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Nutrição, cultivo e metabolismo

Características básicas das bactérias Classificação dos meios de cultura


Substâncias nutritivas → sintéticos e complexos.

Nutrição: fornecimento de substâncias nutritivas


para o crescimento bacteriano (energia e
matéria plástica).
Cultura: propagação do microrganismo em
condições adequadas (exigências nutricionais e
ambientais).
• Agentes seletivos: cloridrato de lítio e
tellurite de potássio.
• Gema de ovo: produção de lecitinase e a
atividade da lipase.
• Colônias pretas devido à redução de
telurito.
• Ação da lecitinase: causam zonas claras
em torno das respectivas colônias.
• Zona opaca de precipitação devido à
atividade da lipase (S. aureus).

Fatores nutricionais
Água: solvente, elevado calor específico, regula
pressão osmótica, participação em reações
químicas, estrutura de macromoléculas etc.
Fonte de energia = doadores de hidrogênio.
• Fotossintetizantes → fototróficas.
• Quimiossintetizantes → quimiotróficas
(quimiolitotróficas e quimiorganotróficas).
Receptores de hidrogênios • Mg++ e K+ (ribossomos).
• Fe++ (citocromos e peroxidases).
• Respiração aeróbia: O2. • Ca++ (parede celular de Gram positivas e
• Respiração anaeróbia: NO3-, SO4-, CO2. esporulação).
• Fermentação: fermentação lática,
Elementos traços: cobalto, zinco (atividade de
alcoólica etc.
enzimas), molibdênio.
Fatores de crescimento: vitaminas, aminoácidos,
bases nitrogenadas, ácidos graxos etc.
Fatores ambientais: pH, temperatura, aeração
(O2), osmolaridade.
pH → estrutura e função das proteínas.
• Maioria na faixa ótima de pH entre 6 e 8.
Ex: Thiobacillus – 1 e 2 (acidófila).
Vibrio comma – 10 (alcalinófila).
Obs: normalmente os meios de cultura são
Fermentação: composto orgânico produzido tamponados.
durante o próprio processo fermentativo.
• Bactérias patogênicas → pH ao redor de
7.
Valores mínimos, ótimos e máximos de pH
durante o cultivo para algumas bactérias:

Carbono (composição química dos compostos


orgânicos):
• Compostos orgânicos: quimio-
heterotróficos.
• CO2 (fotossintetizantes): fotoautotróficos.
Nitrogênio (proteínas, ácidos nucleicos,
coenzimas):
• Orgânica: aminoácidos, sais orgânicos de
amônia.
• Inorgânica: NH3, NO3-, N2.
Enxofre (aminoácidos sulfurados, vitaminas):
• Forma orgânica: radicais sulfidrilas.
• Forma inorgânica: SO4-, HSS.
• Forma elementar.
Fósforo (ATP, ácidos nucleicos, fosfolipídeos,
coenzimas):
• Fosfato inorgânico (PO4-).
Ativadores de enzimas (minerais na forma de
sais):
Bactérias aeróbias e facultativas

Ação das enzimas superóxido dismutase,


catalase e peroxidase. Estas enzimas eliminam
radicais tóxicos do oxigênio que são
inevitavelmente gerados em sistemas vivos na
presença de O2.
A distribuição destas enzimas nas células
determina a capacidade destas células existirem
na presença de O2.

Bactérias anaeróbias estritas

Osmolaridade
Concentração de solutos no meio →
disponibilidade de água.
Teste da Catalase:
• Reação positiva: produzida por Bacillus
sp, Staphylococcus sp.
• Reação negativa: produzida por
Clostridium sp, Streptococcus sp.
Controle da osmolaridade: transporte ativo de K+
Fases do crescimento bacteriano
para o interior da célula e eliminação de
putrescina.

Crescimento bacteriano
• Aumento no número de células no meio
de cultivo.
• Após inoculação no meio de cultura
(=”semeadura”) em condições ótimas.
• Meio líquido: turvação do meio de cultivo.
• Meio sólido: formação de colônias.
• Concentração celular = número de
células / volume do meio. Fase Lag (fase de demora): número de bactérias
• Densidade celular = massa celular / permanece constante em função do tempo
volume do meio. (fisiologicamente ativas).
Fase Logarítmica ou exponencial: progressão
geométrica (crescimento >> morte) (células
viáveis). Tempo de geração → ??
Fase estacionária máxima (crescimento ≈
morte): O2, nutrientes, pH, produtos tóxicos etc.
Fase de declínio ou morte: morte >> crescimento.
Formas de involução.
Fermentação de açúcares: produção de ácido
ou ácido mais gás.
• Açúcar a ser estudado + indicador de
andrade (vermelho em pH ácido).

Princípios de alguns testes


bioquímicos
Catalase: comum em bactérias aeróbias e
anaeróbias facultativas. Vermelho de Metila (VM): fermentação mista
(glicose → ácidos orgânicos).
• Vermelho de metila em pH ácido (<4,5)
fica vermelho.

Oxidase (citocromo oxidade): oxidação do


citocromo C pelo O2. Pela fenilenodiamina é
oxidado pela enzima adquirindo cor vermelha. Voges-Proskauer (VP): fermentação
butilenoglicólica.

Prova de OF (oxidação – fermentação):


carboidrato → ácido. Azul de bromotimol: pH
alcalino (azul), pH ácido (amarelo).
Indol:

Citrato de Simnos: citrato de sódio como única


fonte de C.

Uréia:

Fenil-Alanina: disseminação da Fenil-Alanina →


ácido fenilpirúvico.

Movimento: crescimento em meio semi-sólido


(0,5% de ágar).
• Imóvel: cresce só no local da picada (K.
pneumoniae).
• Móvel: cresce além da picada (E. coli).

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