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VIOSA
Departamento de Microbiologia
MBI 100 Microbiologia Geral
Objetivos
Ao final desta aula o estudante dever
dever ser capaz de:
Reconhecer as principais exigncias nutricionais dos
microrganismos
Nutrio, Cultivo e
Crescimento de
Microrganismos
Composi
Composio aproximada de elementos qu
qumicos
de uma c
clula bacteriana (E. coli)
ELEMENTO
Carbono
Oxignio
Nitrognio
Hidrognio
Fsforo
Enxofre
Pot
Potssio
Sdio
Clcio
Magn
Magnsio
Cloro
Ferro
Outros
% do PESO SECO
50
20
14
8
3
1
1
1
0,5
0,5
0,5
0,2
0,3
Grupo
nutricional
Fonte de
carbono
Fonte de Exemplos
energia
Quimioautotr
Quimioautotrficos
di
dixido de
carbono
compostos
inorgnicos
bact
bactrias nitrificantes,
nitrificantes,
do ferro,
ferro, do enxofre
Quimioheterotr
Quimioheterotrficos
compostos
orgnicos
compostos
orgnicos
bact
bactrias,
rias, fungos
protozo
protozorios e animais
Fotoautotr
Fotoautotrficos
di
dixido de
carbono
luz
bact
bactrias sulfurosas
verde e prpura,
rpura, algas,
algas,
plantas,
rias
plantas, cianobact
cianobact
Fotoheterotr
Fotoheterotrficos
compostos
orgnicos
luz
bact
bactrias prpuras e
verdes nono-sulfurosas
Fun
Funo
Quantidade
(NH4)2SO4
0,5 g
NaHCO3
Fonte de carbono
0,5 g
Na2HPO4
13,5 g
KH2PO4
0,7 g
MgSO4.7H2
O
ons essenciais
0,1 g
FeCl3.6H2O
ons essenciais
0,014 g
CaCl2.2H2O
ons essenciais
0,18 g
gua
Solvente
Fun
Funo
Fonte de energia e carbono
1g
NH4H2PO4
5g
K2HPO4
Fonte de nitrognio,
nitrognio, tampo e
ons essenciais
Tampo e ons essenciais
MgSO4.7H2O
ons essenciais
0,2 g
NaCl
ons essenciais
5g
gua
Solvente
Quantidade
1g
1.000 ml
1.000 ml
Funo
Extrato de
carne
Substncias hidrossolveis de
tecido animal: carboidratos,
compostos de nitrognio orgnico,
vitaminas, sais
Nitrognio orgnico, algumas
vitaminas
3g
Cloreto de
sdio
8g
gua
Solvente
Peptona
Ingredientes
Glicose
Quantidade
5g
1.000 ml
tg
tg
N0
2N0
4N0
20 N0
21 N0
22 N0
8N0 . . .
N = 2n N0
Resolvendo a
equao:
23 N0 . . . 2n N0
tg
Frmula Geral: N= 2n N0
Onde: N = Nmero total de clulas na populao
n = Nmero de geraes (T/ tg)
log N
log N
Fase
Estacionria
Fase
de
morte
(h 1) =
Log 2/ tg
Fase
Lag
Tempo (h)
a) Atmosfera
b) Temperatura
c) pH
Fase Log
d) Disponibilidade de gua
Tempo (h)
tima
Termfilos
Mesfilos
Psicrotrficos
Taxa de crescimento
Reaes enzimticas
com velocidade
crescente
Hipertermfilos
Ex: Thermococcus celer
Ex: Pseudomonas sp
Desnaturao de
protenas
Colapso da membrana
plasmtica
Lise celular
Mxima
Mnima
Solidificao da membrana
Diminuio do transporte de substncias
Paralizao do crescimento
Temperatura (C)
Psicrfilos
Ex: Flavobacterium sp
Disponibilidade de gua
No haloflicos
Ex: Escherichia coli
Neutrfilos
Acidfilos
Alcaliflicos
Ex: Acidithiobacillus sp
Ex: Bacillus sp
3,5
Haloflicos
Ex: Vibrio fischeri
Taxa de crescimento
Taxa de crescimento
Haloflicos extremos
Ex: Halobacterium salinarium
14
pH
Halotolerantes
Ex: Staphylococcus aureus
O2 -
(nion super
superxido)
xido)
H2O2 (per
nio))
(perxido de hidrog
hidrognio
H2O + OH
(radical hidroxil)
hidroxil)
Mecanismos de destoxificao
2 O2- + 2H+ SOD O2 + H2O2
2 H2O2
catalase
2 H2O + O2
M
todos para quantificar o crescimento microbiano
Mtodos
1.1.1 LMINA
Anaer
Anaer
Anaerbios
Anaerbios
Aer
Aerbios
aerotolerantes
estritos Anaer
Anaerbios facultativos
Microaer
Microaerfilos
estritos
1.1 TOTAIS
1.1.1 ELETRNICA
1.
No.
CLULAS
1.2.1 PLAQUEAMENTO (diluies)
1.2 VIVEIS
MEDIDAS
DE
CRESCIMENTO
2.1 DIRETA
2. MASSA
Contagem de colnias
em placas e dilui
diluies
seriadas
Diluies sucessivas da
amostra
Plaqueamento de alquotas
Contagem de colnias
(entre 30 e 300)
Espectrofotmetro
Turbidez
da cultura
Fonte
luminosa
Amostra
Fototubo
Utiliza
Utilizao da cmara de contagem de PetroffPetroff-Hausser na
contagem microsc
microscpica direta do n
nmero de bact
bactrias
Clculo de unidades
formadoras de colnia
(UFC/mL)