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Laboratórios VB - Claudia

Swot:
- Vantagens da tecnica
- desvantagens da tecnica
- aplicações, o que permite fazer com esta tecnica
- comparação com técnicas que possam fazer o mesmo, o que faz frente
ao pcr, ameaças

O pcr só por si, só sabemos se esta a funcionar ou não depois do gel


O real time pcr não temos de fazer gel, porque os dados estão a ser
processados. É por sondas que emitem fluorescência que tao a ser
processados no computador e que nos mostram o grafico, se não estiver a
funcionar nós paramos na altura e não e preciso estar 2 horas á espera
para se concluir se funcionou ou não. Stora

Slides Marta- capitulo 1


Tecnica de pcr- reação em cadeia da polimerase- que permite amplificar
moléculas de DNA. Este é um método de amplificação de DNA sem o uso
de um organismo vivo, ao contrário da amplificação de DNA plasmidico
recorrendo à transformação de e.coli. O pcr veio facilitar as sequenciacoes
em massa dos genoma e possibilitar diversas outras técnicas de
engenharia genética.

Slides Marta- capitulo tecnologias de pcr

Requisitos da tecnica de PCR


- primers: servem de inicio para a amplificação de uma cadeia de DNA; são
necessários 2 primers para copiar um fragmento de DNA de cadeia dupla;
são colocados em largo excesso na reação do PCR; definem a região que é
amplificada.
- DNA polimerase termo-estavel:
O PCR é uma das ferramentas mais utilizadas/inovadoras para o estudo
dos ácidos nucleicos, pois e uma tecnologia altamente sensível,
reprodutível é muito eficiente e que consome pouco tempo, o que
permite obter resultados confiáveis e fáceis de avaliar.
Os resultados produzidos pelo pcr são qualitativos enquanto que os por
real time PCR são quantitativos.
Pcr : reação em cadeia da DNA polimerase
Atualmente sabemos que a missão do PCR é copiar uma sequência
específica de DNA milhões de vezes, por meio de uma catalise poderosa
realizada por uma enzima, a DNA polimerase , de modo a que pequenas
quantidades de DNA podem ser sintetizadas e copiadas fielmente e ser
analisadas para diversos fins.
O desenvolvimento desta técnica permitiu estudar e manipular melhor o
DNA, facilitando o estabelecimento de protocolos em biologia molecular.
Uma das maneiras recentes de detetar e quantificar ácidos nucleicos e por
PCR em tempo real
Hoje em dia, o PCR é aplicado em diferentes áreas das ciências biológicas
e da saude, integrando parte do trabalho cientifico de muitos laboratórios
investigação que usam o PCR principalmente para a expressão genica,
genotificacao, deteção de patogénicos e analise de mutações.
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