INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS - ICB

DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS FISIOLÓGICAS

GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA
IBF027- Caracterização de Biomoléculas

Caracterização de biomoléculas
Absorção atômica: Fundamentos e aplicações
Lei fundamental da Absorção Atômica
 Espectrofotometria de absorção atômica

AAS: Atomic Absorption Spectrometry

Absorção de luz

Nível atômico

Determina a presença e a quantidade de um dado elemento metal

e alguns não metais em uma amostra!!
Espectrofotometria de absorção atômica
Espectrofotometria de absorção atômica

62 diferentes elementos químicos

absorção atômica X emissão atômica
Espectrofotometria de absorção atômica
 Instrumentação

Componentes do AAS

Emite a radação no
mesmo l que o
átomo consegue
absorver
 Instrumentação
Componentes do AAS

Espectros
 Instrumentação

Fonte
Sistema que emitirá a radiação necessária na forma de linhas

Lâmpada de cátodo oco (LCO)

• Bulbo de vidro contendo gas inerte (Ar ou Ne)
• Cátodo elaborado com o elemento de interesse
• Anodo com filamento W
• Algumas lampâdas são multi-elementos.
 Instrumentação

Fonte
Processos que ocorrem na lâmpada de cátodo oco

1. Ionização

2. Ablação Processo de Sputerring

3. Excitação

4. Emissão
 Instrumentação

Fonte
 Instrumentação

Fonte

Lâmpada de descarga sem eletrodo

• Bulbo de vidro contendo elemento de interesse

• Excitação por radiofrequencia
• + intensa que a LCO mas menos estável
 Instrumentação

Atomizadores
Atomizadores
fundamentados em chama

• Amostras líquidos ou gases

• Acetileno (C2H2) =Combustíveis mais utilizado
• Ar e óxido nitroso (N20) são os oxidantes mais
comumente empregados

2100-2400oC

2600-2800oC

• A radiação luminosa da chama interfere no

valor da radiação absorvida pela amostra
(deve ser subtraída)
 Instrumentação

Atomizadores
Atomizadores
fundamentados em chama
 Instrumentação

Atomizadores

Vaporização eletrotérmica

• Forno de grafite

• Tempo do vapor atômico

• Sensibilidade
• Pequenos volumes
• Amostras sólidas
 Instrumentação

Monocromadores

Prisma Rede de difração

 Instrumentação

Detectores

Válvulas fotomultiplicadoras
 Instrumentação

AAS
Padrões de calibração para preparo da curva padrão
Aplicação da Lei de Lambert-beer
 Aplicação

Análises ambientais= solos, águas, plantas, sedimentos…

Análises clínica: urina, cabelo, soro sanguíneo e outros fluidos

Análises alimentos: in natura x enlatados
Análises industriais: fertilizants, lubrificantes …
 Vantagens

Alta sensibilidade

Distingue elementos em amostras complexas

Permite uma análise multielementar

Concentrações em ppm ou ppb