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Fatores que influenciam a

atividade enzimática
Professor Rodrigo Ippolito Bouças
OBJETIVOS DE
APRENDIZAGEM

• 1. Descrever a ação das principais


enzimas digestivas no sistema
digestório e identificar quais
fatores pode interferir em suas
atividades (correlacionar com o
ambiente onde é produzida e onde
é ativada).

• 2. Representar graficamente a
velocidade da ação enzimática da
amilase salivar em função da
concentração de substrato,
concentração da enzima, pH e
temperatura e comparar seus
resultados com a pepsina e
amilase pancreática
ENZIMAS
São catalisadores biológicos de alta especificidade.
• Catalisar uma reação é alterar a sua velocidade, ou
seja, a quantidade de massa de reagente
transformada na unidade de tempo.

• A presença de um catalisador pode alterar a


velocidade das reações assim como pode alterar
também a quantidade de energia necessária que deve
ser emprestada ao sistema para início das reações
(Energia de Ativação).

• Biológicas – produzidas pelo corpo.


• Alta especificidade – para cada enzima há um
substrato específico.
ENZIMAS

Substrato: substância que sofre a transformação; V = reagentes transformados


Produto: resultado da transformação do substrato. tempo
ESTRUTURA ENZIMÁTICA
ENZIMAS - COFATORES
Algumas enzimas necessitam de elementos inorgânicos como os cofatores
para exercer sua atividade biológica.

ENZIMA COFATOR

Peroxidase Fe2+ ou Fe3+

Citocromo Oxidase Cu2+

Álcool desidrogenase Zn2+

Hexoquinase Mg2+

Urease Ni2+
ENZIMAS - COENZIMAS
Maioria das coenzimas deriva de vitaminas hidrossolúveis.

REAÇÃO
COENZIMAS ABREVIATURA ORIGEM
CATALISADA
Nicotinamida Niacina
adenina NAD+ Óxido-redução
dinucleotídeo (Vitamina B3)

Nicotinamida
adenina Niacina
NADP+ Óxido-redução
dinucleotídeo (Vitamina B3)
fosfato

Flavina adenina Riboflavina


FAD Óxido-redução
dinucleotídeo (Vitamina B2)
ENZIMAS – ATIVIDADE
ENZIMÁTICA

Fatores que alteram a velocidade de


reações enzimáticas:

• Temperatura;
• pH;
• concentração das enzimas;
• concentração dos substratos;
• presença de inibidores.
INFLUÊNCIA DA TEMPERATURA
 temperatura: a taxa de reação aumenta, como se observa na maioria das reações químicas e a
estabilidade da proteína decresce devido a desativação térmica (DESNATURAÇÃO)
INFLUÊNCIA DO pH
O efeito do pH sobre a enzima deve-se às variações no estado de ionização dos componentes
do sistema à medida que o pH varia e também ao processo de desnaturação.
Enzimas → grupos ionizáveis em diferentes estados de ionização.
INFLUÊNCIA DA CONCENTRAÇÃO
DA ENZIMA [E]
Velocidade de transformação do S em P é proporcional à quantidade de E.

A velocidade da reação cresce proporcionalmente à quantidade de enzima utilizada.


A inclinação da reta (a) dependerá da afinidade da enzima pelo seu substrato.
Cada enzima apresenta uma inclinação própria.
INFLUÊNCIA DA CONCENTRAÇÃO
DO SUBSTRATO [S]
[S] varia durante a reação à medida que S é convertido em P.

v v para [2E]

v = Vmax
para [E]
Vmax
2
Vmax para [E/2]
2

Km [S] Km [S]
A velocidade da reação aumenta à medida que a [S] se eleva até um ponto que a enzima é saturada
pelo substrato.
PRESENÇA DE INIBIDORES
ENZIMÁTICOS
Inibidor é qualquer substância que reduz a velocidade de uma reação enzimática.
ENZIMAS GIGESTIVAS
HIDRÓLISE DO AMIDO
PROCEDIMENTO

EXPERIMENTO 1 – FATORES QUE


INFLUENCIAM A ATIVIDADE DA
AMILASE SALIVAR
• Coleta e preparo da saliva por grupo:
• Recolher 4 ml de saliva em um
béquer de vidro ou tubo cônico de
50ml.
• Adicionar 10 ml de água destilada.
• Filtrar a solução em gaze utilizando
funil de vidro e erlenmeyer.
• Homogeneizar (está pronta para o
uso).
• Preparar cada um dos tubos
conforme as tabelas a seguir.
INFLUÊNCIA DA TEMPERATURA

INFLUÊNCIA DA CONCENTRAÇÃO DA ENZIMA INFLUÊNCIA DO pH


EXPERIMENTO 2 –
HIDRÓLISE ENZIMÁTICA DO
AMIDO

• Enumerar 16 tubos de ensaio e


adicionar em cada um 2 gotas de
lugol (solução de iodo).
• Em béquer de 250ml, colocar 100 ml
de solução de amido a 2%.
• Adicionar 2 ml da solução em um
tubo (1). Agitar e anotar a coloração;
• Acrescentar 10 ml de saliva à solução
de amido;
• Retirar alíquotas da solução de
amido de 30” em 30” (segundos).
• Agitar e anotar a coloração em
repouso.
• Interpretar os resultados obtidos.

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