Bioquímica

Instituto Superior de Cincias da Sade Norte
Ensino Universitrio
Bioqumica
Geral
Caderno de Apontamentos
Mestrado Integrado em Medicina Dentria
Ano lectivo 2009/2010
Bioqumica
Geral
Contactos das Docentes:
Prof. Doutora Roxana Falco Moreira
roxana.moreira@iscsn.cespu.pt
Mestre Juliana Faria

juliana.faria@iscsn.cespu.pt
Dr. Tiago Silva

ogait_tiago@hotmail.com
I - PROTENAS
Objectivos do captulo:
Saber reconhecer um aminocido, uma estrutura polipeptdica e uma estrutura

proteica;
Compreender a relao entre a ionizao de aminocidos e protenas e as

caractersticas cido-base do meio em que se encontra;
Conhecer aminocidos comuns e derivados;
Compreender os nveis de organizao das estruturas proteicas;
Compreender a relao entre estrutura e funo das protenas;
Compreender a desnaturao e renaturao de protenas;
Entender a funcionalidade de protenas como a hemoglobina, mioglobina e o

colagnio;
Entender a funo de grupos prostticos. Entender a funcionalidade de protenas

conjugadas;
Saber o que o heme;
Entender a importncia da poro peptdica da hemoglobina;
Entender as consequncias da maior ou menor afinidade pelo oxignio da

hemoglobina;
Entender a que se referem as estruturas T e R da hemoglobina;
Entender porque a hemoglobina uma protena alostrica e conhecer os 3 tipos de

interaces alostricas apresentados;
Conhecer e entender a hemoglobinopatia a que se refere a anemia falciforme;
Conhecer a estrutura do colagnio e a sua funcionalidade consequente;
Conhecer os pormenores a nvel de organizao estrutural do colagnio;
Conhecer patologias relacionadas com alteraes do colagnio.
Funes desempenhadas pelas protenas em humanos
1-Dinmicas
Exemplos:
- Enzimas
- Protenas transportadoras (de oxignio, ferro, hormonas, de drogas e

compostos txicos...)
- imunoglobulinas e interfero
- fibrina
- Hormonas
- Protenas envolvidas em mecanismos contrcteis
- Protenas envolvidas em mecanismos de transcrio e traduo gentica
2-Estticas
Exemplos:
- Protenas estruturais
(presentes nos: osso, ligamentos, orgos, sistema vascular, epiderme)
Aminocidos: caractersticas e propriedades
Todos os diferentes tipos de protenas so sintetizados inicialmente como polmeros de
apenas 20 aminocidos (aminocidos comuns: aminocidos para os quais existe um codo
especfico no cdigo gentico.) No entanto, para alm dos aminocidos comuns,
encontram-se nas protenas aminocidos derivados que so formados a partir dos
aminocidos comuns, aps estes terem sido incorporados numa estrutura proteica.
Estrutura geral de um aminocido
Um carbono central (C ) ao qual esto ligados 4

substituintes, um grupo carboxlico, um grupo amino
e uma radical(R).
Exemplos de aminocidos
Estrutura dos radicais (cadeias laterais) dos aminocidos comuns:

1) CADEIAS LATERAIS APOLARES
2) CADEIAS LATERIAS POLARES
3) CADEIAS LATERAIS AROMTICAS
4) CADEIAS LATERAIS CARREGADAS NEGATIVAMENTE (ACDICAS)
5) CADEIAS LATERAIS CARREGADAS POSITIVAMENTE (BSICAS)
Nota: Os aminocidos polares so mais solveis em gua ou hidroflicos porque contm grupos
funcionais que estabelecem ligaes de hidrognio com a gua.
Exemplos de Estruturas de aminocidos derivados:
Derivam dos comuns por modificaes qumicas ps traducionais (hidroxilaes,

carboxilaes, ligao a aucares, fosforilaes).
Aminocidos tm um centro assimtrico
Os aminocidos comuns tm uma estrutura geral com 4 substituintes ligados a um tomo

de carbono (-carbono) num arranjo tetradrico. Portanto, o tomo de carbono
assimtrico: o aminocido exibe isomerismo ptico (com excepo da glicina, em que dois
dos substituintes (R=H) so iguais. Ismeros pticos so imagem um do outro num espelho
plano.
Propriedades cido-base dos aminocidos e protenas:
1. Dependem essencialmente da ionizao dos grupos alfa-carboxlicos e amino assim
como da ionizao dos grupos presentes nas cadeias laterais.
o
Formas cidas:
De grupos contendo azoto so positivas.
De grupos contendo oxignio ou enxofre so neutras.
Formas bsicas:
De grupos contendo azoto so neutros.
De grupos contendo oxignio ou enxofre so negativos.
2. Os aminocidos com cadeias laterais contendo tomos de azoto (Lis, Arg) so

designados de bsicos. A pH fisiolgico esto predominantemente carregados
positivamente (forma cida).
3. Os aminocidos com cadeias laterais contendo grupos carboxlicos (Asp, Glu) so

designados de acdicos. A pH fisiolgico esto predominantemente carregados
negativamente (forma bsica).
4. Protenas em que a razo ( Lis+ Arg / Glu+ Asp) maior que um so referidas
como protenas bsicas; protenas em que essa razo inferior a um, so referidas
como protenas cidas.
5. Um aminocido dissolvido em gua, a pH neutro, existe predominantemente na
forma de um io dipolar (zwitterio). Assim, pode funcionar como um cido (dador
de protes) mas tambm pode funcionar como uma base (aceitador de protes).
Por exemplo, a glicina, um aminocido

monoaminomonocarboxlico:
pK (carboxilo) = 2,4 pK (amino) = 9,8
Portanto, 1 ionizao pH 2,4.

2 ionizao pH 9,8.
Ponto isoelctrico (pI)

pH ao qual o aminocido (ou ptido ou protena) electricamente neutro. O seu valor
depende dos pK dos grupos ionizveis que contenha.
Notas:
1)
A pH inferior ao seu pI, o aminocido (pptido, protena) fica carregado

positivamente.
2)
A pH superior ao seu pI, o aminocido (pptido, protena) fica carregado

negativamente.
Determinao experimental do ponto isoelctrico
Valor do pH ao qual a molcula no se move num campo elctrico. Quanto mais afastado
do pI o pH a que se encontra uma protena, maior a carga global da protena.
Influncia do pH na funcionalidade proteica
Exemplo: enzimas cuja funcionalidade depende essencialmente de aminocidos presentes
no centro activo a forma bsica desse aminocido pode corresponder forma activa; a
forma cida forma inactiva...
Pptidos e ligao peptdica
Nas protenas, o grupo -carboxlico de um aminocido unido ao radical -amino de

outro aminocido por uma ligao peptdica (ligao amida).
Muitos aminocidos unidos por ligaes peptdicas originam cadeias peptdicas. Os

aminocidos dessas cadeias designam-se radicais ou resduos.
Uma cadeia polipeptdica tem direco:

Por conveno, a extremidade amnica considerada o incio da cadeia.
A maioria das cadeias polipeptdicas naturais contm entre 50 a 2000 aa. As cadeias com
mais de 50 aa j se designam por protenas. Existem protenas com uma nica cadeia
polipeptdica e existem protenas multimricas, formadas por vrias cadeias. O peso
molecular mdio de um aa cerca de 110 Da.
Nota: Alguns pequenos pptidos tm actividade biolgica. Por exemplo, a hormona insulina
formada por dois pptidos de 30 e 21 aa.
10
As protenas podem conter outros grupos qumicos para alm dos aa
o Protenas simples contm unicamente aa

o Protenas conjugadas contm tambm grupos prostticos
As protenas homlogas de espcies diferentes possuem sequncias homlogas
Encontram-se na sua sequncia de aa:

o
Resduos invariantes
Resduos variveis
Substituies conservativas (substituies por aminocidos de polaridade

similar)
Utilizao de protenas homlogas no tratamento da diabetes mellitus
Possvel utilizao de insulina de porco ou vaca no tratamento de diabetes mellitus

humano. possvel devido ao pequeno n de substituies no conservativas de resduos.
11
Protenas: estrutura primria, secundria, terciria e quaternria
o Estrutura primria
A sequncia de aminocidos das cadeias polipeptdicas de uma protena corresponde ao
que designado por Estrutura primria de uma protena. a estrutura primria que
confere a uma protena as suas propriedades fsicas e faz a protena enrolar-se numa
estrutura nica, que responsvel pela sua funcionalidade caracterstica.
Diz respeito estrutura covalente da protena, ou seja: sequncia de aminocidos e
tambm localizao de pontes dissulfureto (cistinas).
A estrutura primria nica numa protena, uma vez que, a sua composio, proporo e
sequncia em aminocidos caracterstica.
PONTES DISSULFURETO:
o Resultam da ligao qumica de cistenas;

o Podem ser estabelecidas numa s cadeia polipeptdica ou entre diferentes cadeias
polipeptdicas.
12
o Estrutura Secundria
Refere-se ao arranjo espacial dos radicais de aminocidos presentes na sequncia linear.
Quando essas relaes so do tipo linear, do origem a estruturas peridicas.
Exemplo:
a) -hlice
b) Folha pregueada
ESTRUTURA SUPERSECUNDRIA
So estruturas intermedirias entre estruturas

secundrias
tercirias.
Referem-se
aglomerados de estruturas secundrias.

Exemplo:
Algumas cadeias enovelam-se em regies
compactas (DOMNIOS). Os domnios podem ser
unidos por um segmento flexvel da cadeia,
como prolas num cordo, podendo exibir um
deslocamento especfico relativamente uns aos outros, tendo tal deslocamento um
objectivo funcional.
13
o Estrutura Terciria
Refere-se estrutura tridimensional da protena, incluindo a relao geomtrica entre
segmentos distantes da estrutura primria. Envolve aminocidos distantes na sequncia
peptdica e pertencentes a diferentes estruturas secundrias. a estrutura terciria que
aproxima resduos de aminocidos bem distantes na estrutura primria permitindo a
formao de estruturas vitais para a funcionalidade de certas protenas.
A estrutura terciria tambm responsvel pela localizao das cadeias hidrofbicas no

interior das cadeias hidrofbicas no interior da estrutura proteica, ao contrrio das cadeias
ionizveis, localizadas exteriormente, na interface aquosa.
14
o
Estrutura Quaternria
Refere-se
ao
subunidades
arranjo
proteicas
de
protenas
em
ou
complexos
tridimensionais. As subunidades de uma

estrutura quaternria esto associadas no
covalentemente. Vrias subunidades ligadas
covalentemente
constituem
uma
nica
estrutura terciria, no quaternria.
A FORMA DE UMA MOLCULA PROTEICA DETERMINADA PELA SUA SEQUNCIA DE AMINOCIDOS
A maioria das protenas assume o seu

enrolamento caracterstico espontaneamente.
Atravs do tratamento com certos solventes
as
protenas
(desenroladas),
podem
desnaturadas
ser
perdendo
conformao
caracterstica. Para alm de certos solventes,

o calor, pH extremos, certos solutos, so
igualmente
capazes
de
criar
condies
desnaturantes. A desnaturao implica a

perda de estrutura e consequentemente da
funcionalidade.
15
Quando o desnaturante removido, as protenas geralmente readquirem a sua
conformao original, o que indicativo de que a sua sequncia em aminocidos contm
toda a informao necessria para o enrolamento.
16
Hemoglobina e Mioglobina
A hemoglobina e a mioglobina so importantes protenas para estudo porque ilustram
muitos princpios importantes de conformao, dinmica e funo de protenas:
-exemplo de enovelamento
-exemplo de ligao a outras molculas (ligandos e reguladores)
-exemplo de integrao de conformaes (interaces alostricas)
-exemplo de como uma simples mutao pode causar doena
-...
Os vertebrados desenvolveram dois mecanismos principais para assegurar que a todas as

suas clulas chega um fluxo contnuo e adequado de oxignio:
-um sistema circulatrio que distribui oxignio s clulas
-uso de molculas transportadoras de oxignio para vencer as limitaes impostas
pela baixa solubilidade do oxignio na gua:
HEMOGLOBINA (nas hemcias, transporta o oxignio no sangue)

MIOGLOBINA (no msculo)
Analisando a hemoglobina e a mioglobina:
A. ESTRUTURAS
o Protenas globulares.
o Contm um grupo grupo heme, (que uma porfirina com radicais substituintes e um
tomo de ferro central) com o local de ligao ao oxignio. O estado ferroso (+2:
ferro-hemoglobina ou ferro-mioglobina) liga-se ao oxignio, mas no o frrico
(+3:ferri-hemoglobina ou ferri-mioglobina).
17
Heme - o grupo prosttico: unidade no peptdica ligada firmemente a estas protenas e

essencial para a sua funo. (As protenas sem o grupo prosttico caracterstico designamse de apoprotenas).
18
MIOGLOBINA
-
Formada por uma cadeia polipeptdica nica que adquire uma forma compacta;
O interior da mioglobina constitudo quase exclusivamente por aminocidos

apolares;
Cerca de 75% da cadeia enrola-se em -hlice;
O heme, localiza-se num nicho apolar que o protege da oxidao forma frrica.
O tomo de ferro do heme liga-se (num mesmo plano) a quatro N dos aneis pirrol. Liga-se
igualmente ao tomo de N de uma histidina (histidina proximal) e a sua 6 posio de
coordenao (do outro lado do plano em relao 5 posio de coordenao) corresponde
ao local de ligao ao oxignio.
A proximidade ao heme de uma outra

histidina (histidina distal), diminui a
afinidade de ligao do CO ao local de
ligao ao oxignio e inibe a oxidao
para o estado frrico. A histidina
distal
impede
aproximao
de
cadeias de mioglobina o que tornaria

mais favorvel a oxidao do heme
ferroso para frrico. tambm a
histidina distal que, por interferir na
ligao (s permite a ligao numa
geometria no favorvel) de uma molcula de CO, reprime assim a preferncia inata
do heme por monxido de carbono.
19
Modo linear de ligao do monxido de carbono a ferro-porfirinas isoladas. Neste modo de

logao a afinidade da ferro-porfirina para o CO bastante superior relativamente ao O2.
No entanto, o modo de ligao do CO ao heme nas cadeias de mio ou hemoglobina,
angular e no linear pela influncia da presena da poro peptdica da molcula. A
afinidade para o CO ento pronunciadamente reduzida.
assim compreensvel a necessidade da poro peptdica destas molculas, para o

transporte e armazenamento de oxignio.
20
HEMOGLOBINA
constituda por 4 cadeias polipeptdicas, cada uma com um heme;
A hemoglobina A, predominante em adultos, constituda por duas cadeias e

duas . Os adultos tambm possuem outra hemoglobina em menor quantidade e os
fetos produzem hemoglobinas com subunidades um pouco diferentes;
A estrutura tridimensional das cadeias e da hemoglobina marcadamente

semelhante da mioglobina;
O facto de a hemoglobina possuir quatro cadeias polipeptdicas provoca o

aparecimento de certas caractersticas ausentes na mioglobina, monomrica;
A hemoglobina transporta caties hidrognio e dixido de carbono, para alm de

oxignio;
A ligao da hemoglobina s molculas por ela transportada regulada por

interaces alostricas, que so interaces entre centros distantes na mesma
protena. A hemoglobina uma protena alostrica, a mioglobina no.
A hemoglobina apresenta trs tipos de efeitos alostricos:
21
a) A ligao ao oxignio cooperativa, ou seja, a ligao do oxignio ao heme
facilita a ligao de oxignio a outros hemes da mesma molcula. Compare-se as

curvas de ligao ao oxignio da hemoglobina e da mioglobina:
Notar: a maior afinidade da mioglobina para o oxignio: as formas das curvas,

hiperblica para a mioglobina, sigmide para a hemoglobina.
b) Efeito de Bohr: H+ e CO2 promovem a libertao do oxignio da hemoglobina

(estimula a libertao de oxignio em tecidos em metabolismo activo). O oxignio
promove a libertao do H+ e CO2 nos capilares dos alvolos pulmonares.
22
c) A afinidade da hemoglobina para o oxignio tambm regulada pelo 2,3bifosfoglicerato (BPG), que se liga desoxi-hemoglobina mas no oxihemoglobina, diminuindo a afinidade da molcula para o oxignio. A hemoglobina
fetal tem maior afinidade para o oxignio do que a hemoglobina do adulto, por
ligar-se menos fortemente ao BPG.
A hemoglobina fetal tem maior afinidade para o oxignio do que a hemoglobina do adulto,
por ligar-se menos fortemente ao BPG.
23
Pode-se afirmar que da evoluo da mioglobina para a hemoglobina, surgiu uma molcula
capaz de perceber informaes do ambiente em que se encontra.
As ligaes do oxignio, H+, CO2 e BPG ocorrem em locais distintos originando mudanas de
conformao da protena, da sua estrutura quaternria. Assim se explica que a ligao de
uma molcula afecte a ligao das outras. As caractersticas funcionais da protena so
reguladas por molculas especficas do seu ambiente.
Estrutura quaternria tensa (T) e relaxada (R) da hemoglobina
Estrutura quaternria tensa (T): ligaes salinas entre as subunidades, o que origina baixa
afinidade para o oxignio.
Estrutura relaxada (R): ausncia de ligaes salinas, aumenta a afinidade para o oxignio.
A oxigenao da cadeia provoca a alterao da conformao T para R.
24
Anemia Falciforme
a)
A hemoglobina existe nas hemcias.
b) Forma de foice das hemcias, caracterstica da anemia falciforme.
Na anemia falciforme, existe uma anormalidade a nvel da hemoglobina: a hemoglobina S

(com duas cadeias normais e duas mutadas). Ocorre substituio de um glutamato (aa
polar) na posio 6 da cadeia por uma valina (aa polar).
A substituio ocorrida na hemoglobina S altera a solubilidade da hemoglobina, provoca o
aparecimento
de
precipitados
fibrosos
resultantes
da
polimerizao
de
DESOXIHEMOGLOBINAS S que deformam a hemcia (forma de foice) e levam sua

destruio e consequente origem da anemia.
25
Colagnio
O colagnio encontrado em quantidades significativas em todos os tecidos e orgos onde
fornece suporte e fora estrutural. O colagnio torna-se assim a protena mais abundante
no organismo humano e a sua presena em percentagem varia de 4% a 70% conforme o
tecido ou orgo considerado.
Composio em aminocidos
muito alta em glicina (33%), prolina (10%), hidroxiprolina 810%) e hidroxilisina (1%). Uma
pequena quantidade de carbohidratos encontrada no colagnio ligado a hidroxilisina.
Sequncia em aminocidos
A unidade molecular do colagnio contm trs cadeias polipeptdicas. No colagnio
presente em alguns tecidos, as trs cadeias tm uma sequncia em aminocidos idntica,
noutros tecidos apenas duas das cadeias so idnticas em sequncia, noutros ainda as trs
cadeias so todas diferentes. Os diferentes tipos de colagnio so caracterizados pelas suas
26
diferenas nas propriedades fsicas devido s diferenas nas sequncias presentes de
aminocidos e percentagem em hidratos de carbono.
notvel a regularidade da sequncia do colagnio: quase todo o terceiro aminocido
glicina. Para alm disso, a sequncia glicina-prolina-hidroxiprolina repetida com muita
frequncia. A presena da glicina no colagnio crtica, porque estabiliza a estrutura do
colagnio (hlice tripla do colagnio, j estudada). O interior do cabo trifilamentar
muito apertado. De facto o nico aminocido que pode caber numa posio interior a
glicina. Como h trs aminocidos por volta na hlice, o terceiro aminocido em cada
filamento conveniente que seja glicina. O aminocido de cada lado da glicina est
localizado fora do cabo, onde h espao para os anis volumosos de prolina e
hidroxiprolina. Assim, verifica-se que a simplicidade da glicina s vezes vantajosa,
porque como ocupa muito pouco espao, permite que filamentos polipeptdicos se
aproximem.
A mutao de uma s glicina no colagnio pode ser letal. Por

exemplo, uma mutao que origine a substituio do resduo 988 de
glicina para um de cistena, leva a uma quebra da hlice tripla
expondo-a a excessiva hidroxilao e glicosilao. Por consequncia,
forma-se um colagnio anormal, que se desdobra temperatura
corporal e no consegue formar os normais arranjos fibrilares
altamente ordenados.
A hidroxilao defeituosa uma das leses bioqumicas no

escorbuto: a deficincia diettica do cido ascrbico (vitamina C),
causadora do escorbuto, leva a que a aco da enzima que promove
as hidroxilaes do colagnio esteja inibida. O colagnio que se
forma ento insuficientemente hidroxilado, sendo incapaz de
formar fibras adequadamente e por isso surgem as leses cutneas e fragilidade dos vasos
sanguneos, to destacados no escorbuto.
27
As fibras do colagnio so fortalecidas por interligaes.
As fibras do colagnio so estabilizadas pela formao de interligaes covalentes. Tais

interligaes
estabelecem-se
intermolecularmente
intramolecularmente.
Intermolecularmente, os derivados aldedicos de duas lisinas prximas do terminal amnico

sofrem uma condensao alcolica. Intramolecularmente, as ligaes estabelecem-se entre
dois radicais, um de hidroxilisina e outro de lisina: estas ligaes estabelecem-se entre
aminocidos prximos do terminal amnico de uma molcula e aminocidos prximos do
terminal carboxlico de outra. O tipo e o grau das interligaes variam com a funo
fisiolgica e com a idade do tecido.
Pessoas com o sndrome de Ehlers-Danlos tipo V: tm articulaes hipermveis e pele

muito distensvel, por causa de uma deficincia na enzima que catalisa essas interligaes.
28
II - ENZIMAS
Objectivos do captulo:
Entender o que uma enzima;
Entender a importncia da aco enzimtica no organismo;
Conhecer as propriedades da funcionalidade enzimtica;
Familiarizar-se com os vrios tipos de enzimas;
Entender o que so cofactores e coenzimas;
Perceber o modelo de Michaelis- Menten;
Entender os conceitos de velocidade de reaco, velocidade mxima, constante de

Michaelis- Menten, afinidade enzimtica;
Perceber a importncia da regulao da actividade enzimtica;
Compreender a catlise enzimtica;
Entender os conceitos de energia de activao, estado de transio;
Entender a inibio da actividade enzimtica, irreversvel e reversvel, competitiva

e no competitiva;
Entender as consequncias da inibio na cintica enzimtica.
29
Enzimas
Polmeros biolgicos que catalisam mltiplos processos dinmicos que tornam a vida
possvel tal como a conhecemos. O seu poder catalisador assim como a sua elevada
especificidade para o substrato so duas caractersticas globais.
Terminologia:
Actividade enzimtica:
Usualmente expressa em micromoles (mol) de substrato convertido em produto por
minuto, em determinadas condies de reaco.
Unidade de actividade enzimtica (U):
Quantidade de enzima que cataliza a converso de 1 mol de substrato por minuto
Actividade especfica de uma preparao enzimtica:

N de unidades de enzima por mg de protena (U/mg), nada indicando a pureza da
preparao.
N de renovao outurnover:
N de molculas de substrato convertidas em produto por unidade de tempo quando a
enzima est saturada.
Isoenzimas:
Formas fisicamente distintas de uma dada enzima, presentes em diferentes tipos celulares
ou compartimentos subcelulares
Velocidade mxima:
Velocidade em condies de saturao da enzima pelo substrato em determinadas
condies de pH, temperatura e fora inica.
(Nota: Katal (kat): nova unidade que designa a converso de uma mol de substrato por segundo)
30
Existem seis classes principais de enzimas:
Muitas enzimas requerem, para alm do substrato, uma segunda molcula orgnica,
metaloorgnica ou simplesmente metal, sem a qual so inactivas para o desempenho da
catlise enzimtica.
Essa molcula designa-se de COFACTOR. Caso seja orgnica ou metaloorgnica, pode-se
designar de COENZIMA.
31
Importncia da aco Enzimtica
Nas condies suaves de T e pH a que as clulas se encontram, a maioria das molculas
biolgicas so bastante estveis. Sem catlise, a maioria das reaces no ocorreriam ou
ocorreriam a baixas velocidades. As enzimas afectam a velocidade da reaco, no o seu
equilbrio. Para que uma reaco ocorra necessrio que se alinhem grupos reactivos,
implicando
uma
barreira
energtica
(E
de
activao).
As
enzimas
diminuem
selectivamente as E de activao das reaces que so vitais para as clulas.
As reaces enzimticas ocorrem no centro activo da enzima. O seu poder cataltico e a

sua especificidade so consequncia das interaces fracas no covalentes que se
estabelecem entre a enzima e o substrato.
No entanto, ao contrrio do que era anteriormente aceite, as enzimas no so

complementares ao substrato. Na realidade, as enzimas so complementares ao
substrato apenas no estado de transio.
Estado de transio: refere-se ao momento molecular instantneo aps o ultrapassar da

E de activao, em que j ocorreram acontecimentos como quebra e formao de
ligaes, aparecimento de cargas (...) at que se atingiu um ponto em que igualmente
provvel a reaco colapsar para o lado dos substratos ou para o lado dos produtos.
32
MODELO DE MICHAELIS-MENTEN
Explica as propriedades cinticas de muitas enzimas. A velocidade de catlise da maioria

das enzimas varia com a concentrao do substrato, sendo quase linearmente proporcional
para concentraes baixas e quase independente para concentraes muito elevadas.
Equao de Michaelis- Menten:

V = Vmax ( |S| / ( |S| + Km) )
Velocidade mxima:
Velocidade quando a enzima est saturada

Km: constante de Michaelis-Menten
Constante numericamente igual concentrao do substrato para a qual V = Vmax / 2

- inversamente proporcional afinidade da enzima pelo substrato.
33
Vmax e Km podem ser determinados pela

variao da concentrao do substrato
Para transformar a equao de Michaelis-Menten numa equao que origine um grfico em

linha recta pode-se considerar o inverso da equao.
1/V = 1/Vmax + (Km/Vmax)(1/|S|)
O traado desta equao designa-se de TRAADO DE LINEWEAVER-BURK que permite a
determinao de Vmax e Km: a intercepo com o eixo das ordenadas d o valor de 1/Vmax e
o declive d Km/Vmax.
34
As Enzimas Alostricas no obedecem cintica de Michaelis-Menten
Existem enzimas cujas propriedades cinticas no so explicadas pelo modelo de MichaelisMenten. Um exemplo disso so as enzimas alostricas. Tais enzimas apresentam
frequentemente grficos sigmides (e no hiperblicos) de velocidade de reaco em
funo de concentrao do substrato por a ligao do substrato a um centro activo afectar
as propriedades de outros centros activos na mesma molcula de enzima. Para alm disso,
a regulao frequente dessas enzimas por protenas reguladoras que se ligam a locais
diferentes dos catalticos tambm afecta as suas propriedades cinticas.
As actividades catalticas de vrias Enzimas so reguladas
Existem diversos mecanismos de regulao: fosforilao, glicosilao, quebra de ligaes

peptdicas especficas, retroinibio, interaces alostricas, etc.
A actividade regulada das enzimas permite que as reaces sejam aceleradas,
controladas e organizadas, de modo a que a clula tenha o maior rendimento energtico
e portanto a maior sobrevivncia.
As Enzimas podem ser inibidas por molculas especficas
A inibio da actividade enzimtica por determinados compostos, um dos mais

importantes mecanismos de controlo dos sistemas biolgicos. O estudo de tais inibies
esclarece esses mecanismos, identifica locais crticos de catlise enzimtica e permite o
fabrico de agentes teraputicos com efeitos sobre aco enzimtica.
Inibio irreversvel: um inibidor reversvel fica fortemente ligado enzima, de forma
covalente ou no. A sua dissociao muito lenta ento.
35
Inibio reversvel: o inibidor liga-se fracamente enzima. O complexo enzima inibidor
dissocia-se rapidamente. Pode ser COMPETITIVA ou no COMPETITIVA.
Inibio competitiva: a enzima pode ligar-se ao substrato ou ao inibidor, mas no ambos.
Muitos inibidores competitivos assemelham-se ao substrato e ligam-se ao centro activo da

enzima. O substrato ento impedido de ligar-se ao mesmo centro activo. Um inibidor
competitivo diminui a velocidade de catlise pela reduo da proporo de molculas de
enzima ligadas ao substrato. Acontece por vezes que uma enzima seja inibida
competitivamente pelo produto da reaco que cataliza, j que esse apresenta
semelhana estrutural com o substrato. A inibio competitiva pode ser anulada pelo
aumento da concentrao do substrato.
Inibio no competitiva: o inibidor e o substrato podem ligar-se simultaneamente
mesma molcula de enzima, porque os seus locais de ligao no se sobrepem. Neste tipo
de inibio no diminudo o n de molculas de enzima ligadas ao substrato, mas sim
diminudo o n de turnover da enzima. Este tipo de inibio no pode ser ultrapassada por
aumento da concentrao do substrato.
36
Diferenciao de Inibio Competitiva e No Competitiva por anlise da cintica
Inibio competitiva:
o Diminui a afinidade de ligao ao

substrato;
o Km aumenta ( necessria uma

concentrao de S superior para
que se atinja metade da saturao
da enzima);
o A inibio competitiva pode ser ento anulada por altas concentraes do

substrato.
o Vmax mantm-se.
Inibio no-competitiva:
o A afinidade de ligao mantmse: Km mantm-se.

o A inibio no competitiva no
pode ser anulada pelo aumento
da concentrao do substrato. A
velocidade da reaco catalisada
diminui: Vmax diminui.
37
Aplicaes
a) Uso do etanol como inibidor competitivo para tratar envenenamento por

etilenoglicol;
b) Uso de penicilina como inibidor irreversvel de uma enzima chave na sntese da
parede celular bacteriana. A penicilina assemelha-se a um dos substratos da enzima
transpeptidase ligando-se irreversivelmente a ela e inactivando-a.
As molculas de RNA tambm podem ser catalisadores muito eficazes
Foi descoberta uma molcula de RNA que actua quer como uma ribonuclease quer como
uma RNA polimerase. Apresenta um alto grau de especificidade, cintica de Michelis
Menten e susceptibilidade a inibio competitiva.
As molculas de RNA podem ser catalisadores muito eficazes, formando estruturas
tridimensionasis precisas que se ligam a substratos especficos. Em relao s protenas,
tm a desvantagem de no formarem nichos apolares e serem muito menos versteis, por
s conterem 4 elementos de construo em vez de 20.
38
Vias Metablicas
Metabolismo
Em todas as clulas do organismo encontram-se centenas de reaces qumicas a ocorrer,

que em conjunto so designadas por metabolismo. Dentro das clulas, a existncia de
enzimas especficas leva a que estas estabeleam sries de reaces com elevadas taxas
de fluxo numa determinada direco as vias metablicas. Tais vias metablicas podem
ser utilizadas para extraco de energia a partir de diferentes nutrientes vias catablicas
ou para sntese de molculas mais complexas vias anablicas. H ainda vias (como o
ciclo de Krebs, por exemplo) que podem ter simultaneamente funes anablicas ou
catablicas e que so designadas por vias anfiblicas.
Mecanismos de Regulao Metablica
As actividades das vias metablicas so constantemente ajustadas de forma a que a

produo de energia ou a sntese de diferentes metabolitos satisfaam as necessidades
fisiolgicas do organismo. Desta forma, as vias de sntese e degradao de uma
determinada molcula nunca esto simultaneamente activas, uma vez que isso se iria
traduzir num gasto ftil de energia. Alguns dos mecanismos envolvidos na regulao das
vias metablicas so:
a) Disponibilidade de substrato;
b) Regulao alostrica (alterao da actividade enzimtica pela ligao de
activadores ou inibidores alostricos);
c) Controlo transcricional (alterao da expresso de uma determinada enzima
envolvida na via metablica, provocada por alteraes na sntese de RNA
mensageiro);
d) Controlo hormonal (a activao ou inibio de enzimas chave em vrias vias
metablicas mediada por hormonas).
39
ATP
O funcionamento de uma clula depende da sua capacidade de extraco e de utilizao

de energia qumica de molculas orgnicas. O ATP a unidade biolgica universal de
energia. O ATP formado na oxidao de diferentes nutrientes (por exemplo glicose,
cidos gordos ou aminocidos) e utilizado para:
a) Realizar trabalho mecnico no processo de contraco muscular e outros
movimentos celulares;
b) O transporte activo de metabolitos;
c) Sntese de macromolculas e outras biomolculas.
O ATP utilizado como o dador imediato de energia livre num sistema biolgico e no
como uma forma de armazenamento a longo prazo. Numa clula, uma molcula de ATP
utilizada menos de um minuto aps a sua formao. Torna-se vital, deste modo para a
clula possuir mecanismos de regenerao do ATP. A formao de ATP o objectivo
primrio dos processos catablicos. O carbono das molculas combustveis oxidado e a
energia libertada usada para regenerar ATP a partir de ADP e Pi.
40
Metabolismo de Hidratos de Carbono e Bioenergtica
Gliclise
Reaces e regulao da gliclise. Rendimento energtico da gliclise. Destinos

metablicos do piruvato. Entrada de outras hexoses na via glicoltica.
Bioenergtica
Formao de acetil-CoA. Ciclo de Krebs. O ciclo de Krebs como ciclo anfiblico. Reaces
anapleurticas. Regulao do ciclo de Krebs. Fosforilao oxidativa. Criao da fora
proto-motriz. Teoria quimiosmtica. Rendimento energtico da oxidao completa de uma
molcula de glicose. Inibidores da fosforilao oxidativa. Desacopladores da fosforilao
oxidativa.
Via das Pentose Fosfato
Formao de NADPH e ribose-5-fosfato. Fase oxidativa e fase no oxidativa. Consequncias

da deficincia da enzima glucose-6-fosfato desidrogenase.
Gluconeognese
Reaces e regulao da gluconeognese. Diferenas entre gliclise e gluconeognese.

Localizao da gluconeognese. Precursores utilizados na sntese de glicose e sua entrada
na via gluconeognica.
Metabolismo do Glicognio
Sntese e degradao do glicognio. Regulao da sntese e degradao do glicognio.

Diferenas no metabolismo do glicognio heptico e muscular. Doenas genticas de
armazenamento do glicognio.
41
Entrada de Glicose nas Clulas
Os combustveis energticos mais importantes so a glicose e os cidos gordos. No entanto,

embora a oxidao de cidos seja mais rentvel do ponto de vista energtico do que o
oxidao da glicose, a glicose um combustvel praticamente universal. o nico
combustvel que pode ser utilizado pelos eritrcitos e por clulas da medula renal bem
como pelo crebro, em circunstncias fisiolgicas normais. A glicose tambm o
combustvel utilizado pelas clulas musculares em condies de exerccio fsico intenso.
O primeiro passo no metabolismo de qualquer nutriente consiste na sua entrada para o
interior da clula. A glicose entra nas clulas atravs de transportadores especficos e uma
vez nas clulas imediatamente fosforilada a glicose-6-fosfato pela enzima hexocinase (ou
glucocinase em alguns casos). Esta fosforilao importante uma vez que a adio de uma
carga negativa molcula impede a sua difuso atravs da membrana. Conforme as
condies fisiolgicas em que a clula se encontra, a glicose-6-fosfato pode ter diferentes
destinos:
a) Converso em piruvato atravs da gliclise;
b) Converso em ribose-5-fosfato e NADPH atravs da via das pentose fosfato;
c) Armazenamento sob a forma de glicognio.
42
Gliclise
A gliclise uma via metablica que ocorre no citoplasma de praticamente todas as

clulas, quer estas estejam em condies aerbicas ou anaerbicas. Por cada molcula de
glicose degradada pela via glicoltica so formadas duas molculas de piruvato, de ATP e
de NADH. Em condies anaerbicas, a gliclise torna-se essencial, pois a nica via que
permite a sntese de ATP. Nestas condies, o piruvato formado convertido em lactato,
de forma a regenerar o NAD+ e poder prosseguir a gliclise. Na ausncia de oxignio, a
gliclise a nica via que a clula pode utilizar para a sntese de ATP a partir de ADP e Pi.
Em condies aerbicas o piruvato transformado em acetil-CoA que entra no ciclo de
Krebs, o que vem permitir um maior rendimento energtico. Para a utilizao de glicose
em condies aerbicas, necessrio no s a funcionalidade das enzimas glicolticas e a
presena de oxignio, mas tambm sistemas enzimticos mitocondriais como a piruvato
desidrogenase, o ciclo de Krebs e a cadeia respiratria.
Reaces da Gliclise
Todas as enzimas da gliclise so encontradas no citoplasma celular e catalisam as

reaces envolvidas na converso de glicose a piruvato. Na primeira fase da gliclise
ocorre consumo de glicose e clivagem da glicose em dois compostos em C3.
43
A glicose entra na via glicoltica pela fosforilao a glicose-6-fosfato, reaco catalisada
pela hexocinase. Esta reaco irreversvel e envolve o consumo de ATP. A hexocinase
inibida de forma alostrica pelo produto final glicose-6-fosfato. No fgado, esta reaco
tambm catalisada pela glucocinase, uma isoenzima da hexocinase, que actua s para
elevadas concentraes de glicose uma vez que tem uma afinidade bastante mais baixa
para o substrato. A funo da glucocinase remover a glicose do sangue quando esta se
encontra em nveis elevados (por exemplo, a seguir a uma refeio). A glucocinase, ao
contrrio da hexocinase, especfica para a glicose.
A glicose-6-fosfato um metabolito importante, pois um intermedirio comum a
diferentes vias metablicas (gliclise, gluconeognese, glicognese, gluconeognese e via
das pentose fosfato). Na gliclise aps a sua converso em frutose-6-fosfato, ocorre um
novo passo de fosforilao que leva formao de frutose-1,6-bifosfato, numa reaco
irreversvel. A enzima que catalisa esta reaco a fosfofrutocinase, uma enzima chave
na regulao da gliclise. A fosfofrutocinase uma enzima alostrica e indutvel. Nveis
elevados de ATP inibem alostericamente a enzima, diminuindo a afinidade para o
substrato. O AMP e ADP invertem a aco inibitria do ATP, pelo que a actividade da
enzima aumenta quando a razo ATP/AD(M)P baixa, ou seja, quando h uma baixa carga
energtica na clula. A fosfofrutocinase tambm inibida na presena de elevada
concentrao de H+, de forma a evitar a produo excessiva de cido lctico e consequente
acidose metablica. A fosfofrutocinase ainda inibida pelo citrato (que assinala a
abundncia de precursores biossintticos formados a partir de glicose) e activada pelo
metabolito frutose-2,6-bifosfato.
A frutose-1,6-bifosfato formada clivada em dois compostos em C3 (gliceraldedo-3fosfato e dihidroxicetona-fosfato) interconvertveis. A enzima triose fosfato isomerase
converte rapidamente dihidroxicetona-fosfato em gliceraldedo-3-fosfato, o qual pode
prosseguir para as seguintes reaces glicolticas.
44
Na segunda fase da gliclise as duas molculas de gliceraldedo-3-fosfato provenientes de
cada molcula de glicose vo ser convertidas em piruvato, ocorrendo nesta fase sntese de
ATP.
gliceraldedo-3-fosfato
oxidado
pela
enzima
gliceraldedo-3-fosfato
desidrogenase, originando 1,3-bifosfoglicerato e NADH. Para esta reaco ocorrer

necessrio a presena de NAD+ na clula, o qual reduzido nesta reaco a NADH. Na
reaco seguinte, catalisada pela enzima fosfoglicerato cinase, o 1,3-bifosfoglicerato
convertido em 3-fosfoglicerato, ocorrendo a hidrlise de uma ligao fosfato altamente
energtica e que est associada sntese de ATP (fosforilao ao nvel do substrato). O 3fosfoglicerato isomerizado a 2-fosfoglicerato ocorrendo de seguida a converso deste
composto a fosfoenolpiruvato pela enzima enolase. Na ltima reaco da gliclise, a
enzima piruvato cinase catalisa a sntese de piruvato, ocorrendo novamento neste passo a
formao de ATP. Esta reaco irreversvel e a enzima piruvato cinase sujeita a
regulao, sofrendo inibio na presena de ATP.
45
Rendimento energtico da gliclise
Na primeira fase da gliclise ocorre gasto de duas molculas de ATP, mas na segunda so
formados 2 molculas de ATP por cada molcula em C3, o que corresponde a um ganho
lquido de 2 molculas de ATP. Por cada molcula de glicose oxidada por esta via so
tambm reduzidas 2 molculas de NAD+ a NADH.
Destinos metablicos do piruvato
A oxidao completa da glicose requer no s oxignio molecular, mas tambm sistemas

enzimticos mitocondriais como o complexo piruvato desidrogenase (que converte
piruvavato em acetil-CoA), ciclo de Krebs e cadeia respiratria. Em condies aerbicas e
na presena destes sistemas enzimticos, o piruvato formado na gliclise transportado
para a mitocndria por um transportador especfico. Dentro da mitocndria, o piruvato
descarboxilado oxidativamente a acetil-CoA pelo complexo piruvato desdrogenase e na
presena de tiamina (TPP-vitamina B1). O complexo piruvato desidrogenase constitudo
por trs enzimas diferentes que actuam sequencialmente (piruvato desidrogenase,
dihidrolipoil transacetilase e dihidrolipoil desidrogenase). O facto destas enzimas actuarem
num complexo enzimtico de espao confinado, leva a que os intermedirios metablicos
no se dissociem e permaneam ligados s enzimas, o que se traduz num aumento da taxa
da reaco e elimine reaces colaterais. A piruvato desidrogenase catalisa uma reaco
irreversvel e portanto a acetil-CoA no pode ser utilizada na sntese de piruvato. A
regulao desta enzima d-se por inibio feed-back, em que os produtos finais (acetil-CoA
e NADH) inibem a actividade da enzima. tambm regulada por modificao covalente a
fosforilao inibe a actividade enzimtica, a desfosforilao activa-a.
46
Quando o fornecimento de oxignio escasso (o que acontece, por exemplo no exerccio
fsico anaerbico) ou quando a clula no possui sistemas enzimticos mitocondriais (caso
dos eritrcitos), a reoxidao do NADH atravs da cadeia respiratria encontra-se
impedida, o que poderia levar inibio da gliclise (o NAD+ um cofactor essencial da
gliclise). Nestas circunstncias, o piruvato convertido em lactato pela enzima lactato
desidrogenase, havendo simultaneamente reoxidao do NADH a NAD+, o que permite o
prosseguir da via glicoltica. Assim, a gliclise pode ocorrer em condies anaerbicas,
embora o rendimento energtico seja desta forma muito mais baixo (2 molculas de ATP
por cada molcula de glicose consumida). Consequentemente, para obter uma
determinada quantidade de energia, haver consumo de muito mais glicose e aumentar a
produo de lactato, que poder provocar acidose lctica.
Nos mamferos, todas as clulas possuem a enzima lactato desidrogenase (LDH), sendo o
lactato o produto final da gliclise em condies anaerbicas. Em condies aerbicas e na
presena dos sistemas enzimticos mitocondriais funcionais, as clulas podem utilizar o
oxignio molecular e as reaces mitocondriais para oxidar NADH a NAD+. Nestas
condies, o piruvato transportado para a mitocndria onde convertido em acetil-CoA
que prossegue para o ciclo de Krebs e cadeia respiratria.
Alguns microrganismos possuem um mecanismo alternativo para oxidar o NADH formado na
gliclise. Utilizam a enzima lcool desidrogenase, regenerando o NAD+ e produzindo etanol
(fermentao alcolica).
47
Entrada de outras hexoses na via glicoltica
Alguns alimentos vulgarmente utilizados na dieta humana possuem na sua composio

dissacardeos como sacarose ou lactose. A hidrlise destes dissacardeos pelas enzimas
invertase (ou sacarase) e lactase levam formao respectivamente de frutose e
galactose, para alm da glicose. Estes monossacardeos podem, tal como a glicose, ser
convertidos em intermedirios glicolticos.
A frutose metabolizada mais rapidamente que a glicose no fgado. A enzima frutocinase,

presente no fgado, converte frutose em frutose-1-fosfato. A frutose-1-fosfato formada
clivada por uma aldolase em gliceraldedo e no intermedirio glicoltico dihidroxicetona
fosfato (a ausncia desta enzima provoca intolerncia frutose hereditria). O
gliceraldedo tambm convertido no intermedirio glicoltico gliceraldedo-3-fosfato pela
enzima triocinase. Estes dois compostos podem ento prosseguir a via glicoltica. A entrada
de frutose na gliclise por esta via, leva a que seja ultrapassada a reaco catalisada pela
principal enzima envolvida na regulao da gliclise a formao de frutose-1,6-bifosfato
pela enzima fosfofrutocinase. Isto leva a que o metabolismo da frutose se d muito mais
rapidamente e possa ocorrer uma sntese descontrolada de cido lctico. Para alm disso,
parte do piruvato formado pode tambm originar acetil-CoA que pode ser utilizada na
sntese de cidos gordos e triglicridos. Ocorre ento um aumento na secreo de VLDL
podendo provocar hipertrigliceridemia. O aumento de VLDL provoca por sua vez um
aumento nas LDL que transportam colesterol.
A galactose rapidamente convertida em glicose no fgado. A galactose fosforilada pela

galactocinase e o produto resultante galactose-1-fosfato reage com UDP-glicose para
formar UDP-galactose e glicose-1-fosfato. A glicose-1-fosfato ento convertida em
glicose-6-fosfato e prossegue a via glicoltica. A incapacidadade em metabolizar galactose,
por deficincias nas enzimas envolvidas nesse metabolismo provocam a doena
galactosemia. Nesta doena ocorre um aumento dos nveis de galactose que pode ser
reduzida a galactitol que pode acumular e provocar cataratas.
48
49
Bioenergtica
A oxidao completa da glicose pressupe, como referido, a presena de oxignio

molecular, bem como os sistemas enzimticos mitocondriais complexo piruvato
desidrogenase, ciclo de Krebs e cadeia respiratria.
Formao de acetil-CoA
O piruvato formado na gliclise transportado para a mitocndria por um transportador

especfico, sendo a convertida em acetil-CoA pelo complexo piruvato desidrogenase. A
acetil-CoA uma molcula central no metabolismo, dado que um ponto de convergncia
de vrias vias metablicas.
glucose
c. gordos
amino cidos
(cetognicos)
piruvato
Acetil CoA
sntese de
corpos cetnicos
sntese de
cidos gordos
sntese de
colesterol
oxidao via
ciclo de Krebs
Ciclo de Krebs
O ciclo de Krebs, tambm designado por ciclo do cido ctrico ou ciclo dos cidos
tricarboxlicos, uma via metablica que ocorre na matriz mitocondrial e que permite a
oxidao de resduos de acetil a CO2. A maior parte da acetil-CoA que entra no ciclo de
Krebs proveniente da oxidao de cidos gordos ou da oxidao do piruvato catalisada
pelo complexo piruvato desidrogenase. Tal como o prprio ciclo, estes processos ocorrem
na mitocndria.
A acetil-CoA entra no ciclo atravs de uma reaco de condensao com oxaloacetato
(catalisada pela enzima citrato sintetase), originando citrato. O citrato isomerizado a
isocitrato. Nos dois passos seguintes, ocorrem duas descarboxilaes oxidativas, com
50
formao de CO2 e NADH. Na primeira reaco a enzima isocitrato desidrogenase converte
isocitrato em -cetoglutarato, o qual transformado na reaco seguinte em succinilCoA, pela enzima -cetoglutarato desidrogenase. O succinil-CoA clivado em succinato e
CoA, numa reaco suficientemente exergnica para originar a sntese de GTP. As trs
ltimas reaces do ciclo permitem a regenerao de oxaloacetato. A enzima succinato
desidrogenase (protena integral da membrana mitocondrial interna) converte succinato
em fumarato, havendo nesta reaco formao de FADH2. A enzima fumarase catalisa uma
reaco de hidratao que leva formao de malato, o qual oxidado a oxaloacetato,
levando mais uma vez produo de NADH. Esta reaco completa o ciclo, havendo a
formao de 2 molculas de CO2, 3 molculas de NADH, uma molculas de FADH2 e uma
molcula de GTP (que pode ser convertido em ATP), por cada molcula de acetil-CoA que
entra no ciclo.
O ciclo de Krebs como via anfiblica
O ciclo de Krebs, alm das funes catablicas j descritas, apresenta tambm funes
anablicas designado por via anfiblica. O ciclo de Krebs fornece precursores
51
importantes para vias anablicas. o caso, por exemplo, da utilizao de oxaloacetato na
gluconeognese para a sntese de glicose, da utilizao de -cetoglutarato e oxaloacetato
para a sntese de aminocidos, ou da utilizao do succinil-CoA para a sntese do grupo
heme.
Reaces anapleurticas
Os intermedirios do ciclo de Krebs encontram-se na mitocndria em quantidades muito

reduzidas. Torna-se assim necessrio a reposio destes compostos quando so utilizados
em reaces anablicas, de modo a permitir a continuidade do ciclo. Esta reposio
conseguida atravs das chamadas reaces anapleurticas, que conduzem formao de
intermedirios do ciclo de Krebs. A reaco anapleurtica mais importante a catalisada
pela enzima piruvato carboxilase que converte piruvato em oxaloacetato. O oxaloacetato
formado pode rapidamente ser transformado noutros intermedirios do ciclo at permitir a
reposio do composto em falta.
Em contraste com o piruvato, a acetil-CoA no um metabolito anapleurtico. A acetilCoA que entra no ciclo completamente oxidada a CO2, no havendo por isso tomos de
carbono disponveis para reaces biossintticas.
52
Regulao do ciclo de Krebs
Os principais locais de regulao do ciclo de Krebs correspondem a reaces que no de

equilbrio, como o caso das reaces catalisadas pelas enzimas citrato sintetase,
isocitrato desidrogenase e -cetoglutarato desidrogenase. As enzimas citrato sintetase e cetoglutarato desidrogenase so inibidas pelo produto final, citrato e succinil-CoA
respectivamente. As enzimas isocitrato desidrogenase e -cetoglutarato desidrogenase so
activadas pelo clcio. O clcio encontra-se aumentado durante o processo de contraco
muscular, situao em que h uma maior demanda energtica. As enzimas envolvidas na
regulao so tambm afectadas pelo estado energtico da clula dado pelas razes
ATP/ADP e NADH/NAD+. Uma diminuio destas razes traduz um dfice energtico na
clula e conduz activao do ciclo.
53
Fosforilao Oxidativa
Os equivalentes redutores (NADH e FADH2) que se formam na gliclise, sntese de acetilCoA e ciclo de Krebs, transferem os electres atravs de uma srie de complexos proteicos
at ao aceitador final que o oxignio molecular. Esta transferncia de electres conduz
formao de uma grande quantidade de energia sob a forma de ATP, num processo
designado por fosforilao oxidativa. Este processo aerbico, dado que requer o oxignio
como ltimo aceitador de electres.
A cadeia respiratria parte do processo de fosforilao oxidativa e catalisa a

transferncia de electres desde o NADH e FADH2 at ao oxignio molecular. A cadeia
respiratria consiste em quatro complexos proteicos (I, II, III e IV), sendo que o complexo II
a enzima succinato desidrogenase, participante no ciclo de Krebs. A cadeia respiratria
consiste ainda em duas molculas transportadoras mveis, ubiquinona e citocromo c, que
permitem o transporte de electres entre os diferentes complexos proteicos. A enzima ATP
sintetase por vezes includa na cadeia respiratria e designada por complexo V.
Todos os complexos da cadeia respiratria so constitudos por vrias cadeias peptdicas e
contm uma srie de centros redox. Esses centros redox so flavinas (FMN e FAD nos
complexos I e II), centros de Fe/S (complexos I, III e IV) e grupos heme (complexos II, III e
IV).
A oxidao do NADH por esta forma permite a regenerao do NAD+ em condies
aerbicas. Esta regenerao em condies anaerbicas conseguida pela converso de
piruvato em lactato.
54
O complexo I transfere electres do NADH para a ubiquinona, via FMN e vrios centros de
Fe/S. O complexo II transfere electres do FADH2 tambm para a ubiquinona ou coenzima
Q. A ubiquinona ento reduzida e transfere os electres para o complexo III (a
ubiquinona um componente mvel na membrana, podendo por isso fazer essa
transferncia). O complexo III, por sua vez transfere os electres para o citocromo c (outra
molcula mvel) que os transfere para o complexo IV ou citocromo oxidase. O complexo IV
catalisa a transferncia final dos electres para o oxignio molecular que convertido em
gua. O transporte de electres pelos complexos da cadeia respiratria ocorre
vectorialmente. No entanto, embora estes complexos estejam todos localizados na
membrana mitocondrial interna, eles no se encontram em contacto. As molculas
ubiquinona e citocromo c so molculas mveis que permitem fazer a transferncia de
electres entre os diferentes complexos.
Criao de uma fora proto-motriz
O transporte de electres atravs da cadeia respiratria est associado ao bombeamento

de protes ao nvel dos complexos I, III e IV. Assim, durante a transferncia de electres, a
concentrao de H+ aumenta, levando a uma diminuio do valor de pH no espao
intermembranar. Isso leva formao de um potencial qumico (pH alcalino no interior
da matriz mitocondrial) e de um potencial elctrico devido diferena de cargas ( negativo no interior da matriz mitocondrial). O conjunto dessas duas foras designado
por fora protomotriz. Por cada molcula de NADH oxidada so bombeados 10 protes, ao
passo que a oxidao do FADH2 leva apenas ao bombeamento de 6 protes, uma vez que
no h bombeamento de protes ao nvel do complexo II. Isso leva a diferentes
rendimentos energticos na oxidao das duas molculas: a oxidao de uma molcula de
NADH leva produo de 2,5 molculas de ATP ao passo que a oxidao de uma molcula
de FADH2 conduz apenas sntese de 1,5 molculas de ATP.
55
Teoria quimiosmtica
O transporte de electres atravs da

cadeia respiratria at ao oxignio
molecular, conduz, como referido, ao
bombeamento de protes para o espao
intermembranar. A fora proto-motriz
originada desta forma utilizada para
conduzir a sntese de ATP pela enzima
ATP
sintetase.
Este
acoplamento
existente entre a formao de um

gradiente
de
protes
pela
cadeia
respiratria e a sntese de ATP

designada por teoria quimiosmtica.
Os protes bombeados durante o transporte de electres pela cadeia respiratria podem

retornar matriz mitocondrial pela enzima ATP sintetase. Esta enzima consiste em duas
unidades funcionais: um canal que permite a passagem de protes (subunidade F0) e a
unidade cataltica onde ocorre a sntese de ATP (subunidade F1). A unidade cataltica
possui 3 locais activos. O processo cataltico pode ser dividido em trs fases: na primeira
56
fase ocorre ligao do ADP e do Pi, na
segunda d-se a sntese de ATP e finalmente,
na terceira, o ATP formado libertado. Cada
vez que ocorre passagem de protes atravs
da unidade F0, ocorre uma modificao
conformacional e cada um dos trs locais
activos passa de uma fase para a fase
seguinte.
Rendimento energtico da oxidao completa de uma molcula de glicose
As molculas de NADH formadas na gliclise, no citoplasma das clulas, podem ser

transportadas para a mitocndria por dois transportadores diferentes (glicerol-fosfato ou
malato-aspartato). Conforme o tipo de transportador, originam NADH ou FADH2
mitocondrial, o que se ir traduzir numa eficincia energtica diferente.
57
Inibidores da fosforilao oxidativa
Existem vrios venenos, como o cianeto, que conduzem inibio do processo de

fosforilao oxidativa. A inibio deste processo leva a que a clula tenha que recorrer
gliclise para obteno de energia. A gliclise um processo muito menos rentvel
energeticamente, pelo que a inibio da fosforilao oxidativa conduz a um aumento do
consumo
de
glicose
por
parte
das
clulas,
uma
activao
da
gliclise
consequentemente a um aumento dos nveis de lactato, o que poder levar a uma situao
de acidose lctica, que aliada ao dfice energtico pode a conduzir a uma situao
extremamente grave, podendo mesmo originar a morte.
Desacopladores da fosforilao oxidativa
Os desacopladores so substncias que provocam a separao funcional entre a oxidao

do NADH ou FADH2 e a fosforilao do ADP a ATP. Os desacopladores permitem a dissipao
do gradiente de protes no espao intermembranar sem que haja o envolvimento da ATP
sintetase neste processo. O desacoplamento
pode resultar de danos qumicos ocorridos na
membrana interna ou da aco de substncias
como o 2,4-nitrofenol que transportam os
protes atravs da membrana. A energia
contida no gradiente de protes ento
dissipada sob a forma de calor. A utilizao
destes compostos leva a um descontrolo da
respirao, a um aumento da taxa metablica
e uma diminuio do peso corporal.
A termogenina um desacoplador natural
existente no tecido adiposo castanho. Este
tecido encontrado, por exemplo, em recmnascidos ou em animais que hibernam e tem
como objectivo a produo de calor. Ao
contrrio
do
que
acontece
com
outros
desacopladores, este um processo regulado e

localizado.
58
Via das Pentose Fosfato
A via das pentose fosfato, tambm designada por via das hexose monofosfato, uma via
oxidativa, localizada no citoplasma e que, tal como a gliclise, iniciada a partir de
glicose-6-fosfato. O objectivo desta via a formao de NADPH, necessrio em muitas vias
biossintticas (ex. sntese de cidos gordos), e de ribose-5-fosfato, necessrio para a
sntese de nucletidos constituintes dos cidos nucleicos.
Fase oxidativa
fase
oxidativa
da
via
transforma glicose-6-fosfato em
ribulose-5-fosfato, a qual pode
ser
convertido
fosfato.
Neste
em
ribose-5-
processo
so
formadas uma molcula de CO2 e

duas de NADPH. A primeira
reaco da via catalisada pela
enzima
glicose-6-fosfato
desidrogenase e a principal
enzima
envolvida
na
sua
regulao.
59
Fase no oxidativa
Esta fase ocorre quando h uma maior necessidade em NADPH do que em ribose-5-fosfato.
Desta forma ribulose-5-fosfato pode ser convertida em frutose-6-fosfato (por enzimas
designadas transaldolases e transcetolases), que por sua vez podem originar glicose-6fosfato. A glicose-6-fosfato formada pode ser de novo utilizada na via das pentose fosfato
para formar mais NADPH. Caso a clula se encontre com carncia de energia
adicionalmente carncia em NADPH, parte da glicose-6-fosfato e gliceraldedo-3-fosfato
formados na fase no oxidativa, pode ser canalizada para a gliclise para a produo de
ATP.
Deficincia na glucose-6-fosfato desidrogenase
A enzima glucose-6-fosfato desidrogenase a principal enzima envolvida na regulao da

via das pentose-fosfato, pelo que a deficincia gentica nesta enzima conduz a uma
diminuio na produo de NADPH. A baixa dos nveis de NADPH leva inibio da
regenerao da glutationa reduzida nos eritrcitos. A glutationa reduzida utilizada como
defesa antioxidante e por isso, nesta situao, os eritrcitos encontram-se mais sujeitos
exposio de agentes oxidantes. A exposio a agentes oxidantes leva peroxidao
lipdica das membranas dos eritrcitos e sua destruio, podendo provocar uma situao
de anemia.
60
Gluconeognese
Alguns tecidos, como o crebro e eritrcitos, so dependentes da utilizao de glicose

como combustvel energtico. Numa situao em que no haja fornecimento de glicose
atravs da alimentao, o organismo pode recorrer, num perodo de tempo limitado, s
reservas
de
glicognio
hepticas.
No
entanto,
essas
reservas
esgotam-se
em
aproximadamente 24 horas. Assim, o organismo tem que recorrer a outras vias para manter
os nveis de glicose sanguneas para perodos de tempo superiores a um dia. Isso possvel
atravs da sntese de glicose a partir de precursores no glicdicos, como o lactato,
aminocidos ou glicerol, numa via metablica designada por sntese de novo de glicose ou
gluconeognese.
A gluconeognese ocorre predominantemente no fgado, embora possa tambm ocorrer em

menor escala no rim. Os principais precursores gluconeognicos so os aminocidos
derivados de protena muscular. Numa situao de jejum, ocorre uma degradao de
protena muscular em elevada extenso, de forma aos aminocidos poderem ser utilizados
para a sntese de glicose. Outro precursor importante o lactato, formado nos eritrcitos
ou nos msculos em exerccio anaerbico. Numa situao de jejum, ocorre tambm
degradao de triglicridos do tecido adiposo, e o glicerol resultante dessa hidrlise
utilizado para a sntese de glicose. Pelo contrrio, os cidos gordos provenientes dessa
hidrlise no contribuem para a gluconeognese.
A maior parte das enzimas envolvidas na gluconeognese so comuns gliclise. Existem,

no entanto, enzimas especficas desta via, e que so responsveis pela regulao da
gluconeognese. A existncia de reaces irreversveis na gliclise e na gluconeognese
leva a uma regulao diferenciada das duas vias, evitando a sua ocorrncia simultnea e o
consumo intil de energia.
Os primeiros passos da gluconeognese ocorrem na mitocndria. O piruvato carboxilado a

oxaloacetato pela enzima piruvato carboxilase (enzima activada por acetil-CoA). Como o
oxaloacetato um intermedirio do ciclo de Krebs, todos os aminocidos que possam ser
desaminados a um intermedirio do ciclo ou a piruvato, podem ser utilizados na
gluconeognese. O oxaloacetato transportado para o citoplasma e a convertido em
fosfoenolpiruvato
pela
enzima
fosfoenolpiruvato
carboxicinase.
Na
gliclise
transformao de fosfoenolpiruvato em piruvato ocorre num s passo catalisado pela

enzima piruvato cinase. Os passos seguintes da gluconeognese so catalisados pelas
61
mesmas enzimas da gliclise at
formao de frutose-1,6-bifosfato.
Ocorre ento remoo de um grupo
fosfato da frutose-1,6-bifosfato por
aco da frutose-1,6- bifosfatase
(enzima inibida pro frutose 2,6
bifosfato). A fosforilao de frutose6-fosfato
frutose-1,6-bifosfato,
que ocorre na gliclise, catalisada

pela fosfofrutocinase. A frutose-6fosfato isomerizada a glucose-6fosfato e esta desfosforilada pela
glucose-6-fosfatase
na
ltima
reaco da via. Na gliclise a

fosforilao da glicose para formar
glicose-6-fosfato catalisada pela
hexocinase.
glucose-6-fosfatase
apenas existe no fgado e no rim,

pelo que estes so os nicos locais
do
organismo
onde
ocorre
gluconeognese. A glicose formada

aps a aco da glucose-6-fosfatase
ento libertada para o sangue.
O glicerol , como referido, um

substrato gluconeognico. Para se
dar essa converso, o glicerol
fosforilado
glicerol-3-fosfato
entrando depois na gluconeognese

via dihidroxicetona-fosfato.
62
Ciclo de Cori
O ciclo de Cori estabelece-se entre

tecidos produtores de lactato (p.e.
msculo em condies anaerbicas) e o
fgado.
lactato
produzido
pelo
msculo (durante o catabolismo da

glicose em condies anaerbicas)
transportado pela corrente sangunea
at ao fgado. No fgado convertido
em glicose pela gluconeognese e essa
glicose formada transportada para o
msculo onde pode novamente ser
convertida em lactato aps o processo
de gliclise.
Metabolismo do Glicognio
O glicognio a forma prontamente mobilizvel da glicose, sendo um polmero altamente

ramificado, com a maioria dos resduos unidos por ligaes 1,4 e em que as ramificaes
surgem de ligaes 1,6 (1 em cada 10 resduos).
A presena de glicognio aumenta muito a quantidade de glucose disponvel de imediato
quer no intervalo entre as refeies quer durante a actividade muscular. Para ter uma
ideia do que isto significa, a energia que corresponde quantidade de glicognio total num
organismo saudvel cerca de 15 vezes superior quantidade de energia correspondente
glicose existente nos fluidos corporais.
Os dois locais principais de armazenamento de glicognio so o fgado e o msculoesqueltico. A concentrao de glicognio maior no fgado mas a quantidade de
glicognio armazenada superior no msculo porque tem maior massa. No entanto, quase
todos os tecidos animais sintetizam glicognio. No citosol, observam-se grnulos de
glicognio.
63
A sntese e degradao de glicognio so vias importantes porque:
o Regulam os nveis sanguneos de glucose e fornecem uma reserva de glucose para
situaes de exerccio intenso;
o A regulao hormonal do metabolismo mediada por mecanismos de importncia
geral, como o controlo coordenado destas vias pelo cAMP e regulao das enzimas
por fosforilao reversvel;
o Existem uma srie de deficincias enzimticas hereditrias que resultam em
desequilbrios deste metabolismo que s vezes atingem gravidades letais.
Degradao do glicognio
O glicognio quebrado pelo ortofosfato para originar glucose fosforilado, numa reaco
catalisada pela glicognio fosforilase:
Nesta reaco d-se a remoo sequencial de resduos glicosil das extremidades no
redutoras de uma molcula de glicognio.
A clivagem fosforoltica do glicognio energeticamente vantajosa porque o acar que se
liberta est fosforilado podendo entrar na via glicoltica sem gasto de ATP (j que seria
necessrio fosforil-la) e a presena do fosfato d uma carga negativa que impede a
glucose de se difundir para o exterior da clula.
64
A fosforilase s degrada ligaes -1,4
pelo
que
apenas
possibilita
uma
degradao limitada do glicognio. A

fosforilase
pra
sua
actuao
quando atinge o resduo terminal que

dista
resduos
do
ponto
de
ramificao.
A fosforilase cliva 5 ligaes -1,4

numa das ramificaes e 3 na outra.
Nesse ponto pra a sua actividade pois
os resduos esto a 4 resduos do
ponto de ramificao. Agora entra em
aco uma enzima diferente. Uma
enzima
transferase
transfere
um
bloco de 3 resduos glicosil de uma

ramificao para a outra. Quebra-se
assim uma ligao glicosdica 1,4
entre e estabelece-se uma nova. Esta
transferncia expe um resduo
aco de uma terceira enzima 1,6
glicosidase, tambm conhecida como
enzima desramificadora. Esta enzima
hidrolisa a ligao glicosdica 1,6.
Ento as enzimas transferase e desramificadora convertem a estrutura ramificada numa
estrutura linear, o que torna possvel a clivagem adicional pela fosforilase. interessante
notar que a transferase e a enzima desramificadora so partes da mesma enzima e que, de
facto, se trata de uma s cadeia polipeptdica que contm ambos os centros catalticos.
A glucose-1-fosfato, libertada pela aco da glicognio fosforilase, convertida em

glucose-6-fosfato pela fosfoglucomutase.
65
O fgado possui a glucose-6-fosfatase, uma enzima hidroltica ausente no msculo
Uma das principais funes do fgado a de manter relativamente constante os nveis de

glicose no sangue. A glicose libertada captada principalmente pelo crebro e pelo
msculo-esqueltico. Ora a glicose fosforilada no pode sair facilmente das clulas,
contrariamente ao que acontece glucose. Como foi referido, o fgado possui uma enzima
hidroltica, glucose-6-fosfatase, que permite a sada de glucose. Como esta enzima est
ausente no msculo e crebro, a glicose fica retida o que importante porque estes rgos
necessitam de grandes quantidades deste combustvel para a regenerao de ATP.
Verifica-se que o fgado armazena glucose de uma forma no egosta fazendo-o tambm
para o benefcio de outros tecidos. Na ausncia de glucose-6-fosfatase, a glicose formada
pode ser utilizada na gliclise para a sntese de ATP (msculo) ou na via das pentosefosfato.
Sntese do glicognio
A sntese de glicognio ocorre por uma via distinta da via inversa do processo de
degradao. Este no um caso isolado no metabolismo geral: vias separadas de sntese e
degradao permitam uma maior flexibilidade tanto em termos energticos como de
regulao.
66
O ponto de partida para a sntese de glicognio a glucose 6-fosfato que pode derivar de
glucose livre por aco da enzima hexocinase ou pela enzima glucocinase. Para que se
inicie a sntese de glicognio, a glucose 6-fosfato reversvelmente convertida a glucose1-fosfato pela fosfoglucomutase.
A UDP-glucose sintetizada a partir de glucose-1-fosfato e uridina trifosfato (UTP), numa
reaco catalisada pela enzima UDP-glucose pirofosforilase.
Na sntese do glicognio, torna-se necessria a adio de unidades glicosil aos resduos

terminais no redutores da molcula. As unidades glicosil activadas da UDP-glucose so
transferidas para o grupo hidroxilo do C-4 terminal do glicognio para formar uma ligao
1,4 glicosdica. Esta reaco catalisada pela glicognio sintetase, que consegue
apenas adicionar resduos glicosil se a cadeia polissacardea contiver j mais de 4 resduos.
67
A sntese de glicognio necessita de um primer (iniciador). A protena glicogenina (37 kDa)
serve de protena iniciadora qual adicionada o primeiro resduo de glucose e que serve
igualmente de catalisadora da sntese da molcula nascente de glicognio at estarem
ligados cerca de 8 resduos de glucose.
A glicognio sintetase s capaz de catalisar a sntese de ligaes a 1,4. ento

necessrio outra enzima para catalisar a formao de ramificaes, importantes para a
solubilidade do glicognio. A ramificao ocorre aps a introduo de uma srie de
resduos glicosil unidos por ligao 1,4. Uma ramificao criada por quebra de uma
ligao a 1,5 e criao de uma ligao 1,6, pela enzima glicosil-(4-6)-transferase: um
bloco de resduos, geralmente de 7, transferido para um local mais interior da molcula,
criando uma nova ramificao.
Para a sntese de glicognio h gasto de uma molcula de ATP por cada glucose, gasta na
formao de UTP. No entanto a oxidao completa de uma glucose libertada pela
degradao do glicognio permite a obteno de 37 ATP. Estes 37 ATP versus 1 ATP gasto
no armazenamento significa que a eficincia do armazenamento energtico em glicognio
de cerca de 97%.
Regulao da Sntese e Degradao do Glicognio
A sntese e degradao do glicognio esto coordenadas de modo que a glicognio

sintetase est praticamente inactiva quando a fosforilase est totalmente activa e viceversa. O metabolismo do glicognio profundamente afectado por hormonas especficas.
A insulina indica um estado alimentado e induz a sntese de glicognio no fgado. A
epinefrina e o glucagon so hormonas com o efeito oposto ao da insulina, e so libertadas
como consequncia de um estado de jejum ou exerccio muscular, por exemplo. Estimulam
a degradao do glicognio no fgado, fazendo com que aumentem os nveis sanguneos de
68
glucose. A epinefrina e o glucagon no entram nas clulas alvo. Em vez disso ligam-se a
receptores proteicos especficos na membrana plasmtica. Estes complexos hormonareceptor activam a sntese de cAMP que leva activao de uma cascata de reaces que
por sua vez conduzem activao da fosforilase e inibio da glicognio sintetase. A
fosforilase activada pela fosforilao de um resduo especfico de serina. A forma
inactiva da enzima designada de fosforilase b e a forma activa designada de fosforilase
a. A fosforilao da enzima catalisada pela fosforilase cinase e a desfosforilao
mediada por uma fosfatase especfica que hidrolisa o fosforil ligado serina.
A glicognio sintetase inactivada pela fosforilao de um resduo especfico de serina. A
fosforilao converte a glicognio sintetase a na forma inactiva b. Assim, a fosforilao
tem efeitos opostos nas actividades enzimticas da glicognio sintetase e da fosforilase.
69
Temos assim uma cascata de reaces no controlo da fosforilao da glicognio sintetase e
da fosforilase:
As enzimas fosfatases revertem os efeitos das cinases. A epinefrina leva inibio da

fosfatase enquanto a insulina leva sua activao.
Doenas genticas de armazenamento de glicognio
70
Metabolismo Lipdico
Os lpidos so a fonte energtica mais rentvel na maioria dos tecidos humanos, com
excepo de eritrcitos e clulas cerebrais. Os triglicridos constituem a forma de
armazenamento dessa energia. Os cidos gordos, provenientes da hidrlise dos
triglicridos, constituem a forma imediata de energia. Os cidos gordos so libertados do
tecido adiposo aps liplise mediada pelo glucagon e transportados no sangue em
associao com a albumina para os diversos tecidos onde so metabolizados. O seu
metabolismo inteiramente oxidativo, sendo o bom funcionamento da maquinaria
enzimtica mitocondrial imprescindvel. Em condies de descanso, cerca de metade da
energia utilizada por tecidos como msculo ou fgado derivado do catabolismo dos cidos
gordos.
Digesto e Absoro dos Lpidos da Dieta
Os lpidos so constituintes importantes da dieta, no s devido ao seu elevado contedo

energtico, mas tambm porque esta classe de nutrientes inclui vitaminas lipossolveis e
cidos gordos essenciais.
Tal como acontece com outros nutrientes, os lpidos da dieta tm que ser hidrolisados a
molculas mais simples, de modo a se poder dar a sua absoro a nvel intestinal.
Aproximadamente 90% dos lpidos ingeridos correspondem a triglicridos, sendo os
restantes respeitantes a fosfolpidos, colesterol, steres de colesterol e cidos gordos
livres. O estmago secreta uma lipase gstrica que hidrolisa os triglicridos a cidos gordos
livres e 1,2-diacilglicerol. No entanto, o baixo pH a que se encontra o estmago leva
destruio das protenas e apenas cerca de 30% dos triglicridos so hidrolisados por esta
enzima. O processo de digesto prossegue ento no intestino, onde secrees biliares e
pancreticas neutralizam essa acidez, de modo a permitir a actividade de enzimas contidas
no suco pancretico e intestinal. Uma dessas enzimas a lipase pancretica que hidrolisa
os triglicridos a cidos gordos livres e a monoacilgliceris. No entanto, para ser possvel a
actividade desta enzima, os triglicridos tm que ser emulsificados de modo a formar uma
superfcie hidroflica que permita a actuao da enzima. A solubilizao iniciada no
estmago,
com
componentes
da
dieta
(fosfolpidos,
cidos
gordos
livres
monoacilgliceris) e cidos gordos livres resultante de alguma hidrlise dos triglicridos a

actuarem como surfatantes, sendo completada no intestino pelos cidos biliares. A lipase
pancretica , no entanto, inibida na presena de cidos biliares. Esta inibio pode ser
ultrapassada pela actuao de uma colipase presente no suco pancretico, que por um
71
lado impede a inibio da lipase por parte dos cidos biliares e por outro permite a
ancoragem entre a lipase e o seu substrato. A aco da lipase pancretica produz na sua
maioria cidos gordos livres e 2-monoacilgliceris. Os produtos da digesto so absorvidos
e d-se a ressntese de triglicridos nas clulas da mucosa intestinal. O glicerol livre que se
pode formar pela hidrlise completa dos triglicridos passa directamente para a veia
porta.
Os triglicridos ressintetizados nas clulas da mucosa intestinal juntam-se a outros lpidos
da dieta fosfolpidos, colesterol e steres de colesterol e a apoprotenas para formarem
os quilomicrons. Os quilomicrons so, portanto, lipoprotenas que permitem o transporte
de lpidos provenientes da dieta. Os triglicridos constituem o principal componente destas
lipoprotenas, que fazem o seu transporte do intestino principalmente para o tecido
adiposo, onde se d o seu armazenamento. As figuras seguintes esquematizam todo esse
processo de digesto e absoro dos triglicridos.
72
Lipognese
A lipognese e a acumulao de triglicridos no tecido adiposo encontram-se reguladas

pelo estado nutricional e de actividade do organismo. A insulina (hormona que assinala o
estado alimentado) e glicose activam este processo, ao passo que o glucagon (hormona
produzida em situao de jejum) e a adrenalina (produzida por exemplo em situao de
exerccio fsico) o inibem. Assim, a taxa de lipognese maior em organismos bem
alimentados, com uma dieta rica em acares e sedentrios. Todas estas situaes esto
associadas com uma maior quantidade de cidos gordos incorporadas pelo tecido adiposo e
com uma maior taxa de sntese de cidos gordos e triglicridos no fgado e tecido adiposo.
Os triglicridos so transportados para o tecido adiposo pelas lipoprotenas quilomicrons e
VLDL. O fgado possui uma grande actividade lipognica em situao de ps alimentao,
mas os triglicridos a sintetizados so transportados pelas VLDL para o tecido adiposo
onde so armazenados. Os quilomicrons, como j foi referido, transportam os triglicridos
provenientes da dieta. Os quilomicrons e as VLDL so rapidamente catabolizados por aco
da lipoprotena lipase, enzima localizada nas paredes dos vasos sanguneos e activada por
aco da insulina. A aco da lipoprotena lipase permite a hidrlise dos triglicridos
constituintes destas lipoprotenas e a incorporao dos cidos gordos resultantes desta
hidrlise por parte dos adipcitos.
Uma deficincia na lipoprotena lipase impede a hidrlise dos
triglicridos constituintes dos quilomicrons e VLDL, e a
consequente incorporao dos cidos gordos nos adipcitos.
Isto leva a um aumento nos nveis de triglicridos no sangue
(e
uma
diminuio
no
tecido
adiposo),
provocando
hipertrigliceridmia. Este aumento dos nveis de triglicridos

no plasma pode ser tambm visvel comparando o plasma de
um indivduo em jejum com o plasma retirado aps uma
refeio, antes do tempo de actuao da lipoprotena lipase.
73
A insulina alm de promover a activao da enzima lipoprotena lipase, promove tambm a
activao da entrada de glicose nos adipcitos e a sntese de cidos gordos. Os triglicridos
sintetizados no tecido adiposo so formados por esterificao dos cidos gordos captados
pelos adipcitos (provenientes dos triglicridos dos quilomicrons e VLDL aps aco da
lipoprotena lipase) ou l sintetizados, com o glicerol-3-fosfato. Nos adipcitos, o glicerol3-fosfato sintetizado a partir do intermedirio glicoltico dihidroxicetona-fosfato,
tornando-se, portanto, a glicose essencial para a sntese e armazenamento de triglicridos.
A insulina estimula a gliclise, o que permite a maior produo de glicerol-fosfato
necessrio para a sntese de triglicridos, bem como de piruvato, o qual pode ser
convertido em acetil-CoA. A acetil-CoA formada pode ser direccionada para a sntese de
cidos gordos que esterificados com o glicerol-fosfato aumentam os nveis de triglicridos
sintetizados e armazenados.
Adipcito
Glicose
DHAP
Glicerol-3-P
INSULINA
VLDL
TG
Glicose
Lipoprotena
lipase
c. gordos
TG
Piruvato
Acetil-CoA
c. gordos
c. Gordos-CoA
quilomicrons
TG
Liplise
Tal como acontece com a lipognese, tambm a liplise, ou hidrlise de triglicridos no

tecido adiposo, se encontra regulado pelo estado nutricional e de actividade do organismo.
Neste caso, ao contrrio do que acontece na lipognese, a insulina e glicose inibem este
processo, ao passo que o glucagon e a adrenalina o activam. A taxa de liplise activada
em situaes de jejum ou durante o exerccio fsico, por exemplo. O processo de
catabolismo dos triglicridos origina como produtos finais cidos gordos livres e glicerol,
que passam para a corrente sangunea. O glicerol transportado para o fgado, onde
convertido em glicose pelo processo de gluconeognese. O glicerol proveniente da hidrlise
de triglicridos do tecido adiposo, constitui uma importante fonte de glicose durante o
perodo de jejum. No que respeita aos cidos gordos libertados, estes so transportados
em associao com a albumina, podendo ser metabolizados pela maioria dos tecidos do
74
organismo (exceptuando eritrcitos, neurnios),
o que permite um poupar de glicose nesta
situao.
A
enzima
triglicridos
responsvel
lipase
pela
hidrlise
sensvel
dos
aco
hormonal, enzima activada pelo glucagon e

inibida pela insulina. O glucagon promove a
fosforilao desta enzima tornando-a activa, ao
passo
que
insulina
conduz
sua
desfosforilao.
-OXIDAO DOS CIDOS GORDOS
Os cidos gordos so uma importante fonte

energtica, armazenados na sua maioria em
triglicridos do tecido adiposo. A oxidao de
cidos gordos origina acetil CoA, substrato para
o ciclo de Krebs, e NADH e FADH2 que podem ser
utilizados no processo de fosforilao oxidativa
para a sntese de ATP. O catabolismo dos cidos
gordos efectuado por enzimas presentes na matriz mitocondrial das clulas, num
processo designado por -oxidao. A -oxidao iniciada pela ligao da coenzima-A ao
terminal carboxlico dos cidos gordos. Este passo inicial acompanhado pela hidrlise do
de duas ligaes fosfato de elevada energia do ATP, originando AMP e dois Pi.
75
A activao dos cidos gordos (de cadeia longa) com a coenzima A ocorre no citoplasma
das clulas. O passo seguinte do catabolismo dos cidos gordos consiste assim, na
passagem destes derivados dos cidos gordos para a matriz mitocondrial das clulas, de
forma a que os cidos gordos activados possam ser oxidados. Os cidos gordos de cadeia
curta ou cadeia mdia podem atravessar a membrana mitocondrial por difuso passiva,
sendo activados por ligao CoA no interior da mitocndria. No entanto, os cidos gordos
de cadeia longa, principais constituintes dos triglicridos da dieta e armazenados, so
activados com a CoA no citoplasma e transportados para a mitocndria atravs do shuttle
da carnitina.
A CoA uma molcula grande e polar que no consegues atravessar a membrana

mitocondrial. Assim, os cidos gordos so transferidos para uma pequena molcula, a
carnitina, pela enzima carnitina aciltransferase I. Na membrana mitocondrial existe um
transportador que permite a passagem da molcula acil-carnitina para a matriz
mitocondrial. Na matriz mitocondrial, a enzima carnitina aciltransferase II permite
regenerar a molcula acil-CoA e libertar a carnitina. O shuttle da carnitina inibido pelo
malonil-CoA e pelo acetato. Deficincias no metabolismo da carnitina impedem a oxidao
de cidos gordos, levando a graves consequncias para o organismo, especialmente em
situao de jejum.
Oxidao dos cidos gordos
A -oxidao dos cidos gordos consiste numa srie de ciclos de reaces que consistem
em oxidao, hidratao, oxidao e clivagem de uma molcula de acetil CoA a partir da
extremidade do cido gordo. Nas duas reaces de oxidao, h transferncia de electres
para o FAD e NAD+, formando-se respectivamente FADH2 e NADH. Assim, por cada ciclo
76
ocorrido, forma-se uma molcula de NADH, uma de FADH2 e uma de acetil-CoA. O NADH e
o FADH2 podem entrar na cadeia respiratria ao passo que a acetil CoA entra no ciclo de
Krebs. Desta forma, tal como j foi referido, o catabolismo dos cidos gordos pressupe a
existncia do metabolismo oxidativo e dos sistemas enzimticos mitocondriais. As clulas
cerebrais, embora obedeam a esse requisito, no podem utilizar cidos gordos para a
produo de energia, pois estes no conseguem ultrapassar a barreira hemato-enceflica.
FADH2
NADH
FADH2
NADH
FADH2
NADH
FADH2
NADH
FADH2
NADH
FADH2
NADH
+ 6 FADH2 + 6 NADH
A clivagem da molcula de acetil-CoA a partir da extremidade do acil-CoA (cido gordo

activado com a coenzima A), ocorre na presena da CoA. Assim, no fim de cada ciclo de
reaces liberta-se acetil-CoA e forma-se novo acil-CoA que possui menos dois tomos de
carbono e que pode prosseguir para novo ciclo. Em cada ciclo forma-se ento uma
molcula de NADH, uma de FADH2, uma de acetil-CoA e a molcula de acil-CoA encurtada
em dois carbonos. No ltimo ciclo, esta molcula de acil-CoA encurtada em dois carbonos
a prpria acetil-CoA.
77
Balano energtico da -oxidao de cidos gordos
Para uma molcula de cido gordo com

16 tomos de carbono, como o cido
palmtico, so necessrios sete ciclos
para a sua oxidao completa. Por cada
ciclo efectuado forma-se, como referido,
uma molcula de NADH, uma de FADH2 e
uma de acetil-CoA. No fim dos sete ciclos
so formadas sete de cada uma destas
molculas, mais a molcula de acetil-CoA
final, o que origina no total 7 molculas
de NADH, 7 de FADH2 e 8 de acetil-CoA O
NADH e o FADH2 entram na cadeia
respiratria, ao passo que a acetil-CoA
entra no ciclo de Krebs.
Cada molcula de NADH origina 2,5 molculas de ATP, ao passo que o FADH2 origina 1,5
molculas de ATP. Por sua vez, a oxidao completa de uma molcula de acetil-CoA
origina 10 molculas de ATP (ciclo de Krebs + cadeia respiratria). Assim, no total obtmse 7x2,5 ATPs provenientes do NADH, 7x1,5 ATPs provenientes do FADH2 e 8x10 ATPs
provenientes da acetil-CoA produzidos na -oxidao do cido palmtico (16C). No total
isso origina 108 ATPs aos quais tm que ser subtrados 2 ATPs gastos na activao do cido
gordo, sendo o resultado final de 106 ATPs. Este rendimento energtico bastante
superior ao da oxidao de uma molcula de glicose, mesmo quando se d sua oxidao
completa. importante referir, neste processo de oxidao de cidos gordos, que a acetilCoA formada no pode ser utilizada para a produo de glicose, pois no pode ser
convertida em piruvato (a reaco que converte piruvato em acetil-CoA irreversvel). A
acetil-CoA pode ser usada para a produo de energia por incorporao no ciclo de Krebs
ou pode ser utilizada na sntese de corpos cetnicos.
78
Oxidao de cidos gordos insaturados
No organismo humano, cerca de 50% dos cidos gordos so insaturados, ou seja, possuem
ligaes duplas entre os carbonos da sua cadeia. A maior parte dos cidos gordos
insaturados so degradados pela via da oxidao com uma enzima adicional, que
converte a ligao dupla cis numa ligao
trans - a via da -oxidao apenas pode
processar
ligaes
duplas
trans.
existncia dessa ligao dupla leva a que

na oxidao de cidos gordos insaturados
ocorra menos uma reaco de oxidao
concomitantemente com a reduo de
FAD a FADH2. H desta forma um menor
rendimento energtico por comparao
com a oxidao de um cido gordo
saturado com o mesmo nmero de
tomos de carbono.
Oxidao de cidos gordos com nmero mpar de tomos de carbono
Os cidos gordos com nmero mpar de tomos de carbono prosseguem a via normal da oxidao, mas no ciclo final o acil CoA resultante o propionil CoA (3 tomos de carbono)
e no a acetil CoA (2 tomos de carbono). O propionil CoA convertido a metil malonil
CoA, numa reaco catalisada pela enzima propionil CoA carboxilase e dependente de
biotina. O metilmalonil CoA convertido no intermedirio do ciclo de Krebs succinil CoA. O
succinil CoA pode ser metabolizado pelo ciclo de Krebs, podendo tambm ser convertido
em glicose atravs da gluconeognese, tal como acontece com todos os intermedirios do
ciclo de Krebs. Trata-se da nica situao em que pode haver sntese de novo de glicose
(embora em quantidade reduzida) atravs da oxidao de cidos gordos.
79
Sntese de corpos cetnicos cetognese
Os corpos cetnicos (acetona, acetoacetato e -hidroxibutirato) so sintetizados no fgado

a partir de acetil-CoA (a qual produzida principalmente atravs da oxidao de cidos
gordos) e so substratos energticos para o corao, msculo-esqueltico e rins em
situao de jejum. Em caso de jejum prolongado so tambm uma fonte de energia
importante para o crebro. No entanto, quando em excesso no organismo, os corpos
cetnicos podem conduzir a uma situao de acidose metablica, prejudicial ao organismo.
Os corpos cetnicos podem ser oxidados a acetil-CoA, substrato para o ciclo de Krebs,
sendo produzidos 10 ATPs por cada molcula de acetil CoA. Os corpos cetnicos so
essencialmente produzidos em condies em que ocorre um aumento da oxidao de
cidos gordos no fgado e uma activao da gluconeognese (por exemplo, numa situao
de jejum ou num indivduo com diabetes tipo I). O aumento da oxidao de cidos gordos
conduz a um aumento dos nveis de acetil-CoA, substrato do ciclo de Krebs. No entanto,
em situaes fisiolgicas que conduzem activao da gluconeognese, os nveis de
oxaloacetato encontram-se diminudos, pois o oxaloacetato encontra-se desviado para a
gluconeognese. O oxaloacetato pode combinar-se com a acetil-CoA para a sntese de
citrato, que entra assim no ciclo de Kreb, mas nestas condies a acetil CoA est em
excesso em relao ao oxaloacetato disponvel. A acetil CoA em excesso ento desviada
para a sntese de corpos cetnicos.
80
Biossntese de cidos Gordos
Os cidos gordos so sintetizados a partir de acetil CoA (proveniente principalmente do

piruvato, originado pela gliclise, atravs da enzima piruvato desidrogenase) e so o
principal substrato energtico do tecido cardaco. As enzimas responsveis pela biossntese
de cidos gordos encontram-se localizadas no citoplasma e so completamente diferentes
das enzimas envolvidas na -oxidao, que ocorre na mitocndria. Para a sntese de cidos
gordos necessrio NADPH (proveniente da via das pentose fosfato) e ATP.
Transferncia de acetil-CoA para o citoplasma
A acetil CoA no pode atravessar a membrana mitocondrial interna e transportada para o

citoplasma atravs do shuttle do citrato. A acetil CoA sofre uma reaco de condensao
com o oxaloacetato, originando citrato que transportado para o citoplasma. O citrato
reage com a CoA no citoplasma, formando oxaloacetato e acetil CoA.
Sntese de malonil CoA
A enzima acetil CoA carboxilase catalisa a carboxilao da acetil CoA a malonil CoA, numa
reaco dependente de biotina e que consome ATP. Este passo o passo chave na
regulao da sntese de cidos gordos. A acetil CoA carboxilase activada pelo citrato e
insulina e inibida pelo palmitoil CoA e glucagon. O malonil CoA um dador activado de
unidades de acetil CoA.
81
Sntese da cadeia de cido gordo
O complexo enzimtico cido gordo sintetase catalisa vrias reaces que permitem o
alongamento
da
cadeia
do
cido
gordo.
Ocorre
transferncia da acetil CoA (2C) e malonil CoA (3C) para um

domnio
deste
complexo
designado
por
protena
transportadora de acilo (ACP). H ento uma reaco de

descarboxilao e condensao formando-se acetoacetil CoA
(4C).
O acetoacetil CoA sofre uma reaco de reduo (em que

necessrio NADPH), uma de desidratao e novamente uma
reaco de reduo (em que intervm de novo o NADPH),
originando butiril CoA, o qual se combina com o malonil CoA,
entrando num novo ciclo de alongamento.
cidos gordos com mais de 16 tomos de carbono so sintetizados no

retculo endoplasmtico. Tambm no retculo endoplasmtico pode ocorrer
a insaturao dos cidos gordos por aco da enzima cido gordo
oxigenase.
82
Resumo:
o A sntese de cidos gordos de cadeia longa catalisada por 2 sistemas enzimticos
presentes no citoplasma das clulas: acetil-CoA carboxilase e sintetase dos cidos
gordos.
o Esta via converte acetil-CoA em palmitato e requer NADPH, ATP, Mn2+, biotina,
cido pantotnico e HCO3- como cofactores.
o A acetil-CoA carboxilase converte acetil-CoA em malonil-CoA. A sintetase dos cidos

gordos catalisa a formao de palmitato a partir de uma molcula de acetil-CoA e 7
de malonil-CoA.
o A acetil-CoA carboxilase regulada positivamente pelo citrato e negativamente por

acil-CoA (cido gordo activado com CoA). A insulina activa esta enzima a curto
prazo por desfosforilao e a longo prazo por induo da sntese. O glucagon e
adrenalina tm efeito contrrio.
o O alongamento dos cidos gordos com mais de 16C ocorre no retculo
endoplasmtico.
insaturao
catalisada
por
um
sistema
enzimtico
microssomal.
Regulao Geral do Metabolismo dos cidos Gordos
Adipcito
Triglicridos
INSULINA
quilomicrons
TG
INSULINA
Lipase sensvel
aco
hormonal
Lipoprotena
lipase
+ GLUCAGON
c. gordos
c. Gordos
VLDL
TG
c. gordos
+ albumina
Triglicridos
c. gordos livre
Acil-CoA
Acil-CoA
Malonil-CoA
+
-
Hepatcito
INSULINA
GLUCAGON
Acetil-CoA
Sntese de cidos gordos
B-oxidao
Acetil-CoA
Corpos
cetnicos
Degradao de cidos gordos
Ciclo Krebs
(ATP)
83
Metabolismo do cido araquidnico
O cido araquidnico, cido gordo com 20 tomos de carbono, um intermedirio chave

no processo de inflamao, bem como em processos de sinalizao. precursor de
eucosanides como prostaglandinas, tromboxanos e leucotrienos. obtido por duas vias
distintas: atravs da hidrlise de fosfolpidos pela fosfolipase A2 (agentes inflamatrios
esterides como a hidrocortisona inibem a fosfolipase A2) ou pela hidrlise de diglicridos
pela aco da diacilglicerol lipase. Os leucotrienos so mediadores inflamatrios e
vasoactivos e que so sintetizados a partir do cido araquidnico por aco da
lipoxigenase. Uma outra enzima, a cicloxigenase, converte o cido araquidnico em
prostaglandinas e tromboxanos. A cicloxigenase converte o cido araquidnico na
prostaglandina
PGH2,
que
depois
pode
ser
convertida
noutras
prostaglandinas,
prostaciclina e tromboxanos. A aspirina tem efeito anti-inflamatrios e anti-trombticos

porque inibe a aco da enzima cicloxigenase.
Metabolismo dos fosfolpidos

Sntese de glicerofosfolpidos
O precursor metablico de fosfoglicridos o CDP-diacilglicerol ou o diacilglicerol. O CDPdiacilglicerol formado por reaco do cido fosfatdico (diacilglicerol-3-fosfato) com
citosina trifosfato (CTP). O CDP diacilglicerol reage com o glicerol-fosfato, originando
fosfotidilglicerol, com o inositol originando fosfotidilinositol, com a serina originando
fosfotidilserina, ou com outra molcula de CDP diacilglicerol, originando cardiolipina. A
fosfotidilserina por carboxilao origina fosfotidiletenolamina, e esta por metilao
84
origina fosfotidilcolina. Outra via para a sntese de fosfoglicridos envolve a utilizao de
diacilglicerol como precursor. O diacilglicerol reage com CDP-colina ou com CDPetenolamina, formando respectivamente fosfotidilcolina ou fosfotidiletanolamina.
Sntese de esfingofosfolpidos
A esfingosina, lcool constituinte dos esfingolpidos, formada por condensao entre

serina e palmitoil-CoA, numa reaco que requer NADPH. A ceramida sintetizada a partir
da esterificao entre esfingosina e um cido gordo. A esfingomielina formada por
reaco entre a ceramida e CDP-colina. A adio de uma ose ceramida origina
cerebrsidos. A adio de mais oses origina os ganglisidos.
Metabolismo do Colesterol
O colesterol um dos principais constituintes das membranas celulares, regulando a

fluidez da membrana. tambm importante para a sntese de esteris importantes no
organismo, como os cidos biliares, vitamina D e hormonas esterides. No entanto, o
colesterol em excesso no organismo pode originar placas artereosclerticas e provocar
doenas cardiovasculares, a principal causa de morte nos pases ocidentalizados. Grande
parte do colesterol no organismo obtido atravs da dieta, mas o colesterol pode tambm
ser sintetizado no organismo (no intestino, na pele, em glndulas produtoras de hormonas
esterides e principalmente no fgado) a partir de acetil-CoA.
A via biossinttica pode ser dividida em 4 fases:
1. Na primeira fase, ou fase de condensao, forma-se mevalonato, um composto com
6 tomo de carbono a partir de 3 molculas de acetil-CoA. nesta fase que ocorre
a reaco mais importante para a regulao da sntese de colesterol. A converso
de hidroximetilglutaril-CoA (HMG-CoA) a mevalonato pela enzima HMG-CoA
redutase, numa reaco que utiliza NADPH. O HMG-CoA tambm precursor da
sntese de corpos cetnicos por aco da enzima HMG-CoA liase, mas esta reaco
ocorre na mitocndria, ao passo que a sntese de mevalonato ocorre no retculo
endoplasmtico.
2. Na segunda fase, o mevalonato (C6) descarboxilado a um isopreno isopentenildifosfato (C5). Nesta reaco so consumidos 3 ATPs.
85
3. Na terceira fase, ocorre condensao entre as molculas de isopreno, originando o
esqualeno (C30).
4. Por ltimo, o colesterol sintetizado a partir do esqualeno por uma srie de
reaces, em que ocorre ciclizao, oxidao, remoo e migrao de grupos
metilo. A converso do esqualeno em colesterol dependente do citocromo P450.
A enzima HMG-CoA redutase uma enzima chave na regulao da sntese de colesterol.

sujeita a vrias formas de regulao:
I.
reprimida pelo colesterol, o produto final da via. tambm reprimida pelo

colesterol da dieta. O colesterol altera a fluidez da membrana, inibindo a
actividade da enzima. O colesterol alm de inibir a actividade da HMG-CoA
redutase inibe tambm a prpria sntese da enzima.
II.
A enzima sujeita a fosforilao por resposta aco de diferentes hormonas. A

forma fosforilada a forma inactiva. A insulina promove a desfosforilao da
enzima activando-a, ao passo que o glucagon a inibe ao promover a sua fosforilao
III.
A insulina activa a expresso do gene da HMG-CoA redutase. O glucagon inibe essa

expresso.
IV.
A HMG-CoA redutase responde a um ritmo circadiano.
A droga levostatina utilizada no tratamento da hipercolesterolmia, por inibir a

actividade da HMG-CoA redutase, e portanto, bloquear a sntese endgena de colesterol.
A maior parte do colesterol esterificado com cidos gordos de cadeia longa.
Sntese de derivados do colesterol cidos biliares, vitamina D e hormonas esterides

cidos biliares
Os cidos biliares primrios (cido clico e quenodesoxiclico) so sintetizados no fgado a

partir do colesterol. Para a sntese dos cidos biliares necessria a aco do citocromo
P450.
Circulao enteroheptica
Os cidos biliares primrios so transportados para o intestino, onde so convertidos em

cidos biliares secundrios (cido desoxiclico e litoclico) por bactrias intestinais. No
86
intestino, os cidos biliares so desconjugados, reabsorvidos e retornam pela veia porta
para o fgado ligados albumina. O fgado capta os cidos biliares, reconjuga-os com
taurina ou glicina e secreta-os para a blis. A secreo da blis para o intestino constitui a
principal forma para a excreo de colesterol, dado que o ncleo esteride no pode ser
oxidado a CO2 e H2O. O excesso de colesterol na blis pode levar ao aparecimento de
pedras na vescula biliar.
Vitamina D
O 7-dehidrocolesterol, intermedirio da sntese de colesterol, acumula-se na pele, onde

convertido a colecalciferol (vitamina D3) pela luz ultravioleta. O colecalciferol
transformado na forma activa da vitamina D por duas hidroxilaes dependentes do
citocromo P450 que ocorrem no fgado e no rim. A vitamina D regula o metabolismo do
clcio e do fosfato no organismo e a sua deficincia origina raquitismo nas crianas e
osteomalcia nos adultos.
Hormonas esterides
O colesterol, nas clulas adrenocorticais, convertido em progesterona, um intermedirio

na sntese das hormonas adrenais (cortisol, corticosterona, aldosterona) e sexuais
(testosterona, progesterona, estradiol). A sntese de progesterona a partir de colesterol
dependente do citocromo P450.
87
Metabolismo de Lipoprotenas
As lipoprotenas so compostas de um ncleo hidrofbico lipdico revestido pela parte

proteica (apoprotenas) e por lpidos polares (fosfolpidos, colesterol). So classificadas de
acordo com a sua densidade e incluem por ordem crescente de densidades: quilomicrons,
VLDL, IDL, LDL, HDL.
Os quilomicrons transportam os lpidos provenientes da alimentao e so sintetizados no

organismo. So constitudos na sua maioria por triglicridos. Os quilomicrons transportam
os triglicridos do intestino principalmente para o tecido adiposo (mas tambm para outros
locais como por exemplo para as glndulas mamrias). Os triglicridos dos quilomicrons so
hidrolisados pela lipoprotena lipase, de forma aos cidos gordos poderem ser captados
pelo tecido adiposo. Quando os quilomicrons perdem os triglicridos, por aco da
lipoprotena lipase, convertem-se em quilomicrons remanescentes, enriquecidos em
colesterol e steres de colesterol exgenos, e so captados pelo fgado.
As VLDL so sintetizadas no fgado e os principais lpidos constituintes destas lipoprotenas

so os triglicridos sintetizados no fgado. As VLDL transportam os triglicridos do fgado
principalmente para o tecido adiposo. Tal como acontece com os quilomicrons, os
triglicridos das VLDL so hidrolisados em cidos gordos (captados pelo tecido adiposo,
glndulas mamrias, msculo...) e glicerol pela enzima lipoprotena lipase. H medida que
vo perdendo os triglicridos, as lipoprotenas remanescentes aumentam de densidade
convertendo-se sucessivamente em IDL e LDL (estas ltimas especialmente ricas em
colesterol sintetizado no fgado). A deficincia na lipoprotna lipase conduz a um aumento
dos quilomicrons e VLDL no sangue, conduzindo a uma hipertrigliceridmia. As LDL so o
principal transportador de colesterol no organismo e transportam colesterol do fgado para
os tecidos perifricos. O aumento dos nveis de LDL est associado ao aparecimento de
placas artereosclerticas nas artrias.
As HDL so ricas em steres de colesterol endgenos e transportam o colesterol

proveniente de outras lipoprotenas e das membranas para o fgado. tambm designado
por colesterol bom. O colesterol proveniente da morte celular e remodelao das
membranas incorporado nas HDL. O colesterol esterificado e as HDL trocam
apoprotenas e steres de colesterol com outras lipoprotenas. No fgado libertam o
colesterol.
88
Os cidos gordos so transportados associados albumina. Os corpos cetnicos so
hidrossolveis e so transportados na forma livre.
Receptores das LDL papel chave no metabolismo das LDL
As LDL transportam colesterol do

fgado para os tecidos perifricos. As
clulas
possuem
receptores
especficos para as LDL (ligam-se

apoprotena B100). O complexo LDLreceptor
internalizado
endocitose.
As
vesculas
endocitose
associam-se
por
de
com
lisossomas, ocorrendo a degradao

dos componentes das
LDL pelas
enzimas lisossomais. O colesterol livre pode ser re-esterificado ou pode ser incorporado
nas membranas celulares.
Os receptores das LDL so sujeitos a uma regulao retroactiva. Quando ocorre um
aumento dos nveis de colesterol dentro da clula, a expresso dos receptores das LDL
encontra-se inibida, inibindo dessa forma a captao de LDL e consequentemente a
incorporao de mais colesterol nas clulas.
89
Na hipercolesterolmia familiar, h uma deficincia gentica nos receptores das LDL.
Como consequncia h uma inibio na captao das LDL plasmticas por parte das
clulas, o que se vai traduzir num aumento dos nveis de LDL, e consequentemente do
colesterol no sangue. A hipercolesterolmia pode tambm ser provocada por erros
alimentares. O aumento da captao de colesterol por parte das clulas devido ao
aumento dos nveis de LDL, provocado pelos erros alimentares, leva inibio da sntese
de receptores das LDL (que so sujeitos a retroinibio). Assim, a captao das LDL
encontra-se inibida e ocorre um aumento do colesterol no sangue. O aumento de colesterol
no sangue provoca o aparecimento de xantomas e est associado ao aparecimento de
doenas cardiovasculares. A mevinolina utilizada no tratamento da hipercolesterolmia
familiar. A mevinolina inibe a enzima HMG-CoA redutase, enzima chave na sntese de
colesterol. Desta forma, ocorre uma diminuio dos nveis de colesterol na clula. A
diminuio dos nveis de colesterol celulares vai estimular o gene normal (em doentes
heterozigticos) a produzir mais receptores das LDL, de modo a contrariar essa descida de
colesterol. H por conseguinte uma diminuio das LDL e do colesterol no sangue.
O evento chave no aparecimento de placas artereosclerticas o aparecimento de danos
no endotlio provocado pelas LDL oxidadas. O endotlio fica mais permevel a
lipoprotenas. As LDL atravessam a parede vascular e depositam-se no interior onde podem

ser oxidadas. As LDL oxidadas estimulam a expresso de molculas de adeso, a atraco
de moncitos, ocorrendo formao de macrfagos. As LDL so ingeridas pelos
macrfagos e as clulas ficam com lpidos acumulados. H um enfraquecimento de uma
capa fibrosa com macrfagos, expondo colagnio e lpidos corrente sangunea. Ocorre
adeso e agregao de plaquetas e a formao da placa arterosclertica.A formao de
90
placas artereosclerticas pode levar ao bloqueamento de artrias, podendo provocar
ataques cardacos ou derrames cerebrais.
91
Metabolismo Proteico
Em termos quantitativos, as protenas so o grupo mais importante de biomolculas. Num

indivduo pesando cerca de 70 kg, as protenas compreendem cerca de 10 kg, a sua maioria
compreendendo as protenas musculares. Algumas hormonas, nomeadamente o cortisol e a
testosterona regulam a sntese e degradao proteica. O metabolismo do nitrognio de um
adulto saudvel geralmente equilibrado, ou seja, a quantidade de nitrognio incorporado
e excretado sensivelmente igual. A anlise de alteraes desse equilbrio designa-se por
balano de azoto. Assim, numa situao de balano de azoto positivo, a quantidade de
azoto ingerida superior quantidade excretada. Alguns exemplos em que ocorre balano
positivo de azoto incluem crescimento, gravidez, lactao, convalescncia (ocorre
reparao de tecidos), administrao de esterides anabolizantes. Pelo contrrio, numa
situao de balano de azoto negativo, a quantidade de azoto ingerida inferior
quantidade excretada. Alguns exemplos em que ocorre balano negativo de azoto incluem
jejum, dieta pobre em protenas, falta de aminocidos essenciais, aumento do catabolismo
proteico aps trauma ou infeces.
As protenas ingeridas na dieta tm que ser hidrolisadas no percurso digestivo, de forma

aos aminocidos constituintes poderem ser absorvidos a nvel intestinal. As protenas so
degradadas em aminocidos por uma srie de proteases e peptidases. Os aminocidos
livres passam para a corrente sangunea por transportadores especficos. Alguns pptidos
de tamanho pequeno podem tambm ser transportados para a corrente sangunea.
Tripsina
Quimiotripsina
Carboxipeptidase
Aminopeptidase
O metabolismo de aminocidos compreende uma vasta gama de reaces de sntese e

degradao pelas quais os aminocidos so condensado em polipptidos ou outros
compostos, e degradados para obter energia metablica ou para sintetizar glicose. A
transformao qumica dos aminocidos distinta dos hidratos de carbono ou dos lpidos
por envolver o elemento nitrognio. No existe nenhuma reserva de aminocidos anlogos
ao glicognio (hidratos de carbono) ou triglicridos (lpidos). Os mamferos sintetizam
92
alguns aminocidos e obtm os restantes da dieta. Os aminocidos em excesso no so
armazenados nem excretados mas sim desaminados e convertidos a metabolitos comuns
que so precursores de glicose, cidos gordos e corpos cetnicos, ou seja, os aminocidos
so combustveis metablicos.
Os componentes celulares esto em constante renovao. A semi-vida das protenas varia

desde poucos minutos a vrias semanas. As clulas esto constantemente a sintetizar e a
degradar protenas. Desta forma, armazenam nutrientes sob a forma de protenas que
podem ser degradas em caso de necessidades metablicas, eliminam protenas anormais e
controlam enzimas e protenas reguladoras. As principais enzimas reguladoras tm tempo
de semi-vida curtos, ao passo que as protenas com actividades constantes tm tempo de
semi-vida longos. A taxa de degradao de protenas varia com a alterao das condies e
necessidades metablicas, assim como com o estado hormonal e nutricional.
Degradao lisossomal
Os lisossomas possuem cerca de 50 enzimas hidrolticas, incluindo proteasaes. As protenas

degradadas pela via lisossomal so internalizadas por endocitose. Em clulas mal
alimentadas, existe seleco das protenas degradadas para evitar uma depleo de
enzimas essenciais e de protenas reguladoras. Deste modo, os lisossomas, em situao de
privao metablica, degradam apenas protenas especficas (marcadas com um pptido
especfico KFERQ ou muito relacionado). Tais protenas so selectivamente provenientes
de rgos que atrofiam em
resposta
prolongado
ao
jejum
(ex.
msculo),
mas no de rgos que no o

fazem (ex. crebro). Muitos
processos
patolgicos
ou
fisiolgicos esto associados

a uma actividade lisossomal
intensa (exs. i - degradao
muscular
provocada
por
danificao de tecidos ou
trauma; ii regresso do
tero aps o nascimento de
uma criana h reduo da
93
sua massa de 2 Kg para 50 g em 9 dias; iii a artrite reumatide, uma doena inflamatria
crnica, resulta da libertao de enzimas lisossomais para o meio extracelular, o que
origina a danificao de tecidos circundantes). A via de degradao lisossomal de protenas
independente da presena de ATP.
Degradao via ubiquitina
A degradao proteica em clulas eucariticas, tambm ocorre num processo dependente

de ATP e independente dos lisossomas. Tal processo envolve a ubiquitina, uma protena
monomrica de 76 resduos, caracterizada pela sua ubiquidade e abundncia. uma das
protenas mais conservadas, sugerindo que nica para desempenhar a sua funo. As
protenas so marcadas para degradao por ligao covalente com a ubiquitina.
Usualmente, vrias ubiquitinas encontram-se ligadas a essas protena. As protena
membranares so degradadas no vacolo, ao passo que as protenas citoslicas so
degradadas num complexo multiproteico designado proteossoma 26S. A maioria das
protenas degradadas pela via da ubiquitina so protenas anormais e com tempo de semivida curto.
Classificao de aminocidos
Os aminocidos podem ser classificados em essenciais ou no essenciais. Os aminocidos

essenciais no podem ser sintetizados pelo organismo humano e tm que ser fornecidos
pela dieta. Os aminocidos no essenciais podem ser sintetizados pelo nosso organismo
atravs de reaces simples. Existem alguns aminocidos que se tornam essenciais em
determinadas condies de crescimento ou na presena de determinadas deficincias
metablicas.
Aminocidos
Essenciais
No essenciais
arginina1
fenilalanina
histidina
isoleucina
leucina
lisina
metionina
treonina
triptofano
valina
alanina
aspartato
asparagina
cistena
glutamato
glutamina
glicina
prolina
serina
tirosina
apenas durante perodos de crescimento rpido ou doena

94
Biossntese de aminocidos no essenciais
Na biossntese de aminocidos no essenciais existem precursores que so comuns na

biossntese de vrios aminocidos. Os precursores vm de intermedirios da gliclise, vias
da pentose fosfato, ciclo de Krebs.
Alguns aminocidos so sintetizados por

aminao (incorporao do grupo amina).
Nestas reaces intervem o NH4+. Os
aminocidos
glutamato,
glutamina,
asparagina so sintetizados desta forma.
Outros aminocidos so sintetizados por

transaminao.
Nesta
reaco
ocorre
transferncia de um grupo amina de um

aminocido
para
um
cetocido.
aminocido assim transformado em

cetocido e o cetocido em aminocido.
Normalmente o cetocido receptor o cetoglutarato, mas tambm pode ser por
exemplo o piruvato no msculo.
Outro aminocido no essencial a

tirosina. Pode ser formado a partir de
fenilalanina por hidroxilao. A tirosina
pode-se
tornar
essencial
na
doena
metablica fenilcetonria.
Em algumas reaces de sntese de aminocidos necessrio NADPH, tal como acontece

com outras reaces de biossntese, nomeadamente biossntese de lpidos.
Na sntese de alguns aminocidos, nomeadamente serina e metionina, importante a

presena de cido flico. O tetrahidrofolato uma coenzima sintetizada a partir de cido
flico que transfere resduos de unidades de um carbono (C1) em diferentes estados de
oxidao.
95
Existe um equilbrio dinmico entre o pool de aminocidos existente no organismo e as
protenas dos tecidos. As protenas da dieta so uma fonte de aminocidos essenciais e no
essenciais, embora estes ltimos tambm possam ser sintetizados no organismo. Parte
desses aminocidos utilizado na sntese proteica, mas uma parte significativa tambm
utilizada para o metabolismo energtico. O esqueleto carbnico derivado do catabolismo
de aminocidos pode ser convertido em lpidos ou hidratos de carbono. O excesso
resultante de nitrognio deve ser metabolizado e excretado sob a forma de ureia. Para
alm do papel no metabolismo oxidativo, a protena da dieta fornece aminocidos que so
utilizados na sntese de compostos aminados como purinas, pirimidinas, hormonas, etc,
bem como na sntese proteica.
Protenas
da dieta
Sntese de:
~ 30 g / dia
purinas
pirimidinas
neurotransmissores
glucose
Pool de
amino cidos
~ 300 g / dia
Protenas
de tecidos
Ureia (urina)
O metabolismo do azoto num adulto saudvel normalmente equilibrado, ou seja, a

quantidade de azoto ingerida semelhante quantidade de azoto excretada. Quando a
quantidade de azoto ingerida superior quantidade de azoto excretada, o balano
positivo (ex. crescimento, lactao, gravidez, convalescncia), enquanto que no caso
contrrio (quantidade de azoto excretado superior quantidade de azoto ingerida), o
balano negativo (ex. dfice de protena na dieta, falta de aminocidos essenciais,
situaes ps-trauma aumenta o catabolismo proteico).
Antes de se dar o metabolismo do esqueleto carbnico dos aminocidos, o grupo amina

deve ser removido. O nitrognio do grupo amina, ao contrrio do carbono, no pode ser
utilizado na produo de energia. Assim, o grupo amina em excesso, que no utilizado
em reaces de biossntese (de aminocidos ou outras aminas biolgicas), excretado sob
a forma de ureia. O principal mecanismo de remoo do grupo amina a partir de
aminocidos a reaco de transaminao. As reaces de transaminao so catalisadas
por um grupo especfico de enzimas designadas por transaminases ou aminotransferases, e
consistem na transferncia de um grupo amina de um aminocido1 para um cetocido2,
formando os correspondentes cetocido1 e aminocido2. As transaminases esto envolvidas
96
quer no metabolismo catablico, quer no metabolismo anablico dos aminocidos. As
transaminases necessitam da coenzima piridoxal-fosfato, um derivado da vitamina B6
(piridoxina). A passagem do grupo amino de um aminocido para um cetcido complexa.
D-se em primeiro lugar a transferncia do gupo amina do aminocido para a coenzima
piridoxal fosfato ligado enzima. Forma-se o correspondente cetocido e a coenzima
ligada ao grupo amina transfere ento esse grupo para o cetocido aceitador (normalmente
-cetoglutarato) formando-se o correspondente aminocido (glutamato).
As principais transaminases a nvel quantitativo so a alanina transaminase e a aspartato

transaminase. As reaces catalisadas por estas enzimas so reversveis e so as seguintes:
alanina transaminase
alanina + -cetoglutarato
piruvato + glutamato
aspartato transaminase
aspartato + -cetoglutarato
oxaloacetato + glutamato
As enzimas alanina transaminase (ou alanina amino transferase) e aspartato transaminase

(ou aspartato aminotransferase) existem em elevada quantidade no fgado e no msculo
sendo a determinao da sua actividade muitas vezes utilizada para diagnsticos clnicos.
O grupo amina captado pelo -cetoglutarato, para formar glutamato, pode ser removido
por uma reaco de desaminao oxidativa. Quando o grupo amina de um aminocido
libertado sob a forma de amnia, esse processo designado por desaminao. Isso pode
acontecer, por exemplo na remoo do grupo amina da glutamina por aco da
glutaminase. De particular importncia, o mecanismo de desaminao oxidativa, que
permite a remoo do grupo amina do glutamato. Esta reaco catalisada pela enzima
glutamato desidrogenase formando-se NADPH no processo, para alm de amnia e do cetoglutarato.
97
A desaminao oxidativa do glutamato ocorre na matriz mitocondrial. A enzima glutamato

desidrogenase inibida pelo NADH, GTP e ATP e activada pelo ADP e GDP (ou seja,
activada por baixos nveis energticos na clula a reaco leva formao de cetoglutarato, intermedirio do ciclo de Krebs).
A amnia produzida na reaco convertida

em ureia atravs do ciclo da ureia. Assim, o
modo principal como se d o metabolismo do
grupo amina dos aminocidos pela aco
sequencial
das
transaminases,
glutamato
desidrogenase e ciclo da ureia.
98
Ciclo da ureia
No processo de degradao de aminocidos, formam-se grandes quantidades de amnia.

Este io pode ser proveniente da remoo do grupo amina pela glutaminase, da aco de
enzimas como aminocido oxidases ou serina e treonina hidratases, que levam remoo
do grupo amina e, principalmente, pela aco das transaminases acoplada aco da
glutamato desidrogenase. O principal local onde ocorre degradao de aminocidos o
fgado. Neste processo forma-se ento o io amnia. A amnia extremamente txica para
as clulas. Uma das razes para essa toxicidade o facto deste io levar alterao do pH
sanguneo, interferindo deste modo com o equilbrio cido-base. Alm disso, a amnia
atravessa a barreira hemato-enceflica, havendo desta forma um aumento deste io no
crebro. O aumento de amnia pode levar a uma diminuio de -cetoglutarato (reage
com o io amnia originando glutamato) e glutamato (reage com o io amnia originando
glutamina). Assim, as reservas de -cetoglutarato escasseiam, comprometendo o
funcionamento do ciclo de Krebs e a produo de ATP. Por outro lado, o glutamato ele
prprio neurotransmissor e precursor de neurotransmissores (GABA), pelo que a sua
diminuio pode tambm contribuir para os problemas neurolgicos que surgem em
situao de hiperamonmia. A amnia extremamente txica podendo provocar tremores,
alteraes na fala e na viso e danos neurolgicos irreversveis. Assim, a amnia deve ser
rapidamente inactivada e excretada. Em mamferos isso acontece pela sua converso em
ureia. A ureia um composto diaminado no txico, pequeno e hidrossolvel, podendo ser
facilmente transportado no sangue e excretado na urina. A ureia sintetizada
exclusivamente no fgado, atravs de uma srie de reaces que compreendem o ciclo da
ureia. A ureia formada tem dois tomos de azoto um derivado do io amnia e outro
derivado do aspartato.
99
A estequeometria global do ciclo da ureia :
CO2 + NH4+ + 3 ATP + aspartato + 2 H2O
ureia + 2 ADP + 2 Pi + AMP + PPi + fumarato
Reaces do ciclo da ureia
a) Formao de carbamoil-fosfato a partir de amnia e dixido de carbono, pela

enzima carbamoil-fosfato sintetase.
b) Formao de citrulina pela enzima ornitina transcarbamoilase.
c) Formao de argininosuccinato pela enzima arginina succinato sintetase. Requer

uma molcula de ATP. O aspartato fornece o segundo grupo amina encontrado na
molcula de ureia. O aspartato pode ser formado por uma reaco de
transaminao a partir do oxaloacetato - intermedirio do ciclo de Krebs.
d) Formao de arginina e fumarato pela argininosuccinato liase. O fumarato um
intermedirio do ciclo de Krebs, fazendo assim a ligao entre os dois ciclos.
e) Formao de ureia e regenerao da ornitina pela enzima arginase. A ureia uma
molcula no txica e hidrossolvel que passa para o sangue e excretada na
urina.
As primeiras duas reaces do ciclo da ureia ocorrem na mitocndria das clulas hepticas.
As restantes ocorrem no citoplasma.
A sntese de carbamoil fosfato a etapa reguladora do ciclo. O consumo de 2 molculas de
ATP torna-a irreversvel. activada pela arginina e pelo N-acetilglutamato. Quando h um
aumento da degradao de aminocidos (ex: situao de excesso de protenas ingeridas em
que o excesso de nitrognio tem que ser removido e excretado; situao de jejum em que
100
aumenta a degradao de protenas musculares) aumenta a quantidade de amnia, o que
conduz a um aumento de glutamato e N-acetilglutamato, activando desta forma o ciclo da
ureia. As restantes enzimas so controladas pela concentrao de substrato.
Ciclo da ureia:
A ureia excretada pelos rins. Os rins desempenham um papel importante no metabolismo

de aminocidos e na gluconeognese. S os rins e o fgado so capazes de sintetizar de
novo glicose (gluconeognese). Nos rins, o principal substrato gluconeognico a
glutamina. A glutamina transportada para o rim e a por aco da glutaminase origina
glutamato e amnia. O glutamato pode ser utilizado para gluconeognese. A glutamina
sintetase, em conjugao com a glutaminase responsvel pelo transporte de amnia dos
tecidos para o fgado e para o rim. No rim excretada sob a forma de amnia. No fgado
convertida em ureia que depois transportada para o rim e a excretada.
Deficincias enzimticas do ciclo da ureia conduzem a uma situao de hiperamonmia
que, como foi referido, pode levar a encefolapatias e a outros problemas cerebrais muito
graves. Crianas que apresentem uma deficincia completa de enzimas do ciclo da ureia,
normalmente no sobrevivem ao perodo neonatal. Quando essa deficincia parcial, o
tratamento pode atenuar alguns dos sintomas observados. O tratamento feito base de
dietas pobres em protenas (mas a dieta deve incluir os aminocidos essenciais),
administrao de benzoato de sdio e fenilacetato de sdio para reduzir os nveis de
amnia e pode tambm ser necessrio proceder a hemodilise para evitar os danos
cerebrais provocados por hiperamonmia.
101
O ciclo da ureia est relacionado com o ciclo de Krebs: o aspartato que entra no ciclo da
ureia pode ser formado a partir de oxaloacetato do ciclo de Krebs, por transminao; o
fumarato formado no ciclo da ureia intermedirio do ciclo de Krebs
Degradao dos esqueletos carbonados dos aminocidos
A degradao de alguns aminocidos (glucognicos) converte-os a intermedirios do ciclo

de Krebs ou a seus precursores, de modo a poderem ser oxidados ou usados na
gluconeognese. A degradao de outros aminocidos pode convert-los a acetil-CoA ou
acetoacetato (aminocidos cetognicos). Os aminocidos so degradados a um dos
seguintes intermedirios metablicos: piruvato, -cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato,
oxaloacetato, acetil-CoA, acetoacetato.
Os aminocidos podem ento ser divididos em dois grupos nas suas vias catablicas:
I.
Glucognicos: o esqueleto carbnico dos aminocidos so degradados a piruvato, cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato ou oxaloacetato, logo so precursores da
glicose.
II.
Cetognicos: o esqueleto carbnico dos aminocidos so degradados a acetil-CoA

ou acetoacetato, logo podem ser convertidos a cidos gordos ou corpos cetnicos.
H ainda aminocidos que so simultaneamente glucognicos e cetognicos.
102
Ciclo da glicose-alanina
Existe um grupo de aminotransferases musculares que utilizam o piruvato como o seu

cetocido aceitador. O aminocido que se forma nesse processo a alanina que libertada
para o fgado. A alanina pode tambm ser proveniente da degradao de protena
muscular. No fgado a alanina cede o seu grupo amina ao -cetoglutarato por uma reaco
de transaminao originando de novo piruvato, que utilizado na gluconeognese. A este
ciclo d-se o nome de ciclo glicose-alanina. O grupo amina que libertado no fgado aps
desaminao oxidativa do glutamato utilizado na sntese de ureia. Numa situao de
jejum prolongado, a glicose formada no fgado por esta via usada por tecidos perifricos,
quebrando o ciclo. O NH3 e o piruvato formados nestas condies provm da degradao de
protena muscular.
103
Os aminocidos como precursores biossintticos
Alguns aminocidos para alm de constituirem as unidades de construo das protenas,
so igualmente precursores de vrias biomolculas importantes, incluindo nucletidos,
coenzimas, o grupo heme, hormonas, neurotransmissores e glutationa.
glutamato
-aminobutirato (GABA)
CO2
triptofano
serotonina
CO2 LSD compete com serotonina
tirosina
hormonas da tiride (T3/T4)
histidina
histamina
CO2 Vasodilatador libertado na resposta alrgica
glutationa
glutamato + cistena + glicina
Protege os eritrcitos de danos oxidativos
glicina + arginina
creatina
serina
fosfocreatina
acetilcolina
A glutationa (GSH) um tripptido composto por glutamato, cistena e glicina, que tem
numerosas funes importantes nas clulas. um agente redutor, conjuga-se com drogas
tornando-as solveis, est envolvida no transporte de aminocidos atravs das membranas
celulares, serve de co-factor em algumas reaces enzimticas e participa no rearranjo de
ligaes dissulfureto em protenas.A tirosina precursora de vrias aminas biognicas
como a melanina, os neurotransmissores DOPA e dopamina e as catecolaminas epinefrina
(adrenalina) e norepinefrina (noradrenalina).
tirosina
tirosina
hidroxilase
(BH4)
tirosinase
O2
melanina
H2O
DOPA
dopamina
dopamina
hidroxilase
(ascorbato)
O2
H2O
norepinefrina
epinefrina
104
Doenas genticas associadas ao metabolismo de aminocidos
Fenilcetonria provocada por uma deficincia na enzima fenilalanina hidroxilase (ou
no seu cofactor), que converte fenilalanina em tirosina. Essa deficincia provoca uma
acumulao de fenilalanina e seus derivados fenilcetocidos (fenilpiruvato, fenilactato)
que em parte so excretados na urina da o nome da doena. O aumento de fenilalanina
pode provocar atrasos mentais, mas aps os 10 anos esse aumento no parece ser to
grave. Alm da acumulao de fenilcetocidos, a fenilcetonria caracteriza-se tambm
pela deficincia em tirosina, que passa a ser neste caso um aminocido essencial. A
tirosina precursora de neurotransmissores e de catecolaminas (DOPA, dopamina,
adrenalina, noradrenalina), pelo que a sua deficincia est tambm associada aos defeitos
neurolgicos observados. A tirosina tambm precursora de melanina, pigmento de
colorao da pele, pelo que a sua deficincia leva a que os doentes apresentem cor de
pele e cabelo clara. A fenilcetonria uma das doenas genticas que pode ser
diagnosticada no teste do pezinho. O seu diagnstico precoce permite que seja
administrado um tratamento que leva ao retardar dos sintomas caractersticos desta
doena. Esse tratamento passa pela dieta que deve ser pobre em fenilalanina e
suplementada com tirosina, que passa a tornar-se no caso desta doena num aminocido
essencial.
Alcaptonria A alcaptonria resulta na excreo de grandes quantidades de
homogentisato, devido falta de homogentisato oxidase, enzima envolvida na degradao
de tirosina. Esta doena no apresenta grande gravidade, podendo apenas levar a uma
situao de artrite em idade mais avanada. A urina destes doentes negra devido
oxidao do homogentisato.
Albinismo O albinismo provocado por uma deficincia em tirosinase, enzima que
converte tirosina em melanina. A sua deficincia provoca falta de pigmentao da pele, o
que provoca susceptibilidade a queimaduras solares e cancros de pele.
Doena de Parkinson A doena de Parkinson provocada por deficincia na enzima

tirosina hidroxilase que converte tirosina em DOPA. A DOPA depois convertida a
dopamina, pelo que a falta desta enzima provoca uma deficincia em dopamina,
provocando os sintomas caractersticos da doena de Parkinson. O tratamento feito com
L-DOPA, pois a dopamina no atravessa a barreira hematoenceflica.
105
Metabolismo dos cidos Nucleicos
Os nucletidos participam em vrias funes essenciais no organismo: so constituintes do

DNA e RNA, so portadores de energia sob a forma de nucletidos trifosfatos (ex. ATP), so
intermedirios metablicos, so constituintes de coenzimas (FAD, NAD, NADP, CoA),
participam na regulao do metabolismo, etc. Um nucletido composto por trs
componentes: uma base azotada, uma pentose e fosfato. Quando a base azotada se liga
pentose, forma-se um nuclesido. Um nucletido um ster fosfato de um nuclesido. As
bases azotadas contidas nos nucletidos so bases pricas ou pirimdicas. As principais
purinas no DNA e RNA so a guanina e adenina. Em relao s pirimidinas, no DNA
encontramos a timina e a citosina, enquanto no RNA, a timina substituda por uracilo.
Os nucletidos podem ser sintetizados de novo ou podem ser sintetizados aps reciclagem
das bases azotadas. A via de recuperao importante, j que a sntese de novo de
nucletidos uma via energeticamente dispendiosa. A biossntese das bases azotadas um
processo complexo, mas a maioria das clulas possui as enzimas necessrias neste
processo. No entanto, como h uma via alternativa de recuperao, a existncia de
defeitos genticos nesta via enzimtica no pe normalmente em risco a vida humana.
Biossntese de nucletidos de purinas
biossntese
de
nucletidos
de
purinas
inicia-se
pela
sntese
de
PRPP
(5-
fosforibosilpirofosfato), que fornece a poro ribose-fosfato. A sntese de PRPP envolve a

transferncia de um grupo pirofosfato (PPi) para o carbono 1 da ribose-5-fosfato
(proveniente da via das pentose fosfato), numa reaco catalisada pela enzima PRPP
sintetase. A sntese do anel de purina
inicia-se
ligao
pela
formao
N-glicosdica,
em
de
uma
que
glutamina o aminocido dador do

nitrognio, formando-se desta forma o
composto
5-fosforibosilamina.
Esta
reaco catalisada pela enzima

PRPP amidotransferase e constitui o
principal
passo
na
sntese
de
nucletidos de purina.
106
Os restantes elementos do anel heterocclico do IMP (nucletido precursor do AMP e do
GMP), so provenientes da glutamina, do formil-tetrahidrofolato, do aspartato, da glicona
e do CO2.
*
*
No passo final, a enzima IMP sintetase

catalisa o fecho do segundo anel de purina,
de modo a formar o IMP.
107
O IMP um nucletido que tem como base azotada a hipoxantina e precursor dos
nucletidos de purina AMP e o GMP. O IMP convertido nestes dois nucletidos em duas
reaces enzimticas:
O ATP e o GTP so depois sintetizados por reaces de fosforilao do AMP e do GMP,

respectivamente.
Para alm da via de sntese de novo, as clulas podem tambm sintetizar nucletidos
atravs da recuperao de bases azotadas provenientes de nucletidos obtidos a partir da
dieta ou a partir da degradao de cidos nucleicos endgenos - via de recuperao de
nucletidos. Nos seres humanos, linfcitos T inactivos ou outras clulas do sistema imune
produzidas no timo, sintetizam nucletidos por esta via, embora a sntese de novo seja
necessria para a activao dos linfcitos T. O crebro humano apresenta tambm um
nvel baixo de actividade da enzima PRPP amidotransferase, pelo que a via de recuperao
particularmente importante neste rgo. A via de recuperao uma via muito mais
simples e menos dispendiosa energeticamente comparativamente sntese de novo. Na via
de recuperao tambm sintetizado PRPP que se combina com as bases pricas de modo
a sintetizar os nucletidos de purina. A enzima adenina fosforibosiltransferase catalisa a
sntese de AMP a partir de adenina e PRPP, ao passo que a enzima hipoxantinaguaninafosforibosiltransferase (HGPRT) catalisa a sntese de IMP e GMP a partir de
hipoxantina/guanina e PRPP. A deficincia gentica desta ltima enzima origina uma
doena designada por sndroma de Lesch-Nyhan. A deficincia gentica na HGPRT conduz a
um aumento dos nveis de PRPP, resultando numa activao da sntese de novo de
108
nucletidos de purina (O PRPP substrato da enzima PRPP amidotransferase). A
superproduo de nucletidos de purina origina tambm um aumento da sua degradao e,
consequentemente, de cido rico (produto de degradao de nucletidos de purina). Esta
doena caracterizada por anormalidades neurolgicas (atrasos mentais, comportamentos
agressivos, auto-mutilao) e pela acumulao de cido rico (gota, artrite, clculos
renais).
Biossntese de nucletidos de pirimidinas
Ao contrrio do que acontece com os nucletidos de purina, o anel de pirimidina

sintetizado primeiro e s depois ligado a ribose-fosfato para formar os nucletidos
pirimdicos. Os precursores do anel de pirimidina so o carbamoil fosfato (que entra
tambm no ciclo da ureia) e o aspartato. O carbamoil fosfato utilizado para a sntese de
pirimidinas formado no citosol, ao passo que o carbamoil fosfato do ciclo da ureia
sintetizado na mitocndria. O anel heterocclico formado por duas reaces origina
orotato, o qual se combina ento com o PRPP para formar orotato-monofosfato (OMP). O
OMP ento descarboxilado para sintetizar UMP. O UMP serve de precursor para a sntese
de outros nucletidos pirimdicos. Primeiro, o UMP fosforilado duas vezes originando o
UTP. Depois, a CTP sintetase catalisa a converso de UTP em CTP numa reaco de
aminao em que o dador do grupo amina a glutamina.
109
Sntese de desoxiribonucletidos
O DNA utiliza na sua constituio desoxiribonucletidos em vez dos ribonucletidos

encontrados no RNA, pelo que as clulas necessitam de vias de reduo que convertam os
ribonucletidos na sua forma desoxi. Nesta reaco, o 2-OH da ribose substitudo por 2H na desoxirribose. Os desoxiribonucletidos de adenina, guanina e citosina so
sintetizados directamente a partir do correspondente ribonucletido, por aco da enzima
ribonucletido redutase. A reduo de ribonucletidos ocorre apenas na forma difosfato,
pelo que os mononucletidos tm que ser primeiro convertidos a dinucletidos, para que
se possa ento processar a reduo da ribose. O nucletido dTMP, que existe unicamente
no DNA, sintetizado por uma via especfica que envolve a metilao da forma desoxi do
uridilato (dUMP), numa reaco catalisada pela enzima timidilato sintetase.
O dUMP serve de substrato enzima timidilato sintetase, que transfere um grupo metil do
metilenotetrahidrofolato para o dUMP, originando dTMP. O folato libertado sob a forma
de dihidrofolato. A regenerao do dador metil metilenotetrahidrofolato, pode ser
efectuada em dois passos: a enzima dihidrofolato redutase regenera o tetrahidrofolato,
que pode novamente ser convertido em metilenotetrahidrofolato pela enzima serina
hidroximetiltransferase.
110
Utilizao de drogas inibidoras da sntese de DNA
As drogas que inibem a proliferao celular so utilizadas em quimioterapia, no tratamento

do cancro. Muitas dessas substncias interferem com a sntese de desoxirribonucletidos,
inibindo desta forma a replicao de DNA e a diviso celular. Alguns agentes
quimioteraputicos, como o fluoruracilo, aminopterina e o metotrexato, actuam por
inibio da actuao da enzima timidilato sintetase e, consequentemente, da sntese de
dTMP. O fluoruracilo origina o composto fluordesoxiuridilato (fluor-dUMP). Este composto
um inibidor competitivo do substrato desoxiuridilato (dUMP) e designado por substrato
suicida uma vez que se liga irreversivelmente enzima. Por sua vez, o metotrexato (um
111
antifolato) actua ao nvel da enzima dihidrofolato redutase, impedindo a regenerao do
metilenotetrahidrofolato, substrato da enzima timidilato sintetase. As clulas cancerosas
so particularmente sensveis a este tratamento, uma vez que requerem mais dTMP para a
diviso celular. H no entanto, algumas clulas saudveis que tambm se encontram em
diviso e que por isso so sensveis aco destas drogas. Algumas dessas clulas so as
clulas da medula ssea, as clulas da mucosa intestinal ou os folculos capilares, da os
efeitos secundrios observados no tratamento por quimioterapia.
Degradao de nucletidos: catabolismo de purinas e formao de cido rico
Nos seres humanos, as purinas so degradadas a cido rico e excretadas desta forma. No
primeiro passo efectuada a remoo do grupo fosfato aos nucletidos adenina
monofosfato (AMP) e guanosina monofosfato (GMP), originando os nuclesidos adenosina e
guanosina, respectivamente. A adenosina desaminada originando a inosina. A aco de
nucleosidases permite a remoo da ribose, originando hipoxantina no caso da inosina e
guanina no caso da guanosina. Ambas as bases azotadas (hipoxantina e guanina) so
convertidas a xantina, a qual convertida em cido rico por aco da enzima xantina
oxidase.
112
O aumento da degradao de nucletidos de purina pode levar ao aumento da produo de

cido rico e gota. O cido rico pouco solvel em gua e, portanto, quando formado
em elevada quantidade ou a sua eliminao est comprometida (situao que leva
hiperuricmia excesso de cido rico no sangue), pode ocorrer acumulao de cristais de
cido rico no organismo. Esses cristais depositam-se essencialmente nas articulaes,
levando a ataques dolorosos de gota. A acumulao de cristais de cido rico pode tambm
levar formao de pedras renais e obstruco do tracto urinrio. Algumas das causas da
hiperuricmia so: sndroma de Lesch-Nyhan (referido anteriormente), deficincia em
glucose-6-fosfatase (leva acumulao de glucose-6-fosfato e activao da via das
pentose fosfato aumento da produo de ribose fosfato aumento do turnover de
purinas), diminuio da excreo de cido rico, uso de uma dieta rica em purinas (ex.
carne). A hiperuricmia pode ser tratada com alopurinol, um inibidor da enzima xantina
oxidase.
113

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Instituto Superior de Cincias da Sade Norte

Mestrado Integrado em Medicina Dentria

Ano lectivo 2009/2010

Mestre Juliana Faria

Dr. Tiago Silva

Saber reconhecer um aminocido, uma estrutura polipeptdica e uma estrutura

Compreender a relao entre a ionizao de aminocidos e protenas e as

Conhecer aminocidos comuns e derivados;

Compreender os nveis de organizao das estruturas proteicas;

Compreender a relao entre estrutura e funo das protenas;

Compreender a desnaturao e renaturao de protenas;

Entender a funcionalidade de protenas como a hemoglobina, mioglobina e o

Entender a funo de grupos prostticos. Entender a funcionalidade de protenas

Saber o que o heme;

Entender a importncia da poro peptdica da hemoglobina;

Entender as consequncias da maior ou menor afinidade pelo oxignio da

Entender a que se referem as estruturas T e R da hemoglobina;

Entender porque a hemoglobina uma protena alostrica e conhecer os 3 tipos de

Conhecer e entender a hemoglobinopatia a que se refere a anemia falciforme;

Conhecer a estrutura do colagnio e a sua funcionalidade consequente;

Conhecer os pormenores a nvel de organizao estrutural do colagnio;

Conhecer patologias relacionadas com alteraes do colagnio.

- Protenas transportadoras (de oxignio, ferro, hormonas, de drogas e

Um carbono central (C ) ao qual esto ligados 4

Estrutura dos radicais (cadeias laterais) dos aminocidos comuns:

Derivam dos comuns por modificaes qumicas ps traducionais (hidroxilaes,

Aminocidos tm um centro assimtrico

Os aminocidos comuns tm uma estrutura geral com 4 substituintes ligados a um tomo

2. Os aminocidos com cadeias laterais contendo tomos de azoto (Lis, Arg) so

3. Os aminocidos com cadeias laterais contendo grupos carboxlicos (Asp, Glu) so

Por exemplo, a glicina, um aminocido

pK (carboxilo) = 2,4 pK (amino) = 9,8

Portanto, 1 ionizao pH 2,4.

Ponto isoelctrico (pI)

A pH inferior ao seu pI, o aminocido (pptido, protena) fica carregado

A pH superior ao seu pI, o aminocido (pptido, protena) fica carregado

Determinao experimental do ponto isoelctrico

Nas protenas, o grupo -carboxlico de um aminocido unido ao radical -amino de

Muitos aminocidos unidos por ligaes peptdicas originam cadeias peptdicas. Os

Uma cadeia polipeptdica tem direco:

o Protenas simples contm unicamente aa

As protenas homlogas de espcies diferentes possuem sequncias homlogas

Encontram-se na sua sequncia de aa:

Substituies conservativas (substituies por aminocidos de polaridade

Utilizao de protenas homlogas no tratamento da diabetes mellitus

Possvel utilizao de insulina de porco ou vaca no tratamento de diabetes mellitus

o Resultam da ligao qumica de cistenas;

So estruturas intermedirias entre estruturas

aglomerados de estruturas secundrias.

A estrutura terciria tambm responsvel pela localizao das cadeias hidrofbicas no

tridimensionais. As subunidades de uma

estrutura terciria, no quaternria.

A FORMA DE UMA MOLCULA PROTEICA DETERMINADA PELA SUA SEQUNCIA DE AMINOCIDOS

A maioria das protenas assume o seu

caracterstica. Para alm de certos solventes,

desnaturantes. A desnaturao implica a

Os vertebrados desenvolveram dois mecanismos principais para assegurar que a todas as

HEMOGLOBINA (nas hemcias, transporta o oxignio no sangue)

Analisando a hemoglobina e a mioglobina:

Heme - o grupo prosttico: unidade no peptdica ligada firmemente a estas protenas e

O interior da mioglobina constitudo quase exclusivamente por aminocidos

Cerca de 75% da cadeia enrola-se em -hlice;

A proximidade ao heme de uma outra

cadeias de mioglobina o que tornaria