Curso: Biomedicina

Valor da avaliação:
Disciplina-Turma: Técnicas Moleculares e laboratoriais
(x) AV1 ( ) AV2 ( ) AVS ( ) 2ª Ch. AVS
Professor(a): Natália de Morais Cordeiro
Data: 24/09/2021
Aluno(a):PRISCILA SAILLOT DIAS MATTEDI
Matrícula:6501195

1. Classifique como verdadeiras ou falsas as seguintes afirmações, justificando as falsas:

a) Na técnica de PCR, a etapa de emparelhamento é essencialmente uma hibridação. VERDADEIRA

b) Em geral, as experiências com PCR requerem um único primer.FALSA. DOIS PRIMERS SAO USADOS PARA
CADA REAÇÃO DE PCR
c) A técnica de PCR é constituída por diversas etapas que se repetem por 3 ciclos. FALSA.São 3 etapas:
desnaturação, anelamento ou hibridação e extensaõ ou polimerização. O procedimento é repetido muitas vezes até que o nível desejado de
amplificação seja obtido.Na prática, a amplificação efetiva do DNA requer de 20 a 30 ciclos de reação, com os produtos de cada ciclo
servindo como DNA-molde para o próximo – dando origem ao termo “reação em cadeia” da polimerase

d) Na reação de PCR, durante o processo de polimerização, o DNA neo-sintetizado pode sofrer mutações.
VERDADEIRA
e) Existem diferentes tipos de DNAs polimerases termoestáveis, que podem ser utilizadas
indiscriminadamente nas reações de PCR. FALSA. Somente a Taq Polimerase pode ser
utilizada.

2) Fale sobre as DNAs polimerases utilizadas no PCR, seu uso e características.

As DNAs polimerazes são responsáveis por fazer o alongamento da fita lider continua, a mesma chega após o Primer e ela coloca
novas bases com novos nucleotídeos. DNA Polimerase usada na PCR é chamada de Tac Plimerase. É necessária para fazer novas
fitas de DNA usando as existentes como moldes. Ela faz cópia no sentido 3’-5’ de forma contínua, porem no sentido 5’- 3’ não é
capaz de fazer, criando espaços que são chamados de Fragmentos de Okasaki

3) Um pesquisador pretende amplificar por PCR a região reguladora de um gene de B. subtilis, contida na
sequência abaixo indicada:

5’ ACTGATGCTAGTGACACCCAG ... (150 pb) ... ACTTACATTAGGAAATTCAAA 3’

Que primers permitem amplificar a região?

a) 5’ ACTGATGCTAGTGAC 3’ e 5’ ATTAGGAAATTCAAA 3’
b) 5’ TGACTACGATCACTG 3’ e 5’ TAATCCTTTAAGTTT 3’
c) 5’ ACTGATGCTAGTGAC 3’ e 5’ TTTGAATTTCCTAAT 3’
d) 5’ GTCACTAGCATCAGT 3’ e 5’ TAATCCTTTAAGTTT 3’
e) 5’ GTCACTAGCATCAGT 3’ e 5’ ATTAGGAAATTCAAA 3’

LETRA C

4) Descreva características de um primer e sua utilidade.

Pedaço de RNA Sintetizado por uma RNA Polimerase e especial chamada Primase. São utilizados para
direcionar a síntese do Dna em ciclos repetidos