Cromatografia de íons acoplada à

espectrometria de massa de alta

resolução para rastrear
substâncias aniônicas altamente
polares em águas subterrâneas

Gabriela Dalmora - PPGCTA

 INTRODUÇÃO
Contaminantes antropogênicos e orgânicos estão onipresentes no meio ambiente.

• Persistentes
• Móveis
• Tóxicos
• Muito persistentes
• Muito tóxicos

Os métodos analíticos para esses produtos químicos ainda não atingiram todo o seu potencial
 INTRODUÇÃO
Devido à extensão de métodos analíticos apropriados nos últimos anos, um número crescente de substâncias
está sendo descoberto

• Ácido trifluoroacético (TFA )

• Ácido cianúrico
• Pesticidas
 INTRODUÇÃO
As principais limitações para análise de compostos iônicos e muito iônicos são

Preparo da Separação
amostra Cromatográfica

O preparo da amostra vem sido amplamente substituído pela injeção devido ao uso de
espectrômetros de massa cada vez mais sensíveis.
INTRODUÇÃO

Cromatografia Cromatografia
aniônica iônica

Composto Íons
VPM/PMT Inorgânicos
 Objetivos

1 2

Lacuna analítica Desenvolver

método analítico
Ajudar a preencher a lacuna analítica Método analítico sensível baseado em
para contaminantes aniônicos cromatografia de íons acoplado com
altamente polares ionização eletrospray para HRMS/MS
 2
MATERIAIS E MÉTODOS
 Produtos Químicos e padrões

70 substâncias
A paleta de substâncias foi escolhida com base em sua especiação
(valores pk a calculados ), log DValores OW , relatados na literatura e
disponibilidade de padrões de referência.
 Amostragem de campo

Coletou-se quatro amostras compostas por semana, enquanto uma amostra composta foi produzida
reunindo amostras coletadas a cada 15 minutos por 42 horas.

Aproximadamente 100 mL por amostra foram colocados em recipientes de polipropileno e congelados

a -20 °C e armazenados no escuro até a análise em novembro de 2022. A
Preparação da amostra
IC-ESI-HRMS/MS
RPLC-ESI-HRMS/MS
 Quantificação e validação do método

• A quantificação das concentrações do analito foi realizada com o método de calibração de padrão interno,
preparando amostras de calibração

• Alguns compostos não provaram linearidade em toda a faixa de níveis de calibração, portanto, seu
nível de calibração mais alto foi reduzido para 1000 ng/L.

• O desvio padrão relativo foi então considerado como a precisão para o respectivo composto
 3
Resultados e discussão
 Desenvolvimento de método
Otimizando as condições do MS

A mistura padrão (10 mg/L) foi injetada a uma taxa de 0,01 mL/min para um fluxo de 0,35 mL/min de água com
0,2 mL/min de solvente de reposição enquanto mudava:

a) A temperatura do capilar de transferência iônica de

300 a 400 °C em etapas de 20 °C,
b) A temperatura do gás auxiliar de 300 a 500 °C em
etapas de 50 °C
c) A tensão de pulverização de -2,0 a -3,4 kV em
etapas de -0,2 kV.
 Desenvolvimento de método
Otimizando as condições do MS

Além de diferentes configurações de ESI, diferentes solventes de maquiagem foram examinados, acetonitrila ,
etanol e metanol, cada um deles corrigido com 2 mM de fluoreto de amônio como um modificador para
aumentar a ionização no modo negativo.

Todos os compostos tiveram melhor desempenho

em etanol

O solvente de maquiagem puro sem NH 4 F teve

um desempenho melhor do que com o modificador,
indicando que todos os ânions estão
suficientemente ionizados
Preparação da amostra

Precipitação de ânions
Remoção de Cloretos e sulfatos com
cartuchos.
Aqui, as resinas de troca catiônica
liberam íons de bário e prata na troca
com outros cátions, precipitando e
imobilizando sulfato e cloreto,
respectivamente
 Preparação da amostra

Enriquecimento das
amostras
O sucesso do enriquecimento da
amostra foi examinado comparando
três séries de calibração preparadas em
água evian®. A primeira série não foi
tratada enquanto a segunda foi tratada
apenas com cartuchos e a terceira com
cartuchos e VEC.
 Enriquecimento da amostra

• O número de substâncias compatíveis foi substancialmente maior em IC do que em RPLC em

todos os três tratamentos.

• Nas amostras enriquecidas, 16 compostos foram detectados apenas por IC em comparação

com RPLC, enquanto dois foram detectados apenas por RPLC.

• Isso demonstra a superioridade do IC ao analisar substâncias pequenas, altamente polares e

aniônicas
 Separação Cromatológica

Observou-se que moléculas pequenas e fortemente iônicas são separadas melhor em IC do que em RPLC.

Todos os compostos tiveram tempos de retenção estáveis ​nas medições, larguras de pico abaixo de 45 s e
não apresentaram cauda significativamente, exceto o ácido cianúrico, que exibiu alguma cauda ruidosa.
 Validação de método e garantia de
qualidade
Efeitos de matriz das águas subterrâneas durante o ESI

• O fator de matriz para águas subterrâneas durante o ESI pode ser determinado para 64 compostos.

• Um número significativo de compostos parece ser afetado pela supressão de sinal. Eles foram causados ​
principalmente por ânions inorgânicos interferentes como flúor, nitrato e sulfato durante ESI

• O sulfato foi insuficientemente removido pelos cartuchos aplicados, enquanto o flúor e o nitrato não
puderam ser removidos das amostras de qualquer maneira
 Limites de quantificação em águas
subterrâneas
Os limites de quantificação em água ultrapura puderam
ser determinados para todos os 70 analitos,

Os LOQs da matriz puderam ser determinados para 64

compostos

Onde 78% tinham um LOQ de matriz abaixo de 80 ng/L

em comparação com água ultrapura

Tal fato evidencia novamente o efeito da supressão de

sinal pelo nitrato de ânions inorgânicos enriquecidos e
sulfato
 Ocorrência de analitos em águas
subterrâneas
Dos 64 analitos, doze foram encontrados acima
de sua matriz LOQ.

Os valores e estruturas de Log D OW foram

previstos e desenhados usando o Marvin Sketch
(ChemAxon).
.
 Clorotalonil TPs

Na análise RPLC, o clorotalonil TP R417811

foi encontrado em todas as amostras em
concentrações >100 ng/L.

Na análise de IC, o clorotalonil TP R417811

foi fortemente suprimido pelo sulfato,
tornando-o não quantificável.
 Dimetenamida TPs
Concentrações máximas dimetenamida de 790
ng/L em 27 de junho durante um evento de chuva
logo após sua aplicação

No entanto, concentrações elevadas de

dimetenamida TPs OXA, ESA e M31
toxicologicamente não relevantes ocorreram
apenas com eventos de precipitação cerca de
duas semanas depois
 Ácido cianúrico, ácido sulfâmico e ácido
trifluoroacético
Ácido Cianúrico = 970 ng/L
Ácido Sulfâmico= 5600 ng/L
Ácido Trifluoroacético= 2800 ng/L

Enquanto o ácido sulfâmico e o TFA ocorreram

em quase todas as amostras e o ácido
cianúrico ocorreu predominantemente nos
períodos de precipitação intensa em julho em
25 das 86 amostras.
 4
Conclusões
Sucesso no método Enriquecimento com
Um método utilizando separação
VEG
de IC e detecção por HRMS/MS,
sensível para uma ampla gama de Não foi seletivo e os componentes
substâncias aniônicas polares foi da matriz, como íons de sal
desenvolvido com sucesso predominantes nas águas
subterrâneas, podem interferir no IC-
MS

Estudos futuros
Abordagens alternativas de limpeza
de amostra devem ser exploradas no
futuro para reduzir os efeitos da
matriz e fazer uso de todo o tempo
de execução cromatográfica,
especialmente em relação ao sulfato,
nitrato e fosfato
Obrigado pela
atenção