1) O documento descreve os mecanismos da coagulação sanguínea in vitro e vários anticoagulantes usados para coleta de sangue no laboratório.
2) Os principais anticoagulantes descritos são: EDTA, heparina, citratos, misturas de citratos e oalatos, que agem inibindo fatores-chave da coagulação como cálcio e trombina.
3) Cada anticoagulante tem vantagens e desvantagens para diferentes exames laboratoriais, dependendo de seu mecanismo
1) O documento descreve os mecanismos da coagulação sanguínea in vitro e vários anticoagulantes usados para coleta de sangue no laboratório.
2) Os principais anticoagulantes descritos são: EDTA, heparina, citratos, misturas de citratos e oalatos, que agem inibindo fatores-chave da coagulação como cálcio e trombina.
3) Cada anticoagulante tem vantagens e desvantagens para diferentes exames laboratoriais, dependendo de seu mecanismo
1) O documento descreve os mecanismos da coagulação sanguínea in vitro e vários anticoagulantes usados para coleta de sangue no laboratório.
2) Os principais anticoagulantes descritos são: EDTA, heparina, citratos, misturas de citratos e oalatos, que agem inibindo fatores-chave da coagulação como cálcio e trombina.
3) Cada anticoagulante tem vantagens e desvantagens para diferentes exames laboratoriais, dependendo de seu mecanismo
Para se entender a necessidade de uma coleta de sangue rpida e com agulha
bem afiada, necessrio estrear a coagulao do sangue, verificando o que acontece desde a entrada da agulha no vaso sanguneo ou da penetrao da lanceta atravs da pele, at a formao do cogulo. A coagulao "in vitro" envolve a transformao de uma protena eistente no plasma, o fibrinog!nio, em fibrina. "ssa fibrina vai formar fibras, que se emaranham, envolvem as hemcias, os leuc#citos e as plaquetas, formando o cogulo. A coagulao "in vitro" se d em seq$!ncia, pela ativao em srie, de fatores eistentes no plasma, que em seguida vo ativando outros fatores. %hama&se reao "em cascata". A interrupo de uma ativao impede a ativao do resto da seq$!ncia, impossibilitando a coagulao 'este o papel eercido pelos anticoagulantes(. )s fatores envolvidos na coagulao receberam n*meros em algarismos romanos, + medida que foram sendo descobertos, de modo que a seq$!ncia dos fen,menos no segue uma numerao crescente ou decrescente. A coagulao - in vitro -se inicia com um fator, eistente no plasma, que ativado em contato com o vidro ou com o plstico da seringa, que o fator .//. "sse fator tambm ativado nos tecidos, pelas clulas traumati0adas pela agulha ou pelas les1es causadas pelas manobras repetidas para tentar achar um vaso2. ) fator .//, inativo, toma&se fator .//, ativo, que por sua ve0 ativa o fator seguinte 'fator ./(, comeando a reao em cascata. 3o ativados, sucessivamente, os fatores /., 4///, . e 4. "nto, devido ao clcio proveniente das plaquetas, formada a protrombina, que depois se transforma em trombina. "ssa passa a fibrinog!nio, que d origem ento + fibrina froua, no incio e + fibrina firme, que finalmente engloba os elementos s#lidos do sangue. "st formado o cogulo. Mecanismo da Coagulao "in vitro" c o n t a t o c o m v i d r o l a ! u e t a s " C a r o t o m # i n a t o m # i n a $ i # r i n a $ r o u % a $ i # r i n a $ i r m e $ i # r i n o g & n i o X I I X I I I X V I I I X V Anticoagulantes' 5uando necessitamos de sangue total ou de plasma, usamos anticoagulantes. 6o eiste um anticoagulante ideal para todos os eames de laborat#rio. "m geral, eles interferem no mecanismo da coagulao "in vitro", inibindo a formao da protrombina ou da trombina. c o n t a t o c o m v i d r o l a ! u e t a s " C a E ( T A O % a l a t o s C i t r a t o s ) l u o r e t o * e a r i n a $ i # r i n a $ r o u % a $ i # r i n a $ i r m e $ i # r i n o g & n i o X I I X I I I X V I I I X V Anticoagulantes Usados' E(TA +,cido etileno-diamino-tetra-ac.tico/' 6ome %omercial7 3equestrene Age, na seq$!ncia da coagulao -in vitro2, sobre o %lcio. Atua na forma no ioni0ada do %lcio fiando&o por quelao 'seq$estro( e o resultado a formao de um sal insol*vel. 8esta forma, bloqueia a formao da protrombina e, portanto, o resto da coagulao2. 9 usado na concentrao de : a ; mg<ml de sangue. 6a forma lquida usa&se : gota de "8=A < ; a > ml de sangue, devendo ser muito bem misturado no momento do uso. %olocar em frasco de coleta o volume apropriado de uma soluo aquosa de "8=A a :? e secar a temperatura ambiente. 0antagens' a( Pode ser usado em muitas determina1es bioqumicas@ b( Atima conservao de plaquetas c( Baia toidade, podendo ser usado em transfuso. d( > a C horas ap#s a coleta obtm&se bons esfregaos. e( Delhor anticoagulante para a hematologia f( =empo de reali0ao do eame 'contagens celulares podem ser reali0adas at ;C horas ap#s a coleta do sangue, se mantido sob refrigerao(. g( 6o serve para estudos da coagulao. *E1A2INA' 6ome %omercial7 Eiquemine 'obtido de mast#citos de camundongo( 9 um mucopolissacardeo e considerado o anticoagulante "natural" devido + sua presena no sangue, em quantidade inferior a necessria para evitar a coagulao do sangue recm&colhido. Age inibindo a ativao do fator /. e a ao da trombina 'agente antitrombina(. /mpede tambm a aglutinao das plaquetas. Pode&se usar : gota de Feparina 'na concentrao de GHHH I./.( para cada G ml de sangue ou na concentrao de H,: a H,; mg<ml de sangue. %olocar em frascos com tampa e evaporar em estufa. 0antagens' a( muito *til quando se quer evitar hem#lise b( melhor anticoagulante para os testes de fragilidade osm#tica c( hematologia 'no afeta o volume corpuscular e nem o hemat#crito( d( gasometria e( dosagens bioqumicas f( radioimunoensaio g( imunol#gica (esvantagens' a( 6o deve ser usado para testes de coagulao b( 6o deve ser usado para dosagem de fosfates 'fosfatase cida( c( Preo elevado d( Fematologia 'no deve ser usado na confeco de esfregaos, pois as colora1es ficam a0uladas( O3ALATOS 3o utili0ados os oalatos de potssio, de s#dio, de am,nio ou de ltio, sendo mais comumente empregado o oalato de potssio. Jreq$entemente so empregadas misturas de dois sais. )s oalatos agem na remoo do %lcio pela precipitao como oalato de clcio, que insol*vel. )s oalatos so utili0ados como agentes descalcificantes de ao reversvel. ) oalato de potssio utili0ado na quantidade de : a ; mg<ml de sangue 'H,H: ml de uma soluo aquosa a ;H?, por ml de sangue, ou seKa, : gota por G ml de sangue. %olocar em frascos com tampa e evaporar em estufa. Portanto, utili0ado na forma de p#. 0antagens' a( )s oalatos de s#dio e potssio so muito usados no estudo da coagulao, contagem de LB, L 4, Ft, Fb e dosagens bioqumicas 'oalato de ltio para dosagem de cido *rico@ oalato de potssio para dosagem de uria e creatinina(. (esvantagens4 a( =#ico@ b( Provocam inibio da fosfatase cida, amilase e desidrogenasses@ c( Alteram as concentra1es dos componentes do plasma devido + sada de gua das hemcias, que aumenta com a concentrao de anticoagulante@ d( 8iminui, rapidamente, em G a :H?, o valor do Ft e certos componentes do plasma@ e( "sfregaos hematol#gicos no so satisfat#rios, uma ve0 que os neutr#filos apresentam distor1es, ocorrem altera1es citoplasmticas e aberra1es nos n*cleos dos leuc#citos. Mistura de *eller e 1aul ou Mistura de O%alato de Am5nio e O%alato de 1ot,ssio +6 artes de O%alato de Am5nio e 7 artes de O%alato de 1ot,ssio/' Isado na proporo de ; mg da mistura por ml de sangue. %olocar H,: ml de anticoagulante por ml de sangue em frascos com tampa e evaporar em estufa 0antagens' a( preo 'anticoagulante barato( b( facilidade de preparao c( usado para Ft e Femossedimentao 'reali0ar o eame em menos de > horas(. (esvantagens' a( no usar para dosar nitrog!nio no&protico ou nitrog!nio, urico pelo mtodo da urease. b( tempo de reali0ao do eame 'fa0er em seguida ou no mesmo dia( c( t#ico 'no usar em transfus1es(. CIT2ATOS 6o mecanismo da coagulao, os citratos agem sobre o %lcio por captao, formando um sal insol*vel. )s citratos so utili0ados na concentrao de G mg<ml de sangue. Para isso, preparamos tubos com H,G ml de citrato de s#dio a >,M g<:HH ml 'H,: D( e completamos o volume de G ml, com sangue. 8evemos usar solu1es preparadas recentemente ou estreis, pois so muito suscetveis as contamina1es por fungos, com baia de sua atividade@ 0antagens' a( estudos de coagulao 'plaquetas e 4F3(. (esvantagens' a( /nibem fosfatase alcalina e amilase, no devendo ser utili0ado para dosagens bioqumicas 'provoca sada de gua das hemcias(. E(TA-)LUO2ETO +E(TA 89: +;v/ < )luoreto de S=dio 8: +;v//' ) fluoreto de s#dio 'preservador( um potente inibidor en0imtico '"veneno en0imtico"(, impedindo a atuao das en0imas que quebram a. glicose 'glic#lise(. Pode ser adicionado a outros anticoagulantes, conferindo&lhes este efeito. Proporo Isada7 > partes de "8=A :H? e : parte de Jluoreto de 3#dio :?. Isar : gota< > ml de sangue. 0antagem' a( dosagem de glicose 'conserva por M horas(. (esvantagem' a( 6o deve ser usado nas dosagens por mtodo en0imtico 'dosagem da urase(, pois um anticoagulante en0imtico. AC( +Acido C>trico" Citrato" (e%trose/' Anticoagulante de banco de sangue. Isa&se : ml A%8< C mg de sangue e refrigera&se a CN%. 6o laborat#rio pode ser usado para estudo da coagulao. AC(1 +?cido C>trico" Citrato" (e%trose" )os$ato/' ) Anticoagulante de banco de sangue, que apresenta mais vantagens na utili0ao que o anticoagulante anterior.