Universidade Federal da Integração Latino Americana

Mestrado em Biociências

Profa. Dra. Aline Theodoro Toci

2019
 Universidade Federal do Paraná
Programa de Pós-Graduação em
Engenharia de Alimentos

Profa. Dra. Aline Theodoro Toci

2022

Latos 2
 A móvel ←
→ A estacionária
K = CAE
CAM
Interação química somente com a fase estacionária
 Controlador
de Vazão
Sistema de
Injeção

Sistema de
Registro e
Tratamento
Forno Detector de dados
Fonte de
Coluna
Gás
Cromatográfica
Requisitos:

 Quimicamente inertes
 Adequado ao tipo de detector utilizado
 Alta pureza (99,999%)
 Aconselhável o uso de filtros

Impurezas típicas em gases e seus efeitos: água e

Oxigênio - oxida / hidroliza algumas FE
Os dispositivos para injeção devem prover meios de
introdução INSTANTÂNEA da amostra na coluna
cromatográfica

Extremidade
linear da coluna

TEMPERATURA DO
INJETOR
Deve ser
suficientemente
elevada para que a
amostra vaporize-se
imediatamente, mas
sem decomposição.
split
splitless
on-column
 split
splitless
on-collum

https://www.youtube.com/watch?v=9nYpjtRx0Zs

https://www.youtube.com/watch?v=MRR2bjUfExw
Líquidos
Gases

SPME
 Seringas
Gas tight

Digital
Liner
VOLUME INJETADO
Depende do tipo de coluna e do estado físico da
amostra.
Fast CG
Normal Fast
Diâmetro (mm) 0,25 a 0,32 0,1 a 0,25
Comprimento (m) 30 a 100 10 a 20
Fluxo (ml/min.) <2 >10
Rampa (°C/min.) < 20 < 70

Tempo X Custo
 Modos de eluição:

Isocrático Gradiente

Temperatua
constante
Espectrômetro de Massas: Análise da
razão massa/carga dos compostos
Detector de Ionização por Chama (DIC)
Em inglês – FID Flame ionization detector

• Baseia-se na reação de combustão

• Faz-se necessário a presença de O2

molecular (comburente) e o
combustível (matéria orgânica ou
Hidrogênio molecular)
2 H2(g) + O2(g) → 2 H2O(l) + 572 kJ (286 kJ/mol)

• As reações de combustão são de

oxirredução, pois os combustíveis
sofrem oxidação (perdem elétrons e
seu Nox aumenta) e o comburente,
que é o oxigênio, sofre redução (ganha
elétrons e seu Nox diminui) para a
formação dos produtos.
Detector de Ionização por Chama (DIC)
Em inglês – FID Flame ionization detector
• O efluente que sai da coluna é
misturado com H2 e air (O2)

• Ignição por descarga de corrente

• A grande maioria dos compostos

orgânicos geram íons quando
pirolisados

• O coletor de íons localizado após

a chama

• Os íons ao chegarem ao coletor

geram um sinal que pode ser
medido
Detector de Ionização por Chama (DIC)
Em inglês – FID Flame ionization detector
Detector de Ionização por Chama (DIC)
Em inglês – Flame ionization detector (FID)

O sinal gerado é
proporcional ao
número de carbonos.
Possui alta
sensibilidade (nº de
entidades detectada
por unidade de
tempo) e baixo ruído.
Detector por Captura de Elétrons(DCE)
Em inglês – Electron-capture detector (ECD)

Detector mais utilizados para amostras ambientais,

principalmente para pesticidas

• Detecta compostos orgânicos

halogenados, peróxidos,
quinonas e grupos nitro.
Também pode detectar alguns
organometálicos.

• O detector possui um Emissor

de partículas β
 Detector por Captura de Elétrons(DCE)
Em inglês – Electron-capture detector (ECD)

• O efluente passa por esse emissor, que provoca a

ionização do gás e a produção de uma cascata de
elétrons

• Na ausência de espécies orgânicas, esse processo

resulta em uma corrente constante

• Quando há a presença de uma molécula orgânica capaz

de receber elétrons, a intensidade de corrente medida
diminuirá
Detector por Captura de Elétrons(DCE)
Em inglês – Electron-capture detector (ECD)

DTT 1,4-Naftoquinona

Acetonitrila

Organofosforado - Parathion
Detector por Captura de Elétrons(DCE)
Em inglês – Electron-capture detector (ECD)
Detector por Condutividade Térmica (DCT)
Em inglês – Thermal conductivity detector (TCD)
• Baseia-se nas variações de condutividade térmica de uma
corrente aplicada em um gás.

• Seu funcionamento está no fato de que um corpo quente

perde calor a uma velocidade que depende do gás que o
circunda. Assim, a variação da perda de calor pode ser
usada como uma medida da composição do gás.
Detector por Condutividade Térmica (DCT)
Em inglês – Thermal conductivity detector (TCD)

• O corpo quente é um conjunto de filamentos de metal

(platina, tungnstênio e níquel).

• O gás de arraste tem que ter alta condutividade térmica,

ou seja, massa molar pequena (He e H2)

• A amostra em geral é constituída de moléculas maiores,

que provocam uma diminuição na condutividade do gás
que circunda o filamento.

• A perda de calor em uma velocidade menor é convertida

então em sinal.
Detector por Espectrometria de Massas (EM)
Em inglês – Mass spectrometer (MS)

• Técnica hifeneizada: acoplamento a espectrometria

• A espectrometria de massas é uma técnica analítica física

para detectar e identificar moléculas de interesse por meio
da medição da sua massa e da caracterização de sua
estrutura química.

• O princípio físico básico de um espectrômetro de massa

consiste em criar íons de compostos orgânicos por um
método adequado, separá-los de acordo com a sua taxa de
massa/carga (m/z) e, por conseguinte, detectá-los
qualitativa e quantitativamente por sua respectiva taxa
m/z e abundância.
Detector por Espectrometria de Massas (EM)
Em inglês – Mass spectrometer (MS)
Detector por Espectrometria de Massas (EM)
Em inglês – Mass spectrometer (MS)
Detector por Espectrometria de Massas (EM)
Em inglês – Mass spectrometer (MS)
 Espectro de Massas

Biblioteca Virtual NIST (National Institute of Standards and Technology,

United States Department of Commerce). The frst NIST library was
created in 1978, with around 25,000 compounds. A further 20 years were
required to achieve a library with 100,000 compounds. In the last decade,
the number of compounds has doubled, and the latest version (available
since 2014) lists 242,466 chemical compounds.
Espectro de Massas
Índice de retenção

O índice de retenção de um componente é um número, obtido

por interpolação, relacionando o tempo de retenção do
componente em estudo com o tempo de retenção de dois
padrões (geralmente hidrocarbonetos) eluídos antes e após o
pico do composto de interesse4.

Índice de Kovats Índice de Retenção Linear (LRI)

É sempre calculado sob Quando se utilizam

condições isotérmicas
de temperatura.
temperaturas
programadas de
coluna, um valor
similar pode ser
calculado utilizando os
números extraídos de
seus algoritmos
Índice de retenção
Índice de retenção
Índice de retenção

• Método de confirmação de um composto sem utilização de

padrão.

• Independente da rampa ou temperatura utilizada.

 Análise de ácidos graxos e triglicerídeos
 Análise de micotoxinas
 Análise de compostos Voláteis responsáveis pelo
aroma característico de alimentos
 Análise de açúcares
 Análise de aminoácidos
 Análise de agrotóxicos
 Análise de fármacos
 etc
 Sinal intensity

10.0
12.5
15.0
2-pentylfuran

17.5
20.0
3-octen-2-one

22.5
3-ethyl-2-methyl-
1,3-haxadiene
2-octenal

25.0
tetramethylpyrazine

27.5

Retention time (min.)

30.0
32.5
35.0
37.5
40.0

Hexanoic acid
42.5
Healthy
45.0
Black 1
 Compostos não voláteis ???
Derivação
Compostos não voláteis ???
Cromatografia Gasosa Bidimensional
CG x CG
Cromatografia Gasosa Bidimensional
CG x CG

Zani, 2009.
Cromatografia Gasosa Bidimensional
CG x CG
Cromatografia Gasosa Bidimensional
CG x CG
Obrigada