UNIVERSIDADE FEDERAL DA GRANDE DOURADOS

FACULDADE DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E AMBIENTAIS

BIOTECNOLOGIA - BACHARELADO

DISCIPLINA DE MICROBIOLOGIA

Prof.ª Dra. Kelly Mari Pires de Oliveira

Acadêmico: Matheus Nabuco Fernandes Aran

Preparo de meios de cultura

Nutrição de microrganismos

DOURADOS, MS

2023
1. INTRODUÇÃO

O preparo com meios de cultura são fundamentais para a microbiologia ao longo

da sua existência, e se faz muito importante e necessário nos dias de hoje pois acaba por
permitir que os microrganismos se desenvolvam com suas condições necessárias mas se
pararmos para analisar, como que foram desenvolvidos os meios de cultura? essa e
outras perguntas serão abordadas agora. (SPLABOR, 2023).

A princípio os cientistas usavam materiais orgânicos como sangue ou soro para o

cultivo de bactérias. No entanto, o uso desses materiais apresentavam problemas na hora
da esterilização e havia a causa de contaminações. Ao final do século XIX surgiram os
primeiros meios de cultura sólidos como a gelatina e o agar-agar, o uso desses materiais
permitiu um maior controle das condições necessárias para o crescimento bacteriano.
(FIOCRUZ, 2023).

O primeiro cientista a utilizar um meio de cultura para crescer bactérias em

laboratório foi Louis Pasteur, em 1860. Era um meio líquido, semelhante a uma sopa,
colocado em um balão de pescoço longo. Além do balão de pescoço longo, eram
utilizados também tubos de ensaio de vidro com algodão colocado na boca, para tampar.
Os dois principais problemas desses métodos eram a dificuldade de manter o trabalho
asséptico e a dificuldade para individualizar as culturas, ou seja, isolar os
microrganismos encontrados. (FIRSTLAB, 2023).

Os meios de cultura para microrganismos devem fornecer condições ideais de

crescimento para todos os tipos ou para tipos específicos de microrganismos. A
composição precisa de um meio depende da espécie sendo cultivada e do objetivo da
aplicação. O pH médio precisa ser ajustado dependendo dos microrganismos. Os meios
de cultura para microrganismos são classificados com base em vários parâmetros, como
componentes químicos, natureza física e função. (DRICH, 2023).
OBJETIVO
- Colocar em prática o que foi estudado na teoria sobre meio de cultivo;
- Analisar diferentes tipos de crescimento de bactérias.

MATERIAL
- Micropipeta
- Béquer;
- Agulha;
- Tubo com rosca;
- Alça de inoculação;
- Pipeta graduada;
- Meio sólido inclinado;
- Peptona Bacteriológica;
- Meio sólido líquido;
- Extrato Levedura;
- Meio líquido;
- Cloreto de Sódio NaCl;
- Placa de Petri;
- Agar-agar em pó;
- Bico de Bunsen;
- Balança semi analítica;
- Palitos de fósforo;
- Álcool;
- Água destilada;
- Escherichia coli;
- Staphylococcus aureus;
- Candida albicans.

PROCEDIMENTO
Preparo de meio-sólido inclinado
1. Foi feito uma dobra em formato de copo com papel laminado para colocar as
substâncias pesadas;
2. Realizou-se a pesagem de 0,9 g de extrato de levedura;
3. Pesou-se 1,8 g de peptona bacteriológica;
4. Pesou-se 36 g de NaCl;
5. Em um béquer de 1000 mL foi adicionado 200 mL de água destilada;
6. Pesou-se 3,6 g de agar agar em pó.

7. No béquer com água destilada as substâncias foram homogeneizadas;

8. A substância foi levada para aquecer no microondas e foi deixado por 5 a 6

minutos;
9. Utilizando uma pipeta graduada, pipetou-se 7 mL de meio de cultivo quente em
20
10. tubos com roscas e foi realizada uma volta em suas tampas.

Preparo de placa de petri e tubo de ensaio com bactérias

1. Flambou-se a alça de inoculação e foi pego uma placa de petri com

Staphylococcus aureus;

2. Com a alça de inoculação pegou-se uma colônia isolada de S. aureus e foi

inserida em um tubo de meio líquido e homogeneizado;

3. Foi pego a mesma colônia e homogeneizada em outro tubo com meio líquido;
4. A alça de inoculação foi flambada e utilizada novamente em meio semi-sólido;

5. Para o meio semi-sólido foi usado colônias de Staphylococcus aureus;

6. Inseriu-se a alça de inoculação verticalmente no meio semi-sólido;

7. Flambou-se a agulha e pegou-se uma placa de petri com Staphylococcus

aureus e com a agulha foi selecionado uma colônia;

8. Utilizando o tubo de ensaio sólido inclinado foi pego a agulha com a colônia e
inserido no meio de cultivo e foi realizado estrias em seu exterior;
 9. O mesmo foi feito com o outro tubo de ensaio, porém com Escherichia coli;

10. Foi pego uma placa de petri e a mesma foi dividida ao meio;

11. Em um lado da placa utilizou-se uma colônia de Staphylococcus aureus e no

outro lado foi colocada uma colônia de Candida albicans.

4.1 Preparo de meio-sólido inclinado

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

Preparo de meio-sólido inclinado

Ao preparar algum meio de cultivo sendo ele líquido, semi sólido

ou sólido deve-se ter conhecimento que cada meio precisa de uma
quantidade exata de substâncias. Algumas bactérias, necessitam de
meios de cultura com quantidades de substâncias e temperatura
específicas.

Existem dois alguns tipos de meios de cultivo o primeiro são os quimicamente

definidos, onde é necessário uma quantidade específica de cada substância, podendo
também ser meios fastidiosos é feito quando as bactérias são extremamente exigentes,
e por último e o meio de cultivo mais utilizado é o complexo pois contém vários
nutrientes dentro de um só, como foi usado em aula o peptona.
Placa de petri e tubo de ensaio com crescimento de bactérias

Quando foi realizado o procedimento com o meio líquido esperava-se ter um

resultado onde deveríamos ser capazes de identificar se a colônia de bactéria necessita
de oxigênio ou não. Para identificar se uma bactéria precisa ou não de oxigênio ele
deve ter crescido na parte de cima do meio de cultura, assim ela seria uma bactéria que
necessita de oxigênio para crescer, agora se ela crescesse na parte de baixo do meio ela
não precisa de oxigênio.
Houve um turvamento no meio de cultura, significando que a colônia de
bactéria utilizada cresceu na parte do meio do tubo mostrando que elas não necessitam
de tanto oxigênio para crescer mas também não gostam de ficar sem oxigênio.
o meio semi sólido, esse meio é feito para saber a mobilidade das bactérias, ou
seja, se elas possuem flagelos ou não. Essa análise de mobilidade é de fácil percepção
pois quando o tubo com bactérias com flagelos ficará com uma aparência turva já o
tubo com bactérias sem flagelos essas irão ficar no mesmo local onde foi colocada a
alça de inoculação.
Para o meio de cultura em meio sólido inclinado com crescimento de
bactérias foi usado de 1,5 - 2% de Ágar, ele é um polissacarídeo retirado de algas
marinhas vermelhas utilizado para que o meio de cultura se solidifique.
O meio de cultura sólido foi feito com dois tipos de bactérias, em um dos
tubos foi inserido uma colônia de Staphylococcus aureus e no outro tubo Escherichia
coli, onde foram armazenados para crescer em temperaturas diferentes, porém mesmo
as bactérias em temperaturas diferentes não houve um crescimento das mesmas, isso
pode ter ocorrido por conta de falta de algum nutriente no meio de cultura ou até
mesmo temperatura não favoráveis para ambas.

4. CONCLUSÃO

Após a conclusão da aula prática, nossa capacidade de identificar os diferentes

tipos de crescimento bacteriano foi aprimorada significativamente. A compreensão
da importância de um meio de cultivo adequado tornou-se evidente, pois
reconhecemos que sem as condições apropriadas, o crescimento bacteriano pode ser
comprometido. Isso pode ocorrer devido à carência de nutrientes essenciais ou às
condições inadequadas de temperatura durante o período de cultivo das bactérias.
Essas observações destacam a complexidade dos fatores que influenciam o
desenvolvimento microbiano e ressaltam a necessidade de cuidados precisos ao
conduzir experimentos microbiológicos. O conhecimento adquirido certamente
contribuirá para a realização de pesquisas e práticas laboratoriais mais eficazes no
futuro.

5. REFERÊNCIAS

DRICH. Preparo de meios de cultura para microrganismos. Disponível em:

https://www.sigmaaldrich.com/BR/pt/applications/microbiological-testing/micro
bial-culture-media-preparation. Acesso em: 13 NOVEMBRO 2023;

SPLABOR. O que são meios de cultura? conheça a microbiologia. Disponivel

em:
https://www.splabor.com.br/blog/meio-de-cultura-2/o-que-sao-meios-de-cultura-
para-microbiologia-saiba-mais/#:~:text=Foi%20somente%20no%20final%20do,
necess%C3%A1rias%20para%20o%20crescimento%20bacteriano. Acesso em:
13 NOVEMBRO 2023;

FIOCRUZ. HistÛrico de desenvolvimento da tecnologia de cultura de tecidos.

Disponível em:
https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/handle/icict/13410/Conceitos%20e%20Met
odos%20V2_Cultivo%20Celular.pdf?sequence=2. Acesso em: 13 NOVEMBRO
2023;
FIRSTLAB. Placa de Petri: A história e o impacto na microbiologia. Disponível
em: https://firstlab.ind.br/placa-de-petri-historia-impacto-microbiologia/. Acesso
em: 13 NOVEMBRO 2023;