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MICROBIOLOGIA

Nutrientes utilizados pelos micro-organismo

Fatores químicos e físicos que influenciam o


crescimento microbiano.

Profa Maria Izete


NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
 Nutrição
 Composição: 70% de água.
 Nutrem-se de material em solução.

As substâncias ou elementos retirados do ambiente:

* Construir novos componentes celulares;

* Obtenção de energia
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
 Classificação dos microrganismos quanto a nutrição:

Microrganismos Quimiotróficos: utilizam compostos orgânicos ou inorgânicos para


obter energia.
 Quimioautotróficos (Nitrosomonas):
• Fonte de energia: compostos inorgânicos(H 2S, H2, CO, etc.)
• Fonte de carbono: CO2

 Quimioheterotróficos (maioria das bactéria, todos os fungos, protozoários e animais):


• Fonte de energia: Compostos orgânicos.
• Fonte de carbono: compostos orgânicos
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
 Classificação dos microrganismos quanto a nutrição:

Microrganismos Fototróficos: dependem de luz para obter energia.


 Fotoautotróficos Algas, cianobactérias, bactérias verdes e purpuras):
• Fonte de energia: luz
• Fonte de carbono: CO2
 Fotoheterotróficos (Rhodopseudomonas):
• Fonte de energia: luz.
• Fonte de carbono: compostos orgânicos
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
 Classificação dos nutrientes quanto ao tamanho

* Representam cerca de 90% da composição


bacteriana
•Macronutrientes (C, O, H, N, P e S) * Construir novos componentes celulares;
* Obtenção de energia

* Componentes de proteínas,
• Micronutrientes (Cu, Mn, Zn, etc.) * Cofatores de enzimas,
* Componentes de
estruturas
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO

 Fontes de carbono:
O carbono é um dos elementos mais importante para o crescimento
microbiano, necessário para a síntese de todos os componentes orgânicos da
célula.
• Microrganismo heterotróficos: obtém carbono a partir de proteínas,
carboidratos e lipídios.

• Fotoautróficos: obtêm carbono a partir de CO2 ou íon carbonato


NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
 Fontes de carbono heterotróficos:
Amido e celulose (carboidratos complexos): obtém carbono a
partir de proteínas, carboidratos e lipídios. Poucos
microrganismos usam. Ex: fungos filamentosos (Bolores),
degradam alimentos através de enzimas amilolíticas e
celulolíticas.

Lipídios: As gorduras e os óleos são degradados por


microrganismos lipolíticos. Ex: fungos filamentosos, leveduras
e bactérias (Ex: gênero Pseudomonas e Staphylococcus).
As enzimas proteolíticas degradam proteínas: importantes em alimentos ricos em
proteínas. Ex: lactobacilos (provocam alterações no odor e sabor).
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO

Nitrogênio e enxofre:
 Fontes de nitrogênio (síntese de DNA, RNA e proteína): Síntese de proteínas.
Sais inorgânicos de nitrogênio, como sais de amônio e nitritos.
Nitrogênio e fósforo:
Fontes orgânicas de nitrogênio - aminoácidos (proteínas). DNA e RNA.

 Nitrogênio gasoso ou atmosférico: síntese de proteínas/


aminoácidos por um processo chamado fixação de nitrogênio.
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO

Fósforo (P): Encontrado no solo e Enxofre (S): Obtido de íons sulfato


em meio aquoso. (SO4- ) e sulfito de hidrogênio (H2S) com
Utilizado para: material orgânico em decomposição).
• DNA; Utilizado para:
• Membrana celular;
• Síntese de amnoácidos (cisteína e
• ATP (metabolismo energético).
cistina);
• Vitaminas (biotina Complexo B).
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO

Potássio: ativador de enzimas e regulador da pressão osmótica.

Magnésio: ativador de enzimas extracelulares e importante na


síntese de proteínas e na união de frações ribossômicas.

Ferro: para a síntese dos citocromos e de certos pigmentos.


NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO

 ÁGUA
Não é um nutriente.
Importante para o transporte de substância através
da membrana.
Regula a pressão osmótica
Regulação térmica, pelo seu calor específico.
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
 ÁGUA
Alta pressão osmótica: leva a perda de água por osmose, levando a
diminuição do citoplasma da célula microbiana.
Ex.: Adição de sal – conservação de peixe salgado.
Adição de açúcar – mel, leite condensado.
Halofílicos: adaptam às altas concentrações de sal.

Baixa pressão osmótica: leva a água entrar na célula.


Ex.: água destilada (pode induzir a lise se a parede celular estiver fraca).
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Célula animal (hemácia) Meio hipertônico Meio isotônico Meio hipotônico Meio muito hipotônico

Lise celular
Célula vegetal

Estado de plasmólise Estado normal Estado de turgescência Estado de turgescência


NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO

 Oxigênio atmosférico

 As bactérias têm comportamentos diferentes na presença de oxigênio livre.

 Não é um nutriente.

 Funciona como receptor final de hidrogênio nos processos de respiração


aeróbica.
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Aérobias estritas: toleram
o oxigênio Anaérobias estritas: não
Ex: Pseudomonas toleram a presença O2 livre.
Ex: Clostridium tetani
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Aérobias facultativas: crescem Anaérobias facultatvas: não


na ausência e na presença de utilizam o oxigênio livre, mas ele
oxigênio livre não é tóxico.
Ex: Estafilococos Ex: Enterobacteiras
(Salmonella typhi)
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO

Microaerófilas: são aeróbias, mas só


crescem em concentrações menores
que as encontradas no ar.
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Outros fatores envolvidos na nutrição: Temperatura
Três grupos de classificação:
 Psicrófilos: crescem em baixas temperaturas.
•0 e 18°C.
•Degrada alimentos (refrigeradores, ex: Pseudomonas)

Mesófilos: crescem em temperaturas moderadas .


•25 e 40°C
•Degradam alimentos e são patogênicos ao homem ( Salmonella sp., Escherichia
coli patogênica, Yersinia enterocolitica e Staphylococcus aureus).

Termófilos: crescem em altas temperaturas (Bacillus e Clostridium).


•50 e 80°C
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Outros fatores envolvidos na nutrição: Concentração hidrogeniônica (pH )

Determina a acidez ou alcalinidade de uma solução.


Neutralidade: pH 6,5 e 7,5 (a maioria das bactérias cresce melhor)

Ácido: 4,0 (poucas bactérias crescem) – utilizado para preservação de


alimentos.

•Bactérias acidófilas: toleram a acidez ( Helicobacter pylorii).

•Fungos crescem em pH entre 5 e 6.


NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Outros fatores envolvidos na nutrição: Concentração hidrogeniônica (pH )
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO

Fatores de crescimento

 Os fatores de crescimento são aqueles indispensáveis ao microrganismo,


mas que eles não conseguem produzir.

 Se tal fator não estiver presente ou estiver em pequena quantidade, o


crescimento microbiano será limitado.
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Meio de Cultura

 Meio de cultura: material nutriente preparado no laboratório para o


crescimento microbiano.

 Inóculo: microrganismos colocados em um meio de


cultura para iniciar o crescimento.

 Cultura: microrganismos que crescem e se multiplicam


nos meios de cultura.
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Meios de cultura
 Soluções nutrientes para promover o crescimento de microrganismos.

 Classes Quimicamente definidos (sais, compostos orgânicos purificados, água)


Complexos (utilizam hidrolisados – caseína, carne, soja, levedura)

 Para obter sucesso no cultivo de microrganismos é necessário o


conhecimento de suas exigências nutricionais, para que os nutrientes sejam
fornecidos de forma e proporção adequada.

Não existe um meio de cultura universal, e sim existem vários tipos meios para
diversas finalidades
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Meios de cultura Nutriente
correto

Água Temperatur
necessária a adequada

Método de: Ser


pH
Isolamento; ajustado estéril
Identificação.
Presença ou
não de O2
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO

Crescimento Bacteriano
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Crescimento Bacteriano
 O crescimento é um somatório dos processos metabólicos progressivos, que
normalmente conduz à divisão.

 Crescimento por Divisão binária: uma célula dá origem a duas células filhas
iguais.

 Crescimento por brotamento: formação de brotos que crescem até atingir o


tamanho da célula mãe, e então se destacam.

 Idade da bactéria: é o espaço de tempo entre uma fissão que a originou e a


divisão que a duplicará.
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Crescimento Bacteriano

Divisão binária ocorre


quando um organismo
se divide em dois.
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Crescimento Bacteriano
Divisão por brotamento

Actinomicetos filamentosos
Crescimento por brotamento
Curva de crescimento Bacteriano

Fase Lag: durante a qual praticamente não ocorre divisão celular, porém há aumento
de massa.

Fase logarítmica (log): Início do processo de divisão (período de crescimento ou


aumento logaritmo). Reprodução celular extremamente ativa, sensíveis as mudanças
ambientais.

Fase estacionária: a velocidade de multiplicação diminui gradualmente, até que se


anule. O número de bactérias novas que se formam equivale ao número daquelas que
morrem.

Fase de declínio: o número de microrganismo diminui gradualmente até que a cultura


se torne estéril, todos morrem.
NUTRIÇÃO e CRESCIMENTO MICROBIANO
Curva de
crescimento
Bacteriano
Curva de crescimento Bacteriano

Fase de Lag:
Fatores que interferem no tempo de duração da fase de lag :

 Inóculo pequeno ou cultura velha;

 Meio e temperatura de incubação menos favoráveis;

 Estágio de crescimento
crescimento Bacteriano

Fase de Log:
 Fase log ou exponencial é aquele período durante o qual a multiplicação
é máxima e constante.
 Bactérias crescem e se reproduzem assexuadamente por divisão binária.
 Cada duplicação do número de organismo numa cultura representa uma
nova geração.

Número de células Uma bactéria


1:2:4:8:16:32:64... OU origina duas
2n: 21:22:23:24: 25... bactérias
Curva de crescimento Bacteriano

Fase de Lag:
Fatores que interferem no tempo de
geração:

 Temperatura
 pH
 Natureza do meio
 Natureza do organismo
 Aeração do meio
crescimento Bacteriano

Fase Estacionária:
 A falta de nutrientes e o acúmulo de materiais tóxicos ao meio podem
cessar o crescimento .

Fase de Declínio
 Ocorre decréscimo da população.
 Causas: falta de nutrientes ou acúmulo de produtos metabólitos tóxicos
crescimento Bacteriano

Cada tudo
Inóculo
Métodos para original
contém
9mL de
quantificar caldo de
cultivo
diretamente o
Diluições 1:10 1:100 1:1000 1:10.000 1:100.00
crescimento
microbiano 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL

Plaqueamento
crescimento Bacteriano

Cresciment
o em
Culturas
Bacterianas
TRABULSI, L.R. ; ALTERTHUN, F. Microbiologia. 5 ed. São Paulo: Atheneu,
2008.

TORTORA, G.J.; FUNKE, B. R.; CASE, C.L. Microbiologia. 8 ed. Porto Alegre:
Artmed, 2005.

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