Diagnóstico avançado

em citopatologia

• Profª Eduarda Fratoni

• Disciplina: Citopatologia
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Papanicolaou é considerado um método eficiente, rápido, de baixo custo, pois

tem a habilidade de identificar lesões precursoras do câncer do colo do útero.

Apresenta altas taxas de resultados falso-negativos;

O grande desafio é a padronização dos processos, pois, não havendo

padrão, não existe qualidade;
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• Citologia em meio líquido:

• Leitura dos espécimes por computadores;

• Apresentação em monocamada das células e a sua melhor preservação;

• Permite um ganho de cerca de 50% no tempo de leitura;

• Alguns autores apontam uma melhoria de 73% na produtividade do laboratório;

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• Vantagens:

• Melhor preservação e distribuição das células analisadas;

• Redução de muco, exsudato inflamatório e hemácias;

• Redução do tempo de leitura;

• Obtenção de preparações adicionais da amostra sem a necessidade de nova coleta de material;

• Utilização possível de resíduos para testes de biologia molecular para vírus como o HPV e outros
micro-organismos patogênicos entre eles a Chlamydia trachomatis e a Neisseria gonorrhoeae;

• Menor percentual de amostras insatisfatórias para a avaliação;

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• Desvantagens:

• Maior consumo de tempo no processamento técnico (em alguns métodos não automatizados);

• Maior custo;

• Necessidade de adaptação profissional à nova técnica;

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• Citologia de meio líquido pode ser realizada através de métodos automatizados e não automatizados;

• Entre os automatizados, os mais utilizados são:

- ThinPrep (Hologic, Inc., Marlborough, MA);

- SurePath (Becton, Dickinson and Company, Franklin Lakes, NJ);

• Os métodos não automatizados incluem:

- Liqui-Prep;
- Gel hidroalcóolico entre outros;
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• ThinPrep:
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• ThinPrep:
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• ThinPrep: etapas de dispersão, coleta das células e transferência das células para a lâmina;
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O equipamento cria correntes, através de agitação, que separam detritos,

dispensando interferentes como o muco. Por uma filtragem a vácuo, uma
fina camada de células é transferida para uma área delimitada na lâmina.
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• SurePath (BD Sure Path Pap test): O cuidado com a fase pré-analítica do processo e a
padronização das etapas como preparo, coloração e o escrutínio, são os principais enfoques desta
metodologia.
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• SurePath (BD Sure Path Pap test):

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• SurePath (BD Sure Path Pap test):
Processa e cora 48 amostras
simultaneamente em 58 min;

Possibilidade de testes de biologia molecular adicional (Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae e HPV) e
leitura automatizada das amostras.
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• BD FocalPoint GS Imaging System;

• BD FocalPoint GS Review Station;

• Leitura automatizada:
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• Liqui-Prep:

• Citologia em base líquida, de forma não automatizada;

• Pode ser aplicado às amostras cervicais e a líquidos como urina, LCR e outros;
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• Principais Funções das Soluções que compõem a metodologia Liqui-Prep:

• Preservativo das amostras – Evita o crescimento de bactérias no transporte, estabiliza a amostra até
90 dias facilitando a sua chegada ao Laboratório, permite o transporte e estocagem da amostra em
temperatura ambiente e preserva as células;

• Liqui-Prep Cleaning Solution - Consiste de uma solução que tem a propriedade de separação física,
ou seja, as células são separadas pela densidade gradativa, o que mantém o sangue e o muco na
superfície;

• Liqui-Prep Cellular Base - Atua como adesivo especial entre as células e as lâminas de vidro padrão
usadas em laboratórios;
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• Imunocitoquímica:

• Técnica que detecta proteínas específicas de amostras citológicas com anticorpos específicos;
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Cromógeno 3-3’-diaminobenzidina
(DAB) – coloração amarelada;
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• Utilizada em patologias mamárias;

• Identificação do tipo de tumor (invasivo, in situ, ductal, lobular);

• Definição de metástase;

• Marcador caderina-E = positivo em carcinoma ductal e negativo em lobular;

• Citoqueratina de alto peso molecular 34 E12 = positiva em carcinoma lobular e negativa em ductal;

• Utilizada em patologias cervicais;

• Expressão de P-caderina em adenocarcinoma in situ, adenocarcinoma invasivo, HSIL, carcinoma

escamoso invasivo;

• p63 negativo para lesões glandulares e positiva para HSIL;

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• Biologia Molecular:
• Hibridização in situ com fluorescência:

• Técnica altamente sensível e específica;

• Detecta a presença ou ausência de determinada sequência de DNA;

• Sonda marcada com moléculas fluorescentes;

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• Hibridização in situ com fluorescência:
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• Biologia Molecular:
• Reação em cadeia da polimerase (PCR):

• Para HPV
- Detecta 14 subtipos de alto risco: 16,18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, e 68;
- Quando houver presença de HPV 16 e/ou 18 o teste propicia a genotipagem especificamente desses
dois tipos;

• Para Chlamydia trachomatis;

• Para Neisseria gonorrhoeae;

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• Microscopia eletrônica de varredura: