Universidade Federal de Viosa

Campus Rio Paranaba

Instituto de Cincias Agrrias
CAL 474 Tecnologia de leos e gorduras
Profa. Isadora Rebouas Nolasco de Oliveira
DETERMINAO DE LIPDEOS EM MATRIAS-PRIMAS OLEAGINOSAS
Introduo
O termo lipdeo utilizado para gorduras e substncias gordurosas e determinao
do teor seu teor, geralmente se baseia nas propriedades dos lipdeos. Estes componentes
apresentam propriedades fsicas que refletem seu carter hidrofbico, sendo insolveis em
gua e solveis em solventes orgnicos. Os solventes orgnicos so, ento, usados na
determinao de gordura por extrao.
No caso de alimentos, nem sempre possvel extrair diretamente a gordura. Se a
amostra for mida necessrio proceder uma secagem pois a gua impede a penetrao
total do solvente. Para amostras que podem ser extradas diretamente so usados
equipamentos que realizam a extrao por solvente como o aparelho de Soxhlet (extrao
intermitente). Quando os lipdeos se encontram ligados a protenas ou acares, faz-se
necessrio uma hidrlise prvia (mtodo de Gerber ou Soxhlet modificado). Em alguns
casos, em vez de combinao de hidrlise e extrao, suficiente tratar a amostra com
uma mistura de clorofrmio e metanol (Mtodo de Bligh-Dyer).
A escolha do mtodo para extrao de lipdeos depende do material a ser analisado
e da natureza das subsequentes anlises a serem feitas neste extrato lipdico.
Objetivo
O objetivo desta prtica determinar o teor de lipdeos em amostras de gros
oleaginosos por dois mtodos diferentes de extrao.
Procedimentos
Mtodo de Bligh-Dyer
Pesar as amostras em Becker
Transferir a amostra para tubos (70-100mL) e adicionar exatamente:
-10 ml de clorofrmio,
-20 ml de metanol e
-8 ml de gua destilada.

OBS.: Para produtos com teores de gordura acima de 20% (leite integral em p,
amendoim, sementes, etc...) pesar entre 2,00 e 2,50g; e para produtos com porcentagem
menor que 20% pesar entre 3,00 e 3,50g. essencial que as amostras estejam
COMPLETAMENTE MODAS.
Tampar hermeticamente e colocar os tubos num agitador rotativo por 30 min.
Em seguida adicionar exatamente:
-10 ml de clorofrmio e
-10 ml da soluo de sulfato de sdio 1,5%.
Tampar e agitar por mais 2 minutos. Deixar separar as camadas de forma natural
em funil de decantao ou centrifugar a 1000 rpm por 2 minutos para acelerar a separao.
Descartar a camada superior e retirar cerca de 15 ml da camada inferior (clorofrmio)
e colocar num tubo de 30 ml. Adicionar aproximadamente 1g de sulfato de sdio anidro,
tampar e agitar para remover traos de gua que so arrastados na pipetagem da camada
inferior. Filtrar rapidamente num funil pequeno com papel de filtro. A soluo obtida deve
ser lmpida.
Medir exatamente (pipeta volumtrica) 5 ml do filtrado e despejar em bquer de 50
ml previamente tarado. Colocar o bquer numa estufa a 80oC at evaporar o solvente (1520 minutos). Resfriar em dessecador e pesar em balana analtica.

Soxhlet
Pese 2 a 5 g da amostra em cartucho de Soxhlet ou em papel de filtro e amarre com
fio de l previamente desengordurado. No caso de amostras liquidas, pipete o volume
desejado, esgote em uma poro de algodo sobre um papel de filtro duplo e coloque para
secar em uma estufa a 105C por uma hora. Transfira o cartucho ou o papel de filtro
amarrado para o aparelho extrator tipo Soxhlet. Acople o extrator ao balo de fundo chato
previamente tarado a 105C.
Adicione ter em quantidade suficiente para um Soxhlet e meio. Adapte a um
refrigerador de bolas. Mantenha, sob aquecimento em chapa eltrica, a extrao continua
por 8 (quatro a cinco gotas por segundo) ou 16 horas (duas a trs gotas por segundo).
Retire o cartucho ou o papel de filtro amarrado, destile o ter e transfira o balo com
o resduo extrado para uma estufa a 105C, mantendo por cerca de uma hora.
Resfrie em dessecador at a temperatura ambiente. Pese e repita as operaes de
aquecimento por 30 minutos na estufa e resfriamento at peso constante (no mximo 2 h).

Clculos
Mtodo de Bligh-Dyer

% =

Soxhlet

% =

N= peso dos lipdeos (g) contido em 5 ml

P= peso da amostra (g)

N = peso dos lipdeos (g)

P = peso da amostra (g)

Resultados

-Apresentar os dados obtidos

-calcular a % de lipdeos totais dessas amostras
-comparar os dados obtidos pelos 2 mtodos e em Tabela de Composio de
Alimentos, e se houver diferena entre esses valores, explicar porque isto
ocorreu.
Questo: Quais as diferenas entre a determinao de gorduras pelo mtodo Bligh & Dyer
e pelo mtodo de extrao por Soxhlet? Explicar a diferenas quanto vidrarias, solventes,
temperatura, amostra, tempo, facilidade de operao?

Referncias
INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas Analticas do Instituto Adolfo Lutz. v. 1:
Mtodos qumicos e fsicos para anlise de alimentos, 3. ed. Sao Paulo: IMESP, 1985.
p. 42-43.
ASSOCIATION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS. Official methods of
analysis of the Association of Official Analytical Chemists (method 920.39,C).
Arlington: A.O.A.C., 1995, chapter 33. p. 10-12
CECCHI, Heloisa Mascia. Fundamentos tericos e prticos em anlise de
alimentos. 2 ed.- campinas, SP; editora Unicamp, 2003.

Alimentos
2 ou 4 amostras, (amendoim, girassol, azeitona, soja, coco) uma para cada grupo realizar
os 2 mtodos ou cada grupo realiza 1 dos mtodos
Bligh-dyer
Reagentes
Metanol, clorofrmio, soluo aquosa de sulfato de sdio 1,5%, sulfato de sdio
anidro
Material e Vidraria
Pinas, esptulas, bandeja de alumnio limpa e seca, bquer de 100 ml, tubos de
100 mL, bquer de 50 ml, previamente aquecido (a 110 oC) e tarado, pipeta volumtrica
de 5 ml, pipeta de 25 ml, proveta de 10 e 20 ml, funil de vidro pequeno, grade de tubos,
papel de filtro, pera com vlvulas
Equipamentos
agitador rotativo para tubos, centrfuga de baixa rotao, estufa a 60 - 80oC,
dessecador, balana analtica , balana semi-analtica

Soxhlet
Material
Cartucho de Soxhlet ou papel de filtro de 12 cm de diametro, balao de fundo chato
de 250 a 300 mL com boca esmerilhada, l desengordurada, algodao, esptula e
dessecador com silica gel.
Reagente
Eter
Equipamentos
Aparelho extrator de Soxhlet, estufa, balana analtica, balana semi-analtica.