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MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL – MEIOS DE CULTURA E TÉCNICAS DE SEMEADURA

Prática 1: Meios de cultura

▪ Objetivo: Preparar meio de cultura para ser utilizado como cultivo de

microrganismo

▪ Introdução
Na natureza, os microrganismos encontram-se formando populações mistas (vários
tipos de microrganismos que pertencem a um mesmo habitat). Por outro lado, o
desenvolvimento da microbiologia, assim como todos os procedimentos laboratoriais
para o diagnóstico, depende da obtenção de biomassa microbiana na forma de populações
puras, que quando desenvolvidas/crescidas em meios de cultura denominam-se culturas
puras ou axênicas (populações homogêneas quanto ao tipo de microrganismo, cultivados
em meios de cultura sem a presença de outras formas de vida contaminantes). A obtenção
de uma cultura pura a partir de uma cultura mista denomina-se isolamento, conseguido
através da semeadura dos microrganismos na superfície de meios de cultura sólidos em
placas de Petri, o que permitirá a formação de colônias (que são populações isoladas que
crescem na superfície destes meios).

Como todos os seres vivos, os microrganismos necessitam de nutrientes

apropriados ao seu desenvolvimento, assim como condições físicas ou ambientais
favoráveis. Quando cultivados em laboratório, estas necessidades devem ser respeitadas.
Assim, pode-se dizer que em um ciclo natural na água, solo, ar, na nossa superfície
corporal e de outros animais, etc. os microrganismos conseguem sobreviver pela
utilização de materiais orgânicos e inorgânicos existentes nestes ambientes. O ciclo
artificial (meio de cultura) é o modo que empregamos em laboratório para cultivarmos os
microrganismos. Chamamos de meio de cultura ao conjunto de substâncias necessárias
ao crescimento e multiplicação dos microrganismos.

Prof. Aldeniza Laurentino – 3ª QUÍMICA

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▪ Materiais e Reagentes

• Caldo de carne (Knorr) ou sazon;

• Gelatina incolor (Ágar)- 12g;
• Colher;
• 200 ml Água;
• Potes de plástico ou tampa (placa de petry);
• Água aquecida.

▪ Procedimento Experimental – Parte 1

Obs: a prática utiliza um pacote de gelatina com 12g (rende 300 ml de meio).

• Triturar o caldo (Knorr) e coloque aproximadamente 50 ml de água filtrada e em

seguida homogeneizar;
• Deixar a mistura em repouso;
• Abra a gelatina em pó (sem sabor) em um recipiente de vidro e seguir as
orientações da embalagem, ou seja, acrescente 5 colheres (sopa) de água fria para
hidratar a gelatina;
• Em seguida homogeneizar a gelatina e deixe descansar por 5 min;
• Colocar 250 ml de água para aquecer sem deixar ferver;
• Transferir a água aquecida para o recipiente com a gelatina e em seguida
homogeneizar;
• Misturar o caldo de carne com a gelatina e homogeneizar;
• Inserir a mistura (caldo + gelatina) no pote até atingir aproximadamente 0,5 cm
de altura;
• Leve a geladeira e deixe por 3 h.

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PRÁTICA 2 – Técnica de Semeadura

▪ Objetivo: praticar as duas técnicas de semeadura utilizadas em meio

sólido: semeadura em superfície e esgotamento por estrias.

▪ Introdução
As técnicas de semeadura são o método pelo qual se transfere inóculos
bacterianos de um meio de cultura ou material a ser analisado (secreções,
alimentos) para um outro meio de cultura. Para garantir que apenas o
microrganismo desejado seja semeado, são utilizadas as técnicas assépticas:
procedimentos que devem ser adotados visando a não contaminação de materiais,
meios e culturas.
Finalidades do isolamento: Identificação de um microrganismo. A simples
observação de caracteres morfológicos não é suficiente para a identificação e
classificação dos microrganismos. Para isto, são avaliadas várias características
como: características bioquímicas, sorológicas, de patogenicidade, etc. O estudo
destas características está na dependência do microrganismo que se pretende
identificar.
Várias são as técnicas que podem ser utilizadas como:
- Semeadura em meio sólidos: tubo de ensaio (esgotamento de alça e em
picada); placa de petri (isolamento por estrias e pour plate);
- Semeadura em meio líquido;
- Semeadura em meio semi-sólido: em picada.

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▪ Materiais e Reagentes
• 2 Meios de cultura preparados no roteiro anterior;
• Cotonetes (alça de inoculação ou swab);
• Água coletada do sanitário;
• Papel higiênico.

▪ Procedimento experimental – 2
❖ Tire o plástico filme da amostra;
❖ Insira o cotonete na amostra de água coletada do sanitário e inicie a semeadura;
❖ Usar primeiramente a técnica de semeadura em superfície;
Obs: lembrando que a técnica deve ser realizada próxima a chama, caso estivesse
no laboratório;
❖ Em seguida pegar o outro meio e usar a técnica esgotamento por estrias;
❖ Insira o cotonete na amostra de água coletada do sanitário e inicie a semeadura;
❖ Após finalizar, cobrir os cultivos com plástico filme e em seguida isolar em um
ambiente com temperatura até 37º C e deixar até 48h.

▪ Interpretação dos Resultados

Avaliar o crescimento microbiano nos diferentes meios de cultura e relacionar

o tipo de crescimento à técnica de semeadura realizada.

▪ Dados Bibliográfico
• “Disponível em”:
https://www.youtube.com/watch?v=vZFfG2YIsIk&list=PLR5-
aGwegkm9enKP_gJKoDcHX1TAUcGpR&index=1. “Acesso em”: 28/03/21
• “Disponível em”:
https://www.youtube.com/watch?v=MG3hSIiYJXY&list=PLR5-
aGwegkm9enKP_gJKoDcHX1TAUcGpR&index=2. . “Acesso em”: 28/03/21
• MICHAEL.J; PELCZAR.Jr; CHAN.E.C.S; KRIEG.N.R. Microbiologia:
conceitos e aplicações. V. 1, 2ª ed, 1996.

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