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DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA
INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
CURSO DE ENFERMAGEM
BELO HORIZONTE
2020/1
Você lembra o que você viu ? Sim. Na conclusão da aula prática, obtive conhecimento de que as
bactérias gram positivas, por terem uma camada de peptideoglicano maior retém o corante, ficando
assim roxas. Por outro lado, bactérias gram negativas ficam com a coloração rosa.
Que objetiva do microscópio usamos? Porquê? Qual a ordem de grandeza de uma bactéria.
Não me recordo exatamente de qual objetiva usamos na aula, porém precisamos do limite máximo da
resolução do microscópio para conseguir visualizá-las com melhor precisão. A ordem de grandeza da
bactéria é o micrómetro.
Passamos a lâmina pelo Bico de Bunsen para fixar o esfregaço. Esse processo se chama fixação do
esfregaço.
Primeiro cobrimos com solução de cristal violeta, bicarbonato de sódio e deixamos por 2 minutos,
lavamos e cobrimos neste momento com Lugol deixando por 1 minuto e lavando novamente.
Descoramos rapidamente com acetona-éter e novamente passa por uma lavagem. Cobre-se então com
Safranina por 2 minutos e após lavar, deixar secar ao ar, podemos analisar o resultado com o auxílio de
um microscópio.
O tempo de cada etapa é importante pois apenas seguindo corretamente é possível corar ou não as
bactérias e assim, conseguindo distinguir as gram-positivas das gram-negativas.
Se ultrapassar o tempo, ambas bactérias vão ficar transparentes, e caso deixe tempo insuficiente, todas
permanecem com a coloração do cristal violeta e dará a falsa impressão que são todas Gram positivas.