ATLAS CITOLGICO DE CONCLUSO DO CURSO

DE CITOLOGIA CLNICA E LABORATORIAL DA

ACADEMIA DE CINCIA E TECNOLOGIA DE SO
JOS DO RIO PRETO-SP

TEMA CITOLGICO:

LINFCITOS E SUAS ATIPIAS

REACIONAIS

Autor: Adriano Machado de Sousa

Perodo do curso: julho de 2011 a dezembro de 2012

Endereo para correspondncia:

Lambari-Minas Gerais
e-mail: adrianomachadosousa@yahoo.com.br/adrianohemato@hotmail.com
fone (35) 3271-1266

Os Linfcitos e suas Atipias Reacionais

1. Generalidades
 At cerca de 50 anos atrs a funo dos linfcitos era quase que totalmente
desconhecidas. Descrita por Hewson em 1774 e individualizada por Paul Erlich em
1879, essa clula teve o seu estudo incrementado a partir da dcada de 60 quando se
descobriu ser ela a clula central do sistema imunolgico.
Desde o incio desses estudos, evidenciou-se a existncia basicamente de duas
populaes linfocitrias:
a) O linfcito T com origem medular e marcao no timo e que est envolvido
nos processos de imunidade celular e na regulao da sntese de anticorpos.

b) O linfcito B, que nas aves se desenvolvem em um rgo especializado

chamados Bolsa de Fabricius (no homem os linfcitos B tm origem
medular) e que participa apenas nos processos de imunidade, sendo o
precursor da principal clula formadora de anticorpos do organismo: o
plasmcito.

Mais recentemente uma terceira populao de linfcitos veio a se juntar s

duas primeiras:
c) A clula assassina natural ("natural killer" - NK), uma clula no T no B.
No esfregao sanguneo essas clulas aparecem como grandes linfcitos
granulares. Constituem uma pequena percentagem dos linfcitos circulantes
( 3% segundo Williams). Possuem um citoplasma volumoso e grnulos
(lisossomos) bem visveis, mas no muito numerosos. Possuem a
propriedade incomum de destrurem certas clulas (tumorais principalmente
e infectadas por vrus) sem terem tido um contato prvio com os antgenos
da clula alvo, ao contrrio das clulas T citotxicas (efetoras).
A distino morfolgica (no esfregao) entre as populaes B e T
impossvel.

2. Gnese:

Clulas T

Os precursores de clulas T migram a partir da medula ssea (stem cells) para

o crtex do timo. Ali, as clulas se dividem rpida e repetidamente, mas a maior parte
das novas clulas formadas morre. Esta perda celular resulta de mecanismos de tentativa
e erro na produo de um receptor de membrana de superfcie, o receptor de clula T
(essa mortandade em massa possivelmente signifique a destruio das clulas que
produzam receptores para antgenos prprios do organismo). Os que sobrevivem,
migram para a poro medular da glndula e continuam sua diferenciao (mas no
mais a diviso celular). Quando completo ele sai do Timo com o seu receptor de
antgeno que est apto a reconhecer duas coisas:

a) O eptopo do antgeno estranho;

b) Se o antgeno de histocompatibilidade de um clula self (prprio) ou non

self ( no prprio), utilizado no momento em que se liga uma outra clula.
 Estas clulas no voltam novamente para o Timo que, todavia libera substncias
solveis como a timosina que exerce uma ao de suporte, distncia, sobre estas
clulas T no tecidos linfides.
O processamento de precursores de clula T no Timo comea na vida fetal e
aparentemente ocorre durante toda a infncia. O Timo, de 70 gramas no final da fase de
lactente, pesa no idoso apenas cerca de 3 gramas. A diminuio do suporte hormonal
desse rgo no idoso pode explicar a diminuio da resposta imune nos indivduos
nessa faixa etria.
Os linfcitos T liberados pelo Timo so programados para realizar diferentes
funes via duas subpopulaes principais, ambas em conjuno com os antgenos de
histocompatibilidade:
a) Linfcitos T que, aps exposio a um antgeno estranho numa clula (ex:
antgeno viral na superfcie de clulas prprias infectadas), se tornam clulas
citotxicas que podem lisar as clulas alvo, Constituem o subgrupo T8.
Nesse subgrupo tambm se encontram as clulas T supressoras que agem
bloqueado a respostas imune quando o estmulo antignico cessa.
b) Clulas T que, aps exposio a antgenos, agem como clulas T
imunorreguladoras, com funes auxiliadoras. Constituem o subgrupo T4
(na sua maior parte) e atuam:
- Promovendo o desenvolvimento de clulas T citotxicas;
- Estimulam macrfagos promovendo suas propriedades microbicidas;
- Estimulam a secreo de anticorpos por clulas B (funo "helper").

As clulas T constituem aproximadamente 70% dos linfcitos circulantes. As clulas B

de 10 a 15% dos linfcitos restantes. A movimentao, nos dois sentidos, entre tecidos e
sangue feita pelos dois tipos de linfcitos, mas, menor extenso pelos linfcitos B. Os
linfcitos T possuem vida mdia bem mais longa que a dos linfcitos B.

Clulas B

J as clulas B so processadas na medula ssea, que como a crtex do Timo,

contm uma parcela de linfcitos sofrendo rpida diviso celular e uma alta taxa de
mortalidade como nas clulas T. S que aqui, pelo mesmo mecanismo de tentativa e
erro, o organismo tenta selecionar linfcitos B que iro produzir cada um deles, um
anticorpo contra os literalmente milhes de antgenos existentes na natureza.
As clulas cujos DNA codifiquem anticorpos contra os constituintes "self"
(prprios) so eliminadas.
Inicialmente so produzidas cadeias pesadas e leves de IgM no citoplasma. Na
seqncia do processo maturativo, aparecem cadeias completas de IgM na superfcie
(nessa fase que pode ser eliminada, quando pode reconhecer um antgeno "self").
Na fase posterior ao amadurecimento surge tambm uma IgD na sua superfcie.

Com suas IgM e IgD o linfcito B j est pronto para migrar e colonizar os
rgos linfides perifricos (bao e gnglios linfticos) onde so encontrados em locais
prximos mais distintos. So nesses rgos que os linfcitos B e T vo entrar em
contato e reagir contra os diferentes tipos de antgenos que por ventura penetrem no
organismo. Da a designao para esses rgos de "centros reativos".

Sistema Linftico e seus Centros Representao de um

Reativos Linfonodo
 Distribuio dos Linfcitos nos rgos linfides (primrios e secundrios). LT (reas
paracorticais nos linfonodos e bainhas periarteriolares do bao). LB (acumulam nos folculos
germinativos do tecido linfide e periferia subcapsular do crtex e nos cordes medulares dos
linfonodos.

3. Imunofenotipagem

Recentemente foram produzidos anticorpos monoclonais contra os mosaicos de

antgenos que constituem a superfcie dos linfcitos. Esses antgenos de membrana
podem mudar durante o crescimento e maturao e servem para identificar as clulas
no s quanto ao tipo como tambm quanto a sua fase de amadurecimento. Essa nova
ferramenta de trabalho tornou-se extremamente importante no diagnstico moderno das
leucemias linfides.
Ex:
CD8 (T8): A designao CD ("clusters of differentiation") indica o anticorpo
monoclonal contra antgeno. No caso contra um antgeno que o receptor para
antgenos de histocompatibilidade de classe I, caracterstico das clulas T8.
CD4 (T4): Anticorpo monoclonal contra antgeno de clula T4 que so receptores para
antgeno de histocompatibilidade de classe II, caracterstico das clulas T4 ("helper").

4. Funes

Quando expostos a um determinado antgeno para o qual est programado para

responder, o linfcito sofre ativao e se divide dando origem a um clone expandido de
linfcitos responsivos.
Quando um antgeno penetra nos tecidos, isso induz no local, uma reao
inflamatria, com afluxo para a regio de glbulos brancos. Um pequeno nmero de
clulas (clulas epiteliais, clulas reticulares, macrfagos, clulas de Langenhans e
mesmo linfcitos) podem capturar esse antgeno e o transportam para o linfonodo
regional mais prximo. Essas estruturas so denominadas "centros reativos" e esto
estrategicamente colocadas: "cercam" os locais de maior probabilidade de penetrao
dos antgenos: sangue (bao); a linfa (linfonodos) e mucosas (linfonodos no
encapsulados).
Nos gnglios, macrfagos (Fig.-1) podem digerir os antgenos e apresent-los na
sua superfcie sob uma forma bem mais reativa (antgenos processados eptopos).
Esse procedimento importante para a reao a antgenos T dependentes.
Os linfcitos B (Fig. 2) no necessitam do processamento, "agarram" os antgenos por
meio dos seus anticorpos de superfcie (pela frao Fab).Fig. 3
Tanto os linfcitos T como os B que reagem apresentao do antgeno, esto
previamente programados para reagirem somente contra aquele eptopo. Normalmente,
pela presena de vrios eptopos nas agregaes antignicas normais, ocorre o
aparecimento de vrios clones reagentes dando origem reao policlonal de linfcitos
B e T.
No momento da exposio ao antgeno; entram em ao uma srie de
substncias reguladoras da resposta imune, denominadas de linfocinas e monocinas,
entre elas, as mais importantes so: interleucina 1 e o TNF (caquexina) que so
monocinas; gama interferon, interleucina 2, MIF (fator de imobilizao do macrfago) e
o fator quimiotctil para macrfagos (todos linfocinas).
Principais atividades:
- Interleucina 1: estimula linfcitos T a produzirem IL-2, um fator de
crescimento para linfcitos T. Estimula tambm linfcitos B a proliferar e
evoluir para plasmcitos.
- Gama-Interferon: estimula macrfagos a produzirem IL-I e ativam as
propriedades microbicidas dos mesmos (sem essa linfocina, macrfagos
podem fagocitar agentes etiolgicos veculando-os sem, todavia mat-los).
- Interleucina 2: um fator de crescimento para linfcitos T.
- MIF: um fator de imobilizao de macrfagos no local.
- Fator quimotctil para macrfago: uma substncia que atrai macrfagos no
local onde liberada.

Fig 1 Representao esquemtica -macrfago/linfcitos e seus receptores celulares

Fig 2 Desenvolvimento da resposta Humoral atravs do LT (CD4)

Fig-3 Molcula de imunoglobulina:

Vermelho= regio variante que faz contato com antgeno (Fab)
Azul= regio constante da molcula
5. Linfcito atpico (transformao blstica)

Entrando ento em contato com o antgeno para o qual est programado, o

linfcito, tanto o LT como o LB, aumentam de tamanho, adquirem aspecto de linfcitos
jovens (linfoblastos) (Fig.4), com 20 a 30 micrometro de dimetro apresentado o
citoplasma intensamente basfilo, devido a sntese acelerada de RNA (ribossomos).
Eventualmente esse citoplasma pode apresentar vacolos e o retculo endoplasmtico
rugoso (REF) pode ser visualizado como microcanalculos s vezes, em lminas
coradas. O ncleo torna-se maior, com a rede de cromatina mais delicada, sendo visvel
muitas vezes os nuclolos (Fig.5). Aps algum tempo esse linfcito, assim modificado,
entra em mitose, dando a um clone celular idntico clula de origem (na realidade a
vrios clones considerando o mosaico antignico que caracteriza a maior parte das
infeces). A resposta local espalha-se ento para todo o organismo. Nessa condies
essas clulas recebem a designao de linfcitos ativados.(Fig.6,7,8)
Linfcitos hiperbasfilos (a condio mais especfica e caracterstica da ativao
dos linfcitos) observados no esfregao sanguneo so denominados no Brasil e na
Inglaterra de "linfcitos atpicos". Nos EUA, atualmente o termo mais empregado
(Variant Lymphocyte)". O termo Vircito deve ser evitado, pois nem sempre so vrus
os responsveis pelo aparecimento dessas clulas.
No tronco dos linfcitos B, algumas clulas se diferenciam em uma clula com
propriedades intermedirias entre linfcito B e o plasmcito. So os linfcitos
plasmocitides (Fig.9) (no possuem, como os plasmcitos (Fig.10) o ncleo excntrico
nem o halo justonuclear mais claro, as outras caractersticas so iguais) que secretam
anticorpos IgM, os primeiros a serem produzidos (baixa afinidade). As clulas B
ativadas restantes sofrem mais alteraes que incluem:
a) Substituio das imunoglobulinas de superfcie: IgM e IgD por IgG, IgA e
mais raramente IgE.
b) Expresso de um segundo grupo de receptores de superfcie para um
segundo fator originrio de clulas T: o fator de diferenciao de clulas B
(FDCB).
Com a exposio ao FDCB os linfcitos B evoluem finalmente para plasmcitos,
clulas de vida curta que secretam uma das imunoglobulinas: IgG, IgA ou IgE de
alta afinidade.
Tanto o tronco T como o B cessado o estmulo antignico h produo de
linfcitos de memria.
 Fig. 4 Linfoblastos

Fig-5 Linfcito atpico por aumento de tamanho e basofilia citoplasmtica e ncleo

com nuclolos evidentes

Fig-6 Linfcito atpico por aumento de tamanho, polimorfismo nuclear e discreto

aumento da basofilia citoplasmtica

Fig-7 Linfcito atpico por aumento de Fig-8 Linfcito atpico por aumento de
tamanho, polimorfismo nuclear e basofilia tamanho, polimorfismo e basofilia
citoplasmtica heterognea com granulaes citoplasmtica
 Fig 9 Linfcito plasmocitide Fig 10 Plasmcito

6. Morfologia linfocitaria

Em um indivduo normal, 80% dos linfcitos so clulas pequenas (6 a 9Um)

constitudas por um ncleo que corresponde a 9/10 do total da clula (Fig 11). A maior
parte restante so linfcitos mdios (10 a 15 Um) (Fig. 12) com um pouco mais de
citoplasma as vezes com grnulos citoplasmticos (Fig. 13) e, menos de 0,5% so
clulas hiperbasfilas de grande porte com morfologia tpica de imunoblastos.(Fig.14)
Em crianas, normal at 5% (linfcitos reacionais) dessas clulas, mesmo na
ausncia de doena.
Em algumas doenas, principalmente de origem viral, o nmero dessas clulas
(linfcitos atpicos) aumenta bastante e, devem ser relatados em porcentagem no
hemograma.

Fig. 11 citoplasma escasso, ligeiramente basfilo, ncleo com cromatina condensada e nuclolo no
visualizado
 Figura-12 citoplasma mais abundante Figura-13 Linfcito grande com
basfilo e com ncleo com cromatina grnulos azurfilos
menos condensada

Fig. 14 Imunoblasto

6.1 Algumas causas de atipia linfocitrias

- Mononucleose infecciosa (vrus de Epstein-Barr): a maior causa de

aparecimento de atipias. Os linfcitos atpicos que surgem no esfregao so
clula T reagindo a linfcitos B parasitados pelos vrus Epstein-Barr.
- Infeco por Citomegalovirus*
- Adenovrus*
- Rubola
- Varicela
- Herpes (simples e zoster)
- Meningite linfocitria
- AIDS inicial (2a semana aps contaminao pelo HIV)
- Infeco bacteriana: brucelose, tuberculose e sfilis.
- Infeco por protozorios: Toxoplasmose*, Malria, Babesiose.
- Hipersensibilidade a drogas*: fenotiazimas, cido-aminosalsilico,
mensantonia, sulfasalazina, etc.

*Condies que podem causar o aparecimento de um grande nmero de linfcitos

atpicos semelhante mononucleose infecciosa.
7. Linfocitoses e linfocitopenias patolgicas:

Existe, na literatura, divergncia quanto aos limites normais dos valores de

linfcitos preferindo adotar limites superiores com 3.500/mm3 e inferiores como
800/mm3 (B Bain).

Algumas causas de Linfocitose:

- A maioria das infeces virais: mononucleose infecciosa; rubola; varicela;

influenza; hepatite infecciosa; linfocitose infecciosa (algumas coxsackie
vrus, adenovrus tipo 2, 5 e 12, ecovrus 7); citomegalovirus e AIDS (fase
inicial).
- Algumas infeces bacterianas incluindo: brucelose (crnica), sfilis
(congnita principalmente) e principalmente a coqueluche (Bordetella
pertussis e para pertussis). Na coqueluche observa-se um grande aumento de
linfcitos pequenos na circulao. Valores de 15.000 a 30.000
linfcitos/mm3 so comuns podendo chegar s vezes a cifras de
100.000/mm3. A bactria libera um fator (denominado fator promotor de
linfocitose) que "in vivo" inibe a migrao dos linfcitos do sangue para
gnglios linfticos e bao. Esses linfcitos so, na sua maior parte, linfcitos
T. "helper". Uma confuso com a leucemia linfide crnica descartada,
pois so doenas que afetam faixas etrias bem diferentes e o quadro clnico
totalmente distinto.
- Reaes alrgicas a drogas: doenas do soro; esplenomectomia; doena de
Addison.
- Doena linfoproliferativas: leucemia linfide crnica, linfoma no hodgkin,
micose fungide, sndrome Ssary, etc.
- A leucemia linfide aguda (LLA) pode ser simulada eventualmente pela
mononucleose infecciosa e outras infeces virais as quais causam linfcitos
atpicos, e por tuberculose e sfilis congnita. Quando um teste para o
anticorpo heterfilo negativo e os achados clnicos e do sangue perifrico
no mostram a distino entre LLA e a reao leucemide linfide, uma
aspirao da medula ssea deve ser realizada, e, se necessrio, estudos com
marcadores imunolgicos da clula tambm.

Algumas causas de linfopenias ou linfocitopenias

- extremamente comum como parte da resposta aguda ao estresse, embora

seja freqentemente obscurecida pelas alteraes neutroflicas coexistentes.
- Deficincias nutricionais por vitamina B12, folato e zinco
- Aumento na destruio: AIDS, radioterapia e quimioterapia
- Glicocorticide
- Infeces bacterianas agudas
8. Plasmcitos

Os plasmcitos so normalmente clulas tissulares, porm em algumas ocasies

podem estar presentes no sangue perifrico. O padro de cromatina em "roda de
carroa" ou "mostrador de relgio" visto em cortes de tecido corados pela tcnica da
Hemotoxilina / Eosina (HE) bem menos comum em plasmcitos circulantes corados
pelos corantes hematolgicos (Romanowsky).

Fig 15 Plasmcito

Plasmocitoses:

O aparecimento, no sangue perifrico de um nmero aprecivel de plasmcitos

caracteriza a plasmocitose que pode ser reativa ou ainda pode ser parte de uma discrasia
da clula plasmtica.
As condies que incluam a plasmocitose reativa so: infeces virais
(principalmente) e bacterianas; imunizaes, reaes de hipersensibilidade a drogas,
herpes, lpus eritematoso sistmico e linfadenopatia angioimunoblstica. Nessas
condies, com raras excees, o nmero de plasmcitos usualmente baixo e as
clulas presentes so maduras embora ocasionalmente plasmoblastos possam ser
detectados. Podem apresentar vacolos citoplasmticos os quais contm seus produtos
de secreo ou, raramente podem apresentar cristais nessa mesma regio.
Alteraes Morfolgicas

- Plasmcito "flamejante" apresentam-se com o citoplasma corado em

vermelho e reflete acmulo de imunoglobulinas no secretadas no
citoplasma. No tem um significado clnico evidente
- Clula Mott (Fig.16)apresenta-se com incluso globular abundante ou com
vacolos grande pela dissoluo das incluses globulares pelo corante
hematolgico. Surgem comumente nas hiperplasias crnicas de plasmcitos
(doenas crnicas de estimulao constante: malria Kalazar,
Tripanossomase e tumores malignos principalmente)

Fig 16 Clula de Mott

Referncias

Hoffbrand A V, Petit J E- Hematologia Clnica

Naoum P C, Naoum FA - Hematologia Laboratorial-Leuccitos
Lorenzi T F - Manual de Hematologia-Propedutica e Clnica
Failace R Hemograma Manual de interpretao
Bain B J Clulas Sangneas
Rapaport S I Introduo a Hematologia
Grotto H Z W- Interpretao Clnica do Hemograma
Atualizao em Hematologia Clinica e Laboratorial FCF/UNESP
Araraquara- 2000
Hematologia Laboratorial pela Academia de Cincia e Tecnologia de So Jos do Rio
Preto- 2001