Aula 8 Testes rpidos para sfilis

Pela simplicidade de execuo, facilidade e rapidez na leitura e desempenho equivalente aos

testes laboratoriais, os testes rpidos para sfilis fazem parte das estratgias do Departamento de
DST, Aids e Hepatites Virais para ampliar a cobertura diagnstica desse agravo.

Testes rpidos (TR)

Testes rpidos so todos aqueles em que se faz a execuo, leitura e interpretao do resultado
em, no mximo, 30 minutos, sem a necessidade de estrutura laboratorial.
A leitura dos resultados pode ser feita a olho nu.

Dependendo do fabricante, os testes rpidos para diagnstico da sfilis podem ser feitos com
amostras de sangue total, soro ou plasma.

Desde os anos 2000 os testes rpidos treponmicos tornaram-se disponveis no mercado

brasileiro e passaram a apresentar valores de sensibilidade e de especificidade adequados ao
diagnstico laboratorial da sfilis.

A seguir esto listadas situaes e locais em que se indica a utilizao dos testes rpidos.

Rede de servios de sade sem infraestrutura laboratorial ou localizados em regies

dedifcil acesso.
Programas do Ministrio da Sade (MS), como o Rede Cegonha, o Programa de Sade da
Famlia, o Consultrio na Rua e o Quero Fazer, dentre outros.
Centro de Testagem e Aconselhamento (CTA) e Unidade de Testagem Mvel (UTM).
Segmentos populacionais flutuantes.
Laboratrios que realizam pequenas rotinas (rotinas com at cinco amostras dirias para
diagnstico.
Prontos-socorros.
Maternidades.
Segmentos populacionais mais vulnerveis.

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 1

 Parcerias sexuais.
Gestantes que no tenham sido testadas durante o pr-natal ou cuja idade gestacional no
assegure o recebimento do resultado do teste antes do parto.
Parturientes e purperas que no tenham sido testadas no pr-natal ou quando no
conhecido o resultado do teste no momento do parto.
Abortamento espontneo, independentemente da idade gestacional.
Pessoas em situao de violncia sexual.

Acesse o site do TELELAB para acompanhar a legislao vigente

para a utilizao dos testes rpidos: www.telelab.aids.gov.br.

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 2

 Princpios metodolgicos dos testes
rpidos para diagnstico da sfilis
Os testes rpidos comercializados no Brasil, e registrados na ANVISA, utilizam os princpios
metodolgicos de imunocromatografia de fluxo lateral e de imunocromatografia em plataforma de
duplo percurso DPP (do ingls Dual Path Platform).

Dentro de um mesmo princpio metodolgico pode haver variaes, com os resultados sendo
visualizados na forma de um ponto ou de uma linha.

Imunocromatografia de fluxo lateral

Como exemplo, veja na Figura 1 como funciona um teste rpido de fluxo lateral, com o resultado
em linha.

Figura 1 - Funcionamento de um teste rpido de fluxo lateral

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 3

 1. A fase slida uma tira de nitrocelulose que contm:

um local para colocar a amostra e a soluo tampo, denominado poo;

uma rea intermediria contendo conjugado composto de antgenos recombinantes
de Treponema pallidum ligados ao corante selenium coloidal;
outra rea que contm antgenos de treponema imobilizados, para leitura do
resultado, denominada rea T;
uma quarta rea que contm um conjugado de anti-imunoglobulina (IgG) e ouro
coloidal ou de antiprotena A recombinante e ouro coloidal para controle da reao
e para validao do teste, denominada rea C.
3.A amostra colocada no poo e, em seguida, adicionada a soluo tampo.

4.Os anticorpos da amostra fluem lateralmente pela fita de teste e ligam-se ao conjugado.
Os anticorpos ligados ao conjugado continuam fluindo pela fita at a rea T e ligam-se aos
antgenos imobilizados, resultando no aparecimento de uma linha colorida.

5.O fluxo continua, e fraes do conjugado que no se ligaram na rea T vo ser revelados
na rea C, produzindo uma linha vermelha. Essa linha o controle da reao. Ela sempre
deve estar presente, e indica que houve perfeita migrao da amostra na tira de reao.v

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 4

 Leitura do teste rpido para sfilis
com metodologia de fluxo lateral
Ao realizar a leitura do teste, observe se ocorreu a formao de uma linha colorida na rea C. A
presena dessa linha valida o teste e indica que no houve problema com a reao.
Em seguida, leia o resultado da amostra observando se ocorreu ou no a formao de uma linha
colorida na rea T. Os resultados possveis so estes:

Reagente quando h formao de uma linha colorida na rea T e outra na rea C. Um

resultado reagente indica que h anticorpos antitreponema detectveis na amostra do
indivduo (Figura 2);

Figura 2 - Teste rpido de fluxo lateral reagente

No reagente quando h formao de linha colorida apenas na rea C. Um resultado no

reagente indica que no h anticorpos antitreponema detectveis na amostra do indivduo
(Figura 3);

Figura 3 - Teste rpido de fluxo lateral no reagente

Teste Invlido se no houver formao de linha colorida na rea C, o teste ser

considerado invlido, independentemente do resultado obtido na rea T. Neste caso, o teste
dever ser repetido (Figuras 4 e 5).

Figuras 4 e 5 - Testes rpidos de fluxo lateral invlidos

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 5

Veja a seguir como proceder se o resultado do teste for invlido.

1. Repita o teste. Caso o resultado continue invlido, faa o teste com um kit de outro lote ou
de outra marca.
2. Voc tambm pode considerar que:
a) amostras coaguladas ou lipmicas podem interferir nos resultados;
b) os volumes da amostra e do tampo talvez estivessem incorretos;
c) os tempos de todas as etapas podem no ter sido rigorosamente respeitados.
3. Verifique as condies de estocagem do kit e o prazo de validade.
4. Informe prontamente ao fornecedor caso haja persistncia de resultados invlidos, pois
isso sugere que existem problemas no kit.
5. Faa um teste treponmico, como o FTA-abs, a hemaglutinao ou o imunoenzimtico.

!
No utilize kits com prazo de validade vencido.
No utilizar aps a data de validade. O prazo de validade do kit
indicado na parte externa de sua embalagem
Utilize os volumes corretos da amostra e dos outros reagentes.
No misture componentes provenientes de kits ou caixas de
lotes diferentes.

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 6

 Imunocromatografia em plataforma
de duplo percurso DPP
Observe na Figura 6 um exemplo de teste rpido DPP (imunocromatografia em plataforma de
duplo percurso).

Figura 6 - Funcionamento de um teste rpido de duplo percurso

1. A fase slida constituda de duas tiras de nitrocelulose.

2. Por isso o dispositivo do teste contm:
a) um local onde so colocadas a amostra e a soluo tampo, denominado Poo 1,
que permite a migrao dos anticorpos presentes na amostra;
b) uma rea para colocar o tampo, denominado Poo 2, que tem por objetivo liberar
o conjugado (anticorpos antitreponema ligados a partculas de ouro coloidal) que est
imobilizado na membrana;
c) uma terceira regio, denominada janela de leitura, onde esto imobilizados os
antgenos recombinantes de Treponema pallidum (T) para a reao especfica e
imunoglobulinas G (C) para controle da reao e validao do testes.

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 7

 3. A amostra colocada no Poo 1 e, em seguida, adicionada a soluo tampo.
4. Quando os anticorpos antitreponema esto presentes na amostra, fluem pela fita e ligam-
se aos antgenos imobilizados na rea de leitura do teste. Outros anticorpos presentes na
amostra podem se ligar rea C.
5. Em seguida adicionado um tampo ao Poo 2. A migrao do tampo libera o
conjugado imobilizado, que se liga aos anticorpos especficos antitreponema (rea T) e aos
demais anticorpos (rea C).

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 8

Leitura do teste rpido para sfilis com metodologia DPP

Faa a leitura de acordo com o modo proposto a seguir.

Observe se houve a formao de uma linha colorida na rea C. A presena dessa linha valida o
teste e indica que no houve problema com a reao. Em seguida, faa a leitura do resultado da
amostra observando se houve ou no a formao de uma linha colorida na rea T.
Os resultados possveis so estes:
Reagente quando ocorre formao de duas linhas coloridas, uma na rea de controle (C)
e outra na rea de teste (T) (Figura 7);

Figura 7 - Teste rpido DPP reagente

No reagente quando ocorre formao de somente uma linha colorida, a da rea de

controle (C) (Figura 8);

Figura 8 - Teste rpido DPP no reagente

Teste invlido quando no ocorre formao de linha colorida na rea de controle (C)
(Figuras 9 e 10).

Figuras 9 e 10 - Testes rpidos DPP invlidos

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 9

Acompanhe adiante o passo a passo de um teste rpido para sfilis com metodologia DPP.
Procedimento detalhado para coleta da amostra e execuo do Teste Rpido DPP Sfilis Bio-
Manguinhos

1 Separe os componentes necessrios do kit Teste Rpido DPP Sfilis Bio-Manguinhos e coloque-
os sobre uma superfcie plana. Para cada amostra coletada so necessrios o tampo de corrida,
1 (uma) lanceta descartvel, 1 (uma) ala coletora descartvel, 1 (um) curativo adesivo, 1 (um)
frasco para eluio e 1 (um) suporte de teste DPP Sfilis embalado individualmente.

2 Retire o suporte de teste do envelope laminado, identifique-o com o nome do indivduo ou o nmero
de identificao e lote do kit.

3 Verifique a integridade de todos os componentes e a existncia de 2 (duas) linhas na janela de teste

do suporte, sendo uma de cor azul (linha Teste) e outra de cor verde (linha Controle). Se a duas
linhas estiverem presentes, o dispositivo estar adequado para uso. Caso uma ou ambas as linhas
esteja(m) ausente(s), no utilize o dispositivo, e comunique o ocorrido ao SAC de Bio-Manguinhos
(telefone: 0800 210 310, ou e-mail: sac.reativos@bio.fiocruz.br).

4 Antes de coletar a amostra de sangue, identifique o frasco para eluio com o nome do indivduo ou
o nmero de identificao e desenrosque o dosador (parte branca) do frasco, mantendo a tampa
preta rosqueada no dosador.

5 Colete a amostra por puno digital:

a) Perfure a lateral da polpa do dedo com a lanceta fornecida no kit;

b) encoste a ala coletora na gota de sangue que brotou no dedo, permitindo que a ala seja
preenchida.

6 Insira a ala coletora com a amostra no frasco de eluio de modo que a ala toque no fundo
do frasco. Coloque a ala com a amostra dentro do frasco, quebrando a ala coletora na regio
marcada.

7 Recoloque o dosador no frasco de eluio certificando-se de que tanto o dosador quanto a tampa
preta estejam bem fechados. Homogeneze gentilmente o frasco fazendo movimentos circulares
sobre uma superfcie plana por 10 segundos.

8 Retire somente a tampa preta do dosador e, com o frasco na posio vertical, adicione 2 (duas)
gotas da soluo ao poo 1.

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 10

 9 Marque 5 (cinco) minutos no cronmetro ou relgio. Aps esse tempo, a linha azul (Teste) e a linha
verde (Controle) devem desaparecer da janela de leitura.

!
Se as linhas no desaparecerem, descarte o suporte
de teste e repita o procedimento desde o incio,
usando um novo suporte de teste.

10 Adicione 4 (quatro) gotas do tampo de corrida ao poo 2, mantendo o frasco na posio vertical.

11 Marque 10 (dez) minutos no cronmetro ou relgio. Aps 3 (trs) minutos, verifique se ocorreu
migrao do tampo de corrida na janela de leitura.

!
Caso no haja migrao, descarte o teste e repita o
procedimento desde o incio, usando um novo suporte
de teste.

12 Aps os 10 (dez) minutos de corrida do tampo, realize a leitura do teste. Esse tempo no pode
exceder 15 (quinze) minutos.

a) Verifique o aparecimento de uma linha rosa/roxa na rea da linha Controle. Caso ela no seja
visualizada, invalide o teste e repita o procedimento desde o incio, usando um novo suporte de
teste.

b) Se a linha Controle for visualizada, observe a ausncia ou o aparecimento de uma linha

rosa/roxa na rea da linha Teste. A ausncia dessa linha indica um resultado no reagente, e o
aparecimento da linha indica um resultado reagente.

13 Aps a leitura do teste, anote o resultado.

Trate todas as amostras como material potencialmente infectante.

Portanto, as normas universais de biossegurana devem ser
adotadas, incluindo-se o uso de equipamentos de proteo
individual (jaleco, culos ou protetor facial e luvas).

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 11

 A escolha do teste rpido
Antes de decidir, faa contato com vrios fabricantes de testes que tenham produtos registrados
na ANVISA e solicite a bula de cada produto.

Esses testes esto comercialmente disponveis em variados formatos, para analisar amostras de
sangue total, de plasma e de soro.

Portanto, verifique quais so os tipos de amostras definidos pelo fabricante do conjunto

diagnstico que voc pretende utilizar. O Departamento de DST, Aids e Hepatites Virais fornece os
testes rpidos para a Rede de Servios Pblicos Brasileira.

Acesse o site do TELELAB para saber quais kits esto registrados

na ANVISA: www.telelab.aids.gov.br.

Para realizar a escolha, considere tambm:

qual amostra pode ser utilizada no teste e se sua estrutura de coleta adequada;
a quantidade diria de testes que voc ir realizar;
as condies existentes para estocar as amostras coletadas por puno venosa caso
voc pretenda utilizar esse tipo de amostra;
local adequado e pessoal treinado para coletar a amostra.

!
As amostras obtidas por puno digital podem ser colhidas
em qualquer local, desde que sejam respeitadas as normas de
biossegurana: uso de EPI, antissepsia das mos e do local da
puno, entre outros.

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 12

 Referncias

BENZAKEN, A. S.; BAZZO, M. L.; GALBAN, E.; PINTO, I. C. P.; NOGUEIRA, C. L.; GOLFETTO, L.;
BENZAKEN, N. S.; SOLLIS, K. A.; MABEY, D.; PEELING, R. W. External quality assurance with
dried tube specimens (DTS) for point-of-care syphilis and HIV tests: experience in an indigenous
populations screening programme in the Brazilian Amazon. Sexually Transmitted Infections (Print),
v. 00, p. 1-5, 2013.

BioManguinhos/FIOCRUZ Instrues de Uso testes rpidos para sfilis -DPP TR.

Diagnstico da Sfilis - Aula 8 13