PONTIFCIA UNIVERSIDADE CATLICA DO PARAN

ESCOLA POLITCNICA
CURSO DE ENGENHARIA QUMICA

BRUNA SOARES MONTEIRO DE ASSIS

HELOISA BOVETTO JACOB
JOO OLEINIK

CONTAGEM DE PLACAS E MEIO DE CULTURA

CURITIBA
2015

BRUNA SOARES MONTEIRO DE ASSIS

HELOISA BOVETTO JACOB
JOO OLEINIK

CONTAGEM DE PLACAS E MEIO DE CULTURA

Relatrio tcnico apresentado disciplina
Fundamentos da Biotecnologia do Curso
de Graduao em Engenharia Qumica da
Universidade Catlica do Paran como
forma parcial de avaliao referente a 1 a
Parcial.
Orientador: Prof. Francine Valenga.

CURITIBA
2015

RESUMO
Contagem de microrganismo em placa um experimento que atravs dos
fatores necessrios para seu crescimento, como a temperatura, umidade e
concentrao de oxignio, podem ser analisadas ser aspecto, forma e o crescimento
da bactria. No laboratrio pigmentada uma pequena poro da soluo
bacteriana, diluda em vrios tubos de ensaio, pipetado para uma placa de Petri e
logo depois depositado na estufa. Aps 48 horas, pode ser avaliado o
desenvolvimento bacteriano. O meio de cultura consiste da associao qualitativa e
quantitativa

de

substncias

que

fornecem

os

nutrientes

necessrios

ao

desenvolvimento de microrganismo fora do seu meio natural.

ABSTRATC
Microorganism plate count is an experiment that through the factors necessary
for growth, such as temperature, humidity and oxygen concentration can be analyzed
be aspect, shape and the growth of bacteria. In the laboratory is pigmented a small
portion of the bacterial solution diluted in multiple test tubes pipetted into a petri dish
and then placed in the greenhouse after. After 48 hours, can be evaluated bacterial
growth. The culture medium consists of qualitative and quantitative combination of
substances which provide nutrients necessary for the development of microorganism outside its natural environment.

1. INTRODUO

Os microrganismos so uma forma de vida que no pode ser visto sem o auxilio
do microscpio, podem ser diferenciados das clulas de origem animal e vegetal,
incapazes de sobreviver de forma unicelular na natureza, sendo sempre
encontrados como parte de organismos multicelulares.
So capazes em geral de realizar seus processos vitais de crescimento, gerao
de energia e reproduo, sem depender de outras clulas, sejam estas do mesmo
tipo ou de tipos diferentes. Quando se trata sua relao com o homem, pode ocorrer
de duas formas, positiva e essencial, como as bactrias encontradas no iogurte e o
fermento, ou podem ser negativas, sendo prejudiciais sade, se d pelo contato
com os Microrganismos patognicos, que so os causadores de doenas.
(MADIGAN, 2010)
Em laboratrio os microrganismos necessitam de um meio de cultura adequado
para seu crescimento in vitro. Mas, alm dos componentes presentes no meio,
outros fatores interfere o seu desenvolvimento: so fatores ambientais como
temperatura e tenso de oxignio. Inoculando um microrganismo em um meio de
cultura que possua todos os requisitos nutritivos e fatores ambientais favorecidos, o
microrganismo inicia seu desenvolvimento neste meio, passando pelas diversas
fases de curva de crescimento, desde a fase de latncia, logartmica, estacionria, e
at mesmo a fase da morte. A fase logartmica caracterizada por divises
sucessivas, originando a formao de um grupamento de bactria da mesma
espcie, que denominado de colnia. Esta fase visualizada sem auxilio do
microscpio, sendo ento considerada como caracterstica macroscpica das
bactrias. (RIBEIRO, 2011)
As bactrias so microrganismo unicelulares com uma estrutura muito simples, o
que lhes permitem replicarem muito rapidamente caso encontrem nutrientes,
temperatura, pH, umidade e concentrao de oxignio. (MADIGAN , 2010)
Como cada espcie possui um tipo morfolgico colonial diferente, estas devem
ser analisadas quanto elevao. Forma. Tamanho, bordas e pigmentao. Em um
meio de cultura, um nico tipo de colnia observado denominado cultura pura,
vrios tipos de colnia, cultura mista. Essa versatilidade decorrente do principio do
mtodo, que se baseia na premissa de que cada clula microbiana presente em uma

amostra ir formar, quando fixada em um meio de cultura adequado, um colnia

visvel e isolada. (RIBEIRO, 2011)
O objetivo para contagem de microrganismo em placa determinar o nmero de
microrganismo de uma cultura bacteriana. E o objetivo de preparar o meio de cultura
para a utilizao na microbiologia.

2. MATERIAIS E MTODOS
2.1 MTODOS PARA CONTAGEM DE CULTURA
Primeiramente, colocou 4,5 mL de soluo salina estril em todos os tudo
de ensaio, simbolizou com o nmero de 1 at 6, a ala em anel e a agulha foram
flambadas e em seguida depositou em um dos tubos de ensaio de Cultura de
Escherichia Coli diluda a 10 -4. Logo em seguida, transferiu 0,5 mL do tubo (1) que
continha a suspenso bacteriana para o tubo (2) seguinte, e assim do segundo tubo
para o terceiro, at completar todos. Dividiu a placa de Petri em 6 partes, e
simbolizou com a letra de A at F. Retirou com a pipeta um pequena quantidade
de lquido do tubo 6, abriu a placa de Petri perto do fogo, e deixou cair uma gota no
setor F, fechou a placa e devolveu o excesso de lquido ao tubo 6, foi repetido os
passos com os tubos do 5, 4, 3, 2, e 1. Descartou a pipeta, no recipiente com
desinfetante, fechou a placa de Petri e transferiu para uma Estufa aproximadamente
a 37 C por 24 48 horas.
2.2 MTODOS PARA MEIO DE CULTURA MEIO 1
Pesou todos os componentes, exceto o gar, diluiu em gua. Adicionou ao
balo volumtrico de 250 mL e completou com gua destilada. Adicionou Agar,
preparo 5 tubos de cultura, distribuiu parte do meio preparado em cada um deles.
Esterilizou em autoclave a 121C, por 20 minutos.

2.3 MTODOS PARA MEIO DE CULTURA MEIO 2

Pesou todos os componentes em cada bquer, dilui com gua. Adicionou a
um balo volumtrico de 100 mL e completou com gua destilada. Esterilizou em
autoclave a 121C, por 20 minutos.

3. RESULTADOS E DISCUSSES

Figura 1 Desenvolvimento Bacteriano

As diluies da amostras so feitas para viabilizar a contagem de

microrganismo. Pode analisar, de acordo com figura 01, que no possvel calcular
quantas vezes a cultura A foi diluda, pois teve um grande desenvolvimento,
formando um tapete, dificultando a anlise. E sem esse resultado, no foi possvel
calcular a concentrao tambm.
No interfere se a concentrao menor for antes que a concentrao maior,
pois soluo diluda no reflete no resultado.

4. CONCLUSO

Nesta prtica realizada possvel observar que quando os microrganismos esto

em condies necessrias para seu desenvolvimento, o processo se torna rpido,
podendo ser visto a olho nu, sendo contabilizadas apenas clulas vivas. Mas
tambm, a necessidade de muitas manipulaes pode causar erros nas contagens
devido s diluies ou plaqueamento.

5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

MADIGAN, Michael T. Microbiologia de Brock. 12 edio. Artemed: So Paulo,

2010.
RIBEIRO, Marlangela Cagnoni. Microbiologia Prtica. 2 edio. Atheneu: So
Paulo, 2011.