL;
m = massa da amostra em gramas;
0,90 = fator de converso da glicose para amido.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Salsicharia. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 2, p. 9-15.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
GLICDIOS REDUTORES EM LACTOSE E GLICDIOS NO REDUTORES EM SACAROSE
Mtodo B: Cloramina-T
1. Princpio
Fundamenta-se na quantidade de iodo liberada por uma amostra adicionada de cloramina-T e iodeto de
potssio.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Agitador magntico;
Balana anlitica;
Banho-maria.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Balo volumtrico de 50 e 100 mL;
Basto de vidro;
Bquer de 100 mL;
Erlenmeyer de 125 mL com tampa esmerilhada;
Funil de vidro;
Papel de filtro qualitativo;
Pipetas volumtricas de 5, 10 e 20 mL.
2.3. Reagentes:
Soluo de cido clordrico (HCl) 2 N;
Soluo de cido Wolfrmico: dissolver 7 g de tungstato de sdio (Na2WO4.2H2O) p.a. em 870 mL de
gua, adicionar 0,1 mL de soluo de cido ortofosfrico (H3PO4) a 88 % (m/v) e 70 mL de soluo de
cido sulfrico (H2SO4) 1 N;
Soluo de amido (C6H12O6) a 1 % (m/v);
Soluo de cloramina-T (C7H7ClNNaO2S.H2O) 0,04 N;
Soluo de hidrxido de sdio (NaOH) 1 N;
Soluo de iodeto de potssio (KI) a 10 % (m/v);
Soluo de tiossulfato de sdio (Na2S2O3) 0,041 N.
3. Procedimento
Em um bquer de 100 mL, pesar 10 g de amostra. Adicionar gua fervente e dissolver bem a amostra com
ajuda de um basto de vidro. Transferir quantitativamente para balo volumtrico de 50 mL.
Adicionar aproximadamente 10 mL de gua, 20 mL de soluo de cido Wolfrmico e completar o
volume. Agitar, deixar decantar e filtrar em papel de filtro. Recolher o filtrado em erlenmeyer (codificar
como A).
Inverso da sacarose: num balo volumtrico de 50 mL, colocar 10 mL do filtrado A, aproximadamente
10 mL de gua e 5 mL de soluo de cido clordrico 2 N. Deixar em banho-maria a 60 0C por 15
minutos (agitar durante os trs primeiros minutos). Esfriar a 20 0C, adicionar 10 mL de soluo de
hidrxido de sdio 1 N e completar o volume com gua (codificar como B).
Determinao do teor de Lactose e Sacarose: pipetar em 3 erlenmeyers de 125 mL com tampa
esmerilhada 10 mL de filtrado A (lactose), no primeiro, 10 mL de B (sacarose), no segundo, e 10 mL de
gua (branco) no terceiro. Colocar em cada erlenmeyer 5 mL de soluo de iodeto de potssio a 10 % e
exatamente 20 mL de soluo de cloramina-T 0,04 N (dever ocorrer uma colorao mbar). Umedecer as
tampas dos erlenmeyers com soluo de iodeto de potssio a 10 %, tampar e deixar em lugar escuro por 1
hora e 30 minutos ( 10 minutos). Decorrido esse tempo adicionar 5 mL de soluo de cido clordrico 2
N, 10 mL de soluo de tiossulfato de sdio 0,041 N e titular com a mesma soluo de tiossulfato sdio.
Ao titular com a soluo de tiossulfato de sdio 0,041 N, a cor mbar deve clarear passando para amarelo.
Neste ponto, colocar 4 a 6 gotas de soluo de amido a 1 % (responsvel pelo aparecimento da colorao
azul).
Continuar a titulao at a viragem para incolor (a leitura feita uma gota antes da viragem).
4. Clculos
% lactose = (Vb - VA) x f x 0,0072 x 100 x 0,995 x (100/m)
Onde:
Vb = volume da soluo de tiossulfato de sdio gasto na titulao do branco, em mL;
VA = volume da soluo de tiossulfato de sdio gasto na titulao do filtrado A (lactose), em mL;
f = fator de correo da soluo de tiossulfato de sdio;
m = massa da amostra, em gramas;
0,0072 = massa de lactose monohidratada em gramas correspondente a 1 mL da soluo de tiossulfato de
sdio 0,041 N;
0,995 = correo para volume do precipitado.
% sacarose = [(Vb - VB) x 5 - (Vb - VA)] x f x 0,00685 x 0,995 x 100 x (100/m)
Onde:
VB = mL da soluo de tiossulfato de sdio gasto na titulao de B (sacarose invertida + lactose);
Vb = volume da soluo de tiossulfato de sdio gasto na titulao do branco, em mL;
VA = volume da soluo de tiossulfato de sdio gasto na titulao do filtrado A (lactose), em mL;
f = fator de correo da soluo de tiossulfato de sdio;
Funil;
Papel de filtro qualitativo;
Prolas de vidro;
Pipeta volumtrica de 100 mL;
Pipetas graduadas de 1 e 5 mL;
Provetas de 25 e 100 mL;
Suporte e garras metlicas;
Tubo de refluxo de 50 cm de comprimento.
2.3. Reagentes:
lcool etlico (C2H5OH) 95% p.a. neutralizado;
Soluo alcolica de fenolftalena (C20H14O4) a 1 % (m/v);
Soluo de cido sulfrico (H2SO4) a 2,5 % (v/v);
Soluo de hidrxido de sdio (NaOH) 0,1 N;
Soluo de hidrxido de sdio (NaOH) ou potssio (KOH) em glicerol (C3H8O3): adicionar 20 mL de
soluo de hidrxido de sdio ou potssio a 50% em 180 mL de glicerol.
3. Procedimento
3.1. Pesar 50 g da amostra, fundir em estufa a 45 - 50 C e filtrar com papel de filtro qualitativo. Pesar 5 g
de gordura fundida e filtrada em bquer de 50 mL e transferir, com auxlio de 20 mL de soluo de
hidrxido de sdio ou potssio em glicerol para um balo de fundo chato de 300 mL. Acoplar o tubo de
refluxo e aquecer at completa saponificao, agitando ocasionalmente. O final da saponificao
reconhecido pela limpidez do lquido. Esfriar. Adicionar 90 mL de gua fervida, resfriada at 70 C.
Esfriar. Adicionar 50 mL da soluo de cido sulfrico a 2,5 % e algumas prolas de vidro.
Ligar o balo ao condensador e destilar atravs do aparelho de Reichert - Meissl e Polenske conforme o
modelo detalhado em figuras nas metodologias citadas, recebendo o destilado em balo volumtrico de
110 mL. Regular o aquecimento para que os 110 mL sejam destilados em 30 minutos. Aps o fim da
destilao desligar o aquecimento.
Receber as ltimas gotas do destilado em uma proveta de 25 mL e reservar para a determinao do ndice
de Polenske (3.2). O destilado filtrado em filtro seco para um erlenmeyer de 250 mL.
Reservar o papel de filtro para a determinao do ndice de Polenske (3.2). Transferir com pipeta
volumtrica 100 mL do filtrado para erlenmeyer de 250 mL, adicionar 5 gotas de soluo alcolica de
fenolftalena a 1 % e titular com soluo de hidrxido de sdio 0,1 N at leve colorao rsea. Efetuar
prova em branco.
3.2. Filtrar as ltimas gotas do destilado obtido em 3.1. na proveta de 25 mL, no mesmo filtro que contm
os insolveis da determinao do ndice de Reichert - Meissl. Lavar a proveta de 25 mL, o balo
volumtrico de 110 mL e o condensador com 3 pores de 15 mL de gua passando pelo filtro com os
resduos e desprezando o filtrado. Lavar a proveta, o balo volumtrico e o condensador com 3 pores de
2.1. Equipamentos:
Agitador magntico;
Balana analtica;
Banho de gua;
Coluna cromatogrfica hidroflica para separao de macromolculas por filtrao em gel com as
seguintes caractersticas: partculas de slica esfricas com dimetro nominal de 4 a 4,5mm (micrmetro),
superfcie modificada estabilizada com zircnio, dimetro do poro 150 (Angstron), rea superficial
140m2/g (metroquadrado/ grama), camada hidroflica mono molecular tipo diol, coluna com 9,4mm
(milmetros) de dimetro e 250mm (milmetros) de comprimento da coluna (similar a Zorbax GF 250
Biosries da Agilent);
Sistema cromatogrfico, equipado com detector UV a 205 ou 210nm (nanmetro), volume de injeo de
20 ou 30mL (microlitros) e com fluxo da fase mvel de 1,0 a 1,5mL/min (mililitro por minuto).
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Bales volumtricos de 1.000, 500, 250, 100 e 50mL;
Bqueres de 1.000, 500, 250, 100 e 50mL;
Bureta de 50mL;
Funil de vidro;
Micropipeta;
Pipeta graduada de 20mL;
Pipeta volumtrica de 10, 5, 4, 3, 2, 1 e 0,5mL;
Papel de filtro qualitativo.
2.3. Reagentes:
cido tricloroactico (C2HCl3O2) p.a.;
cido fosfrico concentrado (H3PO4) p.a.;
Caseno-macropeptdeo de pureza conhecida;
Dihidrogenofosfato de potssio (KH2PO4) p.a.;
Hidrogenofosfato de potssio (K2HPO4) p.a.;
Hidrxido de potssio (KOH) p.a.;
Matriz branca de leite fluido integral;
Sulfato de sdio (Na2SO4) p.a.
3. Procedimentos.
amostras turvas, filtrar em unidade filtrante com 0,45mm. Injetar cada amostra tratada no sistema
cromatogrfico.
4. Clculos e expresso dos resultados.
4.1. Curva de calibrao.
Calcular a curva de regresso linear (Y = AX + B), onde, A representa a declividade, ou o coeficiente
angular ou a inclinao da reta, e B, a interseo com o eixo Y ou o coeficiente linear, usando a
concentrao de CMP em miligramas por litro versus altura ou rea do pico. Aceitar a curva para valores
de R > 0,95.
4.2. Amostras.
Identificar o pico com o mesmo tempo de reteno do CMP.
Calcular a concentrao de CMP em miligramas por litro nas amostras pela equao da curva de
calibrao (Y = AX + B).
4.3. Expresso dos resultados.
Os resultados das amostras devem ser expressos em miligramas de CMP por litro (mg/L).
BIBLIOGRAFIA
ALVIM, T.C. Efeito da qualidade do leite na deteco de soro lcteo por cromatografia lquida de alto
desempenho - filtrao glica (GF-HPLC). 1992, 63 f. Dissertao (Mestrado) - Universidade Federal de
Viosa, Viosa.
DIRIO OFICIAL [da] REPBLICA FEDERATIVA DO BRASIL. Poder Executivo. Braslia, DF, 20
nov., 1991. Seo 1, anexo II, p. 26.246.
OLIEMAN, C.; VANRIEL, J. A. M., Detection of rennet whey solids in skim milk powder and
buttermilk powder with reversedphase HPLC. Netherlands Milk and Dairy Journal, Amsterdam, v. 43, p.
171 - 184, 1989.{catlogo coletivo nacional de publicao seriadas} base do IBICT
NDICE DE INSOLUBILIDADE
1. Princpio
Fundamenta-se na determinao do volume, em mililitros, de sedimento (resduo insolvel), obtido
quando um leite em p ou produto lcteo em p reconstitudo e centrifugado.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria;
Centrfuga, carregamento vertical, que produza 160 gravidades (g) de acelerao no fundo do tubo,
mantendo a temperatura a 20 - 25 oC;
Misturador eltrico com 16 lminas em ngulo de 30o, distncia entre lminas de 8,73 mm, distncia das
lminas ao fundo do copo de 10 mm, alcance de frequncia rotacional de 3600 rpm em menos de 5
segundos, equipado ou no com cronmetro.
Tampar o tubo com rolha de borracha e invert-lo lentamente por 5 vezes. Remover a tampa e centrifugar
de modo a obter 160 gravidades durante 5 minutos em temperatura de 20 a 25 C. Durante a centrifugao
a escala graduada do tubo dever estar voltada para um dos lados e no para cima ou para baixo. Remover
o tubo, coloc-lo em posio vertical contra a fonte de luz e fazer a leitura do volume de sedimento com
auxlio de uma lente de aumento, se necessrio.
3.1. Leite em p integral, leite em p parcialmente desnatado e alimentos infantis: pesar 13,0 g;
3.2. Leite em p desnatado e leitelho em p: pesar 10,0 g;
3.3. Soro de queijo em p: pesar 7,0 g.
4. Resultados
Expressar os resultados como: volume de sedimento / temperatura de procedimento.
Exemplo: 0,2 mL / 24 oC.
BIBLIOGRAFIA
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 129 A:1988:
dried milk and dried milk products. Brussels,1988. 6 f.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
NDICE DE PERXIDOS
1. Princpio
Devido a sua ao fortemente oxidante, os perxidos orgnicos formados no incio da rancificao atuam
sobre o iodeto do potssio, liberando iodo, que ser titulado com tiosulfato de sdio em presena de
amido como indicador.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria ou placa aquecedora;
Estufa.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Basto de vidro;
Bquer de 250 mL;
Bureta de 25 mL;
Cpsulas de porcelana;
Frasco para determinao de ndice de iodo ou erlenmeyer de 250 mL, com rolha esmerilhada;
Funil;
Papel de filtro;
Pipetas graduadas de 1 e 5 mL;
Pipetas volumtricas de 25 mL;
Provetas de 50 mL.
2.3. Reagentes:
Soluo de amido ((C6H10O5)n) a 1 % (m/v) recentemente preparada;
Soluo de clorofrmio (CHCl3) p.a. e cido actico (CH3COOH) p.a. (1+3) ;
Soluo de tiosulfato de sdio pentahidratado (Na2S2O3.5H2O) 0,01 N;
Soluo saturada de iodeto de potssio (KI).
3. Procedimento
Transferir pores de partes diversas da amostra previamente preparada para bquer de 250 mL. Colocar
em estufa a 50 C. Fundir a amostra e deixar separar as camadas. Filtrar em papel de filtro qualitativo
recebendo a gordura filtrada em bquer de 100 mL. Pesar cerca de 5 g de gordura em frasco para
determinao de ndice de iodo. Adicionar 30 mL de mistura clorofrmio e cido actico (1+3) e agitar
para dissolver. Adicionar 0,5 mL de soluo saturada de iodeto de potssio, agitar e deixar em repouso
por 1 minuto na ausncia de luz. Adicionar 30 mL de gua, lavando a rolha. Titular com soluo de
tiossulfato de sdio 0,01 N at que a colorao amarela tenha diminudo. Adicionar 0,5 mL de soluo de
amido a 1 % e continuar a titulao, agitando at desaparecer a colorao azul.
Efetuar prova em branco, subtraindo seu resultado da titulao da amostra.
4. Clculos
ndice de perxido em mEq/kg = (Va - Vb) x N x f x 1000 m
Onde:
Va = volume da soluo de tiossulfato de sdio 0,01N gasto na titulao da amostra, em mL;
Vb = volume da soluo de tiossulfato de sdio 0,01N gasto na titulao do branco, em mL;
N = normalidade da soluo de tiossulfato de sdio 0,01 N;
f = fator de correo da soluo de tiossulfato de sdio 0,01 N;
m = massa da amostra, em gramas.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa gropecuria. Laboratrio Nacional de
Referncia Animal. Banha.
In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus ingredientes:
mtodos fsicos e qumicos.
Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 8, p. 2.
Onde:
Va = volume da soluo de cido clordrico 0,5 N gasto na titulao da amostra, em mL;
Vb = volume da soluo de cido clordrico 0,5 N gasto na titulao do branco, em mL;
f = fator de correo da soluo de cido clordrico 0,5 N;
m = massa da amostra, em gramas;
N = normalidade da soluo de cido clordrico 0,5 N;
56 = equivalente-grama do hidrxido de potssio.
BIBLIOGRAFIA MEHLENBACHER,V.C. Chemical caractersistics. In:_____.
The analysis of fats and oils. Champaign: Garrard. 1960, cap. 6.p. 294-301.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
PREGNOLATTO, W.; PREGNOLATTO, N. (Coord.) leos e gorduras. In: _____. Normas analticas do
Instituto Adolfo Lutz:
mtodos qumicos e fsicos para anlise de alimentos. 3. ed. So Paulo: Instituto Adolfo Lutz, 1985. v. 1,
cap.17, p. 247-248.
LIPDIOS
Mtodo A: Roese-Gottlieb
1. Princpio
Baseia-se no uso de hidrxido de amnio para solubilizar a casena, neutralizar a acidez e reduzir a
viscosidade; no lcool etlico para quebrar a emulso gordura-casena e na mistura ter etlico-ter de
petrleo para extrair a gordura. O ter de petrleo usado para diminuir a solubilidade das substncias
no lipdicas, solveis no ter etlico. A gordura assim extrada determinada gravimetricamente.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria;
Centrfuga de Mojonnier;
Estufa.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Bqueres de 150 ou 250 mL;
Frascos de extrao do tipo Mojonnier, com rolhas de silicone;
Pipetas graduadas de 10 mL;
Provetas de 25 mL;
Tenaz metlica;
Suporte para frascos de Mojonnier.
2.3. Reagentes:
lcool etlico (C2H5OH) p.a.;
Soluo de amnia contendo aproximadamente 25 % (m/m) de NH3, densidade 910 g/L, ou soluo mais
concentrada de concentrao conhecida;
Soluo de vermelho Congo (C32H22N6Na2O6S2) a 1 %, (m/v);
ter etlico (C4H10O), livre de perxidos, sem antioxidantes (ou no mais do que 2 mg/kg), compatvel
com as especificaes para o teste em branco. Para testar se o ter encontra-se livre de perxidos,
adicionar 1 mL de uma soluo de iodeto de potssio 100 g/L, preparada no momento do uso, a 10 mL do
ter em um pequeno frasco com tampa de vidro que tenha sido previamente enxaguado
com o mesmo ter. Fechar o frasco, agitar e deixar em repouso por 1 minuto. Se o produto estiver livre de
perxidos, no dever ocorrer a formao de colorao amarela em quaisquer das camadas;
ter de petrleo p.a..
3. Procedimento
Secar um bquer de 150 ou 250 mL por 1 hora em estufa a 102 + 2 C. Esfriar. Pesar e reservar para
recepo da gordura. s amostras preparadas conforme os itens 3.1. a 3.5., adicionar 2 mL da soluo de
amnia (ou volume equivalente de uma soluo mais concentrada) ao frasco de Mojonnier e misturar. A
partir desse ponto, a anlise deve ser conduzida sem demora. Para os itens 3.2. e 3.5.
aquecer o frasco a 65 + 2 oC em banho-maria por 15 a 20 minutos agitando ocasionalmente e esfriar a
temperatura ambiente. Para todos os itens acrescentar 10 mL de lcool etlico e misturar cuidadosamente,
sem agitao forte, mas deixando o lquido fluir entre os dois bulbos, inclinando o frasco de extrao sem
que o lquido atinja a tampa. Se necessrio, adicionar 2 gotas de soluo de vermelho congo a 1 %.
Adicionar 25 mL de ter etlico, fechar o tubo com uma tampa de silicone e agitar vigorosamente o frasco
de extrao, mas no de maneira excessiva (para evitar a formao de emulses persistentes) por 1
minuto, com o frasco na posio horizontal e o bulbo menor voltado para cima. Se necessrio, lavar a
rolha com um pouco da mistura de teres, de modo que a soluo seja recolhida no frasco de Mojonnier.
Adicionar 25 mL de ter de petrleo, reumidecendo a tampa e agitando por 30 segundos conforme
especificado acima.
Remover a tampa e lav-la com a mistura de teres, tendo cuidado para que a soluo de lavagem caia no
interior. Centrifugar ou deixar o frasco de Mojonnier em repouso por 30 minutos no seu suporte. Se a
interface localizar-se abaixo da constrico do bulbo, adicionar lentamente um pouco de gua pela parede
interna do frasco. Transferir o sobrenadante para o bquer, segurando o frasco de extrao pelo bulbo
menor. Lavar a sada do frasco com a mistura de teres, recolhendo o material no bquer. Se necessrio,
pode-se fazer uma primeira remoo dos solventes nesse ponto, por evaporao ou outro processo
adequado. Adicionar 5 mL de lcool etlico ao frasco de Mojonnier. O emprego dessa substncia visa
prevenir a formao de uma camada aquosa viscosa ou gelificada, especialmente em produtos contendo
sacarose, alm de melhorar a preciso do mtodo. Conduzir uma segunda extrao, usando 15 mL dos
teres etlico e de petrleo.
Realizar uma terceira extrao, omitindo o uso do lcool. Transferir o sobrenadante para o bquer,
lavando a sada do frasco de Mojonnier com a mistura de teres. Remover os solventes, incluindo o
lcool, por evaporao ou outro processo adequado. Transferir o bquer para estufa a 102 + 2 C por 1
hora. Remover o frasco da estufa, deixar esfriar e pesar. Essas operaes de transferncia do frasco
devero ser conduzidas com tenaz. Repetir a operao acima at a massa constante.
Adicionar 25 mL de ter de petrleo ao frasco para verificar se todo material solubiliza-se. Aquecer
levemente e agitar at que toda a gordura se dissolva. Se todo o material se dissolver, calcular a massa da
gordura atravs da diferena entre a massa final do bquer contendo a gordura e a massa inicial do mesmo
bquer. Se o extrato no for totalmente solvel no ter de petrleo, fazer a extrao da parte gordurosa,
deixar que o material insolvel se sedimente e descartar o ter de petrleo, repetindo essa operao 3 - 4
vezes. Secar o bquer em estufa a 102 + 2 C por 1 hora, esfriar como mencionado acima e pesar
novamente o bquer, agora com o resduo insolvel. Conduzir um teste em branco substituindo a amostra
por 10 mL da gua.
3.1. Leite Fludo: aquecer a amostra a 35 - 40 oC, misturar cuidadosamente, de modo a no provocar
separao de gordura e esfriar rapidamente a 20 oC. Para amostras de leite desnatado, no esfriar a
amostra, que dever ser pesada a 30 - 40 oC.Misturar a amostra com cuidado, invertendo o frasco que a
contm por 3 - 4 vezes. Pesar exatamente cerca de 10 g diretamente no frasco de Mojonnier;
3.2. Leite desidratado: misturar completamente a amostra por inverso e rotao do frasco e pesar
diretamente no frasco de Mojonnier, cerca de 1 g de leite em p integral ou 1,5 g de leite semidesnatado,
desnatado, soro em p ou leitelho em p. Adicionar 10 mL de gua a 65 + 5 oC para levar todo o p para
o bulbo menor de frasco e misturar at completa disperso. Esfriar.
3.3. Creme de leite: pesar exatamente uma poro da amostra homogeneizada que produza 0,3 a 0,6 g de
gordura extrada (dependendo do contedo de gordura do creme). Pesar diretamante no frasco de extrao
ou em bquer de 50 mL com posterior transferncia quantitativa para o frasco de extrao. Adicionar gua
aproximadamente a 50 C at obter o volume total de 10 a 11 mL, lavando a amostra para o bulbo menor
do frasco de extrao. Misturar completamente a amostra no bulbo menor. Esfriar.
3.4. Doce de leite e leite condensado: pesar exatamente de 2 a 5 g da amostra homogeneizada diretamente
no frasco de extrao ou em bquer de 50 mL, acrescentar cerca de 10 mL de gua a aproximadamente 50
C agitando cuidadosamente o frasco e mantendo
o aquecido nesta temperatura at o produto ficar completamente disperso. No caso de usar o bquer, usar
basto de vidro para dispersar a amostra em pequenas pores de gua a 50 C, totalizando cerca de 10
mL, e transferir para o frasco extrator.
3.5. Leite fermentado: pesar exatamente cerca de 5 g de amostra homogeneizada diretamente no frasco de
extrao. Adicionar volume de gua a 65 + 2 C suficiente para totalizar de 10 a 11 mL, lavando a
amostra para o bulbo menor do frasco e misturar completamente.
4. Clculos
% Gordura = (m1 - m2) - (m3 - m4) x 100 mo
Onde:
mo= massa da amostra, em gramas;
m1= massa do bquer com gordura, em gramas;
m2= massa inicial do bquer ou, no caso de material insolvel no ter de petrleo, massa do bquer com a
massa do resduo insolvel, em gramas;
m3 = massa do bquer usado no teste em branco, em gramas;
m4 = massa inicial do bquer usado no teste em branco ou, no caso de material insolvel no ter de
petrleo, massa do bquer com a massa do resduo insolvel, em gramas.
BIBLIOGRAFIA
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 116 A:1987:
milk, based edible ices and ice mixes: determination of fat content (Rse Gottlieb gravimetric method
)(reference method). Brussels, 1987. 8 f.
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 13C:1987: evaporated milk and sweetened condensed milk:
determination of fat content (Rse Gottlieb reference method). Brussels,1987. 7 f.
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 16C:1987:
cream: determination of fat content( Rse Gottlieb reference method).
Brussels,1987. 7 f.
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 1C:1987: milk:
determination of fat content (RseGottlieb reference method).Brussels, 1987. 8 f.
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 9C:1987: dried milk dried whey, dried buttermilk and dried
butter serum: determination of fat content (Rse Gottlieb reference method). Brussels, 1987. 7 f.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p
LIPDIOS
Mtodo B: Butiromtrico para creme de leite
1. Princpio
Tratamento da amostra com cido sulfrico e lcool isoamlico.
O cido digere as protenas que se encontram ligadas gordura, diminuindo a viscosidade do meio,
aumentando a densidade da fase aquosa e fundindo a gordura, devido liberao do calor proveniente da
reao, o que favorece a separao da gordura pelo extrator (lcool isoamlico). A leitura feita na escala
graduada do butirmetro, aps centrifugao e imerso em banho-maria.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Banho-maria;
Centrfuga de Gerber.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Butirmetro de Khler;
Pipetas de 1 e 10 mL ou dispensador;
Seringa de ao inox Gerber ou similar de 5 mL.
2.3. Reagentes:
Soluo de cido sulfrico (H2SO4) com densidade 1,820 a 1,825 a 20 C, transferir 125 mL de gua para
um frasco de vidro de paredes resistentes. Colocar o frasco em um banho de gelo. Medir 925 mL de cido
sulfrico p.a., com densidade de 1,840 e transferir lenta e cuidadosamente pelas paredes do frasco
contendo a gua.
Agitar cuidadosamente o frasco contendo a mistura (a reao fortemente exotrmica). Esfriar a soluo
at a temperatura de 20 oC e conferir a densidade com um densmetro adequado.
lcool isoamlico (C5H12O) densidade 0,81 a 20 C.
3. Procedimento
Transferir, com seringa de Gerber ou similar, 5 mL da amostra homogeneizada para butirmetro de
Khler contendo 10 mL de soluo de cido sulfrico de densidade 1,820 a 1,825. Com a mesma seringa,
transferir 5,0 mL de gua a 70 - 80oC para o mesmo butirmetro.
Acrescentar 1,0 mL de lcool isoamlico, tampar o butirmetro, agitando vigorosamente. Centrifugar
durante 5 minutos a 1200 rpm e incubar em banho-maria a 65 oC por 10 minutos. Repetir as operaes de
centrifugao e incubao.
4.Resultados
Retirar o butirmetro do banho-maria e fazer a leitura direta da porcentagem de gordura da amostra.
BIBLIOGRAFIA
SCHNEIDER, K. Analisis de la leche. 11a ed. Madrid:: Dossat, 1960.
SILVA, P.H.F. et al. Fsico-qumica do leite e derivados:
mtodos analticos. Juiz de Fora - MG: Oficina de Impresso Grfica. 1997.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584p
LIPDIOS
Mtodo C: Butiromtrico para leite fludo
1. Princpio
Baseia-se no ataque seletivo da matria orgnica por meio de cido sulfrico, com exceo da gordura
que ser separada por centrifugao, auxiliada pelo lcool amlico, que modifica a tenso superficial.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Banho-maria;
Centrfuga de Gerber.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Butirmetro de Gerber para leite com rolhas;
Medidores automticos de 1 e 10 mL;
Centrfuga de Gerber.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Butirmetro de Teichert com rolhas;
Pipetas graduadas de 1 e 10 mL ou dispensadores.
2.3. Reagentes:
Soluo de cido sulfrico (H2SO4) de densidade 1,820 a 1,825 a 20 C: transferir 125 mL de gua para
um frasco de vidro de paredes resistentes. Colocar o frasco em um banho de gelo. Medir 925 mL de cido
sulfrico p.a., com densidade de 1,840 e transferir lenta e cuidadosamente pelas paredes do frasco
contendo a gua.
Agitar cuidadosamente o frasco contendo a mistura (a reao fortemente exotrmica). Esfriar a soluo
at a temperatura de 20 oC e conferir a densidade com um densmetro adequado.
lcool isoamlico (C5H12O) de densidade 0,81 a 20 C.
3. Procedimento
Adicionar 10 mL de soluo de cido sulfrico no butirmetro, sem molhar o seu gargalo. Adicionar
lentamente cerca de 10 mL de gua. Pesar direta e exatamente no butirmetro 2,5 g da amostra.
Acrescentar 1 mL de lcool isoamlico. Fechar o butirmetro e imediatamente agitar com vigor.
Transferir o butirmetro para o banho-maria, durante 10 minutos. Centrifugar por 10 minutos a 1200 rpm.
Retornar o butirmetro ao banho-maria por mais 10 minutos, com a rolha para baixo. Repetir as
operaes de centrifugao e incubao.
4. Resultados
Fazer a leitura da porcentagem de gordura da amostra, diretamente na escala do butirmetro.
BIBLIOGRAFIA
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584p PINTO, M. :
HOUBRAKEN, A. Metodos de analisis quimicos de leche y productos lacteos. Santiago: FAO 1976.
SCHNEIDER, K. Analisis de la leche, 11a. ed. Madrid: Dossat, 1960.
SILVA, P.H.F. et al. Fsico-qumica do leite e derivados:
mtodos analticos. Juiz de Fora - MG: Oficina de Impresso Grfica. 1997.
LPIDIOS
Mtodo E: Butiromtrico para leite desidratado e creme de leite pelo butirmetro de leite
1. Princpio
Baseia-se no ataque seletivo da matria orgnica por meio de cido sulfrico, com exceo da gordura
que ser separada por centrifugao, auxiliada pelo lcool amlico, que modifica a tenso superficial.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria;
Centrfuga de Gerber.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Basto de vidro;
Bquer de 50 mL;
Butirmetro de Gerber para leite com rolhas;
Pipetas graduadas de 5 e 10 mL ou dispensadores.
2.3. Reagentes:
Soluo de cido sulfrico (H2SO4) densidade de 1,500 a 20 C: adicionar 505 mL de cido sulfrico p.a.
com densidade de 1,840 sobre 575 mL de gua, lenta e cuidadosamente, em banho de gelo.
Esfriar at temperatura de 20 C e conferir a densidade com o densmetro.
Soluo de cido sulfrico (H2SO4) densidade de 1,605 a 20 C: adicionar 630 mL de cido sulfrico p.a.
com densidade de 1,840 sobre 460 mL de gua, lenta e cuidadosamente, em banho de gelo.
Esfriar at temperatura de 20 C e conferir a densidade com o densmetro.
lcool isoamlico (C5H12O) densidade de 0,81 a 20 C.
3. Procedimento
Pesar exatamente cerca de 1 g de amostra homogeneizada em um bquer de 50 mL. Para leite desidratado
adicionar 10 mL da soluo de cido sulfrico com densidade de 1,500 a 20 C e para creme de leite
adicionar 10 mL da soluo de cido sulfrico com densidade 1,605 a 20 C. Aquecer a + 60 C em
ambos os casos e homogeneizar com basto de vidro. Transferir cuidadosamente para butirmetro, com
auxlio de basto de vidro. Lavar o bquer 2 ou 3 vezes com 3 a 4 mL da soluo de cido sulfrico para
completar 19 mL. Adicionar 1 mL de lcool isoamlico. Enxugar a boca do butirmetro com papel e
fechar com rolha apropriada. Agitar, invertendo vrias vezes o butirmetro. Levar ao banho-maria a 65 C
por 15 minutos. Centrifugar por 15 minutos a 1200 rpm. Repetir as operaes de banho-maria e
centrifugao mais 2 vezes e fazer a leitura na escala do butirmetro.
4. Clculos
% de LIPDIOS = L x 11,33 m
Onde:
L = leitura no butirmetro;
11,33 = massa em gramas do leite se utilizarmos o mtodo de Rose-Gottlieb;
m = massa da amostra, em gramas.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Salsicharia, In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 2, p. 9-15.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584p.
LIPDIOS
Mtodo F: Butiromtrico para manteiga
1. Princpio
Baseia-se na separao e quantificao da gordura por meio de tratamento da amostra com cido sulfrico
e lcool isoamlico. O cido dissolve as protenas que se encontram ligadas gordura, diminuindo a
viscosidade do meio, aumentando a densidade da fase aquosa e fundindo a gordura, devido a liberao de
calor proveniente da reao, o que favorece a separao da gordura pelo extrator (lcool isoamlico). A
leitura feita na escala do butirmetro, aps centrifugao e imerso em banho-maria.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Centrfuga de Gerber.
2.2. Vidrarias, utenslios e outros:
Butirmetro de Gerber para manteiga;
Pipetas graduadas de 1, 5 e 10 mL ou dispensadores.
2.3. Reagentes:
Soluo de cido sulfrico (H2SO4), densidade 1,820 a 1,825 a 20 C: transferir 125 mL de gua para um
frasco de vidro de paredes resistentes. Colocar o frasco em um banho de gelo. Medir 925 mL de cido
sulfrico p.a., com densidade de 1,840 e transferir lenta e cuidadosamente pelas paredes do frasco
contendo a gua.
Agitar cuidadosamente o frasco contendo a mistura (a reao fortemente exotrmica). Esfriar a soluo
at a temperatura de 20 oC e conferir a densidade com um densmetro adequado.
cido isoamlico (C5H12O) densidade 0,81 a 20 C.
3. Procedimento
Pesar exatamente 5 g de amostra homogeneizada, diretamente no copo do butirmetro e adapt-lo na
parte inferior do mesmo, tampando de modo a obter-se boa vedao. Adicionar 5 mL de gua e em
seguida 10 mL da soluo de cido sulfrico. Colocar 1 mL de lcool isoamlico, acrescentar gua at a
ltima marcao, limpar as bordas do butirmetro e fechar com rolha apropriada. Agit
lo de modo a promover a mistura completa dos lquidos no interior do aparelho. Centrifugar por 10
minutos a 1200 rpm e transferir para banho-maria a 65 C por 5 minutos, repetir as operaes de
centrifugao e de incubao.
4. Resultados
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria;
Centrfuga de Gerber.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Butirmetro de Gerber para queijo com rolhas;
Pipetas graduadas de 1, 5 e 10 mL ou dispensadores.
2.3. Reagentes:
Soluo de cido sulfrico (H2SO4) densidade de 1,820 a 1,825 a 20 C: transferir 125 mL de gua para
um frasco de vidro de paredes resistentes. Colocar o frasco em um banho de gelo. Medir 925 mL de cido
sulfrico p.a., com densidade de 1,840 e transferir lenta e cuidadosamente pelas paredes do frasco
contendo a gua.
Agitar cuidadosamente o frasco contendo a mistura (a reao fortemente exotrmica). Esfriar a soluo
at a temperatura de 20 oC e conferir a densidade com um densmetro adequado.
lcool isoamlico (C5H12O) densidade de 0,81 a 20 C.
3. Procedimento
Pesar exatamente 3 g da amostra homogeneizada diretamente no copo do butirmetro. Acoplar o copo do
butirmetro parte inferior de forma a ficar bem vedado. Em seguida adicionar cerca de 5 mL de gua,
10 mL da soluo de cido sulfrico e 1 mL de lcool isoamlico. Transferir o butirmetro para
banho-maria a 65 C para auxiliar na dissoluo da amostra. Colocar a tampa no butirmetro e agit-lo at
que se dissolva toda a amostra. Realizar esta agitao cuidadosamente, envolvendo o butirmetro em uma
toalha de mo para evitar acidentes. Quando a amostra apresentar-se dissolvida, retirar a tampa superior
do butirmetro e adicionar gua at a ltima marcao deste. Enxugar a borda do butirmetro com papel
absorvente e recolocar a tampa. Centrifugar por 10 minutos a 1200 rpm e ler a porcentagem de gordura
diretamente na escala do butirmetro.
Repetir as operaes de aquecimento e centrifugao, se necessrio.
4. Resultados
Fazer a leitura da porcentagem de gordura da amostra, diretamente na escala do butirmetro.
BIBLIOGRAFIA PREGNOLATTO, W.; PREGNOLATTO, N. (Coord.) Queijo, manteiga, margarina e
extrato de soja. In: _____. Normas analticas do Instituto Adolfo Lutz: mtodos qumicos e fsicos para
anlise de alimentos. 3. ed. So Paulo: Instituto Adolfo Lutz, 1985. v.
1, cap.16, p. 233.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992 /93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
LIPDIOS
Mtodo I: Butiromtrico para queijo pelo butirmetro de leite
1. Princpio
Baseia-se no ataque seletivo da matria orgnica por meio de cido sulfrico, com exceo da gordura
que ser separada por centrifugao, auxiliada pelo lcool amlico, que modifica a tenso superficial.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria;
Centrfuga de Gerber.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Basto de vidro;
Bquer de 50 mL;
Butirmetro de Gerber para leite com rolhas;
Pipetas graduadas de 5 e 10 mL ou dispensadores.
2.3. Reagentes:
Soluo de cido sulfrico (H2SO4) densidade de 1,605 a 20 C: adicionar 630 mL de cido sulfrico p.a.
com densidade de 1,840 sobre 460 mL de gua, lenta e cuidadosamente, em banho de gelo.
Esfriar at temperatura de 20 C e conferir a densidade com o densmetro.
lcool isoamlico (C5H12O) densidade de 0,81 a 20 C.
3. Procedimento
Pesar exatamente cerca de 1 a 2 g da amostra homogeneizada em bquer de 50 mL. Adicionar 10 mL da
soluo de cido sulfrico e aquecer a 60 oC. Homogeneizar com basto at dissoluo completa do
resduo. Passar cuidadosamente para o butirmetro lavando duas vezes o bquer com 4 mL da soluo de
cido sulfrico.
Adicionar ao butirmetro 1 mL de lcool isoamlico. Enxugar a boca do butirmetro, colocar a rolha
apropriada, agitar e transferir para banho-maria a 65 oC durante 10 minutos. Centrifugar durante 5
minutos.
Recolocar no banho-maria por mais 10 minutos e fazer a leitura.
4. Clculos
% de LIPDIOS = L x 11,33 m
Onde:
L = leitura no butirmetro;
11,33 = massa em gramas do leite se utilizarmos o mtodo de Rose-Gottlieb;
m = massa da amostra, em gramas.
BIBLIOGRAFIA:
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal. Queijos, In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de
origem animal e seus ingredientes:
mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981 v. II, cap. 17, p. 3-4.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p. LIPDIOS
Mtodo J: Schmid-Bondzynski-Ratzlaff 1. Princpio Baseia-se na digesto da amostra com cido
clordrico, adio de lcool etlico e subsequente extrao da soluo cido-etanlica com ter etlico e
ter de petrleo, remoo dos solventes por destilao ou evaporao e determinao da massa de
substncias extradas solveis em ter de petrleo.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Centrfuga de Mojonnier;
Banho-maria;
Estufa;
Placa aquecedora.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Bqueres de 100 e 250 mL;
Frasco de extrao tipo Mojonnier;
Proveta de 25 mL;
Pipeta graduada de 10 mL;
Tenaz metlica;
Suporte para frascos de Mojonnier.
2.3. Reagentes:
Soluo de cido clordrico (HCl), d20 = 1,125 g/mL: dissolver 675 mL de cido clordrico concentrado
d20 = 1,18 g/mL em gua e completar o volume para 1000 mL;
lcool etlico (C2H5OH) p.a.;
ter etlico (C4H10O) p.a.;
ter de petrleo p.a.;
Mistura de solventes: ter de petrleo + ter etlico (1 + 1).
Preparar imediatamente antes do uso.
3. Procedimento
Pesar exatamente cerca de 1 a 3 g da amostra diretamente no frasco de extrao ou em bquer de 100 mL
(3 g para queijos com teor de gordura at 30 % e 1 a 3 g para queijos com teores mais elevados de
gordura). Conduzir um teste em branco. Adicionar 8 a 10 mL da soluo de cido clordrico ao frasco de
extrao ou ao bquer contendo a amostra e misturar. Aquecer em banho-maria por 20 a 30 minutos ou
cuidadosamente sobre uma chapa por at 10 minutos, para que todos as partculas sejam dissolvidas.
Esfriar o frasco ou o bquer.
Se a digesto foi feita no frasco de extrao, adicionar 10 mL de lcool etlico e misturar o contedo do
frasco, evitando seu contato com a tampa. Se a digesto foi feita num bquer de 100 mL, transferir seu
contedo para um frasco de extrao. Lavar o bquer de 100 mL sucessivamente com 10 mL de lcool
etlico, 25 mL de ter etlico e 25 mL de ter de petrleo, transferindo cada poro para o frasco de
extrao. Aps adicionar 25 mL de ter etlico ao frasco de extrao, tampar e agitar na posio
horizontal, com o bulbo menor voltado para cima. Remover cuidadosamente a tampa e lav-la com a
mistura de solventes, recebendo a lavagem em bquer de 250 mL previamente pesado. Adicionar 25 mL
de ter de petrleo, fechar o frasco e agitar cuidadosamente por 30 segundos, como descrito acima.
Centrifugar o frasco fechado por 1 a 5 minutos a 500 - 600 rpm. Se no se dispuser de centrfuga, deixar o
frasco de extrao durante 30 minutos na estante at separao entre as camadas aquosa e gordurosa.
Remover a tampa, lavar com a mistura de solventes e receber o material de lavagem no bquer de 250 mL
previamente pesado.
Segurando o frasco de extrao pelo bulbo menor, transferir o mximo possvel da camada sobrenadante.
Lavar a parte externa do frasco de extrao com a mistura de solventes. Recomenda-se colocar desde j o
bquer de 250 mL no banho-maria a 65 oC para evaporao dos solventes. Conduzir uma segunda, e uma
terceira extrao usando 15 mL de cada tipo de ter, transferindo a camada sobrenadante para o bquer de
250 mL. A terceira extrao poder ser omitida para produtos contendo 3 % ou menos de gordura.
Remover os solventes tanto quanto possvel por evaporao e transferir o bquer de 250 mL para estufa a
102 + 2 oC durante 1 hora. Esfriar e pesar. Repetir as operaes de secagem e pesagem at massa
constante.
Adicionar 25 mL de ter de petrleo ao bquer para verificar se o material extrado totalmente solvel.
Aquecer cuidadosamente e agitar o solvente at que toda gordura esteja dissolvida. Se o material extrado
for totalmente solvel no ter de petrleo, considerar a massa de gordura como a massa final obtida no
item anterior. Se o material extrado no for totalmente solvel no ter de petrleo, extrair completamente
a gordura do bquer atravs de repetidas lavagens com ter de petrleo em banho-maria. Deixar que se
deposite qualquer trao de material insolvel e cuidadosamente decantar o ter de petrleo, repetindo esta
operao 3 ou mais vezes. Remover os vapores de ter de petrleo contidos no bquer original atravs de
aquecimento em estufa a 102 + 2 oC por 1 hora. Esfriar e pesar como j descrito.
4. Clculos
% de gordura = (m1 - m2) - (m3 - m4) x 100 mo
Onde:
m0 = massa da amostra, em gramas;
m1 = massa do bquer com material extrado, em gramas;
m2 = massa do bquer com resduo insolvel, se houver, em gramas;
m3 = massa do bquer usado no teste em branco;
m4 = massa do bquer usado no teste em branco, o qual poder conter resduo insolvel, resultante das
lavagens com ter de petrleo.
Observao: Mtodo aplicvel todos os tipos de queijos naturais e processados que possuam teor de
lactose abaixo de 5 % (m/m) dos slidos no gordurosos.
BIBLIOGRAFIA
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 5B: 1986: cheese and processed cheese
products:determination of fat content (gravimetric method) (reference method). Brussels,1986 7p.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
NITRATOS
1. Princpio
O nitrato reduzido a nitrito por ao do cdmio esponjoso em meio alcalino. A seguir, feita a
diazotao dos nitritos com cido sulfanlico e copulao com cloridrato de alfa-naftilamina em meio
cido, formando o cido alfa-naftilamino-p-azobenzeno-p-sulfnico de colorao rsea. O produto
resultante determinado espectrofotometricamente a 540 nm.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Agitador magntico;
Balana analtica;
Banho-maria;
Espectrofotmetro.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Bales volumtricos de 50, 100 e 250 mL;
Bquer de 50 mL;
Erlenmeyers de 125, 250 ou 500 mL;
Funil;
Pipeta graduada de 5 mL;
Papel de filtro qualitativo;
Pipetas volumtricas de 5, 10 e 20 mL.
2.3. Reagentes:
Soluo de tetraborato de sdio decahidratado (Na2B4O7.10H2O) a 5 % (m/v);
Soluo de ferrocianeto de potssio trihidratado (K4[Fe(CN)6].3H2O) a 15 % (m/v);
Soluo de sulfato de zinco heptahidratado (ZnSO4.7H2O) ou acetato de zinco dihidratado ((CH3COO)2
Zn.2H2O) a 30 % (m/v);
Soluo de sulfanilamida (C6H8N2O2S) a 0,5 % (m/v): dissolver 1,25 g de sulfanilamida p.a. em 250 mL
de soluo de cido clordrico (HCl) (1+1). A soluo estvel por 1 a 2 meses;
Soluo de cloreto de alfa-naftiletilenodiamina (C12H16Cl2N2) a 0,5 % (m/v): dissolver 0,5 g de cloreto
de alfanaftiletilenodiamina p.a. em 100 mL de gua. Estocar em frasco mbar sob refrigerao. A soluo
deve ser desprezada quando apresentar alterao da colorao;
Soluo tampo pH 9,6 - 9,7: diluir 20 mL de cido clordrico (HCl) p.a. em cerca de 500 mL de gua.
Adicionar 50 mL de hidrxido de amnio (NH4OH) p.a. e completar para 1000 mL com gua. Verificar o
pH e ajustar se necessrio;
Soluo tampo pH 9,6 - 9,7 diludo (1+9): tomar 100 mL da soluo tampo pH 9,6 - 9,7 e diluir para
1000 mL com gua.
Cdmio esponjoso: preparar 1000 mL de soluo de sulfato de cdmio (3CdSO4.8H2O) a 20 % (m/v) e
transferir para um bquer de 2000 mL. Adicionar de 8 a 10 barras de zinco metlico, deixandoas
totalmente imersas na soluo. A medida em que for depositando cdmio nas barras, retirar utilizando
esptula de porcelana ou de material plstico e transferir para um bquer contendo gua em quantidade
suficiente para cobrir todo o cdmio. Transferir todo o contedo do bquer para um copo de processador
(constitudo de material plstico ou de vidro), homogeneizar e em seguida passar em peneira de 35 mesh,
recolhendo em outro bquer, mantendo o cdmio sempre coberto com gua. O material retido na peneira
dever retornar ao bquer de 2000 mL com barras de zinco para posterior reaproveitamento. O cdmio
batido e peneirado ser posto a decantar completamente. Remover a gua sobrenadante e iniciar o
tratamento do resduo (cdmio esponjoso) da seguinte maneira: cobrir todo o cdmio com soluo de
cido clordrico (HCl) 2 N; deixar em contato (repouso) por dois minutos, no mximo; decantar e remover
o cido clordrico sobrenadante; lavar o cdmio com gua at pH neutro ou pH da gua empregada na
lavagem, avaliando o pH com papel indicador;
adicionar soluo de cido cloridrco (HCl) 0,1 N at cobrir todo o cdmio deixando em repouso por 15
minutos, no mnimo;
decantar e remover o cido cloridrco sobrenadante; lavar o cdmio com gua at pH neutro; decantar e
remover a gua sobrenadante e adicionar soluo tampo pH 9,6 - 9,7 diluda (1+9) e deixar em contato
por, no mnimo, 15 minutos. Decorrido este tempo o cdmio estar pronto para ser utilizado. O cdmio
dever permanecer imerso no tampo diludo durante a conduo da anlise, sendo lavado posteriormente
com gua e deixado em repouso, sempre imerso em gua at que seja recuperado (a recuperao consiste
em tratar o cdmio utilizado nas anlises de acordo com o mesmo procedimento descrito acima). O
cdmio esponjoso no usado dever ser mantido em gua.
Substituir a gua do cdmio esponjoso por tampo pH 9,6 - 9,7 diludo (1+9) pelo menos 15 minutos
antes da sua utilizao em anlises.
Soluo padro estoque de nitrito de sdio (NaNO2) p.a.:
pesar 500 mg de nitrito de sdio de pureza mnima de 99 %, previamente seco por 24 horas em
dessecador, transferir para balo volumtrico de 1000 mL e completar o volume. Transferir 5 mL da
soluo para balo volumtrico de 1000 mL e completar o volume, 1 mL desta soluo corresponde a 2,5
mg de nitrito de sdio.
Curva padro de Nitrito de sdio: pipetar alquotas de 1,0
3,0 - 5,0 - 10 - 15 - 20 e 25 mL da soluo de nitrito de sdio a 2,5 mg/mL para bales volumtricos de 50
mL. Adicionar a cada um, 5 mL de soluo de sulfanilamida a 0,5 %, aguardar 3 minutos e adicionar 3
mL de soluo de cloreto de alfa-naftiletilenodiamina a 0,5 %, agitando aps cada adio. Completar o
volume e homogeneizar.
Deixar em repouso por 30 minutos (ao abrigo da luz) e ler a 540 nm contra um branco dos reagentes.
Construir a curva de absorbncia x concentrao (mg nitrito de sdio/50 mL) e calcular o fator F de
correo da curva.
Soluo padro de nitrato de sdio (NaNO3) p.a.: dessecar o nitrato de sdio por 24 horas em dessecador.
Pesar 0,1 g e dissolver em gua. Adicionar 50 mL da soluo tampo pH 9,6 - 9,7 e completar para 100
mL com gua. Tomar 1 mL desta soluo e levar para 100 mL com gua (soluo de trabalho). A soluo
padro de nitrato de sdio dever ser preparada no momento da anlise. Tomar 20 mL desta soluo, para
verificar a eficincia da reduo do nitrato para nitrito, cada vez que forem preparados novos reagentes, e
transferir para erlenmeyer de 125 mL. Adicionar 5 mL da soluo tampo pH 9,6 - 9,7 e,
aproximadamente, 20 g do cdmio esponjoso. Lavar as paredes do erlenmeyer com o mnimo de gua.
Colocar no agitador por 15 minutos e deixar sedimentar. Filtrar o sobrenadante em papel de filtro
qualitativo, recolhendo diretamente em balo volumtrico de 100 mL. Lavar o erlenmeyer no mnimo 3
vezes com gua, agitando por 2 minutos a cada lavagem. Sedimentar e filtrar. Lavar o papel de filtro e
completar o volume com gua. Pipetar 10 mL para um balo volumtrico de 50 mL. Adicionar 5 mL da
soluo tampo pH 9,6
9,7. Adicionar 5 mL da soluo de sulfanilamida a 0,5 % e agitar.
Aps 3 minutos adicionar 3 mL da soluo de cloreto de alfa-naftiletilenodiamina a 0,5 % e completar o
volume com gua. Aps 30 minutos (ao abrigo da luz) fazer a leitura a 540 nm. A eficincia da reduo
deve estar entre 95 e 105%, caso contrrio tratar novamente o cdmio.
3. Procedimento
Pesar 10 g de amostra homogeneizada em bquer de 50 mL.
Transferir para erlenmeyer de 500 mL com o auxlio de 100 mL de gua quente. Adicionar 5 mL de
soluo de tetraborato de sdio a 5 %. Deixar em banho-maria por 15 minutos, agitando frequentemente.
Esfriar temperatura ambiente. Com o auxlio de um funil e basto de vidro, passar o contedo do
erlenmeyer, quantitativamente para balo volumtrico de 250 mL. Lavar bem o erlenmeyer com
aproximadamente 50 mL de gua quente (60 C). Deixar esfriar e adicionar 5 mL de soluo de
ferrocianeto de potssio a 15 % e 5 mL de soluo de sulfato ou acetato de zinco a 30 %. Agitar por
rotao aps a adio de cada reagente e completar o volume com gua.
Filtrar em papel de filtro qualitativo. Transferir uma alquota de 20 mL do filtrado desproteinizado para
um erlenmeyer de 125 mL.
Adicionar 5 mL da soluo tampo pH 9,6 - 9,7 e aproximadamente 20 g do cdmio esponjoso. Lavar as
paredes do erlenmeyer com o mnimo de gua. Colocar no agitador por 15 minutos, no mnimo e deixar
sedimentar. Filtrar o sobrenadante em papel de filtro qualitativo, recolhendo diretamente em balo
volumtrico de 100 mL.
Lavar o erlenmeyer no mnimo 3 vezes com gua, agitando por 2 minutos a cada lavagem. Sedimentar e
filtrar. Lavar o papel de filtro e completar o volume com gua. Pipetar 10 mL para um balo volumtrico
de 50 mL.
Adicionar 5 mL da soluo tampo pH 9,6 - 9,7. Adicionar 5 mL da soluo de sulfanilamida a 0,5 % e
agitar. Aps 3 minutos adicionar 3 mL da soluo de cloreto de alfa-naftiletilenodiamina a 0,5 % e
completar o volume com gua. Aps 30 minutos (ao abrigo da luz) fazer a leitura a 540 nm. O resultado
obtido refere-se ao teor de nitritos totais.
4. Clculos
mg/mL de nitritos totais (NaNO2) = A x 125 x F m
Onde:
A = absorbncia da amostra;
F = fator da curva de nitrito de sdio;
m = massa da amostra, em gramas.
mg/mL de nitrato (NaNO3) = (nitrito totais - nitrito) x 1,231 Onde:
1,231 = fator de converso dos nitritos em nitratos.
Observaes:
1) Os nitritos so determinados a partir do filtrado desproteinizado e prosseguindo como descrito na
metodologia de nitritos.
2) Usar gua isenta de nitritos.
BIBLIOGRAFIA
CAMPOS, G.; CUNHA, M.R.R. Reduo de nitrito a nitrato atravs de cdmio pelo mtodo de coluna e
da agitao mecnica.
Belo Horizonte: Fundao Ezequiel Dias, [1995] Mimeografado.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
SEN, N.P.; DONALDSON, B. Improved colorimetric method for determining nitrate and nitrite in foods.
Journal Association of Official Analytical Chemistry, Arlington, Va. v. 61, n. 6, p. 1389-1394, 1978
NITRITOS
1. Princpio
Baseia-se na reao de diazotao de nitritos com cido sulfanlico e copulao com cloridrato de
alfa-naftilamina em meio cido, formando o cido alfa-naftilamino-p-azobenzeno-p-sulfnico de
colorao rsea. O produto resultante determinado espectrofotometricamente a 540 nm.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria;
Espectrofotmetro.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Bales volumtricos de 50 e 250 mL;
Bquer de 50 mL;
Erlenmeyers de 250 ou 500 mL;
Funil;
Papel de filtro qualitativo;
Pipeta graduada de 5 mL;
Pipetas volumtricas de 5, 10 e 20 mL.
2.3. Reagentes:
Soluo de tetraborato de sdio decahidratado (Na2B4O7.10H2O) a 5 % (m/v);
Soluo de ferrocianeto de potssio trihidratado (K4[Fe(CN)6].3H2O) a 15 % (m/v);
Soluo de sulfato de zinco heptahidratado (ZnSO4.7H2O) ou acetato de zinco dihidratado ((CH3COO)2
Zn.2H2O) a 30 % (m/v);
Soluo de sulfanilamida (C6H8N2O2S) a 0,5 % (m/v): dissolver 1,25 g de sulfanilamida em 250 mL de
soluo de cido clordrico (HCl) (1+1). A soluo estvel por 1 a 2 meses;
Soluo de cloreto de alfa-naftiletilenodiamina (C12H16Cl2N2) a 0,5 % (m/v): dissolver 0,5 g de cloreto
de alfanaftiletilenodiamina em 100 mL de gua deionizada. Estocar em frasco mbar sob refrigerao. A
soluo deve ser desprezada quando apresentar alterao da colorao;
Soluo padro estoque de nitrito de sdio (NaNO2) p.a.:
pesar 500 mg de nitrito de sdio de pureza mnima de 99 %, previamente seco por 24 horas em
dessecador, transferir para balo volumtrico de 1000 mL e completar o volume. Transferir 5 mL da
soluo para balo volumtrico de 1000 mL e completar o volume, 1 mL desta soluo corresponde a 2,5
mg de nitrito de sdio.
Curva padro de Nitrito de sdio: pipetar alquotas de 1,0
3,0 - 5,0 - 10 - 15 - 20 e 25 mL da soluo de nitrito de sdio a 2,5 mg/mL para bales volumtricos de 50
mL. Adicionar a cada um, 5 mL de soluo de sulfanilamida a 0,5 %, aguardar 3 minutos e adicionar 3
mL de soluo de cloreto de alfa-naftiletilenodiamina a 0,5 %, agitando aps cada adio. Completar o
volume e homogeneizar.
Deixar em repouso por 30 minutos (ao abrigo da luz) e ler a 540 nm contra um branco dos reagentes.
Construir a curva de absorbncia x concentrao (mg nitrito de sdio/50 mL) e calcular o fator F de
correo da curva.
3. Procedimento
Pesar 10 g de amostra homogeneizada em bquer de 50 mL.
Transferir para erlenmeyer de 250 mL com o auxlio de 100 mL de gua deionizada quente. Adicionar 5
mL de soluo de tetraborato de sdio a 0,5 %. Deixar em banho-maria por 15 minutos, agitando
frequentemente. Esfriar temperatura ambiente. Com o auxlio de um funil e basto de vidro, passar o
contedo do erlenmeyer, quantitativamente, para balo volumtrico de 250 mL. Lavar bem o erlenmeyer
com aproximadamente 50 mL de gua deionizada quente (60 C). Deixar esfriar. Adicionar 5 mL de
soluo de ferrocianeto de potssio a 15 % e 5 mL de soluo de sulfato ou acetato de zinco a 30 %.
Agitar por rotao aps a adio de cada reagente e completar o volume com gua. Filtrar em papel de
filtro qualitativo. Transferir 10 mL do filtrado para balo volumtrico de 50 mL. Adicionar 5 mL de
soluo de sulfanilamida a 0,5 %, deixar reagir por 3 minutos, adicionar 3 mL de soluo de cloreto de
alfa-naftiletilenodiamina a 0,5 %, agitando aps cada adio. Completar o volume com gua deionizada e
homogeneizar. Deixar em repouso por 30 minutos (ao abrigo da luz) e ler a 540 nm. Fazer um branco
correspondente.
4. Clculos
mg/mL nitrito de sdio = A x 25 x F
Onde:
A = absorbncia da amostra;
F = fator da curva de nitrito de sdio;
m = massa da amostra, em gramas.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal. Salsicharia. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de
origem animal e seus ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 2, p. 17-19.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
NITROGNIO TOTAL
1. Princpio
Baseia-se na transformao do nitrognio da amostra em sulfato de amnio atravs da digesto com cido
sulfrico p.a. e posterior destilao com liberao da amnia, que fixada em soluo cida e titulada.
Pode-se expressar os resultados em protdios, multiplicando-se a porcentagem do nitrognio total por
fator especfico.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Aparelho ou bloco digestor e destilador macro, semi micro ou micro-Kjeldahl;
Balana analtica.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Balo de Kjeldahl de 800 mL ou tubo de Kjeldahl de 250 ou 100 mL;
Bquer de 250 mL;
Buretas de 25 ou 50 mL;
Erlenmeyers de 125 ou 250 mL;
Esptula;
Papel indicador universal de pH;
Papel de pesagem (papel vegetal livre de nitrognio);
Micro: 1,0 g;
Semi: 3,0 g;
Macro: 6,0 a 10,0 g.
3.5. Doce de leite:
Micro: 0,25 g;
Semi: 0,5 g;
Macro: 1,0 g.
3.6. Leite fermentado:
Micro: 1,5 g;
Semi: 3,0 g;
Macro: 6,0 g.
4. Clculos
% nitrognio total = V x N x f x 0,014 x 100 m
% protdios = % nitrognio total x F Onde:
V = volume da soluo de cido sulfrico 0,1 N, ou soluo de cido clordrico 0,1 N, gasto na titulao
aps a correo do branco, em mL;
N = normalidade terica da soluo de cido sulfrico 0,1 N ou soluo de cido clordrico 0,1 N;
f = fator de correo da soluo de cido sulfrico 0,1 N ou soluo de cido clordrico 0,1 N;
m = massa da amostra, em gramas;
F = fator de converso da relao nitrognio/protena, F = 6,38.
Observaes:
1) Verificar as condies da digesto utilizando uma quantidade de sacarose que consuma
aproximadamente a mesma quantidade de cido sulfrico, que consumiria uma amostra tpica do produto.
Estimar a quantidade de sacarose com as seguintes informaes:
1 g de gordura consome, 18 g de cido;
1 g de protena consome, 9 g de cido;
1 g de carboidrato consome, 7 g de cido;
1 g de sacarose consome, 7 g de cido.
2) Verificar as condies do aparelho de destilao com soluo padro de sulfato de amnio
((NH4)2SO4) p.a., cuja recuperao deve ser no mnimo 99,5 % em nitrognio.
BIBLIOGRAFIA
Basto de vidro;
Bqueres de 25, 30, 50 e 100 mL;
Erlenmeyer de 125 mL;
Pipeta volumtrica de 20 mL;
Proveta de 100 mL;
Tubos de centrfuga.
2.3. Reagentes:
Soluo tampo pH 4;
Soluo tampo pH 7.
3. Procedimento
Calibrar o pHmetro com as solues tampes pH 4 e 7.
Medir o pH da amostra preparada conforme os itens 3.1. a 3.3.
3.1. Leites: medir o pH colocando cerca de 50 mL de amostra em um bquer de 100 mL;
3.2. Queijos: adicionar cerca de 20 mL de gua em um bquer de 50 mL. Acrescentar quantidade
suficiente de amostra previamente preparada, misturando com basto de vidro de modo a obter uma pasta
homognea;
3.3. Manteiga (fase aquosa): aquecer cerca de 100 g da amostra num frasco mantido em banho-maria a 45
- 50 oC, at completa fuso da gordura e separao de fases. A amostra no dever sofrer agitao neste
perodo.Aps total separao das fases, remover o soro atravessando a camada de gordura com uma
pipeta volumtrica de 20 mL (para no permitir a entrada da camada sobrenadante, tampar a extremidade
superior da pipeta com um dedo).
Transferir o contedo da pipeta para um tubo de centrfuga e centrifugar a 1200 rpm por 3 minutos.
Colocar o tubo em um suporte e levar a geladeira por 2 horas, tendo o cuidado de no provocar distrbios
na camada de gordura. Este tempo de repouso sob refrigerao permitir a ascenso da gordura
remanescente e a sua solidificao. Aps a formao de uma camada slida de gordura, atravess-la
novamente com uma pipeta, transferindo o soro para um bquer de 30 mL. Aquecer o soro temperatura
de operao do pHmetro e determinar o pH.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Queijos. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos.
Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 17, p. 5 -6, HALIB FOODS International LTD - Products Especification.
HELRICH, K. (Ed.). Standard solutions and certified reference.
In: _____. Official methods of analysis of the Association of Official Analytical Chemists: food
composition: additives: natural contaminats. 15th ed. Arlington: Association of official analytical
chemists, 1990. v. 2, p. 640-641. Appendix.
MILK INDUSTRY FOUNDATION. Laboratory Manual:
methods of analysis of milk and its products, Washington, [1964?]
PODER COAGULANTE DO COALHO
1. Princpio
Fundamenta-se na determinao do tempo de coagulao de um volume de leite, 35 C, por uma
quantidade de coalho conhecida, baseada na propriedade que tem a quimosina do coalho de desdobrar a
casena do leite.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria;
Cronmetro.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Balo de fundo chato de 250 mL;
Pipeta volumtrica de 1 mL;
Provetas de 100 mL.
2.3. Reagentes:
Soluo de cloreto de sdio (NaCl) a 7 %;
Soluo de coalho lquido: transferir 10 mL da amostra para balo volumtrico de 100 mL e completar o
volume com a soluo de cloreto de sdio a 7 %;
Soluo de coalho em p: pesar 1 g de amostra e transferir para balo volumtrico de 100 mL. Dissolver e
completar o volume com a soluo de cloreto de sdio a 7 %.
3. Procedimento
Transferir 100 mL de leite in natura de boa qualidade para um balo de 250 mL. Levar ao banho-maria
mantido a exatamente 35 oC. Adicionar volumetricamente 1 mL da soluo de coalho preparada.
Acionar o cronmetro quando a soluo de coalho tiver sido colocada. Girar vagarosamente o balo at o
aparecimento dos primeiros grumos na parede do frasco. Interromper o cronmetro e anotar o tempo em
segundos. Realizar trs provas. Considerar a mdia de duas provas cujos tempos no variem mais de 10
segundos entre si.
4. Clculos
Poder coagulante = V x 2400 t
Onde:
V = volume de leite utilizado na prova, em mL, multiplicado por 10 (coalho lquido) ou por 100 (coalho
em p);
2400 = tempo em segundos gasto para coagular 100 mL de leite cru com coalho padro (teoricamente);
t = tempo em segundos gasto para coagular 100 mL de leite cru, usando a soluo de coalho em exame.
BIBLIOGRAFIA:
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Coalho. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos.
Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 20, p. 1-2 modificado MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos
1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
PREGNOLATTO, W.; PREGNOLATTO, N. (Coord.) Leites, creme de leite e coalho In: _____. Normas
analticas do Instituto Adolfo Lutz: mtodos qumicos e fsicos para anlise de alimentos. 3.
ed. So Paulo: Instituto Adolfo Lutz, 1985. v. 1, cap.15, p. 229-230.
ROSELL, J. M.; GOMEZ, J. Manual de anlisis lactolgicos y fabricacin de quesos y mantecas. La
Corua: Trofos, 1960.
SILVA, P.H.F. et al. Fsico-qumica do leite e derivados:
mtodos analticos. Juiz de Fora. MG: Oficina de Impresso, 1997.190 p.
PONTO DE FUSO
Mtodo A: Tubo capilar
1. Princpio
Fundamenta-se na propriedade da gordura de passar do estado slido ao lquido em determinada faixa de
temperatura, dependendo da sua composio em cidos graxos.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Estufa;
Placa aquecedora com agitador magntico;
Refrigerador.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Bqueres de 250 e 1000 mL;
Funil;
Banho-maria;
Estufa 45 - 50 C;
Placa aquecedora com agitador magntico;
Refrigerador.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Bquer de 1000 mL;
Garras metlicas;
Haste metlica de + 60 cm;
Pipeta graduada de 10 mL;
Placa de Wiley: constituda de duas partes, uma placa quadrada de alumnio de 10x10 cm de lado e 0,3
cm de espessura com 9 orifcios circulares de 1 cm de dimetro aproximadamente e uma placa retangular
de ao inox com 1 cm de espessura e 15 cm de comprimento por 10 cm de largura;
Termmetro certificado com resoluo de 0,1 C e escala de leitura de 0 - 50 C;
Termmetro certificado com resoluo de 1 C e escala de leitura de 0 - 100 C;
Tubo de vidro com aproximadamente 40 mm e 150 - 200 mm de comprimento (tubo teste).
2.3. Reagentes:
Mistura lcool-gua: ferver separadamente a gua e o lcool etlico (C2H5OH) p.a. por 10 minutos para
eliminar os gases dissolvidos.
Encher o tubo teste at a metade com gua quente e ento adicionar o lcool quente, inclinando o tubo
para evitar que se misture muito. A adio do lcool aps a gua ter esfriado pode resultar na formao de
bolhas que tornar a soluo imprpria para uso.
3. Procedimento
Pesar cerca de 50 g da amostra, fundir em estufa a 45 - 50 C e filtrar com papel de filtro qualitativo. As
placas de ao inox e alumnio antes de serem usadas devem ser colocadas em refrigerador para estarem
completamente frias. Colocar a placa de alumnio sobre a placa de ao inox e encher os furos da placa de
alumnio com a amostra fundida com auxlio de uma pipeta. Retornar o conjunto ao refrigerador durante
pelo menos duas horas para esfriar completamente.
Remover o excesso de gordura da placa de alumnio. Retirar o disco de gordura solidificada e colocar na
mistura de lcool-gua contida no tubo teste, previamente esfriado em gua e gelo pelo menos a 10 C
abaixo do ponto de fuso da amostra. O disco cair at o ponto onde sua densidade equivalente da
mistura lcool-gua.
Paralelamente fazer um banho-maria utilizando um bquer de 1.000 mL e adaptar atravs de garras
metlicas, o tubo teste dentro do banho, utilizando-se de um agitador magntico para agitao do mesmo.
Inserir o termmetro no tubo teste at que o bulbo esteja na mesma altura do disco da gordura. Girar o
termmetro devagar em volta do disco para manter uniforme a temperatura enquanto aplicado calor
sobre o bquer. Aquecer a gua lentamente e manter a agitao. Enquanto a temperatura da mistura
lcool-gua aumenta, o disco de gordura gradualmente vai mudando de forma. Quando isto acontece,
baixar o termmetro at que o centro do bulbo esteja junto do disco. Continuar girando o termmetro e
regular ento o calor de modo que a temperatura aumente 2 C em 10 minutos. Observar a temperatura na
qual o disco de gordura torna-se completamente esfrico.
Este o ponto de fuso de Wiley. Neste ponto a temperatura da gua do bquer no deve ser mais que 1,5
C acima do ponto de fuso da amostra. A primeira determinao apenas preliminar para estabelecer
uma faixa das condies necessrias. Repetir mais duas determinaes exatamente como descrito. O
segundo e terceiro resultados no devem diferir de 1 C para serem levados em considerao.
Se o disco de gordura encostar nos lados do tubo o teste deve ser repetido. O ponto de fuso poder
tambm ser determinado em aparelho para esta determinao, observando as instrues de cada
equipamento.
BIBLIOGRAFIA
FIRESTONE, D. Oils and fats. In: HELRICH, K. (Ed.).
Offcial methods of analysis of the Association of Official Analytical Chemists: food composition:
additives: natural contaminants. 15th ed.
Arlington: Association of Official Analytical Chemists, 1990. v. 2, cap. 41, p. 953-954 MERCK.
Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
RESDUO MINERAL FIXO
1. Princpio
Fundamenta-se na eliminao da matria orgnica a temperatura de 550 C. O produto obtido
denominado de resduo mineral fixo.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria ou placa aquecedora;
Forno mufla.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Bico de Bunsen;
Cadinho de porcelana, platina ou nquel;
Dessecador;
Pipeta graduada de 1 mL;
Pipeta volumtrica de 20 mL;
Tenaz metlica.
2.3. Reagente:
gua oxigenada (H2O2) a 3 % (10 volumes) (v/v).
3. Procedimento
Aquecer o cadinho de porcelana, platina ou nquel em forno mufla a 550 C durante 30 minutos, esfriar
em dessecador e tarar.
Pesar em balana analtica a amostra homogeneizada diretamente no cadinho, conforme os itens 3.1. e
3.2.. Levar o conjunto ao bico de Bunsen at a carbonizao completa e a seguir ao forno mufla no
mximo a 550 C, para evitar perda de cloretos. Incinerar por 3 horas ou at obter cinzas totalmente
brancas. Esfriar em dessecador e pesar.
No havendo clareamento das cinzas, adicionar 2 a 3 gotas de gua ou gua oxigenada, secar em placa
aquecedora ou estufa 105 C e levar ao forno mufla por tempo suficiente para clareamento das cinzas
(aproximadamente 1 hora). Esfriar em dessecador e pesar.
3.1. Leite Fludo: pesar cerca de 5 g de amostra diretamente no cadinho. Para posterior determinao de
alcalinidade das cinzas, pesar 20 g da amostra. Secar em banho-maria ou evaporar em placa aquecedora
antes de carbonizar em bico de Bunsen;
3.2. Leite desidratado, soro de leite em p, queijo, doce de leite, leite condensado, leite fermentado, creme
de leite: pesar exatamente cerca de 5 g da amostra.
4. Clculos
% cinzas = (m2 - m1) x 100 mo
Onde:
m2 = massa do cadinho com amostra aps incinerao, em gramas;
m1 = massa do cadinho vazio, em gramas;
mo = massa da amostra, em gramas.
Observao: Reservar o resduo mineral fixo do creme de leite, leite em p e soro de leite em p, para
determinar alcalinidade das cinzas, e do queijo para determinao de cloretos.
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Salsicharia. In: _____. Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos. Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 2, p. 3.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
SLIDOS TOTAIS PARA LEITE FERMENTADO
1. Princpio
Evaporao da gua da amostra, na presena de xido de zinco, temperatura de 102 2 C em estufa de
secagem. Determinao do teor de cido lctico visando compensar a perda de gua pela neutralizao.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria ou banho de vapor;
Estufa.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Basto de vidro com uma extremidade achatada e de tamanho adequado cpsula;
Cpsula de ao inoxidvel, nquel ou alumnio, com 50 - 75 mm de dimetro e 20 - 25 mm de altura, com
tampa removvel;
Dessecador;
Esptula;
Tenaz metlica.
2.3. Reagente:
xido de zinco.(ZnO)
3. Procedimento
Aquecer a cpsula aberta em estufa 102 + 20C por 1 hora, contendo 2 g de xido de zinco. Ao seu lado,
colocar a tampa e sobre esta o basto de vidro. Colocar a tampa com o basto de vidro sobre a cpsula e
transferir imediatamente para dessecador. Esfriar no mnimo por 45 minutos e pesar a cpsula com a
tampa e o basto.
Mover o xido de zinco para o lado da cpsula e adicionar cerca de 1 g da amostra. Tampar a cpsula com
basto sobre a tampa e pesar.
Adicionar 5 mL de gua amostra se necessrio, misturando todo o contedo da cpsula. Apoiar a
extremidade reta do basto sobre a borda da cpsula. Aquecer a cpsula em fluxo de vapor, durante cerca
de 30 minutos, com ocasional agitao, atravs de basto. Secar rapidamente o fundo da cpsula com
papel absorvente, deixar o basto dentro da cpsula e levar o material para estufa por 3 horas, mantendo a
tampa ao lado de sua respectiva cpsula. Cobrir a cpsula e levar imediatamente para dessecador e
aguardar 45 minutos. Pesar e repetir o procedimento de aquecimento na estufa por mais 1 hora.
Repetir o procedimento at que a diferena entre as pesagens no exceda 1 mg. Determinar o teor de
cido lctico da amostra.
4. Clculos
% de slidos totais = {[(m2 - m0) x 100] / (m1 - m0 )} + (0,1 x A)
Onde:
m0 = massa em grama da cpsula + xido de zinco + tampa + basto;
m1 = massa em grama da cpsula + xido de zinco + tampa + basto + amostra;
m2 = massa em grama da cpsula + xido de zinco + tampa + basto + amostra dessecada;
A = massa em grama de cido lctico, obtido na acidez.
mnimo 48 horas. Tornar a misturar suave e cuidadosamente, atravs de inverso e rotao do frasco
hermtico por algumas poucas vezes. Pesar uma alquota de 10 + 0,1 g da amostra de leite em p integral
ou desnatado instantneo. Conduzir o teste em triplicata. Pesar 250 + 0,1 g de gua a 25 + 1 C em um
bquer de 600 mL, tendo o cuidado para que a parte interna do bquer acima do nvel da gua permanea
seca.
Colocar o bquer na base do suporte do tubo de vidro. Colocar a placa de vidro centralizada sobre o
bquer e instalar o tubo de vidro sobre a placa fixando-o de tal forma que fique centralizado sobre o
bquer e que deixe a placa de vidro livre o suficiente para ser retirada. Transferir a poro pesada da
amostra para o tubo de vidro, usando a escova se necessrio e distribuir a amostra uniformemente sobre a
placa de vidro com a ajuda da esptula. Acionar o cronmetro e, aps exatamente um minuto, retirar a
placa de vidro com uma das mos, segurando o bquer com a outra de modo que a amostra caia
progressivamente sobre a superfcie da gua contida no bquer. A retirada da placa deve ser conduzida
atravs de movimento contnuo e suave, sendo concluda dentro de aproximadamente 2,5 segundos.
Remover imediatamente o bquer debaixo do tubo e, deixar em repouso.
Assim que todas as partculas tenham submergido, interromper o cronmetro e anotar o tempo, em
segundos.
4. Clculos
W = W' - 60
Onde:
W = tempo de molhagem, em segundos.
W' = tempo cronometrado, em segundos.
Recomenda-se que os valores das triplicatas, assim como a sua mdia, sejam indicados na expresso dos
resultados.
BIBLIOGRAFIA
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 87: 1979: determination of the dispersibility of instan dried
milk. Brussels, 1987. 4 f.
UMIDADE E VOLTEIS, GORDURA E SLIDOS NO GORDUROSOS NA MANTEIGA
Mtodo A
1. Princpio
Fundamenta-se na perda de massa da amostra por evaporao da gua e substncias volteis, na
solubilidade da gordura em ter etlico e na insolubilidade das protenas, lactose, sais minerais e
orgnicos, componentes normais da manteiga, neste solvente.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Banho-maria;
Estufa.
Onde:
m = massa dos insolveis, em gramas;
m' = massa da amostra, em gramas.
4.3. Gordura:
% Gordura = 100 - (% Umidade + % SNG)
BIBLIOGRAFIA
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Agropecuria. Laboratrio Nacional
de Referncia Animal.
Manteiga. In: _____.Mtodos analticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus
ingredientes: mtodos fsicos e qumicos.
Braslia, DF, 1981. v. II, cap. 21, p. 1.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
UMIDADE E VOLTEIS, GORDURA E SLIDOS NO
GORDUROSOS NA MANTEIGA
Mtodo B
1. Princpio
Baseia-se na determinao da perda de massa de gua e substncias volteis atravs de secagem de uma
massa conhecida de manteiga a 102 2 oC, seguida de uma extrao da gordura da amostra dessecada,
atravs de solventes e pesagem do resduo.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Estufa.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Basto de vidro;
Cadinhos com filtro de vidro sinterizado, grau de porosidade p 40 (dimetro dos poros de 16 a 40 mm),
com frasco de suco;
Copos ou frascos de vidro, porcelana ou metal resistente a corroso, com no mnimo 25 mm de altura e 50
mm de dimetro;
Dessecador;
Tenaz metlica.
2.3. Reagentes:
n-Hexano (C6H14) p.a., ou ter de petrleo (P.E.= 30 a 60 oC) p.a.. O reagente no dever deixar mais de
1 mg de resduo aps evaporao de 100 mL.
3. Procedimento
Determinao do teor de umidade:
Colocar o copo em estufa a 102 + 2 C, durante 1 hora.
Esfriar em dessecador e pesar. Pesar exatamente cerca de 2 a 6 g da amostra (ou de 5 a 6 g para manteiga
sem sal). Colocar o copo com a amostra em estufa a 102 + 2 C por 2 horas. Transferir para dessecador,
deixar esfriar e pesar. Repetir a secagem por mais 1 hora e posteriormente por mais 30 minutos, at massa
constante. (considerar o menor valor obtido quando ocorrer eventual aumento da massa).
Determinao de Slidos no Gordurosos (SNG):
Secar um cadinho com filtro de vidro sinterizado por no mnimo 1 hora em estufa a 102 + 2 C, esfriar em
dessecador e pesar.
Adicionar 10 a 15 mL de n-hexano aquecido a 25 oC ou ter de petrleo ao frasco onde se realizou a
determinao do teor de umidade.
Com auxlio de um basto, deslocar o material aderido parte interna do copo e transferir
quantitativamente para o cadinho com filtro de vidro sinterizado. Repetir de 4 a 5 vezes a extrao. Lavar
o sedimento no cadinho com 25 mL de solvente. Transferir para estufa o cadinho e o copo de onde foi
extrado o sedimento e secar ambos a 102 + 2 C por 30 minutos. Transferir para dessecador, esfriar e
pesar. Repetir as operaes de secagem e pesagem at massa constante.
4. Clculos
% Umidade = [( M1 - M2 ) / (M1 - MO)] x 100
Onde:
Mo = massa do copo vazio, em gramas;
M1 = massa do copo com a amostra antes da secagem, em gramas;
M2 = massa do copo com a amostra aps secagem, em gramas.
% SNG = {[(M4 - M3) + ( M5 - MO)] / (M1 - MO)} x 100 Onde:
MO = massa do copo vazio, em gramas;
M1 = massa do copo com a amostra antes da secagem, em gramas;
M3 = massa do cadinho vazio, em gramas;
M4 = massa do cadinho contendo o sedimento aps secagem, em gramas;
M5 = massa final do copo de onde foi extrado o sedimento, em gramas.
% Gordura = 100 - (% Umidade + % SNG)
Observao: A diferena entre os resultados de duas determinaes, conduzidas simultaneamente ou em
rpida sucesso pelo mesmo analista, no dever exceder a 0,1g de gua ou 0,1g de SNG por 100 g de
amostra.
BIBLIOGRAFIA
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 80: 1977: butter: determination of water, solids now fat and
fat contents on the same test portion Brussels, 1977. 2 f.
MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos 1992/93. Darmstadt, 1993. 1584 p.
UMIDADE E VOLTEIS E SLIDOS TOTAIS
Mtodo A
1. Princpio
A umidade determinada pela perda de massa em condies nas quais, gua e substncias volteis so
removidas. O resduo obtido aps evaporao representa os slidos totais da amostra.
2. Material
2.1.Equipamentos:
Balana analtica;
Placa aquecedora;
Estufa.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Basto de vidro;
Bquer de 100 mL;
Dessecador;
Esptula;
Prolas de vidro com 3 mm de dimetro;
Pesa filtro ou cpsula de alumnio, ao inox, porcelana ou nquel;
Tenaz metlico.
3. Procedimento
Colocar a cpsula, em estufa a 102 + 2 C durante 1 hora.
Esfriar em dessecador e pesar. Pesar a amostra preparada e homogeneizada e levar estufa conforme os
itens 3.1. a 3.6.. Esfriar em dessecador e pesar. Repetir at massa constante. As operaes de pesagem
devem ser feitas o mais rpido possvel e a secagem deve ser conduzida sem que haja escurecimento da
amostra.
3.1. Leite em p e soro de leite em p:
Massa da amostra: 5 g;
Temperatura da estufa: 85 + 2 C;
Tempo at a primeira pesagem: 2 horas;
Tempo, na estufa, entre pesagens at massa constante: 30 minutos.
3.2. Doce de leite e leite condensado:
Massa da amostra 3 g em cpsulas contendo prolas e basto de vidro previamente dessecados;
Temperatura da estufa: 85 + 2 C;
Tempo at a primeira pesagem: 6 horas;
Tempo, na estufa, entre pesagens at massa constante: 1 hora.
3.3. Creme de leite:
Massa da amostra: 5 g em cpsula com prolas de vidro;
Temperatura da estufa: 102 + 2 C;
Tempo at a primeira pesagem: 2 horas;
Tempo, na estufa, entre pesagens at massa constante: 30 minutos.
3.4. Queijo.
Massa da amostra: 5 g:
Temperatura da estufa: 102 + 2 C;
Tempo at a primeira pesagem: 3 horas;
Tempo, na estufa, entre pesagens at massa constante: 1 hora.
3.5. Manteiga e Margarina:
Massa da amostra: 5 g em bquer;
Temperatura da estufa: 102 + 2 C;
Tempo at a primeira pesagem: 3 horas (agitar por rotao o bquer para eliminar as bolhas);
Tempo, na estufa entre pesagens at massa constante: 30 minutos.
3.6. Leite fermentado:
Massa da amostra: 5 g em cpsula contendo prolas de vidro;
Temperatura da estufa 102 + 2 C;
Tempo at a primeira pesagem: 4 horas;
Tempo, na estufa, entre pesagens at massa constante: 1 hora.
4. Clculos % umidade e volteis = 100 x m m'
Colocar o basto dentro da cpsula, enxugando o fundo da mesma com papel absorvente. Transferir a
cpsula com sua respectiva tampa para estufa de secagem a 102 1 C durante 2 horas.
BIBLIOGRAFIA
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 4A: 1982: chese and proceesed cheese: determination of the
total solids content (reference method) Brussels, 1982. 2 f.
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 15B: 1988:
sweetened condensed milk: determinarion of the total solids content (reference method). Brussels, 1988. 2
f.
UMIDADE E VOLTEIS E SLIDOS TOTAIS
Mtodo C
1. Princpio
Secagem de uma alquota da amostra, a uma temperatura determinada, at massa constante e pesagem
para determinao da perda de massa de umidade e volteis.
2. Material
2.1. Equipamentos:
Balana analtica;
Estufa com circulao de ar.
2.2. Vidraria, utenslios e outros:
Cpsulas de alumnio, vidro, ao inoxidvel ou nquel, com cerca de 25 mm de profundidade e dimetro
de aproximadamente 50 mm, com tampa.
3. Procedimento
Aquecer a cpsula e a sua tampa separadamente em uma estufa a 102 2C por 1 hora, colocar a tampa
na cpsula, transferir para dessecador, esfriar at a temperatura ambiente e pesar. Transferir a amostra
para cpsula conforme os itens 3.1. e 3.2., colocar a tampa e pesar. Destampar a cpsula e coloc-la, com
sua tampa, na estufa. A tampa dever ficar apoiada na borda da respectiva cpsula, formando um ngulo
entre esta e a estante da estufa . Manter o material a 102 2C, por 2 horas. Tampar a cpsula, transferir
para dessecador, destampar e esfriar a cpsula contendo a amostra dessecada, mantendo a tampa em
posio similar que manteve na estufa. Transferir a cpsula para a balana, colocar sua tampa e anotar o
peso.
3.1. Leite em p: pesar de 1 a 3 g;
3.2. Queijo em p: pesar de 1 a 3 g.
4. Clculos
% Umidade = [(m1 - m2) / (m1 - mo)] x 100
% Slidos Totais = 100 - % Umidade.
Onde:
mo = massa da cpsula com sua tampa, em gramas;
m1 = massa da cpsula com tampa + massa da alquota da amostra, em gramas;
m2 = massa da cpsula com tampa + massa dessecada da alquota, em gramas.
BIBLIOGRAFIA
INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION. 26A: 1993:
dried milk and dried cream: determination of water content Brussels, 1993. 2 f.
VI - SOLUES PADRES
SOLUO DE CIDO CLORDRICO (HCl) 0,1 N
Preparo da soluo padro:
Medir 8,5 mL de cido clordrico p.a. e transferir para balo volumtrico de 1000 mL contendo 500 mL
de gua. Esfriar e completar o volume.
Fatorao com Tris (Hidroximetilaminometano):
Deixar o reativo Tris (Hidroximetilaminometano)
(C4H11 NO3) p.a., padro primrio, por 24 horas em dessecador, ao abrigo da luz. Pesar exatamente
cerca de 0,12114 g, adicionar 20 mL de gua, acrescentar 3 gotas da soluo de vermelho de metila a
0,2% (m/v) e titular com a soluo de cido clordrico 0,1 N. Calcular o fator de correo usando, no
mnimo, a mdia de trs determinaes.
Clculos:
Fator de correo = m______
0,12114 x V x N
Onde:
m = massa de Tris, em gramas;
V = volume da soluo de cido clordrico 0,1 N gastos na titulao, em mL;
N = normalidade esperada da soluo.
Fatorao com carbonato de sdio:
Pesar exatamente 5,299 g de carbonato de sdio (Na2CO3) p.a., padro primrio, previamente seco a 270
C por 1 hora. Dissolver em gua destilada, transferir para balo volumtrico de 1.000 mL e completar o
volume. Pipetar 20 mL da soluo de carbonato de sdio e transferir para erlenmeyer de 250 mL.
Adicionar 3 gotas de vermelho de metila 0,1 % (m/v). Titular at a viragem para colorao rsea. Aquecer
ebulio, para eliminar o gs carbnico. Esfriar e prosseguir a titulao. Repetir esta operao at
colorao rsea persistente.
Clculos:
hidrxido de sdio 0,1 N. Calcular o fator de correo usando, no mnimo, a mdia de trs determinaes.
Clculos:
Fator de correo = m______
0,2042 x V x N
Onde:
m = massa de biftalato de potssio, em gramas;
V = volume de soluo padro de hidrxido de sdio gastos na titulao, em mL;
N = normalidade esperada da soluo.
SOLUO DE NITRATO DE PRATA (AgNO3) 0,1 N
Preparo da soluo padro:
Pesar 17 g de nitrato de prata p.a. e transferir para balo volumtrico mbar de 1000 mL com rolha
esmerilhada e completar com gua. Fatorao:
Pesar exatamente cerca de 0,15 g de cloreto de sdio (NaCl) p.a., padro primrio, previamente seco a
110C por 1 hora, para erlenmeyer de 100 mL e adicionar cerca de 25 mL de gua e 1 mL de soluo de
cromato de potssio (K2CrO4) a 5% (m/v) como indicador.
Titular com a soluo de nitrato de prata 0,1 N at o aparecimento de cor castanha avermelhada. Calcular
o fator de correo usando, no mnimo, a mdia de trs determinaes.
Clculos:
Fator de correo = __ m ______
0,0585 x V x N
Onde:
m = massa de cloreto de sdio, em gramas;
V = volume de soluo de nitrato de prata gastos na titulao, em mL;
N = normalidade esperada da soluo.
SOLUO DE PERMANGANATO DE POTSSIO
(KMnO4) 0,05 N
Preparo da soluo padro:
Dissolver 1,6 g de permanganato de potssio p.a. em bquer contendo aproximadamente 300 - 400 mL de
gua e aquecer a 60 - 70 C por 2 horas. Esfriar, transferir, quantitativamente, para balo volumtrico de
1000 mL, completar o volume e homogeneizar. Deixar em repouso por 72 horas ao abrigo da luz. Filtrar
em cadinho de vidro sinterizado ou cadinho de porcelana com amianto ou l de vidro e estocar em frasco
mbar.
Fatorao: