Tema:

Centrifugação

Until Luciano 1
 Centrifugação:
É um processo de separação em que a força centrífuga relativa gerada pela rotação da

amostra é usada para sedimentar sólidos em líquidos, ou líquidos imiscíveis de diferentes

densidades, separando-os. É usada em diferentes aplicações laboratoriais, industriais e

domésticas.

Segundo ALVES (2010: 27) a centrifugação consiste em utilizar diferentes forças para

separar as partículas que se encontram em suspensão em um líquido. Estas partículas podem

ser glóbulos graxos, microrganismos ou impurezas. Realizar a centrifugação é acelerar o

processo de decantação. Se o objectivo for separar rapidamente o sólido de um líquido,

podemos submeter a mistura a uma centrífuga. Ela vai girando em alta velocidade e

depositando no fundo as partículas sólidas, que são mais densas.

 Técnicas de centrifugação

A centrifugação é uma operação unitária amplamente utilizada nas

áreas industriais e em bioquímica, biotecnologia, biologia celular
molecular, com a principal finalidade de separação de fracções ou a
concentração das moléculas de interesse. Pode ser realizada com o
objectivo de separar sólidos de líquidos ou mesmo uma mistura
de líquidos. . Em geral, estas são introduzidas em tubos de diferentes
tamanhos, que são dispostos num rotor de centrífuga. As centrífugas
estão normalmente adaptadas para a utilização de diferentes tipos e
tamanhos de rotores, conforme a velocidade e aplicação desejadas.
Cont.
Quando uma suspensão de partículas é centrifugada a sedimentação das partículas
é proporcional à força aplicada. As propriedades da solução também irão interferir
na taxa de sedimentação.

Qualquer corpo ou partícula que apresente um movimento circular uniforme está

submetido a uma força centrípeta, que tem como referência, o centro da trajectória
circular que a partícula descreve, e pode ser representada pela relação:

Fc = m . ac = m .v2/r , onde:

m = massa do corpo;

ac = aceleração centripetal

v = velocidade;
r = raio de rotação
 Factores que influenciam:

 Viscosidade da massa;
 Concentração da massa;
 Tamanho e regularidade dos cristais;
 Rapidez da aceleração;

 Força centrífuga: velocidade/ diâmetro;

 Tempo de friagem e descarga.
 Tipos de centrifugação

 Centrifugação isopícnica ou de equilíbrio;

 Centrífuga De Tambor;
 Centrífuga De Prato Ou Disco;
 Centrífuga Tubular ;
 Centrifugação em gradiente de densidade/ zonal de
velocidade
 Centrifugação isopícnica ou de equilíbrio

é usada na separação de macromoléculas recorrendo a gradientes de concentração da

solução base usada para a separação das partículas.
• De acordo com AGUIAR (2009: 96), a centrifugação zonal isopícnica (isopícnico:
de igual densidade) permite a separação de partículas com base na sua diferença de
densidade e não da sua forma ou tamanho e é independente do tempo, ou seja, uma
vez a partícula atingindo a sua zona isopícnica, mesmo que se prolongue a
centrifugação, a partícula não sai dessa zona. A força centrífuga faz com que as
partículas se movam ao longo do tubo em direcção ao fundo, mas estas ao entrarem
numa zona do gradiente mais densa voltam à sua posição anterior.
 Centrífuga De Tambor

Centrífuga de tambor de câmaras múltiplas é utilizada somente para a

clarificação de líquidos como, por exemplo, óleos isentos de água. O
tambor é dotado de 2 a 8 elementos, cilíndricos, interno o que resulta
na divisão do tambor em uma série de câmaras anelares unidas
consecutivamente. O produto a ser clarificado entra no tambor pelo
centro, escoando consecutivamente por cada câmara anelar a partir da
câmara mais interna. Em cada câmara, conforme o diâmetro vai
aumentando a aceleração centrífuga, fazendo o produto escoar por
zonas centrífugas cada vez maiores, até o final do processo.
 Centrífuga De Prato Ou Disco

Neste tipo de centrífuga, o processo de separação é realizado num

conjunto de pratos ou discos, que consiste em um grande número de

peças cônicas colocadas uma sobre a outra. Com este tipo de arranjo, a

câmara de separação fica subdividida em vários recintos individuais de

acordo com a quantidade de discos pelo qual o produto escoa em camadas

finas e, obtém-se assim, percursos mínimos de sedimentação para as

partículas. Estas centrífugas operam a velocidade de 3.000 a 20.000 vezes

a gravidade, e proporciona um sistema de clarificação contínua que

atende produtos com um conteúdo de sólidos de 1 a 2%.

 
 Centrífuga Tubular

A centrífuga tubular consiste em um tubo sólido fechado em ambas as

extremidade e que, normalmente é alimentada com dois líquidos de
densidades diferentes, por uma entrada no fundo
A fase mais pesada se concentra contra a parede do cilindro, enquanto a fase mais leve flutua sobre ela.
As duas fases são separadas por meio de uma placa defletora que as descarrega em dois fluxos
distintos.
 Centrifugação em gradiente de densidade/ zonal de velocidade

WILSON & WALKER (2010: 19), a centrifugação zonal de velocidade permite a

separação de partículas com diferenças de velocidade de sedimentação
relativamente pequenas, sendo complementar da centrifugação diferencial. A
amostra contendo as partículas a separar (organelos ou macro moléculas de grandes
dimensões) é aplicada no topo de um gradiente contínuo de densidade resultante da
deposição em camadas distintas de soluções com densidades decrescentes.
A separação das partículas deve efectuar-se antes da sedimentação completa. O
tempo de centrifugação deverá ser o suficiente para que as partículas caminhem ao
longo do gradiente, formando zonas ou bandas. A migração de cada componente,
segundo uma ou banda, a uma velocidade própria depende: da força centrífuga, da
dimensão e forma da partícula, da densidade e viscosidade do meio – suporte.
 Princípios básicos de sedimentação

Ao planejar um protocolo de centrifugação, é importante ter em mente que:

 Quanto mais densa a estrutura biológica, mais rapidamente ela sedimenta num campo

centrífugo;

Quanto mais massiva a partícula biológica, mais rapidamente ela se move num campo

centrífugo;

Quanto mais denso o sistema tampão, mais lentamente a partícula vai se mover num

campo centrífugo;

 Quanto maior o coeficiente de fricção, mais lentamente a partícula vai se mover;

Quanto maior a força centrífuga, mais rapidamente a partícula sedimenta;

A velocidade de sedimentação de uma dada partícula será zero quando a densidade da

partícula é igual à do meio circundante.

 Cuidados a ter com a centrífuga

Verifique se o rotor correto está sendo usado e se ele está corretamente

instalado no eixo. Verifique se o rotor está preso antes de iniciar.

Equilibre a carga no rotor - cada tubo necessita de um tubo de

equilíbrio no compartimento oposto, com o mesmo volume de fluido;

  Verifique se você está usando o tubo de centrífuga apropriada para o

trabalho - eles podem se romper a uma velocidade muito alta. Você vai

precisar de tubos especiais para altas velocidades de centrifugação.

 
Obrigado pela atenção
dispensada

Fim.
Cont.

Refrigere o compartimento de centrifugação e o rotor antes da

utilização. Rotores devem ser armazenados em um refrigerador,

quando possível.

  Não tente substituir quaisquer características de segurança da

centrífuga.

  Nunca deixe a centrífuga até que atinja a velocidade máxima e

esteja sem ruídos.

 Em caso de dúvida, peça ajuda a outro profissional.