PCR

EM
TEMPO REAL
 INTRODUÇÃO

Também conhecido pelos nomes qPCR, RT-qPCR, ou PCR quantitativo, é uma técnica laboratorial que utiliza a reação
em cadeia polimerase.
O princípio do procedimento é baseado na duplicação de cadeias de DNA “in vitro”, essa cadeia pode ser repetida diversas
vezes, para gerar quantidade de DNA o bastante para realizar muitas análises, pois um único fragmento pode gerar milhões
de cópias.
PCR CONVENCIONAL E
PCR EM TEMPO REAL
PCR OU A REAÇÃO EM CADEIA DE POLIMERASE

Produz números de cópias em grandes escalas para uma determinada

sequência de DNA alvo para diversas análises

Resultados apenas qualitativos

Resolução do gel de agarose é pobre

O processo do PCR demanda bastante tempo para

prazos curto na liberação dos resultados

Aumentam a chance de contaminação no processamento

pós-PCR
PCR EM TEMPO REAL OU qPCR

Variação mais avançada do PCR

O processo é mais rápido, mais preciso, apresenta maior

reprodutibilidade
O processo é quantitativo

Detecta, amplifica e quantifica, acelerando a retirada de

resultados diminuindo os riscos de uma possível
contaminação
TESTE
PCR
No período entre 1998 a 2013, com o objetivo de avaliar o potencial do RT-qPCR, foram selecionadas 616 amostras de
pacientes com meningite, utilizando líquido cefalorraquidiano. Foram coletados RNAs das amostras usando o método
QIAamp, e o ensaio TaqMan foi aplicado.
A avaliação foi feita por meio de comparação dos resultados do RT-qPCR com os resultados do método de isolamento em
cultura celular. Das 616 amostras utilizadas, 15,2%, ou seja, 94 delas foram positivas para a infecção viral EV no RT-
qPCR; já na cultura celular, 9,4% das amostras deram resultado positivo.
De acordo com a Revista do Instituto Adolfo Lutz, os valores de sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e
valor preditivo negativo foram de 89, 70%, 92, 40%, 55, 30% e 98, 90%, respectivamente. O RT-qPCR foi ligeiramente
superior à cultura viral para a detecção de EV no LCR