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Int J Mol Sci. fevereiro de 2022; 23(4): 1989. PMCID: PMC8874507

Publicado online em 11 de fevereiro de 2022. doi:  10.3390/ijms23041989 PMID: 35216123

Envelhecimento, senescência celular e doença de Alzheimer

Rui-Ming Liu

Tiziana Squillaro, Editora Acadêmica e Mauro Finicelli, Editor Acadêmico

Abstrato

O envelhecimento é o maior fator de risco para a doença de Alzheimer de início tardio (LOAD), re‐
sponsável por mais de 95% dos casos de doença de Alzheimer (DA). O mecanismo subjacente à
suscetibilidade relacionada ao envelhecimento para LOAD é desconhecido. Acredita-se que a senescên‐
cia celular, um estado de parada permanente do crescimento celular, contribua de maneira importante
para o envelhecimento e doenças relacionadas ao envelhecimento, incluindo a DA. Astrócitos, mi‐
cróglia, células endoteliais e neurônios senescentes foram detectados no cérebro de pacientes com DA e
em modelos animais com DA. A remoção de células senescentes melhora genética ou farmacologica‐
mente o peptídeo β-amilóide (Aβ) e as neuropatologias induzidas pela proteína tau e melhora a
memória em camundongos modelo de DA, sugerindo um papel fundamental da senescência celular na
fisiopatologia da DA. No entanto, embora as evidências acumuladas apoiem o papel da senescência
celular no envelhecimento e na DA, os mecanismos que promovem a senescência celular e como as
células senescentes contribuem para a neurofisiologia da DA permanecem amplamente desconhecidos.
Esta revisão resume os avanços recentes neste campo. Acreditamos que a remoção de células senes‐
centes representa uma abordagem promissora para o tratamento eficaz de doenças relacionadas ao en‐
velhecimento, como a DA.

Keywords: aging, cellular senescence, Alzheimer’s disease, neurodegeneration, late-onset Alzheimer’s

disease (LOAD), telomere shortening, β-amyloid peptides (Aβ), tauopathy, oxidative stress,
plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1)

1. Introduction

Cellular senescence, including replicative senescence (RS) and stress-induced premature senescence
(SIPS), represents a state of permanent cell growth arrest [1,2,3]. Cellular senescence can occur at any
life stage from embryo to adulthood, although it is associated with the aging process [4,5,6]. Cellular
senescence is a highly regulated process and has both beneficial and detrimental effects, involved in
embryonic development, wound healing, tumor suppression, and aging [4,5,6]. Cancer cells proliferate
indefinitely; cancer cell senescence, therefore, is believed to be beneficial as it prevents the develop‐
ment of cancer. In many other cases, cell senescence is considered deleterious, as it recaptures aging
and contributes to aging-related diseases [7,8,9,10,11,12,13,14,15]. Senescent cells display three major

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characteristics—loss of proliferation or regeneration capacity, alteration of metabolic functions and re‐

sistance to apoptosis, and secretion of an array of pathogenically active molecules, termed senescence-
associated secretary phenotype (SASP) [1,16] (Figure 1).

Figure 1

Potential causes and consequences of cell senescence. Several factors have been identified to induce cell senescence,
including telomere shortening, oncogene activation, DNA damage, and oxidative stress. Senescent cells, on the other
hand, exhibit multiple characteristics, including growth arrest, metabolic changes, altered apoptosis sensitivity, and se‐
nescence-associated secretary phenotype (SASP).

The markers used to identify senescent cells include increased activity of senescence-associated β-ga‐
lactosidase (SA-β-gal), revealed by x-gal staining, increased expression of cyclin-dependent kinase
inhibitors/cell cycle repressors p16, p53, and p21, decreased phosphorylation of retinoblastoma protein
(pRb), and increased cytological markers such as senescence-associated heterochromatin foci (SAHFs)
and senescence-associated DNA damage foci (SDFs) [1,16,17]. Morphologically, senescent cells are
enlarged and flattened [1,16,17]. In the culture, the best way to reveal senescent cells is to show cell cy‐
cle arrest using flow cytometry techniques. Increased expression of cell cycle repressors and SA-β-gal
activity, as well as senescent morphological changes, can be easily revealed and correlated with cell cy‐
cle repression in replicative senescence (RS) or stress-induced premature senescence (SIPS) cells in
culture. However, it is still a challenge to detect or reveal senescent cells in the tissues/organs in vivo,
due to nonspecificity and low sensitivity of currently used senescence markers. It is recommended that
multiple markers be used to reveal senescent cells, especially in vivo.

Although cellular senescence has been demonstrated to contribute importantly to aging and aging-rela‐
ted diseases [8,13,14,18,19], the causes of cellular senescence under either physiological or pathologi‐
cal conditions remain unclear. Several hypotheses, including telomere shortening, oncogene activation,
DNA damage, chromatin perturbation, and stress, have been proposed [1] (Figure 1). It should be stres‐
sed that different factors may contribute to cell senescence under different pathological conditions or
for different types of cells. The potential mechanisms underlying brain cell senescence in AD will be
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discussed later in this review article. Aside from the causes of cell senescence, it is also largely unk‐
nown how senescent cells promote aging and aging-related diseases. Progenitor cells or stem cells are
particularly sensitive to senescence stresses. Therefore, one of the hypotheses is that cellular senescence
leads to exhaustion of progenitor cells or stem cells, which, in turn, causes a decline in tissue regenera‐
tive capacity during aging or upon injury. Another potential mechanism whereby senescent cells contri‐
bute to aging and aging-related diseases is through secretion of pathologically active molecules, termed
as senescence-associated secretary phenotype (SASP). These biologically active molecules can exert
profound effects on secreting cells (autocrine function) or on neighboring cells (paracrine functions).
Nonetheless, despite an incomplete understanding of the molecular mechanisms that promote cell se‐
nescence and by which senescent cells contribute to aging and aging-related diseases, animal studies
and clinical trials have shown some promising results with senolytic drugs. Several recent studies have
shown that removal of senescent cells pharmacologically or genetically slows down aging processes
and alleviates the aging-related pathophysiological changes in several aging-related disease models
[11,20,21,22,23,24,25,26]. Further elucidation of the mechanisms underlying cell senescence and whe‐
reby senescent cells contribute to the pathogenesis of diseases may lead to the development of novel
therapeutics for the treatment of these aging-related diseases.

2. Cellular Senescence and Aging

The cause of aging, an inevitable biological process that affects almost all living organisms, is still an
area of significant controversy. Although numerous hypotheses, including increased oxidative stress,
accumulation of damaged DNA molecules/mutations, and telomere shortening [27,28], have been pro‐
posed, none of these hypotheses completely explains aging phenotypes or process. It has long been ap‐
preciated that cellular senescence is associated with aging and may underlie the pathophysiology asso‐
ciated with aging. Nonetheless, although it has long been speculated that cell senescence underlies the
pathophysiology of aging and aging-related diseases, there is no direct evidence to support the causati‐
ve relation between cellular senescence and aging-related decline in organ function or diseases in vivo,
until recent years, when p16 deficient mice and senolytic drugs became available [8]. These novel gene‐
tic and pharmacological tools help elucidate the significant contribution of cellular senescence to aging
and aging-related diseases.

The relation between cell senescence and aging was mainly supported by correlation studies at the be‐
ginning. Increased expression of the heterochromatin-associated protein histone macroH2A (mH2A) or
formation of DNA damage foci containing activated histone H2A.X (g-H2A.X) have long been used as
markers of cellular senescence. An age-dependent increase in mH2A has been detected in several or‐
gans/tissues in mice and baboons, including lung, liver, gut epithelium, and skeletal muscle [29,30]. It
has also been reported that the expression of mH2A is significantly increased with age in the lung in
mice and humans, which is accompanied by a significant increase in the deposition of matrix proteins,
as well as lung dynamic compliance and airway resistance [31]. Treatment of mice with rapamycin
blocked the mTOR activity, prevented cellular senescence, and reduced lung collagen deposition [31],
suggesting that cellular senescence may contribute to the aging-related decline in lung function.

Stem cells can proliferate and differentiate into different types of cells upon stimulation under either
physiological or pathological conditions. Stem cell proliferation is essential for tissue repairing, regene‐
ration, and maintenance. One of the hypothetic mechanisms by which cellular senescence contributes to
aging, therefore, is that stem cells undergo senescence and lose regeneration capacity. Studies have
shown that the expression of p16 increases with age in hematopoietic stem cells (HSCs) and brain pro‐
genitor cells [32,33]. This is associated with decreased cell repopulating activity and increased apopto‐
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sis upon stress in HSCs [32], as well as a decreased proliferation of multiple progenitor cells in the
mouse brain [33]. Ablation of the p16INK4a gene, on the other hand, mitigated aging-associated HSC
dysfunction and improved survival of the animal in successive transplants, a stem-cell-autonomous tis‐
sue regeneration model [32]. p16INK4a deficient mice also show mitigated the aging-related decline in
self-renewal potential of multipotent brain progenitors [33]. Together, these results suggest that the age-
dependent increase in p16 positive (senescent) stem and progenitor cells may contribute to the age-rela‐
ted decline in brain and bone marrow functions.

To better understand the role of cell senescence in aging and aging-related diseases, a transgenic mouse
model INK–ATTC that expresses FK506-binding protein Caspase 8 fusion protein under the control of
p16Ink4a promotor has been generated [8]. Using this novel mouse model, Backer et al. showed, for the
first time, that removal of naturally occurring p16Ink4a positive cells by administration of AP20187 de‐
layed the onset of aging-related pathologies in various tissues/organs, including adipose tissue, skeletal
muscle, and eye [8]. They also showed that late-life clearance of p16INK4a positive cells slowed down
the progression of already established aging-related disorders [8]. Their data suggest that cellular senes‐
cence is causally implicated in aging-related phenotypes and that removal of senescent cells can prevent
or delay aging-related organ/tissue dysfunction [8]. In another study, the same group further showed
that removal of p16Ink4a-expressing cells by injection of AP20187 to INK–ATTAC transgenic mice ex‐
tended the median lifespan of both male and female mice with two distinct genetic backgrounds [13].
Clearance of p16Ink4a positive cells also attenuated the age-related deterioration of several organs inclu‐
ding the kidney, heart, and fat [13]. These data further suggest that p16Ink4a positive cells that accumu‐
late during adulthood negatively influence lifespan and promote aging-related pathologies in different
organs.

In addition to genetic approaches, pharmacological approaches have also been used to remove senes‐
cent cells to elaborate the role of cell senescence in aging. Xu et al. reported that transplanting a small
number of senescent cells into young mice caused persistent physical dysfunction and induced host tis‐
sues to undergo senescence [14]. They further showed that fewer senescent cells were required to cause
the same effects and to reduce survival in old mice, suggesting that senescent cells can pass their sig‐
nals to adjacent cells and that cellular senescence is related to the shortening of the lifespan [14]. Im‐
portantly, the authors showed that treatment of senescent-cell transplanted young mice or naturally aged
mice with senolytic drugs dasatinib and quercetin, which selectively eliminate senescent cells through
inducing apoptosis of senescent cells, alleviated physical dysfunction and increased post-treatment sur‐
vival [14]. Their data provide proof-of-concept evidence that cell senescence is associated with physical
dysfunction and reduction in survival in old age. Using genetic and pharmacological approaches,
Ogrodnik et al. also showed that removal of senescent cells improved cognitive function in aged mice
[19]. Together, these results suggest that cellular senescence contributes importantly to the aging-rela‐
ted decline in organ function as well as lifespan. Removal of senescent cells may promote healthy aging
and extend life.

3. Cellular Senescence and Alzheimer’s Disease

Alzheimer’s disease (AD) is an aging-related neurodegenerative disease and a major cause of dementia
in the elderly [34]. Over 30 million people worldwide suffer from AD, and there is no effective treat‐
ment for AD due to an incomplete understanding of its etiology and pathogenesis [35,36]. It is estima‐
ted that the incidence of AD doubles every 5 years after age 65, and 50% of the population aged 85 or
older suffer from AD. Therefore, aging is considered the greatest risk factor for AD, although the me‐
chanism underlying the aging-related susceptibility to AD is unknown. Evidence from both humanDeand volta ao to

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animal studies indicates that cellular senescence plays a critical role in the development of many aging-
related diseases [7,8,9,10,11,12,13,14,15], including AD [18,24,25,36,37,38,39,40,41,42,43]. Senile
plaques, which are extracellular deposits of β-amyloid (Aβ) peptides, and neurofibrillary tangles
(NFTs), which are intracellular accumulation/deposition of hyperphosphorylated tau proteins, are two
neuropathological features of AD [44,45]. Although it is still debatable whether and how Aβ and hy‐
perphosphorylated tau lead to neurodegeneration, a foundation of memory loss in AD, accumulating
evidence indicates that both Aβ and tau pathologies are potent inducers of cellular senescence. Senes‐
cent cells have been detected in the brain of AD patients [18,25,36,37,38,39,41,42,43] and AD model
mice that overexpress Aβ or tau protein [24,25,40,41]. Removal of senescent cells pharmacologically
and genetically reduced brain Aβ load and tauopathy and improved memory in these AD model mice
[24,25,41]. These data strongly suggest that cell senescence mediates Aβ- and tauopathy-induced neu‐
ropathophysiology in AD. These data also suggest that cell senescence promotes Aβ and tau pathologi‐
es. Elucidation of the mechanisms underlying brain cell senescence during aging and in AD, as well as
the mechanism by which senescent cells contribute to neurodegeneration in AD, will be key to the de‐
velopment of strategies for the prevention and treatment of this devastating disease.

3.1. Evidence of Cellular Senescence in AD Patients

Although there is increasing evidence showing brain cell senescence in the animal models of AD, the
evidence of cell senescence in the brain of AD patients is still scanty. This is, in part, due to lack of spe‐
cific and sensitive markers for senescent cells in vivo and in postmortem samples. Nonetheless, several
studies, mostly using immunostaining techniques, have shown that different types of cells, including
astrocytes, microglia, neurons, and endothelial cells, in the AD brain express high levels of senescence-
associated proteins, including cell cycle repressors p16, p53, and p21
[18,25,38,39,41,42,46,47,48,49,50], suggesting that cellular senescence may play a role in AD
pathophysiology.

Naderi et al. reported that fibroblasts isolated from AD patients express higher levels of p21 but decrea‐
sed amount of Bax, an apoptosis marker, compared with fibroblasts isolated from non-AD individuals
[46]. Senescent endothelial cells have also been detected in the frontal and temporal cortex of AD pati‐
ents [48]. Turnquist and Bhat showed that the numbers of p53β, a coactivator of full-length p53, and
p16 positive astrocytes were increased in the brain of AD patients and these senescent astrocytes secre‐
ted a number of cytokines, including IL-6, a senescence marker [18,47]. Zhang et al. reported, on the
other hand, that oligodendrocyte progenitor cells, not astrocytes, microglia, or oligodendrocytes, in the
AD brain exhibited senescence-like phenotype, characterized by increased expression of p21 and p16
and increased activity of SA-β-gal [25]. The sustained proliferation of microglia is a hallmark of AD. A
recent study demonstrated that early and sustained proliferation promoted replicative senescence phe‐
notypes in microglia, characterized by increased SA-β-gal activity, telomere shortening, and senescen‐
ce-associated transcriptional signature, in APP/PS1 mice, a well-established murine model of familial
AD, and in postmortem tissue of AD patients [50]. Suppression of early microglial proliferation hinde‐
red the development of microglial senescence, Aβ accumulation, neuritic and synaptic damage in
APP/PS1 mice [50]. Their data suggest that sustained proliferation may trigger replicative senescence
of microglia in the AD brain.

A hiperfosforilação das proteínas Tau, que leva à formação/deposição de emaranhados neurofibrilares

(NFTs) dentro das células, é uma das características patológicas do cérebro com DA. Usando técnicas
de microdissecção de captura a laser, Musi et al. mostraram que os neurônios portadores do emaranha‐
do neurofibrilar (NFT), não os neurônios que cercam as placas Aβ, exibiram fenótipo semelhante àDese‐volta ao to

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nescência em camundongos transgênicos tau e tecido cerebral com DA [ 41 ]. Gaikwad et ai. também
mostrou recentemente que astrócitos ao redor de oligômeros tau patológicos exibiam fenótipo senescen‐
te no cérebro com DA [ 49]. A disfunção vascular, principalmente a disfunção endotelial, desempenha
um papel crítico na patogênese e progressão da DA. Bryant et ai. compararam a expressão de 42 genes
associados à senescência e adesão celular nos microvasos intactos isolados do córtex pré-frontal dorso‐
lateral de 16 indivíduos com DA avançada (Braak V/VI, B3) e 12 controles saudáveis. Eles descobri‐
ram que várias proteínas associadas à senescência e adesão celular, incluindo Serpine1 (também cha‐
mado PAI-1), um inibidor de serina protease e marcador de senescência celular [ 51 , 52 , 53 , 54 , 55 ,
56 , 57], foram significativamente aumentados em microvasos B3 de pacientes com DA, em compara‐
ção com os controles após ajuste para sexo e patologia cerebrovascular [ 58 ]. Seus dados sugerem que
as células endoteliais podem sofrer senescência em pacientes com DA.

Um telômero é uma região de repetições em tandem de sequências curtas de DNA no final de um cro‐
mossomo, que protege o cromossomo da erosão. Durante o ciclo celular, uma replicação incompleta do
DNA leva à perda de uma parte do telômero e, assim, à instabilidade do cromossomo. O encurtamento
dos telômeros leva a uma parada permanente do ciclo celular, conhecida como senescência replicativa.
Numerosos estudos mostraram que o encurtamento dos telômeros está associado ao envelhecimento e
doenças relacionadas ao envelhecimento, incluindo DA [ 59 , 60 , 61 , 62 , 63 , 64 , 65 ], embora resul‐
tados sem associação também tenham sido relatados [ 66 , 67]. Lee e outros. relataram que o DNA de
leucócitos periféricos de indivíduos com DA tem uma taxa de encurtamento de telômeros maior por
ano do que os leucócitos de indivíduos saudáveis ​e indivíduos com comprometimento cognitivo leve
(MCI) [ 64 ] . Liu et ai. mostraram que a correlação negativa entre o comprimento dos telômeros e a
idade era muito mais forte em pacientes com DA, especialmente em mulheres, do que no grupo contro‐
le [ 68 ]. Curiosamente, também foi demonstrado que o comprimento dos telômeros é significativamen‐
te menor em pacientes com DA portadores do alelo homozigoto ApoEɛ4 do que em pacientes com DA
portadores de ApoE ɛ4 heterozigoto , embora nenhuma diferença significativa no comprimento dos
telômeros seja detectada entre pacientes com DA e controles idosos sem demência em geral [ 69].
Usando o escore de risco genético e técnicas de randomização mendeliana (MR), Guo et al. mostraram
que o comprimento mais curto dos telômeros estava causalmente associado a um maior risco de DA [
61 ]. O encurtamento dos telômeros também demonstrou estar associado a um rápido declínio cogniti‐
vo e conversão para demência em pacientes com DCL [ 65 ]. No entanto, resultados sem associação
também foram relatados. Moverare-Skrtic et al. relataram que o comprimento dos telômeros de leucóci‐
tos (LTL) foi reduzido em MCI estável, mas o encurtamento de LTL não foi associado à conversão para
DA [ 66 ]. Em um estudo longitudinal de coorte de idade baseado na comunidade, Hinterberger et al.
relataram que o comprimento dos telômeros dos leucócitos estava ligado a doenças vasculares, mas não
à DA [ 67 ].

3.2. Evidência de senescência celular em camundongos modelo AD

O aumento da deposição de placas amiloides extracelularmente e o acúmulo de proteínas tau hiperfos‐

foriladas intracelularmente são duas características patológicas da doença de Alzheimer [ 44 , 45 ]. Em‐
bora os mecanismos subjacentes ao aumento da deposição de Aβ e proteínas tau fosforiladas no cérebro
de pacientes com LOAD sejam desconhecidos, vários modelos de camundongos que superexpressam a
proteína precursora amilóide humana mutante (APP) ou APP mais presenilina 1 humana mutante ou
forma mutante de proteína humana associada a microtúbulos tau P301S foram gerados e usados ​para
estudar os mecanismos pelos quais Aβ e proteínas tau hiperfosforiladas promovem a fisiopatologia da
DA [ 24 , 25 , 40 , 41 , 49 ,70, 71 , 72 , 73 , 74 , 75 , 76 ]. Evidências emergentes desses estudos com
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animais indicam que o aumento da fosforilação de Aβ e tau promove a senescência das células cere‐
brais e que a senescência celular desempenha um papel crítico na neuropatologia e no declínio da me‐
mória na DA.

3.3. Camundongos Superexpressando Proteína Precursora de Amilóide (APP)

Vários camundongos ou modelos de ratos foram gerados para superexpressar APP humano ou APP
mais presenilina 1 humana mutante para estudar o papel do acúmulo de Aβ na neuropatologia da DA.
Camundongos APP/PS1 são camundongos transgênicos duplos que expressam um APP quimérico de
camundongo/humano (Mo/HuAPP695swe) e uma presenilina 1 humana mutante (PS1-dE9). Esses ca‐
mundongos exibem um aumento significativo na carga de Aβ cerebral e comprometimento da memória
e têm sido amplamente utilizados como modelo murino de AD familiar. Evidências emergentes mos‐
tram que vários tipos de células cerebrais, incluindo células precursoras de oligodendrócitos (OPCs),
astrócitos, micróglia e neurônios, expressam níveis mais altos de marcadores de senescência p16, p21 e
SA-β-gal nesses camundongos modelo de DA familiar [ 25 , 40 , 70 , 71] Nicotinamida adenina dinu‐
cleotídeo (NAD+) é um metabólito importante e está envolvido em muitos processos biológicos. Hou
et al. relataram que, associado a um declínio no nível de NAD+ no cérebro, vários tipos de células ce‐
rebrais em camundongos APP/PS1 exibiram um fenótipo de senescência, incluindo aumento da ativida‐
de de SA-β-gal, bem como aumento da expressão de p16 e p21, [ 71 ] . O tratamento com ribosídeo de
nicotinamida (NR) precursor de NAD+ aumentou o nível de NAD+ no cérebro e reduziu o número de
células senescentes e a neuroinflamação, sugerindo que a senescência celular e alterações neuropatoló‐
gicas observadas no cérebro de camundongos APP/PS1 podem resultar da deficiência de NAD+ [ ] 71].
Uma relação causal entre a senescência celular e a neurofisiologia em camundongos APP/PS1 foi bem
elaborada em outra publicação recente [ 25 ]. Zhang et ai. demonstraram que OPCs que expressam
Olig2 e NG2 associados à placa Aβ, mas não astrócitos, micróglia ou oligodendrócitos, nos cérebros de
pacientes com DA e camundongos APP/PS1 exibem um fenótipo semelhante à senescência, caracteri‐
zado por aumento de SA-β-gal atividade e aumento da expressão de dois repressores do ciclo celular
p16 e p21 [ 25 ]. A exposição direta de OPCs cultivados à senescência induzida por Aβ agregada nessas
células [ 25]. Mais importante, eles mostraram que o tratamento de camundongos APP/PS1 com drogas
senolíticas removeu seletivamente as células senescentes do ambiente da placa, reduziu a neuroinflama‐
ção e a carga de Aβ e melhorou os déficits de memória [ 25 ]]. Seus dados sugerem fortemente que a
senescência celular desempenha um papel fundamental na neuropatologia mediada por Aβ e no déficit
de memória. Seus resultados também sugerem que a senescência celular contribui para o acúmulo de
Aβ no cérebro com DA.

3.4. Camundongos Transgênicos Tau

Vários modelos de camundongos que expressam proteína tau humana mutante ou selvagem foram usa‐
dos ​para estudar o mecanismo pelo qual a tauopatia contribui para a neurofisiologia da DA [ 24 , 41 , 49
, 73 , 74 , 75 , 76 ]. Um desses modelos de camundongos são os camundongos MAPT P301S PS19
(PS19), que expressam a forma mutante P301S da proteína humana associada a microtúbulos tau (
MAPT ) sob a direção do promotor da proteína príon de camundongo. Esses camundongos expressam
altos níveis de tau humana mutante especificamente em neurônios [ 75] e exibir gliose, deposição de
emaranhado neurofibrilar (NFT), neurodegeneração e perda da função cognitiva [ 24 ]. Bussian et ai.
relataram que astrócitos e micróglia no cérebro de camundongos PS19 expressaram altos níveis do mar‐
cador de senescência p16 [ 24 ]. Mais importante, eles mostraram que a eliminação de células senes‐
centes que expressam p16 geneticamente, cruzando camundongos PS19 com camundongos transgêni‐
cos INK-ATTAC ou farmacologicamente pela administração de drogas senolíticas, preveniu gliose, Dehi‐
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perfosforilação de tau e degeneração de neurônios corticais e do hipocampo, associados à preservação

da função de memória [ 24 ]. Esses resultados fornecem uma ligação causal clara entre tauopatias, se‐
nescência celular, neurodegeneração e perda de memória.

Camundongos rTg4510 expressam tau P301L

humana mutante no prosencéfalo. Esses camundongos desenvolvem
patologia tau em regiões do prosencéfalo, concomitante com neurodegeneração e déficits cognitivos [
74 ]. Musi et al. mostraram que neurônios portadores de NFT, mas não associados à placa Aβ, exibiam
um fenótipo semelhante à senescência e expressavam genes relacionados à senescência, incluindo
Cdkn2a, que estava diretamente correlacionado com atrofia cerebral e carga de NFT [ 41 ] . Mais im‐
portante ainda, eles mostraram que o tratamento desses camundongos com drogas senolíticas dasatinibe
e quercetina reduziu a densidade total de NFT, perda de neurônios e aumento ventricular, sugerindo que
a senescência celular está envolvida na perda de neurônios induzida por tauopatia [ 41 ] .

Na doença de Alzheimer, o acúmulo de emaranhados neurofibrilares ocorre na ausência de mutações

tau. Para estudar a patogênese da superexpressão da proteína tau normal, camundongos hTau, que ex‐
pressam seis isoformas da proteína MAPT humana, mas não tau de camundongo, foram gerados [ 73 ].
Esses camundongos desenvolvem patologia semelhante à DA dependente da idade, incluindo acúmulo
de tau hiperfosforilada como filamentos helicoidais pareados agregados em corpos celulares e dendritos
de neurônios, neuroinflamação e disfunção de sinapses, bem como déficit de memória [ 49 , 73 ] . É im‐
portante ressaltar que esses camundongos aumentaram as cargas de células senescentes no cérebro [
49]. O tratamento de camundongos hTau com inibidores da caixa 1 do grupo de alta mobilidade
(HMGB1), que mediou a senescência de astrócitos induzida pela proteína tau in vitro, diminuiu signifi‐
cativamente a carga de células senescentes no cérebro, reduziu a neuroinflamação e melhorou as disfun‐
ções cognitivas [ 49 ] . Esses dados apóiam ainda mais a noção de que a proteína tau promove a perda
de memória, pelo menos em parte, induzindo a senescência das células cerebrais.

4. Mecanismos potenciais subjacentes à senescência das células cerebrais na DA

Os mecanismos subjacentes à senescência celular em condições fisiológicas ou patológicas permane‐

cem obscuros. Embora se acredite que o encurtamento dos telômeros seja responsável pela senescência
replicativa em células em proliferação, o mecanismo molecular que liga o encurtamento dos telômeros
à senescência celular ainda não está bem definido. Além disso, embora tenha sido bem documentado
que várias condições de estresse, incluindo danos ao DNA, espécies reativas de oxigênio (ROS), disfun‐
ção mitocondrial e alteração lisossômica, induzem a senescência celular prematura, as vias de sinaliza‐
ção que levam à senescência celular sob essas diferentes condições de estresse permanecem fracas en‐
tendido. Nesta seção, resumimos descobertas recentes sobre os mecanismos potenciais subjacentes à
senescência das células cerebrais na DA (Figura 2).

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Figura 2

Mecanismos potenciais subjacentes à senescência das células cerebrais na DA. Vários tipos de células, incluindo glia,
células precursoras de oligodendrócitos (OPCs), células-tronco neuronais (NSCs), neurônios e endotélios, demonstra‐
ram sofrer senescência em cérebros com DA e/ou camundongos modelo de DA. Mutações no gene da transcriptase re‐
versa da telomerase (TERT) e no componente de RNA da telomerase (TERC), que leva ao encurtamento dos telôme‐
ros, tau hiperfosforilada, aumento de oligômeros Aβ, espécies reativas de oxigênio (ROS) e expressão do inibidor do
ativador do plasminogênio 1 (PAI-1), estão implicados na senescência das células cerebrais na DA. As setas vermelhas
indicam aumentos nas quantidades dessas moléculas.

4.1. Deficiência de telomerase e encurtamento de telômeros

O encurtamento dos telômeros nas extremidades dos cromossomos dos mamíferos devido à replicação
celular leva a uma interrupção permanente do ciclo celular, também conhecida como senescência repli‐
cativa. Numerosos estudos mostraram que os comprimentos dos telômeros são mais curtos em pacien‐
tes com DA, em comparação com controles de saúde pareados por idade [ 59 , 60 , 61 , 62 , 63 , 64 , 65
], sugerindo um papel potencial do encurtamento dos telômeros na senescência celular na DA. O meca‐
nismo subjacente ao encurtamento dos telômeros na DA é desconhecido. Mata al. relataram que o com‐
primento dos telômeros de leucócitos (LTL) é reduzido em pacientes MCI e reduzido ainda mais em
pacientes com DA, em comparação com controles saudáveis ​[ 62]. Eles também descobriram que a
concentração sérica de folato foi positivamente associada ao LTL, enquanto o nível sérico de homocis‐
teína foi negativamente associado ao LTL, sugerindo que o LTL encurtado em CCL e DA pode estar
relacionado às alterações nos níveis séricos de folato e homocisteína [ 62 ] . Microglia são auto-renová‐
veis. Um estudo recente demonstrou que a micróglia proliferada precoce e sustentada exibiu telômeros
encurtados em camundongos APP/PS1, indicando senescência replicativa da micróglia nesses camun‐
dongos modelo AD [ 50 ]. Esses dados sugerem que a microglia no cérebro com DA pode sofrer senes‐
cência replicativa devido à proliferação sustentada e, portanto, encurtamento acelerado dos telômeros.

Telomerase, consisting of telomerase reverse transcriptase (TERT) and telomerase RNA component
(TERC), restores the telomere length and, therefore, plays a critical role in DNA stability and cell proli‐
feration. It has been reported that the polymorphisms of the TERT gene are associated with increased
risk of AD in man, while three TERC gene polymorphisms are in strict linkage disequilibrium, and De volta ao to

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their genotype combinations influence the age of AD onset [77]. Using a telomerase deficient mouse
model, Whittemore et al. studied telomerase deficiency and aging phenotypes [78]. They found that old
telomerase deficient mice exhibited the signs of neurodegeneration; delivery of the telomerase gene to
their brain, on the other hand, ameliorated some of the neurodegeneration phenotypes [78]. Together,
the results suggest that telomere shortening in AD, at least in part, results from mutations of telomerase
genes. The molecular mechanism by which telomere shortening induces cell senescence remains uncle‐
ar. Herbig et al. showed that telomeric foci in fibroblasts contain multiple DNA damage response fac‐
tors, including ataxia telangiectasia mutated (ATM) and p53, which were assembled in a subset of se‐
nescent cells [79]. Inhibition of ATM expression or activity resulted in cell cycle reentry, suggesting
that telomere shortening may induce cell senescence through activating the ATM–p53 cell senescence
pathway [79].

4.2. Aβ Oligomers

Accumulation of β-amyloid (Aβ) peptides in the brain is a pathological feature of AD [44,45].

Although the mechanism by which Aβ promotes neuronal degeneration and memory loss in AD is still
controversial, accumulated evidence indicates that Aβ is a potent inducer of cell senescence
[25,40,50,70,71,80,81,82,83,84,85,86]. Wei et al. showed that the expression of cell senescence marker
p16 is significantly increased in neurons, although not in astrocytes or microglia, in 5XFAD transgenic
mice, which overexpress human amyloid β (A4) precursor protein 695 (APP) with three mutations de‐
tected in familial Alzheimer’s disease (FAD) and human presenilin 1 (PS1) harboring two FAD mutati‐
ons [40]. They also showed that treatment with oligomeric Aβ induces p16 in cultured primary neu‐
rons, consistent with in vivo mouse data [40]. These data indicate that Aβ oligomers can directly induce
neuron senescence. APP/PS1 mice, which overexpress mutant human APP and PS1 genes and develop
brain amyloidosis at early life, is another widely used FAD mouse model. Several studies have shown
that the numbers of senescent cells are increased in the brain of APP/PS1 mice [25,50,70,71], strongly
suggesting that increased Aβ can provoke cellular senescence in vivo.

In addition to these Aβ overproducing mice, numerous in vitro studies have also shown that Aβ oligo‐
mers induce neuron or endothelial cell senescence in culture [81,82,83,84,85,86]. Singh Angom repor‐
ted that Aβ1-42 oligomers, not monomer or fibrils, induced brain endothelial cell senescence through
upregulation of vascular endothelial growth factor 1 (VEGF-1) [84]. Similarly, He et al. reported that
treatment with Aβ1-42 oligomers induced p16 and SA-β-gal in adult mouse hippocampal neural
stem/progenitor cells (NSPCs) [81]. Blocking Aβ receptor with WRW4 abrogated Aβ1-42 oligomers-
induced NSPC senescence, suggesting that Aβ42 induces NSPC senescence through binding to this Aβ
receptor [81]. Other investigators have shown that Aβ promoted neural cell senescence by increasing
reactive oxygen species (ROS) production [83,85]. Neuroinflammation plays a critical role in AD
pathology. Shang et al. reported that treatment of rat astrocytes with Aβ-increased IL-1β, an important
neuroinflammatory cytokine that is increased in AD brain, and cell senescence [86]. Their studies
further suggest that Aβ promotes astrocyte senescence probably through activating NLR family pyrin
domain containing 3 (NLRP3) pathway, thus increasing IL-1β production [86].

4.3. Tauopathy

Embora o mecanismo pelo qual as proteínas tau hiperfosforiladas promovem a neurodegeneração na

DA ainda esteja em debate, evidências emergentes sugerem que a indução da senescência celular pode
ser um intermediário chave [ 87 ]. Foi demonstrado que a patologia de Tau está associada à senescência
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de vários tipos de células, incluindo astrócitos, micróglia, OPCs e neurônios nos cérebros de pacientes
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com DA e modelos animais de DA [24 , 41 , 47 , 49 , 87 ] . Os neurônios são células terminalmente di‐

ferenciadas. p16 normalmente não é expresso em neurônios diferenciados terminalmente. No entanto,
estudos mostraram que os neurônios que contêm emaranhados neurofibrilares no cérebro de pacientes
com DA expressam níveis aumentados de CDK4 e p16.37 , 88 ], sugerindo que a reentrada dos ciclos
celulares torna essas células sensíveis à senescência celular induzida por tauopatia. Musi et al. também
relataram resultados semelhantes de que NFTs contendo tau desencadeiam uma cascata de eventos que
são altamente correlacionados com a senescência celular em NFT contendo neurônios em cérebros hu‐
manos e de camundongos [ 41 ] . Embora a patologia tau seja observada principalmente dentro dos
neurônios, alguns estudos mostraram que a patologia tau também está associada à senescência das célu‐
las da glia no cérebro de pacientes com DA [ 47 , 49 ]. Astrócitos contendo oligômeros Tau com fenóti‐
pos senescentes foram demonstrados no cérebro de pacientes com DA [ 49]. Streit e outros. mostrou
ainda que células microgliais senescentes, não ativadas, estavam associadas a neurônios tau-positivos e
em degeneração no cérebro com DA [ 47], sugerindo que as alterações patológicas induzidas por tauo‐
patia nos neurônios podem provocar ainda mais a senescência nos astrócitos circundantes. Embora o
mecanismo pelo qual a proteína Tau promove a senescência celular não seja claro, foi relatado que o
NFT portador de tau desencadeia a senescência neuronal provavelmente através da ativação de Cdkn1a
(p21) e Cdkn2a (p16), dois inibidores do ciclo celular. Vale a pena mencionar que um estudo recente
mostrou que a remoção genética ou farmacológica de células senescentes aliviou a gliose e o déficit
cognitivo e também diminuiu o NFT em um modelo de camundongo tauopatia bem caracterizado, ca‐
mundongos PS19, sugerindo que a senescência celular, por sua vez, facilita a tauopatia, formando um
ciclo vicioso [ 24 ].

4.4. Estresse oxidativo

O estresse oxidativo, um desequilíbrio entre a produção oxidante e a defesa antioxidante, aumenta com
a idade e acredita-se que contribua de forma importante para o envelhecimento e doenças relacionadas
ao envelhecimento, incluindo a DA [ 89 , 90 , 91 , 92 , 93 ] . Espécies reativas de oxigênio (ROS) de‐
monstraram induzir a senescência em diferentes tipos de células, embora o mecanismo subjacente não
seja bem compreendido. Numerosos estudos mostraram que as ROS podem induzir ou mediar a senes‐
cência de células cerebrais induzida por Aβ em camundongos modelo de DA e em células cerebrais
cultivadas [ 81 , 83 , 85 , 94 , 95]. Ele e outros. relataram que o tratamento com oligômeros Aβ1-42 in‐
duziu a senescência em células-tronco/progenitoras neurais do hipocampo de camundongos adultos
(NSPCs) [ 81 ]. O bloqueio do receptor Aβ com WRW4 anulou a produção de ROS induzida por oligô‐
meros Aβ1-42, ativação da quinase do mapa p38 e senescência de NSPC, sugerindo que Aβ42 induz a
senescência de NSPC provavelmente através do aumento de ROS e ativação da via p38 [ 81 ] . Zhang et
ai. relataram que o tratamento com Aβ1-40 aumentou a produção de ROS e induziu p53 em células
U87, uma linha celular de astrócitos humanos derivada de gliomas malignos [ 83 ]. O tratamento com
galantamina aliviou a produção de ROS induzida por Aβ1-40, expressão de p53 e senescência de célu‐
las U87, sugerindo que ROS medeia a senescência de células U87 induzida por Aβ [ 83]. Estudos de
outros grupos mostraram que os oligômeros Aβ induzem a senescência de neurônios também através do
aumento da produção de ROS [ 85 , 95 ]. Li et ai. relataram que os oligômeros Aβ42 aumentaram a pro‐
dução de ROS, a acetilação de proteínas mitocondriais e a senescência em células SK-N-SH de uma li‐
nha celular de neuroblastoma [ 85 ]. O tratamento com um derivado de ramnosídeo recém-sintetizado
PL171 inibiu a produção de ROS induzida por oligômeros Aβ42, acetilação de proteínas mitocondriais
e senescência de células neuronais [ 85 ]. Eles também mostraram que PL171 exerceu seus efeitos pro‐
tetores através da regulação positiva de Sirt3, pois a inibição da atividade de Sirt3 eliminou o efeito
protetor de PL171 [ 85 ]. Resultados semelhantes foram relatados com células neuronais M17 [95 ].
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4.5. Expressão aumentada do inibidor 1 do ativador do plasminogênio e senescência celular

O inibidor do ativador do plasminogênio 1 (PAI-1, também chamado de Serpina 1) é um inibidor fisio‐

lógico dos ativadores do plasminogênio tipo tecido e tipo uroquinase (tPA e uPA), que convertem o
plasminogênio em plasmina, uma serina protease que desempenha um papel central na hemostasia. Es‐
tudos anteriores deste laboratório e de outros mostraram que os níveis de proteína PAI-1 são aumenta‐
dos no plasma de idosos e no cérebro com DA [ 15 , 96 , 97 , 98 , 99 , 100 , 101 , 102 , 103 , 104 ]. Es‐
tudos em animais, incluindo o nosso, mostraram ainda que o PAI-1 aumenta com a idade em animais de
tipo selvagem e em camundongos modelo de DA familiar [ 15, 24 , 100 , 105 , 106 , 107 , 108 ]. A ini‐
bição da atividade do PAI-1 ou deleção do gene PAI-1 reduziu a carga de Aβ cerebral e melhorou a me‐
mória em camundongos APP/PS1 [15 , 100 , 107 , 109 ] , sugerindo um papel central do PAI-1 na fisio‐
patologia da DA, embora o mecanismo pelo qual o PAI-1 promova a neurofisiopatologia semelhante à
DA permaneça obscuro. Notavelmente, a expressão de PAI-1 é aumentada em muitas células senescen‐
tes, e o aumento de PAI-1 tem sido usado há muito tempo como um marcador de senescência celular in
vitro e in vivo [ 13 , 24 , 110 , 111, 112 , 113 ]. Mais importante ainda, a evidência acumulada indica
que o aumento do PAI-1 não é apenas um marcador, mas também um mediador da senescência celular [
51 , 52 , 53 , 54 , 55 , 56 , 57 ]. Nossos dados anteriores mostraram que o aumento da expressão/ativi‐
dade de PAI-1 media a senescência celular alveolar tipo II (ATII) através da ativação da via de repres‐
são do ciclo celular p53-p21-pRb no modelo de fibrose pulmonar induzida por bleomicina [ 55 ] . Em
outro estudo, mostramos ainda que o PAI-1 estava envolvido na senescência celular ATII induzida pelo
fator de crescimento transformador β1 (TGF-β1) por meio da indução de p16, não p53 [ 57]. É impor‐
tante ressaltar que vários estudos recentes mostraram que a expressão de PAI-1 é aumentada em células
senescentes no cérebro de pacientes com DA [ 50 , 58 ] e camundongos modelo de DA [ 24 ], sugerindo
que o aumento de PAI-1 contribui para a neuropatofisiologia da DA, provavelmente através da indução
senescência das células cerebrais. Mais estudos são necessários para comprovar essa hipótese.

5. Limitação e Direções Futuras

Evidências emergentes de amostras humanas e estudos com animais indicam que a senescência celular
contribui de maneira importante para o envelhecimento e doenças relacionadas ao envelhecimento, in‐
cluindo a DA. Os mecanismos subjacentes à senescência das células cerebrais e pelos quais a senescên‐
cia celular contribui para a neurodegeneração e perda de memória na DA, no entanto, permanecem am‐
plamente desconhecidos. Um dos desafios enfrentados no campo é a detecção de células senescentes in
vivo e em amostras post mortem. A maioria dos dados de senescência celular de amostras post mortem
foi obtida por coloração imuno-histoquímica, que não é específica ou sensível. Métodos mais sensíveis
e específicos devem ser desenvolvidos para identificar células senescentes in vivo. Definir os tipos de
células que sofrem senescência no cérebro com DA fornecerá informações mecanísticas sobre a fisiopa‐
tologia da doença. Técnicas de sequenciamento de RNA de célula única ou nuclear único foram bem
estabelecidas nos últimos anos; no entanto, nenhum dado de sequenciamento de RNA de célula única
ou nuclear único sobre a senescência celular no envelhecimento ou no cérebro com DA foi relatado ain‐
da. Finalmente, vários estudos têm mostrado resultados promissores com drogas senolíticas. Se essas
drogas podem ser usadas em clínicas para prolongar a vida útil e/ou melhorar as alterações fisiopatoló‐
gicas relacionadas ao envelhecimento, ainda não foi determinado.

Abreviaturas

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CARREGAR Doença de Alzheimer de início tardio

DE ANÚNCIOS doença de Alzheimer

Aβ peptídeos β-amilóides

PAI-1 Inibidor do ativador de plasminogênio 1

RS senescência replicativa

SIPS Senescência prematura induzida por estresse

SASP Fenótipo secretor associado à senescência

SA-β-gal β-galactosidase associada à senescência

pRb Proteína de retinoblastoma fosforilada

SAHFs Focos de heterocromatina associados à senescência

SDFs Focos de danos ao DNA associados à senescência

mH2A MacroH2A

HSCs Células-tronco hematopoiéticas

NFTs Emaranhados neurofibrilares

MCI Comprometimento cognitivo leve

LTL Comprimento dos telômeros dos leucócitos

APLICATIVO Proteína precursora de amiloide

PS1 Presenilina 1

OPCs Células precursoras de oligodendrócitos

HMGB1 Caixa de grupo de alta mobilidade 1

TERT Telomerase transcriptase reversa

TERC Componente de RNA da telomerase

caixa eletrônico Ataxia-telangiectasia mutante

MANIA AD familiar
De volta ao to

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VEGF-1 Fator de crescimento endotelial vascular 1

NSPCs Células-tronco neurais/progenitoras

ROS Espécies que reagem ao oxigênio

NLRP3 Domínio de pirina da família NLR contendo 3

BARRAGEM Microglia associada à doença

tPA Ativador de plasminogênio tipo tecido

uPA Inibidor do ativador do plasminogênio tipo uroquinase

ATII Células alveolares tipo II

TGF-β1 Transformando o fator de crescimento β1

NSC Célula-tronco neuronal

Financiamento

Esta pesquisa foi financiada pelo Instituto Nacional de Saúde e pelo Instituto Nacional do Envelheci‐
mento [R56HL131054 e AG046701 ] e pelo Departamento de Defesa [PR190313].

Declaração do Conselho de Revisão Institucional

Não há necessidade, pois este é um artigo de revisão. Não envolve nenhuma amostra humana.

Declaração de Consentimento Informado

Não há necessidade, pois este é um artigo de revisão. Não envolve nenhuma amostra humana.

Declaração de Disponibilidade de Dados

Não há necessidade, pois este é um artigo de revisão.

Conflitos de interesse

O autor declara nenhum conflito de interesse.

notas de rodapé

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