Unidade 1 | Seção 2

Roteiro
Aula Prática

Higiene e
microbiologia dos
alimentos
 ROTEIRO DE AULA PRÁTICA
NOME DA DISCIPLINA: Higiene e microbiologia dos alimentos
Unidade 1
Seção 1.2

OBJETIVOS
Definição dos objetivos da aula prática:
 Identificar e manipular corretamente a vidraria principal em laboratório de
microbiologia.
 Definir cultura pura, esterilização e assepsia.
 Descrever as principais técnicas de manobras assépticas.
 Desenvolver habilidades de manipular tubos com meios estéreis, bem como
transferir microrganismos de meio sólido para outro meio sólido e também para meio
líquido.

INFRAESTRUTURA
Instalações:
Esta aula prática é realizada no Laboratório Multidisciplinar.

Materiais de consumo:
Descrição
ÁGAR PADRÃO DE CONTAGEM (PCA)
AGULHA BACTERIOLÓGICA
ALÇA DE DRIGALSKI DE VIDRO
ALÇA PLATINA COM CABO 5CMX0.5MM
ÁLCOOL 70%
ALGODÃO HIDROFÓBICO
BASTÃO VIDRO 6X300MM
BECKER GRADUADO DE VIDRO FORMA BAIXA - 1 L

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 BECKER GRADUADO DE VIDRO FORMA BAIXA - 250 ML
BECKER GRADUADO DE VIDRO FORMA BAIXA - 500 ML
BICO DE BÜNSEN COM REGISTRO
CALDO DE CARNE (CALDO NUTRIENTE)
CÁLICE DE SEDIMENTAÇÃO
CANETA DE PROJETOR
ERLENMEYER 500 ML
ESTUFA
FUNIL ANALÍTICO PORCELANA 90MM - 230 ML
LÂMINA LISA DE VIDRO
LAMÍNULA DE VIDRO (24 X 24 MM)
MICROPIPETA VARIAVEL 100-1000UL

PAPEL KRAFT 2M
PINÇA PONTA CURVA
PIPETA GRADUADA EM VIDRO - 1 ML
PIPETA GRADUADA EM VIDRO - 10 ML

PIPETA GRADUADA EM VIDRO - 2 ML

PIPETA PASTEUR EM VIDRO - 1ML

PIPETADOR PIPUMP VERDE 5-10 ML

PLACA DE PETRI VIDRO AUTOCLAVÁVEL (100 X 15 MM)

PROVETA GRADUADA DE VIDRO - 1 L

SERRATIA MARCESCENS

TELA ARAME COM DISCO 14X14CM

TRIPÉ FERRO ARO 12X20

TUBO DE DURHAN

TUBO DE ENSAIO EM VIDRO (16X150MM) - 23 ML

VIDRO DE RELÓGIO

Software:
Sim ( ) Não ( X )
Em caso afirmativo, qual?
Pago ( ) Não Pago ( )
Tipo de Licença: NSA.

Descrição do software:
NSA

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 Equipamento de Proteção Individual (EPI):
Jaleco
Óculos de proteção
Sapato fechado e sem salto
Máscaras
Luvas
Retirar brincos e adornos pessoais

PROCEDIMENTOS PRÁTICOS

Procedimento/Atividade n.1
Procedimento/Atividade n.1
Esterilização e Desinfecção

Procedimentos para a realização da atividade:

1ª Parte – apresentação do material de laboratório aos alunos: mostrar a vidraria
principal (pipetas, placas, tubos, alça, bico de Bunsen etc.)
2ª Parte – orientação aos alunos sobre a maneira correta de realizar manobras
assépticas.
1. Distribuir meio de caldo simples estéril, contido em um tubo, para outro tubo vazio e
estéril, usando pipeta (2 mL). Incubar os tubos inoculados à temperatura ambiente, por,
no mínimo 48horas.
2. Com o auxílio de alça de inoculação, transferir uma porção de crescimento de
Serratia marcescens crescida em tubo de ágar inclinado, contendo meio de ágar
simples, para outro meio idêntico.
3. Transferir uma porção do crescimento de Serratia marcescens crescida em tubo de
ágar inclinado para meio líquido de caldo simples.
4. Incubar os tubos nos itens 3 e 4 à temperatura ambiente, por, no mínimo, 48 horas.
5. Observação: algumas estirpes de Serratia marcescens produzem em suas células
um pigmento vermelho-alaranjado apenas quando incubadas no escuro, outras
produzem o mesmo pigmento sem esta exigência, bastando a incubação à temperatura
ambiente. O pigmento vermelho alaranjado facilita a visualização do crescimento
bacteriano.

Checklist:
- Verificar a listagem de materiais do laboratório a ser apresentada aos alunos.
- Esterilizar os materiais a serem utilizados na aula com antecedência.

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 - Preparar os meios de cultura com 48 horas de antecedência, manter em estufa a 35º
C para constatar a esterilidade.
- Preparar as culturas de microrganismos com 48 horas de antecedência e verificar o
crescimento após 24h.
- Os experimentos com Serratia marcescens devem ser inoculados a 25º C para o
aparecimento da coloração.
- Orientar os alunos para visualização do resultado após 48h. Na impossibilidade desta
observação, os experimentos devem ser mantidos em geladeira até a visita dos alunos.
- Formação dos grupos – 5 pessoas.

RESULTADOS
Resultados da aula prática:
- Quando na leitura dos tubos de caldos simples, estéreis, submetidos à transferência
em condições assépticas for observado turvação, formação de película ou depósito no
meio de cultura, ocorreu erro na manobra asséptica, pois, esses sinais são indicativos
de presença de crescimento bacteriano.
- Quando na leitura dos tubos de ágar simples inclinado, inoculado com Serratia
marcescens, houver a presença de crescimento vermelho-alaranjado, indica Serratia
marcescens, a presença de outro tipo de crescimento que não apresente a referida cor
indica contaminação.
- Nos tubos de caldo simples inoculados com Serratia marcescens a observação de
turvação no meio de cultura indica crescimento da Serratia marcescens, mas não
permite verificar se houve ou não contaminação.