Equ28-04 Sysmex XE2100 Inter of Hemograma Portugtuese

HEMOGRAMA COMPLETO
SANGUE TOTALAutomao Sysmex XE 2100

Non-Smile Contributor
Document Number:
Equ28-04
Effective (or Post) Date:
13-Jan-09
Document Origin: HNSC
Company:
NA
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Review by
Heidi Hanes
Review date
13-Feb-12
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Author: NA
GRUPO HOSPITALAR CONCEIO

HOSPITAL NOSSA SENHORA DA CONCEIO
C.R. LABORATRIO DE ANLISES CLNICAS SETOR DE HEMATOLOGIA
HEMOGRAMA COMPLETO
Procedimento Operacional Padro
SANGUE TOTAL
Data da 1 verso: 06/12/2002
Automao Sysmex XE 2100
Verso n.: 4
Data da efetivao:
POP: H01
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1. Sinonmia:
Hemograma. Mnemnico: HEM
2. Aplicabilidade:
Bioqumicos e auxiliares de laboratrio do setor de hematologia do LAC-HNSC.
3. Aplicao clnica:
Exame laboratorial de rotina para avaliao quantitativa e qualitativa dos elementos figurados
do sangue. Sofre alteraes significativas tanto nas doenas hematolgicas quanto em doenas
das mais variadas patogneses, tendo, por isso, grande valor preditivo e diagnstico.
composto pelos seguintes parmetros: Contagem de eritrcitos, dosagem de hemoglobina,
determinao do hematcrito, volume corpuscular mdio (VCM), hemoglobina corpuscular
mdia (HCM), concentrao hemoglobnica corpuscular mdia (CHCM) e amplitude de
distribuio dos eritrcitos (RDW) que compem o eritrograma; contagem de leuccitos e
frmula leucocitria que compem o leucograma.
4. Principio do teste:
O hemograma realizado em equipamentos de automao total (Sysmex XE 2100) com
reavaliao microscpica.
O funcionamento e medidas realizadas baseiam-se na citometria de fluxo usando
semicondutor laser, foco hidrodinmico, impedncia eltrica, SLS-mtodo de deteco da
hemoglobina (absoro espectrofotomtrica), rdio freqncia, difuso direta e fluorescncia
direta.
5. Amostra:
5.1 Preparo do paciente:
Sempre observar as orientaes do mdico assistente.
Apenas evitar colheitas de material aps exerccio fsico (causa leucocitose) e nas duas horas
que sucedem refeies fartas e ricas em gordura. As diferenas nas contagens do repouso
deambulao (aumento de 2 a 5% na hematimetria) e da manh para a tarde (aumento na
contagem de leuccitos), no apresentam significao clnica. Sempre observar as orientaes
do mdico assistente. Vide POP-L4 Coleta.
5.2 Tipo de amostra:

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Sangue total anticoagulado com EDTA K3 ou K2 (p ou soluo) na concentrao final de
1,5 a 2,2 mg/ml.
5.3 Colheita:
Observar as precaues universais para puno venosa. A colheita pode ser realizada a
qualquer hora, observando as recomendaes do mdico assistente. Utilizar uma das veias da
fossa antecubital (baslica, cubital mdia, ceflica ou ceflica acessria). Usar seringa ou tubo
a vcuo. Tubos a vcuo contendo EDTA K3 (frascos de tampa roxa) com volume de
aspirao preconizado (pediatria: 2,0ml; adultos: 3,0 a 4,5ml).
5.4 Preservao e transporte:
Transportar o material colhido a temperatura ambiente e dentro das normas de segurana
legais. A amostra deve ser encaminhada ao laboratrio o mais rpido possvel, sendo ideal a
realizao do exame dentro de 6h aps a colheita.
5.5 Identificao da amostra:
Etiqueta com cdigo de barras gerada pelo sistema de gerenciamento de dados do LAC
(Sistema Esmeralda). A etiqueta deve ser posicionada nos fracos de colheita a partir da
tampa para o fundo em linha reta de forma que o cdigo de barras fique visvel e alinhado,
sem enrugamentos.
5.6 Estabilidade e armazenamento:
A estabilidade da amostra colhida com EDTA K3 ou K2 de 8h temperatura ambiente e de
24h se refrigerada (2 a 8C). Amostras podem ser utilizadas, para confirmao de resultados,
at 48h aps a colheita desde que mantidas sob refrigerao (2 a 8C). As amostras so
armazenadas em geladeira (nmero de patrimnio: 10939) por 48h aps a realizao do
hemograma para confirmao de resultados, se assim solicitado.
5.7 Amostras Inadequadas:
Colhidas em frascos errados, mal identificadas, congeladas, coaguladas e em volume
inadequado ao tubo usado.
6. Reagentes e materiais:
Corantes:
Soluo de corante May-Grnwald-Giemsa.
Corante pantico rpido.
Reagentes para automao:
Cellpack Soluo de diluio: impedncia e processo ptico (bombonas de 20 l),
Cellsheath Soluo de fluxo duplo: focagem hidrodinmica (bombonas de 20 l),
Stromatolyser FB Lise neutrfilos/basfilos: impedncia e processo ptico (frasco de 5 l),
Stromatolyser 4DL Lise eritrcitos: impedncia e processo ptico (frasco de 5 l),
Stromatolyser 4DS Colorao leuccitos: citometria de fluxo (sache de 42ml),
Stromatolyser NR Lise e colorao eritroblastos: citometria de fluxo (frasco 1 l + 12ml),
Sulfolyser Lise eritrcitos e complexo cromtico hemoglobina: fotometria (frasco de 5 l),

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Stromatolyser IM Leuccitos imaturos: impedncia e processo ptico (bombonas 10 l),
Ret search II Lise/colorao reticulcitos: difuso/fluorescncia direta (frasco 1 l + 12ml).
Materiais:
Lminas: lminas de vidro para microscopia, tamanho aproximado de 25 x 76 mm. Lminas
de vidro lapidadas nas quadro faces, tamanho aproximado de 25 x 76 mm com uma das
extremidades reduzidas (distensora).
Reagentes para calibrao e controle de qualidade:
Sangue controle: e-CHECK, sangue estabilizado para uso in vitro, Sysmex America, Inc.
Calibrador: X-Cal, uso in vitro, Sismex America, Inc.
6.1 Preparo:
Vide Anexo-02 Colorao de lminas, para preparao dos corantes. Demais reagentes so
produtos comerciais pronto para uso.
6.2 Estabilidade:
A estabilidade dos reagentes de automao de 60 dias aps a abertura e/ou instalao no
equipamento, salvo Sulfolyser que de 90 dias. O corante pantico rpido em uso possui
estabilidade de 7 dias e de 3 anos quando no frasco original. O corante May-GrnwaldGiemsa em uso possui estabilidade de 24 horas e de 6 meses quando no frasco original.
6.3 Armazenamento:
Temperatura ambiente e abrigo da luz solar, exceto sangue controle e calibrador (em
geladeira: 2 a 8C).
7. Equipamentos:
Um equipamento de automao Sysmex XE 2100 (com contagem de reticulcitos) e dois
equipamentos de automao Sysmex XE 2100 D (sem contagem de reticulcitos). Cada
equipamento composto pelos seguintes mdulos: analisador, Unidade pneumtica, Estao
de dados e Impressora. Para maiores detalhes vide POPE-H01 Sysmex XE 2100.
8. Calibrao:
A calibrao dos equipamentos realizada anualmente pelos tcnicos da Sismex/Roche.
9. Procedimento (passo a passo):
Preparao das amostras:
Amostras de paciente: as amostras sero entregues no setor de hematologia (bancada de
registro de material) provenientes do ambulatrio, postos de sade comunitria, emergncia e
hospitais (HCC, HCR e HNSC). Avali-las quanto a identificao, posio do rtulo, volume,
cogulos e microcogulos. Amostras mal identificadas devem retornar ao setor
administrativo. Amostras de pouco volume devem ser tratadas individualmente e seus
resultados avaliados. Amostras coaguladas sero rejeitadas incondicionalmente, devendo o

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auxiliar de laboratrio providenciar sua nova colheita conforme rotina preconizada. Vide
POP-L14 Sistema de informatizao laboratorial.
Preparao dos mapas de trabalho:
Retirar os mapas de trabalho conforme rotina preconizada (sistema esmeralda). Vide POPL14 Sistema de informatizao laboratorial. Fazer a separao dos mapas priorizando:
Emergncia, HCR, HCC, HNSC e ambulatrio-postos de sade comunitria. Separar as
amostras com os respectivos mapas de trabalho seguindo a prioridade estabelecida acima,
identificar, numerando seqencialmente, os tubos de amostras com os respectivos mapas de
trabalho. Colocar os tubos j identificados nas racks do equipamento de automao, atentar
para que os cdigos de barra fiquem voltados para frente (para leitura no equipamento).
Observar que a numerao seqencial e nica para as amostras independentemente da
origem. Inicia em 1, diria e por turno (diurno: 1,2,3...n e noturno: 1,2,3...n). Numerar o
mapa de trabalho mesmo das amostras faltantes, registrando seu nmero, nome do paciente e
exames a realizar em caderno prprio para este fim. Anotar em, caderno prprio, o ltimo
nmero seqencial utilizado, ficando assim assegurada a correta identificao numrica da
prxima amostra. Observar, no mapa de trabalho, a existncia de outra solicitao mdica que
no hemograma:
Reticulcitos: separar o tubo para anlise no equipamento de automao apropriado (Sysmex
XE 2100 Sysmex 2) ou processar o teste manualmente. Vide POP-H07 Reticulcitos.
VHS (somente para amostras realizadas no mesmo tubo do hemograma): numerar o rtulo do
VSG com o mesmo nmero do hemograma, separar o material, se possvel, e process-lo. Se
no for possvel a separao, colocar o rtulo numerado em um tubo (vazio) de automao
para VSG e aps a realizao do hemograma processar o VSG. Vide POP-H11 Velocidade
de hemossedimentao.
Teste de falcizao: preparar a lmina. Vide POP-H09 Teste de falcizao.
Teste de fragilidade osmtica: avisar o bioqumico responsvel pela realizao do exame para
process-lo aps a realizao do hemograma. Vide POP-H12 Teste de fragilidade osmtica.
Corrida das amostras:
Correr as racks com as amostras previamente identificadas e numeradas. Utilizar-se dos
equipamentos de automao previamente liberados para uso. Correr as amostras no modo
sampler (tubo fechado). Amostras de pouco volume devem ser passadas no modo manual
(tubo aberto). Vide POPE-H01 Sysmex XE 2100. Utilizar os trs equipamentos separando
as amostras conforme a origem: emergncia e hospitais preferencialmente no equipamento 2,
ambulatrio e postos de sade comunitria nos outros. Caso apenas um dos equipamentos
esteja habilitado passar as amostras na ordem de priorizao (emergncias, hospitais e
ambulatrio-postos de sade comunitria).
Passar os mapas de trabalho com os resultados ao bioqumico responsvel pela triagem. Vide
Anexo-03 Critrios para triagem.

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Amostras com a solicitao de urgncia, quando personalizadas, devem ter tratamento
prioritrio: passar a amostra no equipamento de automao e o resultado diretamente a um
bioqumico para triagem.
Fazer distenses sangneas das amostras previamente marcadas na triagem realizada pelo
bioqumico responsvel. Vide Anexo-01 Confeco de lminas. Corar as distenses
sangneas. Vide Anexo-02 Colorao de lminas.
Passar as distenses coradas, limpas e secas a mesa de lminas.
Avaliao microscpica da amostra: (Bioqumicos)
Examinar as lminas das amostras selecionadas aps colorao. Utilizar-se dos microscpios
do setor (Olympus CX40). Usar objetiva de 50X de imerso ou 40X a seco, a objetiva de
100X de imerso deve ser reservada para avaliao de incluses, granulaes citoplasmticas
etc. Avaliar a srie vermelha focando campos da cauda da distenso onde os eritrcitos no
se sobrepem. Observar a forma, dimenso, colorao e empilhamento dos eritrcitos.
Verificar se os dados numricos do resultado fornecido pelos equipamentos de automao so
comparveis aos vistos ao microscpio. Avaliar as plaquetas quanto ao nmero e morfologia
independentemente de terem sido solicitadas ou no. Fazer a frmula leucocitria
percorrendo a lmina ao longo da distenso junto a borda lateral da cauda, mtodo em ameia
(iniciar a contagem na borda lateral penetrando no corpo da lmina em movimento
ziguezague) ou mtodo em ameia modificado (contar dois campos perto e paralelos borda
da distenso, depois quatro campos em ngulo reto e dois campos paralelos borda, e assim
por diante). Contar 100 leuccitos classificando-os. Atentar para caractersticas morfolgicas,
tintoriais e atpicas. Observar a existncia de eritroblastos, cont-los separadamente dos
leuccitos relacionando-os com 100 leuccitos, corrigindo a contagem global de leuccitos se
for o caso. O equipamento de automao Sysmex II faz a distino de eritroblastos se
solicitado, logo resultados provenientes desta automao no devem ter o nmero total de
leuccitos corrigidos quando este parmetro tiver sido solicitado e corretamente emitido.
Aps a avaliao microscpica fazer as alteraes, se necessrias, e acrescentar as
informaes importantes diretamente na papeleta de resultados impressa pela equipamento de
automao, utilizando-se dos histricos para hemograma. Vide Anexo-04 Histricos. Fazer
a liberao dos resultados nos arquivos de interfaceamento ou diretamente no Sistema
Esmeralda. Vide POPE-H01 Sysmex XE 2100.
10. Controle de qualidade:
10.1 Interno:
Background. e-CHECK em trs nveis (baixo, normal e alto), amostra do dia anterior (duas
amostras normais) e reprodutibilidade (freqncia diria). Repetibilidade (freqncia
semanal). Vide POPE-H01 Sysmex XE 2100. Os dados de controle de qualidade resultam
na liberao dos equipamentos de automao e so revistos pelo responsvel do setor e/ou
laboratrio.

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10.2 Externo:
Controle PNCQ (freqncia mensal). CAP (freqncia quadrimestral). Vide POPE-H01
Sysmex XE 2100.
11. Resultados:
As informaes contidas nos laudos de resultado resultam das medidas efetuadas no
equipamento com alteraes e informaes acrescidas aps avaliao microscpica da
amostra. Esto expressos em formato aceito e consagrado internacionalmente, sendo
liberados diretamente em rede informatizada e interfaceada aps conferncia individualizada
por profissional de nvel superior habilitado. Alteraes de resultados devem ser rubricadas.
11.1 Unidades:
Os resultados so expressos em Unidades Internacionais padronizadas pelo Comit
Internacional de Estandardizao em Hematologia. Vide Valores de referncia.
11.2 Clculos:
Valor real da contagem global de leuccitos (WBC) em caso de presena de mais de 10
eritroblastos em 100 leuccitos: WBC = WBC(total) x 100 / (100 + n. de eritroblastos em
100 leuccitos).
Diluio de amostras: multiplicar os parmetros: leuccitos, hemcias, hemoglobina,
hematcrito e plaquetas pela diluio realizada com a amostra, p.ex.: diluio 1:10 (uma
parte de sangue + 9 partes de diluente Cellpack) , multiplicar os parmetros acima por 10. Os
demais parmetros do resultado no necessitam clculos.
11.3 Critrios de aceitao:
Resultados cujas amostras foram preparadas rigorosamente dentro das condies
estabelecidas. Resultados dentro dos limites de normalidade, triagem e sem nenhum alarme
dos equipamentos de automao podem ser liberadas diretamente em rede, via
interfaceamento. Resultados fora dos limites normais, de triagem ou com alarmes dos
equipamentos de automao devem ser liberados aps processamento e confirmao de
resultados. Resultados dentro de valores crticos (com risco de morte ao paciente) devem ser
liberados aps confirmao, reviso e contato com o mdico solicitante se possvel. Vide
POP-L12 Valores crticos.
12. Valores de referncia:
Homem
Mulher
Hemcias em milhes/uL
4,5 - 6,5
3,9 - 5,8
Hemoglobina em g/dL
13,5 - 18,0 11,5 -16,4
Hematcrito em %
40,0 - 54,0 36,0 - 47,0
Vol. Glob. Mdia em fL
76,0 - 96,0
Hem. Glob. Mdia em pg.
27,0 - 32,0
C. H. Glob. Mdia em %
32,0 - 36,0

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RDW
Leuccitos
: Adultos
4 a 7 anos
8 a 12 anos
%
Promielcitos
0
Mielcitos
0
Metamielcitos 0 - 1
Bastes
1 - 5
Segmentados
40 - 75
Eosinfilos
1 - 6
Basfilos
0 Moncitos
2 - 10
Linfcitos
20 - 45
Plasmcitos
0
11,5 - 16,0
5.000 - 10.000
6.000 - 15.000
4.500 - 13.000
uL(mm3)
45
1.500
45
0
100
1.500
500
7.000
600
200
1.000
3.500
13. Valores crticos:

So resultados que podem comprometer a vida do paciente. Devendo o mdico assistente ser
informado imediatamente. Pacientes com resultados j conhecidos no necessitam informao
ao mdico assistente. Priorizar:
Hematcrito: inferior a 15.
Hemoglobina: inferior a 5,0.
Leuccitos: inferior a 1000 e superior a 100000.
Vide POP-L12 Valores crticos.
14. Linearidade:
A linearidade dos resultados varivel conforme o parmetro em estudo:
Leuccitos (WBC) 0,0-250.000/L.
Eritrcitos (RBC) 0,0-7.500.000/L
Hemoglobina (HGB) 1,0-25,0g/dl.
Volume corpuscular mdio (MCV) 37,0-197,0fL
Plaquetas (PLT) 0,0-2.000.000/L.
O parmetro MCV foi testado, pelo fabricante, com partculas de referncia estandardizada,
os demais, com sangue humano.
Amostras cujos parmetros ultrapassarem os limites de linearidade devem ser repassadas
aps diluio 1:5 ou 1:10 em diluente Cellpack.

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15. Limitaes do mtodo:
15.1 Interferentes:
Ligados a amostra:
Excesso de anticoagulante (EDTA): Causa desidratao dos eritrcitos (alteraes
morfolgicas) e alterao para menos do hematcrito (Erro pouco significativo nos contadores
eletrnicos).
Amostra de pouco volume: Pode causar hemo-diluio se o anticoagulante usado for lquido.
Pode provocar erro de diluio por aspirao incorreta do equipamento de automao. Anotar
no mapa de trabalho correspondente.
Sangue anticoagulado com heparina: No deve ser usado para o leucograma (variao
significativa no nmero de linfcitos). No deve ser usado para contagem de plaquetas. Pode
ser usado para o eritrograma. Se usado imediatamente aps a colheita as diferenas so pouco
significativas. Anotar no mapa de trabalho correspondente.
Amostra com microcogulos: Pode apresentar resultados errneos por erro na diluio da
amostra. Na impossibilidade de nova colheita de material avisar o bioqumico responsvel e
anotar no mapa de trabalho correspondente.
Amostra lipmica: interferncia com hemoglobina (aumento). Anotar no mapa de trabalho
correspondente.
Amostra coagulada: Rejeio incondicional dos resultados. Providenciar nova colheita de
material.
Ligados ao equipamento de automao:
Erro na homogeneizao da amostra por falha no sistema: Apresenta resultados menores ou
maiores dependendo da sedimentao do material. Nem sempre o resultado apresenta alarme
o que prejudica a avaliao. Avaliao da distenso sangnea ao microscpio sempre que os
resultados estiverem fora dos limites de normalidade.
Falha na aspirao da amostra: Resultados sempre com alarme. Repetir o exame.
Interferncia por induo eletromagntica: Resultados sempre com alarme (*). Repetir o
exame.
Entupimento nas cmaras de diluio: Resultados das contagens tendem a zero. Proceder a
desobstruo das cmaras conforme descrito no Manual on line. Repetir o exame.
Amostras hemolisadas: Os equipamentos de automao possuem mecanismos de
compensao afim de minimizar erros. Anotar no mapa de trabalho correspondente.
16. Interpretao dos resultados:
Exame de auxlio diagnstico para doenas hematolgicas e sistmicas. Valores fora dos
limites de referncia podem indicar: anemias, neoplasias hematolgicas, reaes infecciosas
e inflamatrias, acompanhamento de terapias medicamentosas, entre outras patologias.

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17. Biossegurana:
Usar equipamento de proteo individual (luvas, culos etc.). Fazer a descontaminao de
bancadas e equipamentos conforme as normas de segurana do laboratrio. Descartar resduos
de acordo com as Boas Prticas de Laboratrio e com as normas federais, estaduais e locais.
Vide Manual de biossegurana.
18. Anexos:
Anexo-01 Confeco de lminas.

Anexo-02 Colorao de lminas.
Anexo-03 Critrios para triagem.
Anexo-04 Histricos.
19. Bibliografia:
Bain, Barbara J. Clulas sangneas: um guia prtico. 2.ed. Porto Alegre: Artes Mdicas,
1997.
Failace, Renato. Hemograma: manual de interpretao. 3.ed. Porto Alegre: Artes Mdicas,
1995.
Operators manual XE-2100L/XE-2100D Main, Operators manual XE-2100L/XE2100D IPU
e manual online.

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Anexo-01 Confeco de lminas
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Finalidade do exame: Importante na avaliao hematolgica. A confiabilidade das

informaes obtidas com o exame do esfregao (distenso) sangnea depende
principalmente de distenses bem feitas e devidamente coradas.
Mtodo: Mtodo de Cunha Preparo da distenso com uso de duas lminas de vidro
para microscopia, uma para receber a distenso e outra chamada de lmina distensora.
Reagentes / Materiais: Soluo salina (soro fisiolgico) para limpeza da lmina
distensora. Lminas de vidro para microscopia. Lmina distensora (lmina lapidada nas
quatro faces, com as bordas recortadas a fim de torn-la ligeiramente mais estreita que as
lminas para microscopia). Tubos de micro-hematcrito. Lpis dermogrfico.
Tcnica:
Colocar uma gota ( 2 a 3 mm de dimetro) de sangue devidamente homogeneizado
(usando tubo de micro-hematcrito) aproximadamente a 1 cm do final de uma lmina
para microscopia limpa, seca e isenta de p e gordura e apoiada em uma superfcie plana
( bancada de trabalho).
Com o polegar e o indicador segurar o final (extremidade) da lmina distensora com
ngulo de 30 a 45 graus em frente a gota de sangue na lmina descrita acima.
Puxar a lmina distensora para traz at entrar em contato com a gota de sangue. Deixar o
sangue espalhar-se e completar o angulo formado entre as duas lminas.
Empurrar a lmina distensora para frente a uma velocidade moderada e constante, at
que a gota de sangue tenha sido espalhada em um filme moderadamente delgado.
Observar para que o ngulo entre as lminas seja mantido igual em todo o processo.
Secar a distenso ao ar por agitao ou por meio de um ventilador.
Identificar as lminas com nmero seqencial do setor e com as iniciais do nome do
paciente, usando lpis dermogrfico.
Limpar a lmina distensora utilizando uma gaze embebida em soluo fisiolgica.
Repetir o processo para todos os hemogramas solicitados.
Interpretao: A boa distenso deve ter uma poro espessa e uma poro delgada
(cauda), com uma rea de transio gradual de uma parte outra. Deve possuir aparncia
regular, uniforme e ser livre de estrias, ondas ou buracos. As bordas devem ser livres. A
espessura da distenso pode ser ajustada alterando-se o ngulo da lmina distensora, a
velocidade utilizada no espalhamento da gota de sangue ou o tamanho da gota. Para uma
distenso mais espessa: ngulo, velocidade e gota maiores. Para uma distenso mais
delgada: ngulo, velocidade e gota menores. Nas distenses de espessura tima ocorre
uma distribuio uniforme e separao das clulas sangneas em direo a cauda.
Quanto mais rpido o filme de sangue for secado ao ar, melhor a distribuio individual
das clulas na lmina. A secagem lenta resulta em concentrao de artefatos.

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Anexo-02 Colorao de lminas
Finalidade do exame: Importante na avaliao hematolgica. a partir de uma lmina

apropriadamente corada que sero reconhecidos os elementos sangneos.
Mtodo: May-Grnwald-Giemsa. Mtodo derivado do Romanowski. Mistura de
eosinato de azul-de-metileno (May-Grnwald) e azur-eosina (Giemsa). Fornece
colorao a todos os elementos celulares.
Reagentes: lcool metlico p.a, glicerina e sais corantes comerciais de May-Grnwald e
Giemsa.
Preparo da soluo corante:
1. Corante Giemsa: 8,33 g
2. Corante May-Grnwald: 4,16 g
3. Glicerina: 33,3 ml
4. lcool metlico: 5 litros
5. Misturar os sais corantes com a glicerina.
6. Acrescentar o lcool metlico aos poucos, homogeneizando constantemente.
7. Colocar a soluo em um frasco plstico de 5 litros. Deixar em banho-maria (56C) por
uma hora.
8. Identificar o frasco: Corante May-Grunwald-Giemsa - pronto para uso aps filtragem.
(usar as etiquetas auto-colantes) Colocar a data de preparo e rubricar. Esta soluo
estvel por at 12 meses deste que mantida ao abrigo da luz e hermeticamente fechada.
Filtrar apenas a quantidade necessria para uso.
9. Fazer teste com o corante elaborado (corar algumas lminas) afim de verificar sua
eficcia. Anotar na ficha prpria (controle de qualidade), a liberao ou no do corante
para uso.
10. Tcnica de colorao:
1. Cobrir lmina com a distenso sangnea com a soluo corante filtrada.
2. Deixar atuar por 3 minutos.
3. Colocar gua (no necessita ser tratada) sobre a lamina com o corante.
4. Homogeneizar o corante e a gua. Observar para que, ao colocar a gua, o corante no
escorra.
5. Deixar atuar por 15 minutos.
6. Lavar em gua corrente.
7. Limpar o verso da lmina com gaze e lcool.
8. Deixar secar.
Se necessrio, uma distenso corada pode ser descorada cobrindo-se a lmina com etanol,
lavando-a com gua, repetindo-se esta seqncia at que a colorao tenha desaparecido.
Interpretao:
Macroscopicamente uma distenso bem corada deve apresentar uma cor rosa-mate uniforme.
Distenses de cor vermelha intensa de eosina esto excessivamente cidas, ou o corante

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atuou durante pouco tempo. Distenses de cor cinza ou cinza azulada ou esverdeada esto
muito alcalinas, ou o corante agiu durante muito tempo. Microscopicamente a apreciao de
uma boa colorao feita pela avaliao das plaquetas. Estas devem apresentar-se azuladas
com finas granulaes azurfilas. Quando coradas de azul-plido: colorao cida ou
insuficiente. Quando coradas de cor prpura-escura: colorao alcalina ou excessiva.
Colorao caracterstica:
1. Cromatina e corpos de Howell-Jolly: prpura.
2. Grnulos promielocticos e bastes de Auer: vermelho-purpreo.
3. Citoplasma dos linfcitos: Azul.
4. Citoplasma dos moncitos: azul-acinzentado.
5. Citoplasma basfilo (rico em RNA): azul-escuro.
6. Corpos de Dhle: azul-acinzentado.
7. Grnulos especficos dos neutrfilos, linfcitos e plaquetas: prpura-claro ou rosa.
8. Grnulos especficos dos basfilos: prpura-escuro.
9. Grnulos especficos dos eosinfilos: laranja
10. Eritrcitos: rosa.
Interferentes: Presena de contaminantes (geralmente acido actico) no lcool metlico.
PH da gua muito baixo (cido): os componentes basfilos no se coram adequadamente,
os leuccitos so geralmente plidos, com grnulos eosinfilos de um vermelho
brilhante. PH da gua muito alto (alcalino): captao excessiva do corante bsico com
excesso de colorao. difcil distinguir os eritrcitos policromticos dos normais. Os
grnulos dos eosinfilos coram-se de azul-escuro ou de cinza-escuro. Os grnulos dos
neutrfilos normais ficam excessivamente corados, simulando granulao txica.
Controle de qualidade: Corantes satisfatoriamente elaborados com sais de boa
procedncia proporcionam colorao dentro dos padres aceitos. Verificar no incio da
rotina e desprezar, corantes filtrados que tenham sido utilizados pelo planto noturno.
Utilizar gua com o pH adequado o que pode ser avaliado verificado-se a colorao da
distenso macroscopicamente e microscopicamente conforme descrito acima. Ajustar o
pH da gua se necessrio, ou trocar o corante em uso.

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SANGUE TOTAL
Verso n.: 4
Data da efetivao:
POP: H01
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CONTROLE DE QUALIDADE
SOLUES CORANTES
CORANTE DE MAY-GRNWALD-GIEMSA: Soluo

corante produzida pelo Setor de Hematologia conforme
tcnica descrita no ANEXO-02 Colorao de lminas do
POP-H01 Hemograma Volume produzido: bombonas de 5
litros.
Avaliao/controle da soluo corante: avaliar a colorao

proporcionada macroscopicamente e microscopicamente
segundo as caractersticas tintoriais caracterizadas no
Anexo-02 do POP-H01 Hemograma. Informar, a cada
troca de bombona de corante, semanalmente ou sempre que
necessrio, a qualidade da colorao proporcionada e aes
tomadas em caso de colorao no satisfatria.
Corante: data
de produo
Data do
controle
Lib. Uso:
Sim/No
Ao tomada
Rubrica

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SANGUE TOTAL
Verso n.: 4
Data da efetivao:
POP: H01
Pgina 15 de 19

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SANGUE TOTAL
Verso n.: 4
Data da efetivao:
POP: H01
Pgina 16 de 19
CONTROLE DE QUALIDADE
SOLUES CORANTES
CORANTE DE MAY-GRNWALD-GIEMSA: Soluo
corante produzida pelo Setor de Hematologia conforme
tcnica descrita no ANEXO 2 do POP N 1
HEMOGRAMA Volume produzido: bombonas de 5 litros.
Ficha de produo:
Data de produo:
Observaes:
Reagentes
Giensa
May Grnwald
Gliceria
Metanol
Data de produo:
Observaes:
Reagentes
Giensa
May Grnwald
Gliceria
Metanol
Data de produo:
Observaes:
Reagentes
Giensa
May Grnwald
Gliceria
Metanol
Data de produo:
Observaes:
Reagentes
Giensa
May Grnwald
Gliceria
Metanol
Produzido por:
Fabricante
Produzido por:
Fabricante
Produzido por:
Fabricante
Produzido por:
Fabricante
Rubrica:
Lote nmero:
Vencimento
Rubrica:
Lote nmero:
Vencimento
Rubrica:
Lote nmero:
Vencimento
Rubrica:
Lote nmero:
Vencimento

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SANGUE TOTAL
Verso n.: 4
Data da efetivao:
POP: H01
Pgina 17 de 19
1.
2.
3.
4.
5.
Mtodo: Pantico Rpido.

Reagentes: Kit comercial contendo 3 frascos com 500ml cada (corantes: 1, 2 e 3),
prontos para uso. Vide bula do kit.
Tcnica de colorao:
Mergulhar e retirar a lmina na soluo 1 do corante pantico por 5 vezes consecutivas.
Aguardar 5 segundos para escorrer o excesso de corante.
Repetir o mesmo procedimento na soluo 2.
Mergulhar e retirar a lmina na soluo 3 do corante pantico por 10 vezes
consecutivas.
Lavar em gua corrente.
Deixar secar.
Colorao caracterstica: idem ao mtodo May-Grnwald-Giemsa.

HEMOGRAMA COMPLETO
SANGUE TOTAL
Verso n.: 4
Data da efetivao:
POP: H01
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Anexo-03 Critrios para triagem
1
2
Idade: inferior a 1 anos e superior a 85 anos.

Hemoglobina: inferior a 10 e superior a 19. Quando for solicitado somente HB: a
liberao pode ser realizada independentemente do valor, desde que avalie-se a
correlao com o HT (CHCM entre 30 e 35,5).
3 VCM: inferior a 70 e superior a 108.
4 CHCM: inferior a 30 e superior a 35,5.
5 RDW: superior a 18.
6 Leuccitos: inferior a 3000 e superior a 14000. Avaliar o grfico de disperso celular
emitido pelo equipamento de automao para estabelecer provvel desvio a esquerda,
granulcitos imaturos, clulas jovens, atipias e blastos e frente a flags: Left Shift, Imm
Gran, Blasts, Atypical Ly, NRBC, Abn Ly/Bl, RBC Lyse Res, RBC Agglut, Turb/HGB,
Iron Def, HGB Defect, Fragments, PLT Clumps e PLT C(S).
7 Neutrfilos: superior a 80%.
8 Linfcitos: inferior a 10 e superior a 55%.
9 Moncitos: superior a 18%.
10 Eosinfilos: superior a 25%.
11 Basfilos: superior a 2%.
12 Plaquetas: inferior a 100000 e superior a 800000. Quando no for solicitado contagem de
plaquetas: inferior a 70000.

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SANGUE TOTAL
Verso n.: 4
Data da efetivao:
POP n.: H01
Pgina 19 de 19
Anexo-04 Histricos
001- anisocitose 9+ Microcitose 9+ Hipocromia 9+
003- 999.99
011- anisocitose 1+
012- anisocitose 2+
021- policromatocitose 1+
031- hipocromia 1+
032- hipocromia 2+
041- pecilocitose 1+
051- microcitose 1+
052- microcitose 2+
061- macrocitose 1+
062- macrocitose 2+
065- alguns macrcitos e micrcitos
071- hemcias fragmentadas (esquizcitos) 1+
081- hemcias em alvo (target cells) 1+
091- hemcias em gota (dacricitos) 1+
101- eliptcitos 1+
102- eliptcitos 2+
111- drepancitos 1+
112- drepancitos 2+
121- esfercitos (raros)
122- esfercitos (alguns)
131- acantcitos 1+
132- acantcitos 2+
141- estomatcitos 1+
150- eritroblastos: 999 em 100 leuccitos
161- pontilhado basfilo em raras hemcias
163- pontilhado basfilo em vrias hemcias
171- corpos de Howell-Jolly em raras hemcias
173- corpos de Howell-Jolly em vrias hemcias
180- auto-aglutinao sugestiva da presena de crio-aglutininas
190- rouleaux
191- dupla populao hemtica
193- corpsculos de Pappeheimer (siderossomas)
195- rouleaux acentuado sugestivo de disproteinemia
201- linfcitos atpicos (raros)
203- linfcitos atpicos (vrios)
205- presena de clulas linfomatosas
211- mononucleares atpicos (raros)
213- mononucleares atpicos (vrios)
221- granulaes txicas 1+
231- vacuolizaes citoplasmticas nos neutrfilos 1+
241- neutrfilos hipersegmentados (raros)
243- neutrfilos hipersegmentados (vrios)
251- restos celulares (raros)
252- restos celulares (alguns)
254- restos celulares (numerosos)
261- Corpsculos de Dohle (raros)
263- Corpsculos de Dohle (vrios)
270- anomalia granuloctica de Pelger-Huet
280- diferencial prejudicado pela leucopenia
301- plaquetas gigantes (raras)
303- plaquetas gigantes (vrias)
311- plaquetas dismrficas (raras)
313- plaquetas dismrficas (vrias)
320- presena de microcogulos
333 (insere uma linha em branco editvel)
002- anisocitose 9+ Microcitose 9+ Hipocromia 9+

013- Anisocitose 3+
033- hipocromia 3+
053- microcitose 3+
063- macrocitose 3+
034- algumas hemcias hipocromicas

054- alguns micrcitos
064- alguns macrcitos

103- eliptcitos 3+
113- drepancitos 3+
123- esfercitos (vrios)
124- esfercitos (numerosos)
133- acantcitos 3+
151- eritroblastos (raros)
162- pontilhado basfilo em algumas hemcias
164- pontilhado basfilo em numerosas hemcias
172- corpos de Howell-Jolly em algumas hemcias
174- corpos de Howell-Jolly em numerosas hemcias
181- presena de crio-aglutininas
192- corpos de Heinz
194- anis de Cabot
202- linfcitos atpicos (alguns)
204- linfcitos atpicos (numerosos)
206- presena de clulas com ncleo clivado
212- mononucleares atpicos (alguns)
214- mononucleares atpicos (numerosos)
242- neutrfilos hipersegmentados (alguns)
241- neutrfilos hipersegmentados (numerosos)
253- restos celulares (vrios)
262- Corpsculos de Dohle (alguns)
264- Corpsculos de Dohle (numerosos)
271- sugestivo de anomalia granuloctica de Pelger-Huet
302- plaquetas gigantes (algumas)
304- plaquetas gigantes (numerosas)
312- plaquetas dismrficas (algumas)
314- plaquetas dismrficas (numerosas)
330- aglutinao plaquetria

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SANGUE TOTAL
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Data da efetivao:
POP n.: H01
Pgina 20 de 19
340- aparente trombocitopenia
350- aparente trombocitose
360- plaquetas normais, contagem prejudicada.
361- plaquetas aparentemente normais em numero e morfologia
341- ntida trombocitopenia

351- ntida trombocitose
370 contagem de plaquetas prejudicada

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Data da efetivao:
POP n.: H01
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Informaes:
Atividades
Elaborado por:
Revisado por:
Aprovado por:
Liberado por:
Desativado por:
Distribuio:
Local
Responsvel
Dalton Kittler de Mello
Mrcia Henriques Xavier
Raquel Arrieche Fernandes
Andra Cauduro de Castro
Ass.responsvel
Revises:
Revisado por:
Assinatura
Data/distribuio
Assinatura
Data
Data/recolhimento
Data
Desativado:
Data:_______/_______/_______
Desativado por:_____________________________________________________________
Motivo:____________________________________________________________________

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Verso n.: 4
Data da efetivao:
POP n.: H01
Pgina 22 de 19
Conhecimento:
Colaboradores devem ler e dar cincia (por escrito).
Declaramos que lemos, compreendemos e seguiremos fielmente este procedimento:
Nome:
Adriane Turconi Severo
Alessandra M. Lemes
Arno Neuhof
Cntia Cichowski Santos
Dalton Kittler de Mello
Elaine Catarina de Freitas Ataro
Ellen Eunice Ludwig
Ftima Bernardina S. Santos
Janildes Camozzato
Jos Dutra Incio
Leandro C. P. Amaral
Mrcia Henriques Xavier
Marigley F. Antonio
Marina Carniel Marques
Mariza Rodrigues
Marlene Casagranda
Moema Tassoni Silva
Osmaninho Maschmann
Ralf Wagner
Raquel Arrieche Fernandes
Rosangela Silveira Santos
Snia Oliveira Fernandes
Valria Grazziotin Dexheimer
Zuleida Garcia Abreu
Assinatura:
Data:
__________________________________________________________________________

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13. Valores crticos:

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Anexo-01 Confeco de lminas.

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Finalidade do exame: Importante na avaliao hematolgica. A confiabilidade das

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Finalidade do exame: Importante na avaliao hematolgica. a partir de uma lmina

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CORANTE DE MAY-GRNWALD-GIEMSA: Soluo

Avaliao/controle da soluo corante: avaliar a colorao

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Mtodo: Pantico Rpido.

GRUPO HOSPITALAR CONCEIO

Idade: inferior a 1 anos e superior a 85 anos.

GRUPO HOSPITALAR CONCEIO

002- anisocitose 9+ Microcitose 9+ Hipocromia 9+

034- algumas hemcias hipocromicas

072- hemcias fragmentadas (esquizcitos) 2+

GRUPO HOSPITALAR CONCEIO

341- ntida trombocitopenia

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