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Crescimento , Nutrição

e Metabolismo Bacteriano
Prof André Kipnis
Crescimento Bacteriano
Para crescer, as bactérias precisam de uma fonte de energia, uma
fonte de carbono, outros nutrientes (requerimentos químicos) e
condições físicas apropriadas como concentração de O2,
temperatura e pH (requerimentos físicos).

Crescimento celular: elongação, fissão binária

As bactérias podem ser agrupadas de acordo com seus


requerimentos físicos e químicos (nutricionais). Por exemplo
fototróficas são bactérias que usam luz como fonte de energia,
anaeróbios são organismos que crescem sem oxigênio, termófilos
são organismos que crescem em altas temperaturas.
Como que as bactérias crescem?
Crescimento Bacteriano

Tempo de geração
Geração
Taxa de crescimento

Escherichia coli = Tempo geração ?

T0 = 1 célula; T 0,5h = 2 células .............T 16hs ? X Células


Curva de Crescimento Bacteriano

Estacionária Declínio
/Morte
Número de Microrganismos

Log/
Exponencial

Lag

Tempo
Requerimentos físicos
pH
Acidófilas, neutrófilas, alcalófilas
Temperatura
Psicrófilas, mesófilas, termófilas
Oxigênio:
Aeróbicas obrigatória
Anaeróbicas obrigatória
Anaeróbicas facultativa
Microaerófilas
Por quê anaeróbicas ?
Radicais de oxigênio

Superóxido
1
Peróxido de hidrogênio
2
Radical hidroxila

Água

Superóxido dismutase (SOD-1) e peroxidase (2) são enzimas responsáveis


pela neutralização dos radicais
Requerimentos químicos – nutrição
Metabolismo
• Processos químicos que ocorrem dentro da célula

Nutrientes:
• Compostos químicos do ambiente utilizados pelas
bactérias que são transformados em constituintes celulares e/ou
energia.
Catabolismo x Anabolismo
(libera energia) x (consome energia)
Todos organismos precisam de uma fonte
de Carbono, uma fonte de energia e uma
fonte de nutrientes minerais.
Calor Moléculas simples:
Glicose, aminoácidos, ácidos graxos

ATP

Reações catabólicas Reações anabólicas


transferem energia de transferem energia do
moléculas complexas ATP para moléculas
para ATP complexas

ADP + Pi

Moléculas complexas:
Amido, proteínas, lipídios
Calor
Integração metabólica
• Fonte de Carbono
– Autotróficos = CO2
– Heterotróficos = compostos orgânicos
• Fonte de Energia
– Quimiotróficos = fonte química (orgânica ou
inorgânica = quimioorganotróficos ou
quimiolitotróficos)
– Fototróficos = fonte luminosa
Metabolismo
Por que este tópico é importante? Respiração Celular
Glicose
identificação

aplicação microbiana Reações na


ausência de O2
Glicólise

Quimioterapias
Fermentação
2 Piruvato Ácido látcio ou
CO2 e etanol

O que acontece com as moléculas orgânicas


Que entram na célula? Ciclo de
Krebs

Degradadas enzimaticamente Transporte de elétrons

Usadas como “blocos de construção”


Reações na
Retencção de energia presença de O2
Respiração Celular Aeróbica

Ciclo de Krebs

Transporte de Elétrons

Saldo de Energia

ATP

NADH
Metabolismo Anaeróbico

Fermentação

Aceptor de elétrons alternativos

Por ex. NO3, SO4, CO3-2


Diferentes tipos de bactérias podem produzir diferentes produtos de fermentação
Diferentes tipos de bactérias podem produzir diferentes produtos de fermentação
Identificação bacteriana: determinação da espécie bacteriana depende de
diversas propriedades de um determinado organismos isolado em estudo, que
geralmente se baseiam em análises bioquímicas relacionadas a nutrição
bacteriana.
Microbioma intestinal

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Macroelementos necessários: C O H N P K Mg S Fe Zn ...

Microelementos: Cr Co Cu Mn Mo Ni Se W Zn
Fatores de crescimento: Vitaminas, purinas, pirimidinas

Meios de cultura definido x indefinido (complexo: caseína digerida,


carne, soja, células de levedura

Meios seletivos: adição de agentes restritivos (NaCl, sais biliares.....)

Meio de cultura definido Meio de cultura definido para Meio complexo para E.
para Escherichia coli Leuconostoc mesenteroides. coli e L. mesenteroides.

K2HPO4 7g K2HPO4 0,6g Glicose 15g


KH2PO4 2g KH2PO4 0,6g Extrato de levedura 5g
(NH4)2SO4 1g NH4Cl 3g Peptona 5g
MgSO4 0,1g MgSO4 0,1g KH2 PO4 2g
CaCl2 0,02g Glicose 20g H2O para 1000ml pH 7
Glicose 4-10g Acetato de sódio.
Elem. Traços (Fe, Co, Mn...) 2-10g Aminoácidos (20)
H2O para 1000ml pH7 Purinas e pirimidinas
Vitaminas 100 ug/
Elem. Traços (Fe, Co, Mn...)
H2O para 1000ml pH7
Tipos de meios de cultura

Sólido
Semi-sólido
Líquido ou caldo

Meios de Enriquecimento, seletivo, diferencial.....


Meio ágar nutriente, enriquecimento e isolamento de colonias
Tipos de meios de cultura

Sólido
Semi-sólido
Líquido ou caldo

Meios de Enriquecimento, seletivo, diferencial.....


Meio líquido: caldo
Meio ágar sangue, enriquecido

Além de ser de enriquecimento é diferencial= hemólise?


Ágar manitol salgado: meio Seletivo e Diferencial
Seletividade: alta concentração de NaCl (7,5%)

Diferencial: fermenta o manitol? Indicador de pH =


vermelho de fenol, que em pH ácido fica amarelo

negativo
= positivo
Meio agar MacConkey

Meio seletivo para Gram


Negativas
Possui sais biliares e cristal violeta

Meio diferencial para


fermentação de lactose
positivo negativo
Possui lactose e vermelho neutro que em pH ácido fica vermelho
Tipos de meios de cultura

Líquido ou caldo

Meios de Enriquecimento, seletivo, diferencial.....

Meio líquido: caldo

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