SISTEMA Rh

• HISTÓRICO
✓ 1939  Levine e Stetson atribuíram a causa da
DHPN à atividade de anticorpos maternos
✓ 1940  Landsteiner e Wiener

Coelhos imunizados com hemácias de Macacus Rhesus 

Anticorpos capazes de aglutinar as hemácias desse macaco e
também os glóbulos vermelhos de 85 % das pessoas de raça
branca

anticorpo  anti-Rh
 SISTEMA Rh

anticorpo  anti-Rh

Animais Humanos

1963 Ac-LW Ac-antiD

 SISTEMA Rh

✓ mais complexo sistema de grupo sanguíneo em

humanos – 54 antígenos – altamente polimórficos

✓ Antígenos D, E, e, C, c, são os mais importantes

✓ depois do sistema ABO é o mais importante

sistema do ponto de vista transfusional
 SISTEMA Rh

✓ representa um dos sistemas de maior interesse clínico

➢ principal causa de DHPN

➢ reações transfusionais hemolíticas

➢ anemias hemolíticas auto-imunes

✓ Antígenos Rh  proteínas
 SISTEMA Rh

Antígenos Rh

✓ altamente imunogênicos

✓ exclusivamente eritrocitários (membrana)

✓ surgem  10ª semana de vida intra-uterina

 SISTEMA Rh

✓ D, E, e, C, c  responsáveis 99% problemas

clínicos relacionados ao sistema Rh

mais importantes transfusionalmente

✓ importância clínica  antígeno D

altamente imunogênico
Proteínas do sistema Rh
✓ 417 aminoácidos
✓ 12 segmentos transmembranares
✓ 6 alças extracelulares
✓ 5 alças intracelulares.

círculos azuis → aminoácidos RhD e RhCE

círculos de cor rosa → aminoácidos dos antígenos C/c
Círculos de cor roxa → aminoácidos dos antígenos E/e Fonte: Adaptado de Flegel

Flegel, WA. How I manage donors and patients with a weak D phenotype. Curr Opin in Hemat 2006; v.13:476-83.
 SISTEMAS DE GRUPOS SANGUÍNEOS
Principais
Grupo Tipo de Nº cópias
Antígenos Cromossomo
sangüíneo antígeno p/eritrócito
associados
250.000 a >
ABO A, B, AB, A1 Carboidrato 9q34.2
1.000.000
100.000 a
Rh D, C, E, c, e, Proteína 1p34.3-36.13
200.000
MNS M, N, S, s Glicoproteína 4q28.2-q31.1 200.000
3.500 a
Kell K, k, Kpa, Kpb Glicoproteína 7q33
17.000
Não
Lewis Lea, Leb Carboidrato 19p13.3 determinado
13.000 a
Duffy Fya, Fyb Glicoproteína 1q22-q23
14.000
14.000 a
Kidd Jka, Jkb Glicoproteína 18q11-q12
18.000
Diego Dia, Dib Banda 3 17q21-q22 1.000.000
P P1 Carboidrato 22q11.2-qter 500.000
Hh H Carboidrato 19q13.3 1.700.000
Semin. Hematol., v.41, n.2, p. 93, 2004
 SISTEMA Rh

• Nomenclatura

✓ Várias nomenclaturas  explicar origem dos antígenos

Baseada na caracterísitca genética do sistema Rh

➢ Teoria de Fisher-Race

➢ Teoria de Wiener
 SISTEMA Rh
➢ Teoria de Fisher-Race (terminologia CDE)
✓ produção dos antígenos  controlada por três pares de genes alelos
(D, d, C, c, E, e) cujos loci estreitamente ligados  complexo genético
(haplótipo) transmitido em bloco
Antígenos

Gene D D
Gene C/c C/c
Gene E/e E/e

Superfície da hemácia

Ex. complexos genéticos herdados: DCE, DCe, DcE, dCE, dcE, dce
 SISTEMA Rh
➢ Teoria de Wiener (terminologia Rh-Hr)
cada gene  codifica um antígeno (aglutinógeno)  composto de vários
fatores sanguíneos (determinantes sorológicos)  múltiplas especificidades

Gene Aglutinógeno Especificidades (fatores)

R0 R0 Rho, hr’, hr’’ (D, c, e)

R1 R1 Rho, rh’, hr’’ (D, C, e)

R2 R2 Rho, hr’, rh’’ (D, c, E)

RZ RZ Rho, rh’, rh’’ (D, C, E)

r r hr’, hr’’ (d, c, e)

r' r' rh’, hr’’ (d, C, e)

r’’ r’’ hr’, rh’’ (d, c, E)

ry ry rh’, rh’’ (d, C, E)

➢ Teoria de Wiener (terminologia Rh-Hr)
haplótipo → expressa três antígenos diferentes

R→D
r → ausência D Interpretações
1 ou (‘) → C
Não tiver 1 ou (‘) → c R1 = DCe R2 = DcE
r’ = dCe r” = dcE
2 ou (“) → E R0 = Dce r = dce
Não tiver 2 ou (“) → e Rz = DCE ry = dCE
z ou y → C ou E
➢ ISBT (Sociedade Internacional de Hemotransfusão)
teminologia numérica

Numérico
Rosenfield Fischer-Race Weiner ISBT
Rh1 D Rho 004001
Rh2 C rh’ 004002
Rh3 E rh” 004003
Rh4 c hr’ 004004
Rh5 e hr” 004005
 SISTEMA Rh
➢ Anteriormente  ambas teorias propunham
haplótipos a partir de 3 loci

➢ Atualmente
dois genes  RHD e RHCE
10 éxons em orientações opostas no cromossomo (3’RHD5’-5’RHCE3’)
separados por um gene independente SMP1 (Small Membrane Protein 1)

cromossomo 1 (p34-p36)
 SISTEMA Rh

GENÉTICA

✓ gene RHD  não possui alelos

codifica a produção do antígeno D

 SISTEMA Rh
GENÉTICA

✓ gene RHCE  existe na forma de quatro alelos

(RHCE, RHce, RHcE, RHCe)

cada alelo codifica a produção dos antígenos

C c E e
The genetics of the Rhesus Blood Group system

Blood Transfus 2007; 5: 50-57

 HERANÇA Rh

Rh positivo Rh negativo

Locus 1 RHD

Locus 2 RHCE RHCE

(alelos: RHCE, RHCe, RHcE, RHce ) (alelos: RHCE, RHCe, RHcE, RHce )

Locus 1 = codifica para a presença ou ausência de D

Locus 2 = codifica para a presença de CE, Ce, cE, ce

 PROTEÍNAS Rh

PROTEÍNAS PESO NÚMERO DE

FENOTIPO Rh
PRESENTES MOLECULAR AMINOÁCIDOS

Proteína D 32 kDa 417

D Positivo
Proteína CcEe 34 kDa 417

D Negativo Proteína CcEe 34 kDa 417

 SISTEMA Rh
Diferenças estruturais entre os antígenos D, C, c, E, e

✓ proteína D difere da proteína CcEe em 32 aminoácidos

➢ essa diferença  antígeno D imunogênico para os indivíduos

que não o possuem

✓ proteína C difere da proteína c em 4 aminoácidos devido a

mutações em seis nucleotídeos do gene RHCE

✓ proteína E difere da proteína e em 1 aminoácido devido a

mutações em 1 nucleotídeo do gene RHCE
Proteínas do sistema Rh
✓ 417 aminoácidos
✓ 12 segmentos transmembranares
✓ 6 alças extracelulares
✓ 5 alças intracelulares.

círculos azuis → aminoácidos RhD e RhCE

círculos de cor rosa → aminoácidos dos antígenos C/c
Círculos de cor roxa → aminoácidos dos antígenos E/e Fonte: Adaptado de Flegel

Flegel, WA. How I manage donors and patients with a weak D phenotype. Curr Opin in Hemat 2006; v.13:476-83.
Antígenos D C c E e
➢ CDe
➢ Cde
➢ Esses antígenos formam ➢ cDE
oito complexos gênicos, ➢ cDe
chamados de haplótipos RH ➢ cdE
➢ cde
➢ CDE
➢ CdE.
 Frequência dos Haplótipos
do sistema Rh segundo a etnia

freqüência

HAPLÓTIPOS brancos negros

CDe 41 8
cDE 17 7
cDe 3 49
CDE <1 <1
Cde <1 <1
cdE <1 <1
cde 37 25
CdE raríssimo raríssimo
 SISTEMA Rh
Fenótipo Rh negativo

Atualmente  3 mecanismos genéticos associados ao

fenótipo D negativo

✓ Deleção do gene RHD → mais frequente em caucasianos

✓ pseudogene RHD
mais frequente em asiáticos
e africanos
✓ Gene híbrido RHD-CE-D
 Fenótipo Rh negativo
A. Deleção do gene RHD B. Deleção do gene RHD

C. pseudogene RHD (stop códon) D. Gene híbrido RHD-CE-D

 Expressão do Fenótipo Rh
✓ proteínas RhD e RhCE não são glicosiladas
✓ PM 30kD
✓ inseridas na membrana eritrocitária ligadas à glicoproteína RhAG

✓ glicoproteína RH50 → 50 kDa

✓ codificada pelo gene RHAG localizado no cromossomo 6p12-p21 formando
assim o chamado "complexo Rh".
Antígeno D

◼ Características raras
Variantes

D Fraco ou D parcial
 Variantes do antígeno RhD
Antígeno RhD  extenso polimorfismo

➢Antígeno com fraca expressão  D Fraco

➢Antígeno modificado  D Parcial

D Fraco e D Parcial

 D variantes

Podem determinar formação de anticorpos em indivíduos RhD

negativos
 Variantes do antígeno RhD
D fraco (polimorfismo quantitativo)

✓ mutações de ponto missenses no gene RHD

(substituições de aminoácidos nas regiões transmembranares
ou intracelulares da proteína)

Flegel & Wagner, 2002

✓ número reduzido de antígenos RHD por hemácia sem

aparente perda de epítopos
✓ geralmente não desenvolvem anti-D

✓ frequência < 1% da população (mais comum em

afrodescendentes ou africanos)
Rh(D) – Normal Rh(D) – Fraco Rh(D) – parcial Rh(D)
– parcial fraco

Legenda: Epítopo Antígeno

 Variantes do antígeno RhD
D parcial (polimorfismo qualitativo)
✓ mutações de ponto missenses no gene RHD
(substituições de aminoácidos nas alças extracelulares
e dispersas na proteína)

✓ caracterizados pela ausência de um ou mais epítopos do

antígeno D

✓ é um antígeno D incompleto (não apresenta todos os epítopos

do antígeno D)
✓ também denominado D categoria

✓ sorologicamente é de difícil detecção

 D – Normal D - Fraco Rh(D)
– parcial Rh(D) – parcial fraco

Legenda: Epítopo Antígeno

 Identificação sorológica do
antígeno D fraco

➢ Apresenta uma reação de aglutinação fraca ou

negativa com antisoros anti-D (TA ou 37°C)

➢ Aglutinação intensificada pela ação de

potencializadores (antiglobulina humana)
 Variantes do Antígeno D
Significado clínico
✓ Indivíduos que expressam o antígeno D fraco
 fenotípicamente Rh positivos

Transfusionalmente
✓ Doadores D fraco  devem ser considerados
Rh positivos

✓ Receptores D fraco  transfundir sangue D

negativo
• Determinação Fator RhD

✓ Rh Positivo  presença antígeno RhD

✓ Rh negativo  ausência do antígeno RhD

Pesquisa de D fraco
 SISTEMA Rh

Anticorpos Rh

✓ Clinicamente significativos  reagem a 37°C

✓ resultam  aloimunização por
transfusão ou gravidez incompatível
✓ principalmente IgG

✓ ligam-se à membrana do eritrócito  hemólise

extravascular
 SISTEMA Rh
Anticorpos Rh

✓ anti-D  uma vez formado  persiste por muitos

anos

• Freqüência ➔ D > E > c > e > C

 Anticorpos Rh

✓ anti-D variante – D parcial

 aloimunização em D completo

 aloimuninização na ausência de D

- D fraco
 baixa expressão de D
→ seria aloimunizado???
 Variantes do Antígeno D
Significado clínico
✓ Indivíduos que expressam o antígeno D fraco
 fenotipicamente Rh positivos

Transfusionalmente

✓ Doadores D fraco  devem ser considerados

Rh positivos

✓ Receptores D fraco  transfundir sangue D negativo